孙波；闫剑群；王倩；赵小林；李金容；闫薇；陈坷；杨雪娟；赵师儒；闫君宝
目的 初步探讨慢性脑缺血对大鼠睡眠钟基因表达的影响及乌龙丹对其的调控作用.方法 24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、乌龙丹给药组.采用改良式双侧颈总动脉永久性结扎法建立大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后,灌胃给药3周,并持续监测各组大鼠体重,应用实时荧光定量PCR检测大鼠松果体钟基因Clock、Bmal1、Per1表达的变化.结果 模型组较假手术组Clock mRNA、PerlmRNA表达显著降低(P＜0.01,P＜0.05),Bmal1基因表达无显著差异(P＞0.05)；乌龙丹给药组的Clock基因水平高于模型组(P.＜0.01),Bmall基因表达较假手术组降低(P.＜0.05),Per1无显著变化(P＞0.05).结论 慢性脑缺血可能成为睡眠障碍的潜在病因,乌龙丹对慢性脑缺血引起的睡眠障碍有一定的治疗作用.
作者：富祯祯；夏旸；彭康 刊期： 2012年第04期
目的 研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平.方法 以双链RNA(dsRNA)实现RNA干扰.体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转染到日本血吸虫成虫中,体外培养7d后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40基因及SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达,Western blot检测Sjp40蛋白表达产物.提取各期虫体总RNA,qPCR检测Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达.结果 转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照GFP dsRNA转染组下降了80％左右；蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化.此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高.结论 dsSjp40 RNAi可特异性抑制Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响.
作者：陈敏芳；麦荣嘉；莫倩珍；周晓红 刊期： 2012年第04期
目的 比较老年冠心病患者单用氯吡格雷与氯吡格雷联用钙拮抗剂(CCB)的疗效.方法 选自2000年1月～2011年2月有完整住院资料及门诊随访记录,服用氯吡格雷的老年冠心病患者1021名,其中单用氯吡格雷402例,氯吡格雷联用CCB 619例,其中二氢吡啶类钙拮抗剂547例,非二氢吡啶类钙拮抗剂72例；P糖蛋白(Pgp)抑制剂的钙拮抗剂患者357例,非PgP抑制剂的CCB患者262例.研究主要终点为随访期内全因死亡,次要终点为心绞痛再入院,心梗再入院,血管再通术(PCI或CABG),脑卒中,TIA.结果 氯吡格雷组和联用CCB组发病密度(全因死亡)分别是50.55/1000、42.02/1000,粗RR 0.83 (95％ CI:0.55～1.26),调整RR 0.47 (95％CI:0.14～1.6),两组全因死亡率无显著差异(P＞0.05)；终点事件发生率比较也无显著差异(P＞0.05).对所有混杂因素进行倾向评分加权后,非二氢吡啶类CCB比二氢吡啶类CCB增加缺血性心脑血管事件风险,SMRW调整OR=1.97( 95％:1.2～3.23),P=0.007；氯吡格雷联用CCB组与单用氯吡格雷组加权前后全因死亡率及终点事件比较,差异无统计学意义.不同代谢途径CCB加权前后全因死亡率比较无显著差异(P＞0.05).结论 老年冠心病患者联用氯吡格雷及CCB治疗不增加全因死亡及缺血性心脑血管事件的发生,不同代谢途径CCB之间死亡率无明显差异,非二氢吡啶类CCB与氯吡格雷联用时比二氢吡啶类CCB致缺血性心脑血管终点事件的风险更高.
作者：高燕；卢学春；曹剑；刘先锋；马聪；范利 刊期： 2012年第04期
目的 分析精索静脉曲张患者睾丸及精液指标的变化,探讨其对于男性生殖功能的影响.方法 回顾分析2003年以来在我院诊治的172例精索静脉曲张患者的资料,阴囊超声检测患者双侧睾丸的体积.收集167例患者的精液标本进行分析,同时收集163例青年健康志愿者的精液分析资料作为对照组.结果 所有患者均存在左侧精索静脉曲张,其中63例为双侧精索静脉曲张,但大多数左侧精索静脉曲张的临床分级均高于右侧.患者左侧睾丸体积平均为(10.99±3.71)ml,右侧睾丸体积平均为(11.86±4.05) ml,左侧睾丸体积明显小于右侧(P＜0.01).与对照组比较,患者精液的理化指标(包括精子密度)无显著差异(P＞0.05),但大多数患者的精子活力和活率均显著低于对照组(P＜0.05).单、双侧精索静脉曲张患者的精子密度、活力和活率无统计学差异(P＞0.05).结论 精索静脉曲张可导致睾丸体积缩小.单侧精索静脉曲张可同时对双侧睾丸产生影响,并导致睾丸功能受损.精索静脉曲张导致男性睾丸功能受损,主要表现为患者精子活力和活率的下降.
作者：薛娟；阳建福；严谨；蒋先镇；何乐业；伍拓；郭军华 刊期： 2012年第04期
目的 研究芥菜籽对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用,探讨其可能的作用机制.方法 将18只BALB/c小鼠随机分为模型组、芥菜籽组、正常组,模型组和正常组喂养普通饲料,芥菜籽组喂养含5％芥菜籽饲料.3周后,以2.4-二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠ACD模型,耳部激发24 h后,观察芥菜籽对小鼠耳肿胀度,组织病理改变,皮损处朗格汉斯细胞(LC)浸润、局部促炎细胞因子及血清IFN-γ等因子的水平.结果 芥菜籽能抑制ACD小鼠的耳肿胀度、降低皮损处LC浸润、降低IL-1β、TNF-α、IL-6等炎症因子的表达(P＜0.05),但对血清IFN-γ、IL-4、IL-17水平没有影响(P＞0.05).结论 芥菜籽对小鼠ACD有抑制作用,可能与其抑制LC的迁移及降低炎症因子有关.
作者：汶春苗；杨闰平；胡坚；焦泽龙；杨宇光；杨剑凌；李恒进；赵华 刊期： 2012年第04期
目的 明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析.方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组.对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP 与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素释放前18h加入PMA( 10 nmol/L)；应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量.实时定量PCR检测对照组、HCNP组HCNP前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,CHAT)、3型毒蕈碱样受体(3-typemuscarinic receptor,M3R)基因水平表达情况.结果 浓度为3.3 mmol/L葡萄糖,三组间胰岛素含量无明显差异.浓度为5.6mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义.HCNP组INS-1细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义.结论 HCNP通过提高ChAT活性,推测影响乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用.
作者：高飞；陈宏；张桦；郭南京；徐艳花；蔡德鸿 刊期： 2012年第04期
目的 探讨1,3-二环己基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(ZL-5010)体内、体外的抗炎镇痛活性.方法 醋酸所致小鼠扭体反应模型评价镇痛作用；二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型评价抗炎作用.细菌脂多糖(LPS,10μg/mL)刺激小鼠腹腔渗出细胞活化作为体外炎症模型.ELISA法检测白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果 ZL-5010经灌胃给药,1次/d,连续3d,在0.25和0.50mmol/kg的剂量下能减少醋酸所致小鼠的扭体次数,抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,抑制角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀,均具有统计学意义(P＜0.05);ZL-5010体外能抑制LPS诱导的小鼠腹腔渗出细胞产生促炎细胞因子IL-1β和TNF-α,具有统计学意义的低有效浓度分别为10和20 μmol/L(P＜0.05).结论 首次发现ZL-5010经动物体内灌胃给药具有抗炎镇痛作用,体外可抑制小鼠腹腔渗出细胞产生促炎细胞因子IL-1β和TNF-α.
作者：张群；周桂保；雷林生；余传林；陈娜娜 刊期： 2012年第04期
目的 探讨输尿管移行细胞癌术后膀胱复发的危险因素.方法 同顾分析两附属医院2000～2010年原发性输尿管癌病例,统计其临床及病理资料,通过多因素回归分析与膀胱复发相关的危险因素,用Kaplan-Meier法计算膀胱无复发生存率.结果 随访104例输尿管移行细胞癌患者,中位随访时间46个月(13～89个月),39例患者出现膀胱复发.尿脱落细胞学(P=0.000)、肿瘤数量(P=0.006)、肿瘤分级(P=0.039)及合并膀胱肿瘤(P=0.014)是输尿管移行细胞癌术后膀胱复发的独立危险因素.危险因素越多的患者,膀胱无复发生存率越差.结论 尿脱落细胞学、肿瘤数量、肿瘤分级及合并膀胱肿瘤与输尿管移行细胞癌术后膀胱复发密切相关.含有危险因素的病例可能需密切随访和积极治疗.
作者：叶云林；秦自科；卞军；陈明坤；黄燕平；袁小旭；孙祥宙；戴宇平 刊期： 2012年第04期
目的 探讨人类胚胎期大脑额叶、脑室区(VZ)和脑室下区(SVZ)内代谢型谷氨酸受体5(mGluRS)的表达规律及细胞分布.方法 将收集的引产胎儿按胎龄分为4组:9～11周,14～16周,22～24周和32～36周.切取额叶及含VZ、SVZ的脑组织固定后切片,免疫组织化学染色后观察额叶、VZ和SVZ内mGuR5的表达及其细胞定位.结果 9～36周的胚胎额叶及VZ、SVZ都有mGluR5表达,边缘带和皮质板内的免疫反应程度强于VZ和SVZ,阳性产物主要位于细胞膜.表达mGluR5的细胞主要为VZ和SVZ内的神经干/祖细胞、边缘带和VZ内的成熟前神经元及皮质板内的大量成熟神经元.结论 人类胚胎额叶、VZ和SVZ内均有mGluR5表达,提示mGluR5可能参与了人类大脑皮质发生的调节过程.
作者：解武玲；杨蓬勃；张军峰；肖新莉；靳辉；石秦东；徐曦；刘勇 刊期： 2012年第04期
目的 探讨血小板衍生生长因子A(PDGF-AA)/PDGF受体α(PDGFR-α)信号通路对系统性硬化症(SSc)患者皮损成纤维细胞(FB)增殖和转分化为MFB的作用.方法SSc患者皮损和正常皮肤原代FB体外培养、鉴定,用免疫细胞化学法检测其中的α-SMA;分别予两组FB不同浓度的PDGF-AA刺激,用MTT法检测其对FB增殖的作用；对两组FB分别予TGF-β1、PDGF-AA及两者联合刺激,用RT-PCR法检测其PDGFR-αmRNA、α-SMA mRNA的表达水平.结果 两组FB形态虽相似,但SSc FB中α-SMA呈阳性,正常皮肤则为阴性；SSc FB增殖的饱和浓度高于对照组,在一定浓度与饱和浓度间两组FB都呈剂量依赖方式增殖(P＜0.05)；不论有无PDGF-AA刺激及刺激浓度大小,SSc FB增殖程度均高于对照组(P＜0.05)；除单用TGF-β1对正常皮肤FB表达PDGFR-α mRNA无影响外,TGF-β1、PDGF-AA或两者联合刺激均可上调两组FB中PDGFR-α mRNA、α-SMA mRNA的表达水平,以两者联合刺激作用强；不论有无刺激或何种刺激,SSc FB中PDGFR-α mRNA、α-SMA mRNA表达水平均高于正常皮肤FB (P＜0.05)；PDGFR-α mRNA和α-SMA mRNA的表达水平依照未处理、PDGF-AA、TGF-β1及TGF-β1+PDGF-AA的顺序渐次增加,两者呈高度正相关(r=0.925,P＜0.05).结论 SSc患者皮损来源的FB存在着向MFB转分化的显著特性,SSc FB胞膜表面过表达的PDGFR-α可结合较多的PDGF-AA配体,从而介导更强的促进FB增殖和转分化为MFB作用,TGF-β1则可增强此作用.
作者：刘彤；张静 刊期： 2012年第04期
主动脉弓离断是一种罕见的、婴幼儿期死亡率高的严重复杂畸形,能长大成人更为罕见.一位42岁男性高血压患者,经主动脉CT血管造影检查证实,降主动脉起始部血管与主动脉弓中断,邻近脊柱旁、肋间及胸背部皮下软组织内见多个扭曲紊乱血管团,并于降主动脉起始水平见数支血管汇人降主动脉CT血管造影.经降压治疗后,症状好转出院.本研究报道给我们的启示:对年轻高血压患者要仔细听诊,一旦前胸背部听到杂音,及时行CTA检查,避免漏诊和误诊.
作者：包宁；张煜；张志国；曹慧茹；张文辉 刊期： 2012年第04期
目的 探讨无功能型垂体腺癌的临床特点、诊断及治疗策略.方法 通过2例无功能型垂体腺瘤的诊断与治疗经过,并结合现有文献对本病进行探讨.结果 2例无功能型垂体腺瘤患者经过外科手术、立体定向放射治疗后肿瘤仍旧复发,分别在发病后3个月和5个月死亡.结论 垂体腺癌非常罕见,需要结合临床表现、影像学、细胞学、免疫组化等进行诊断,在进行常规治疗的同时需要寻找更为有效的办法控制肿瘤进展.
作者：宋烨；漆松涛；彭玉平；龙浩；刘华 刊期： 2012年第04期
目的 RT-PCR扩增小鼠前列腺干细胞抗原(mPSCA)基因,构建原核表达质粒pET-42a-mPSCA,诱导mPSCA蛋白表达并纯化,并检测mPSCA蛋白的抗原活性.方法 利用RT-PCR的方法从小鼠前列腺癌细胞系RM-1细胞中扩增mPSCA基因,测序正确后PCR的方法去掉mPSCA的信号肽序列将其克隆至原核表达载体pET-42a中构建重组载体pET-42a-mPSCA.将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,随后将表达的融合蛋白进行纯化.经SDS-PAGE分析后,Western blot检测纯化的蛋白,将纯化蛋白进一步包板后用ELISA法对其抗原活性进行评价.结果 测序结果证实成功扩增出全长mPSCA基因；酶切和测序结果证实pET-42a-mPSCA原核表达载体构建成功；转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白；Western blot检测证实纯化的蛋白能与特异性的抗体发生反应；ELISA检测显示纯化后的mPSCA抗原具有免疫原性.结论 成功扩增出小鼠全长PSCA基因,成功构建了mPSCA基因的原核表达载体,获得了纯化的mPSCA蛋白,该蛋白具有良好的抗原活性,为进一步研究以PSCA为靶点的前列腺癌的免疫治疗奠定了基础.
作者：董金凯；罗津；阎瑾琦；张亮；高江平；于继云 刊期： 2012年第04期
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在人肺癌A549细胞放射治疗中的增敏作用.方法 单独γ射线辐照细胞或联合应用TNF-α处理细胞,通过MTT法检测人肺癌A549细胞存活生长曲线,采用流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期的变化,并利用Western blot法分析细胞中Caspase-3蛋白表达的变化.结果 与单独γ射线作用相比,TNF-α和γ射线联合应用能明显抑制人肺癌A549细胞的生长,同时诱导和促进A549细胞的凋亡发生,调整细胞周期的变化,这一过程与细胞中Caspase-3蛋白表达的增加相关.结论 TNF-α可以增加入肺癌A549细胞的放疗敏感性,提高γ射线对人肺癌A549细胞的放射治疗效果.
作者：夏晖；于长海；张宜明；俞建琦；李捷；张文；李英杰 刊期： 2012年第04期
目的 探讨杏仁中央核内μ阿片受体是否参与大鼠蔗糖溶液摄入的调节及其可能的机制.方法 杏仁中央核内注入μ阿片受体激动剂DAMGO或生理盐水,测量大鼠在双瓶选择试验中对蔗糖溶液及蒸馏水的摄入量；利用荧光免疫组织化学方法,在大鼠摄入蔗糖溶液或蒸馏水后,观察杏仁中央核内μ阿片受体/Fos免疫阳性双标记神经元的数量.结果 与生理盐水注射组相比,杏仁中央核内注入DAMGO增加了大鼠3h内的蔗糖溶液摄入量；与蒸馏水摄入组相比,大鼠摄入蔗糖溶液后,杏仁中央核内c-Fos阳性神经元及μ阿片受体/Fos共表达神经元均显著增加(P＜0.05).结论 杏仁中央核参与大鼠蔗糖溶液摄入的调节,该调节作用可能部分是由μ阿片受体介导的.
作者：孙波；闫剑群；王倩；赵小林；李金容；闫薇；陈坷；杨雪娟；赵师儒；闫君宝 刊期： 2012年第04期
目的 了解不同细胞来源的肠道原发性非霍奇金淋巴瘤(PINHL)在临床特征、内镜表现、诊断及治疗、预后方面的差异.方法 回顾性分析我院2003年1月～2010年12月间明确诊断的PINHL病例,分别统计B细胞来源与T细胞来源的PINHL在临床表现、内镜表现、诊断治疗,并随访预后.结果 共纳入PINHL 85例,中位年龄52岁,男女比例为3.05:1,B细胞来源58例(68.2％),T细胞来源27例(31.8％).T细胞淋巴瘤较B细胞淋巴瘤具有发病年龄小(32岁vs56岁,P＜0.01)；发热、便血、腹泻、盗汗多(P＜0.05)；病变以多部位弥漫性分布和肠镜下以溃疡及溃疡浸润性表现为主；确诊时间长(4月vs2月,P＜0.01)；误诊率高(16/27vs12/58,P＜0.01);预后差等特点；且T细胞淋巴瘤以结外NK/T淋巴瘤为主.结论 我院PINHL中,T细胞来源淋巴瘤比例高,发病年龄更早,诊断困难,容易误诊,总体预后差,病理分型以结外NK/T淋巴瘤为主.
作者：冉文斌；欧阳钦 刊期： 2012年第04期
目的 应用Catwalk步态分析系统评价脐带间充质干细胞(UC-MSCs)治疗脑损伤后的功能恢复情况.方法 采用重物坠落模型制作脑损伤模型.成年Wistar大鼠分成3组:移植治疗组,脑损伤后第7天移植DiO标记的UC-MSCs;损伤对照组,损伤后第7天注射等量生理盐水；正常对照组不接收任何手术和治疗.按照分组,分别在大鼠损伤前、损伤后3d以及UC-MSCs移植治疗后7d,以改良神经损伤程度评分(mNSS)为经典评估参照指标,同步对实验鼠进行Catwalk步态分析检测,并于移植后14d进行脑片免疫组化染色观察,评价以Catwalk步态分析系统检测UC-MSCs治疗脑损伤后功能恢复情况的灵敏度.结果 细胞移植后7d,损伤组和移植组的mNSS评分有统计学差异(P＜0.05)；而Catwalk则从大鼠每一只爪子的压力、长度、宽度、面积、步幅等不同量化的角度,呈示了损伤组各参数与正常组之间的差异(P＜0.05),以及移植组和损伤组之间的部分差异；移植治疗组的损伤灶区显示,DiO标记的UC-MSCs呈GFAP和β-Tubulin Ⅲ阳性表达.结论 以Catwalk步态分析系统评估损伤大鼠治疗前后的运动功能情况更为敏感客观,可准确评价UC-MSCs移植治疗TBI并促进脑功能恢复的情况.
作者：张润；秦琨；法志强；刘翼；李鹏；蔡颖谦；姜晓丹 刊期： 2012年第04期
目的 运用超声心动图的血流向量成像技术(VFM)定量评估早期心肌缺血患者左室涡流的结构及位置等特征,以期发现有助于诊断早期心肌缺血的新指标.方法 疑似心绞痛患者共105例,射血分数正常,既往无心脏病史和心梗病史.依据冠脉造影结果分成早期心肌缺血组(冠脉狭窄＞75％,n=56)和对照组(无明显冠脉狭窄或＜75％,n=49例),进行常规超声检查后,行VFM检查,存图后将VFM资料导入超声工作站脱机分析得到涡流各项参数并将两组结果进行比较和统计学分析.涡流各项参数包括:涡量(QMAX)、涡流半径、直径(r、R)、面积(S)及涡强(Q/S).结果 与对照组相比,涡流的流量、面积及半径等参数无差异(P＞0.05),但是早期心肌缺血组涡强比对照组显著降低,两者比较有差异,分别为:23.68±11.66/20.20±6.29 (P＜0.05).结论 超声心动图的VFM技术对于定量评估左室涡流的可行性较高,其中涡强(Q/S)可能成为诊断早期心肌缺血的新指标.
作者：童锴；张瑾；王晶；周肖；徐勇；智光 刊期： 2012年第04期
目的 构建晚期糖基化终末产物受体(RAGE)胞外段不同功能段V/VCl真核细胞表达载体,并在前列腺癌细胞株PC-3中表达,为进一步研究其在前列腺癌发病中的作用和机制打下基础.方法 采用PCR方法扩增RAGE不同功能段V/VCl的序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中.利用PCR和测序鉴定克隆正确性.转染PC-3细胞,用Western blotting检测其表达,免疫荧光检测其在细胞中的定位.结果 克隆的RAGE不同功能段V/VCl真核表达载体完全正确,Western blotting检测剑RAGE不同功能段V/VCl的表达,免疫荧光检测其主要定位于细胞浆中.结论 成功地构建了RAGE不同功能段V/VC1真核表达载体,其能够在PC-3细胞中表达.
作者：李炬聪；宋先璐；陆斌；李煜生；洪英洽；邓鹏；赵楚标；罗海华；赵善超；姜勇 刊期： 2012年第04期
目的 探讨雷帕霉素及3-甲基腺嘌呤(3-MA)对高糖诱导的原代大鼠系膜细胞自噬、氧化损伤及衰老的影响.方法 从大鼠肾分离培养原代肾小球系膜细胞(GMCs),分为正常对照组、高糖组、高糖+雷帕霉素(自噬增强剂)及高糖+3-甲基腺嘌呤(自噬抑制剂)干预组.在细胞培养24h、72h及10d时,Western blotting观测自噬标志物-自噬相关基因LC3及泛素结合蛋白p62/SQSTM1的表达变化;硫代巴比妥酸法检测细胞脂质损伤产物-丙二醛(MDA)水平,2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法测定细胞蛋白质损伤产物-羰基含量,通过进行衰老相关β-半乳糖苷酶活性( SA-β-gal)染色及衰老相关异染色质斑块(SAHF)分析检测细胞的衰老程度.结果 与对照组相比,细胞经高糖处理72h和10d后,自噬标志物LC3表达降低,p62/SQSTMI升高,MDA及羰基含量上升(均P＜0.05)；处理72h细胞SA-β-gal染色阳性率增加(P＜0.05),细胞核异染色质斑块形成增加.高糖培养的细胞用雷帕霉素干预72h和10d后,LC3表达升高,p62/SQSTMI表达下降,MDA及蛋白质羰基含量均下降(均P＜0.05),72h后细胞SA-β-gal染色阳性率下降(P＜0.05),细胞核异染色质斑块形成减少；高糖培养的细胞用3-MA干预72 h和l0d后,LC3表达下降,p62/SQSTMI表达升高,MDA及蛋白质羰基含量升高(均P＜0.05).72h细胞SA-β-gal染色阳性率上升(P＜0.05),细胞核斑块形成增多.结论 高糖可抑制系膜细胞自噬功能,促进系膜细胞氧化损伤,加速细胞衰老；雷帕霉素干预可减轻高糖对系膜细胞自噬功能抑制,减少氧化损伤,延缓衰老；3-MA加重高糖对系膜细胞自噬功能的抑制,进一步加重细胞氧化损伤,加速衰老.
作者：李锦；白雪源；崔少远；傅博；陈香美 刊期： 2012年第04期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
