黄禹;陈正贤;任红岩;何碧芳;黎秀玉
目的 初步研究依帕司他保护高糖诱导的血管内皮细胞损伤的作用.方法 体外培养脐静脉血管内皮细胞HUVEC,高糖刺激8h后利用化学发光法检测细胞培养上清中NO的含量,利用Rcal time PCR和Western blot分别检测细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的mRNA和蛋白表达水平,以同浓度的甘露醇作为对照.给予依帕司他(0.1 μmol/L)预处理30 min,随后再进行高糖培养,检测NO的含量以及eNOS的mRNA和蛋白表达,同时检测依帕司他的靶向基因醛糖还原酶(AR)以及NO的上游基因NADPH氧化酶4(NOX4)的蛋白表达水平.结果 高糖培养8h之后,血管内皮细胞分泌NO下降,eNOS的mRNA和蛋白表达水平下降,与甘露醇对照组相比,具有统计学差异(P<0.05);预先给予依帕司他处理后再进行高糖培养,细胞中eNOS的mRNA和蛋白表达水平均升高,NO表达上调,与单独高糖培养组相比,具有统计学差异(P<0.05).同时,细胞中AR和NOX4的蛋白表达下降.结论 高糖可以诱导内皮细胞损伤,表现为NO的分泌水平降低.依帕司他可能是通过抑制AR和NOX4的表达而发挥对血管内皮细胞损伤的保护作用.
作者:王芳;洪权;刘皈阳 刊期: 2012年第07期
目的 研究SATB1在不同侵袭潜能的人肝癌细胞株表达状况.方法 分别用荧光定量PCR,RT-PCR,Western blotting及免疫荧光方法,检测人永生化肝细胞株HL-7702及肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3中SATB1的表达.结果 相对于HL-7702,SATB1 mRNA在其余5种肝癌细胞株中都有较高程度的表达,其中高侵袭性HCCLM3、MHCC97H表达高,MHCC97L次之,SMMC-7721、HepG2低(P<0.001);Western blotting分析HepG2、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3肝癌细胞株的蛋白相对表达量分别为0.271±0.002;0.351±0.023;0.621±0.026;0.878±0.026;1.236±0.006,高侵袭性HCCLM3相当于HepG2的4.6倍(P<0.001);免疫荧光显示SATB1在5种肝癌细胞株的胞浆和胞核内均有分布,高侵袭性细胞株HCCLM3、MHCC97H表现强阳性染色.结论 SATB1在不同侵袭潜能肝癌细胞株中的表达有差异,与肝癌转移密切相关.
作者:李光辉;杨定华;李湘竑;钟克波;刘萧;毕民平;刘延;廖晓明;林梁 刊期: 2012年第07期
目的 建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC) O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较.方法 针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR榆测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果.结果 成功建立了LAMP和PCR榆测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfi/ml,PCR检测限为102 cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高.对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性.结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段.
作者:姜容;龙北国;曾桂芬;王丹;范宏英;吴娴波 刊期: 2012年第07期
目的 应用超声造影技术评价颈动脉粥样硬化斑块内血管新生,应用PET/CT技术评价颈动脉粥样硬化斑块内巨噬细胞炎症活性,整体评估颈动脉粥样硬化斑块的稳定性.方法 运用超声造影技术对17例颈动脉粥样硬化患者的21个斑块进行斑块内新生血管检测,根据斑块性质分为软斑+混合斑组(14个)和硬斑+钙化斑组(7个),比较组间斑块相对管腔的大增强强度(IMAX)及大增强密度(DMAX).同期行颈部PET/CT检查,比较组间相应位置颤动脉斑块处反映18F-FDG摄取的平均标准化摄取值(SUVmean).并对超声造影与PET/CT的检查结果进行对比分析.结果 软斑+混合斑组颈动脉粥样硬化斑块的DMAX值(4.26±3.65)明显高下硬斑+钙化斑组(1.41±1.47)(P<0.05).软斑+混合斑组颈动脉粥样硬化斑块内的IMAX值(26.83±19.61)高于硬斑+钙化斑组(24.73±29.85),软斑+混合斑组颈动脉粥样硬化PET/CT检查的SUVmean值(1.70±0.45)高于硬斑+钙化斑组(1 47±0.12),但无统计学差异.超声造影的IMAX、DMAX结果与PET的定量指标SUVmean间无关联(P>0.05).结论 超声造影可以敏感地显示斑块内新生血管的增强情况,PET/CT可以显示颈内动脉粥样硬化斑块炎症程度,两种影像技术可以从不同角度观察和评价斑块的稳定性.
作者:李娟;刘宏斌;智光;尹大一;王晶;盖泾兢;谢雷星;刘家金;张雄伟 刊期: 2012年第07期
目的 研究慢病毒介导生存素基因特异性短发夹状RNA(shRNA)对子官内膜异位症异位内膜生长及新生血管形成的影响.方法 建立鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)子宫内膜异位症模型,随机分成单纯接种组、shRNA慢病毒组、空载慢病毒组和空白载体组,每组30只.通过Image-proplus软件测量新生血管面积与鸡胚尿囊膜面积比(VA/CAM)评价沉默survivin基因对CAM血管生成的影响,TUNEL检测异位内膜细胞凋亡,组织病理学观察异位内膜病灶生长行为.结果 shRNA慢病毒处理组种植内膜存活率低,该组VA/CAM明显低于单纯接种组、空载慢病毒组和空白载体组(P<0.001),后3组间比较无显著性差异(P>0.05).shRNA慢病毒处理组种植内膜细胞凋亡率明显高于其他3组(P<0.05),另3组间比较无显著性差异(P>005).shRNA慢病毒处理组病灶在光镜下可见腺体结构不完整,间质伴有不同程度的坏死.结论 慢病毒介导survivin基因特异性shRNA能够显著抑制人子宫内膜异位症种植CAM模型的新生血管形成,抑制子官内膜在CAM上的种植生长.
作者:彭冬先;何援利;丘立文 刊期: 2012年第07期
目的 评价对伊马替尼耐药或不耐受的慢性粒细胞白血病(CML)患者接受尼洛替尼治疗的远期疗效和安全性.方法 26例对伊马替尼耐药或不耐受CML患者接受尼洛替尼400~800 mg/d治疗,随访观察近5年,定期监测血液学、细胞遗传学及分子生物学指标,记录用药后患者临床表现及各项生化指标,评价其疗效、不良反应.结果 26例对伊马替尼耐药或不耐受的CML患者,尼洛替尼中位治疗时间17个月,中位随访时间51个月.累计获得完全血液学缓解(CHR)16例(61.5%),获得主要细胞遗传学缓解(MCyR)13例(50.0%),获得完全细胞遗传学缓解(CCyR)9例(34.6%),获得主要分子生物学缓解(MMR)7例(26.9%).尼洛替尼治疗相关的非血液学不良反应多为1~2级,主要为胆红素升高(69 2%)和皮疹(57 7%).3~4级血液学不良反应包括血小板减少(53.8%)、中性粒细胞减少和贫血(分别为26.9%和19.2%).相比进展期患者,尼洛替尼对慢性期和缓解期的患者疗疗效更佳、血液学副作用更少.结论 尼洛替尼为对伊马替尼耐药和不耐受的CML患者提供了一个有效并安全的治疗选择,尤其对非进展期CML患者更为安全和有效.
作者:魏永强;张贤;陈伟伟;曹睿;阴常欣;冯茹;刘启发;孟凡义 刊期: 2012年第07期
目的 利用TiO2的抗菌特性,开发一种能够应用于口腔的无机抗菌材料.方法 采用射频磁控溅射法在医用不锈钢表面制备TiO2xNx薄膜,用XRD、SEM、EDS等测试手段表征薄膜的结构、形貌、组成,并通过覆膜法利用口腔常见致病菌考察TiO2-xNx薄膜的抗菌性能.结果 纳米TiO22-xNx抗菌薄膜为锐钛矿相结构,氮元素质量比为0.13%,表面结构均匀致密,对变形链球菌、粘性放线菌及白色念珠菌的抗菌率分别为97.79%、49.42%和96.84%.结论 纳米TiO2-xNx抗菌薄膜对口腔常见致病菌具有较强的抗菌效果,可作为一种新型抗菌剂应用于口腔临床.
作者:李娜;曹宝成;王育华;刘斌 刊期: 2012年第07期
目的 在原发性闭角型青光眼的房角分离术中应用内窥镜,探讨内窥镜在房角分离术中的作用,并观察其早期疗效.方法31例(31眼)原发性闭角型青光眼患者,采用内窥镜直视下房角分离术联合白内障超声乳化摘除人工晶体植入术.其中急性闭角型青光眼17例(17眼),慢性闭角型青光眼14例(14眼).随访并观察其并发症、眼压、视力、前房深度及房角情况.结果术后有3例发生前房出血、渗出,均可逐渐吸收.两组术后眼压均有所下降(P均<0.05),相同时间段两组间眼压比较差异均无统计学意义(P均>0.05).术后6个月时仅有1例慢性闭角型青光眼的眼压仍>21 mmHg,应用降眼压药物u可控制在正常范围内.两组术后视力、前房深度均有不同程度提高,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05).急性和慢性闭角型青光眼组术后分别为16眼(94.1%)和9眼(64.3%)房角全部开放,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).术后6个月有1眼急性闭角型青光眼和5眼慢性闭角型青光眼仍存在不同程度和范围的房角粘连,随访过程中未见房角粘连范围明显扩大.结论 对于原发性闭角型青光眼,内窥镜引导的房角分离术直观、精准、安全,近期疗效确切,具有临床应用价值.
作者:陈静;邹玉平 刊期: 2012年第07期
目的 研究无痛导尿管联合利多卡因行膀胱冲洗对患者术后留置导尿管引起的尿道刺激症状的疗效.方法 将2011年6月~2012年1月男性患者,在我科行手术治疗,术后留置导尿管的患者分为两组,每组病例60人,第1组患者采用无痛导尿管联合利多卡因,术后第1天将利多卡因配生理盐水行膀胱冲洗,第2组患者采用普通导尿管,不行利多卡因配生理盐水膀胱冲洗,观察术后患者出现尿道刺激症状(尿道疼痛,尿急,会阴部不适等)情况.结果 第1组患者出现尿道刺激症状的患者人数11人,其余患者无特殊不适,第2组患者出现尿道刺激症状的患者人数约24人,其余患者无特殊不适,两组数据资料,具有明显的统计学差异(P<0.05).结论 无痛导尿管联合利多卡因行膀胱冲洗可明显减轻术后留置导尿管给患者带来的尿道刺激症状,值得临床推广应用.
作者:杨建昆;周其赵;刘存东;李峰;卞军;钟钦;薛康颐 刊期: 2012年第07期
目的 探索外膜蛋白T(OmpT)基因在尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)CFT073致尿路感染中的作用.方法 利用RED重组技术构建UPEC CFT073 0mpT基因缺失株(命名为COTD),并建立小鼠急性尿路感染模型,体内外实验比较野生株与敲除株之间在膀胱组织的定植能力.结果 PCR分析及测序鉴定证实ompT基因缺失株构建成功;体外实验结果显示野生株粘附率为(8.3±1.9)%,敲除株粘附率为(6 7±2.2)%,敲除株粘附率明显低于野生株(P<0.05).体内实验膀胱组织内,野生株定植细菌数为(7±2)x 105 cfu,敲除株定植细菌数为(17±8)x104 cfu,ompT敲除株定植于膀胱组织的能力明显降低(P<0.05).结论 证实OmpT作为毒力因子参与细菌定植膀胱组织,在UPEC致尿路感染的过程中发挥重要作用.
作者:赵铁;方幸幸;刘晓露;彭亮;龙敏;张文炳;罗军;曹虹 刊期: 2012年第07期
目的 探讨超声刺激“关元穴”对围绝经期大鼠卵泡发育的影响.方法 采用阴道涂片法筛选围绝经期雌性SD大鼠.选用输出声功率0.1W,工作频率9 MHz,焦距4.5~5 mm,给予大鼠关元穴超声刺激.采用电化学发光免疫分析法检测大鼠血清雌激素(E)水平,组织学方法观察卵巢组织学结构变化,计数卵巢各级卵泡数.结果 与对照组比较,超声刺激关元10 min/d、5min/d连续刺激10d后显著提高围绝经期大鼠血中E水平(P<0.05),卵巢初级卵泡数、次级卵泡数增多,闭锁卵泡数减少(P<0.05).结论 超声刺激关无能改变围绝经期大鼠分泌雌激素的功能,影响卵巢卵泡发育.
作者:欧洪琼;方廖琼;白晋;刁庆春;翟蓓 刊期: 2012年第07期
目的 探讨巨细胞病毒(CMV)对儿童重型β-地中海贫血(地贫)儿童异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)后180d外周血T细胞亚群的变化.方法 对我院儿科造血干细胞移植中心2010年1月~2011年1月儿童重型地贫Allo-HSCT 35例病例半年后的T细胞亚群进行分析,比较有CMV(13例)和无CMV感染组(22例)在造血干细胞移植后早期T细胞的变化.结果 半年内有CMV组CD8+比率高于无CMV感染组,但CD4+比率低.在CMV感染组伴随CD8+CD28+细胞比率降低,CD8+CD28细胞比率和CD8+比率升高,同时发现CD8+与CD8+CD28+细胞比率呈线性相关性.结论 重型β-地中海贫血儿童在异基因造血干细胞移植后,CMV感染后会导致CD8+CD28细胞堆积,是构成CD8_细胞升高的主因,且两者比率呈线性相关.
作者:王彦华;吴学东;冯晓勤;何岳林;裴夫瑜;李春富 刊期: 2012年第07期
目的 探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对胆管结扎(BDL)大鼠肝纤维化的抑制作用.方法 18只Wister雄性大鼠随机分为假手术(SHAME组)组,BDL组和Ang-(1-7)治疗组.假手术组:行开腹术再关腹,在腹腔埋注射泵,以25μg·kg-1·h-1的速度持续注射生理盐水;BDL组:开腹结扎胆总管建立肝纤维化模型,在腹腔埋注射泵,以25 μg·kg-1·h-1的速度持续注射生理盐水;Ang-(1-7)治疗组:BDL建立肝纤维化模型,同时在腹腔埋注射泵,以25 μg·kg-1·h-1的速度持续注射Ang-(1-7).4周后宰杀动物、取肝组织,行Masson胶原染色,肝纤维化评分,测定羟脯氨酸含量,免疫组织化学检测α-肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 与BDL组相比,Ang-(1-7)治疗组肝纤维化评分(2.33±0.52vs 5.17±0.75)、胶原面积(23.71±3.43vs 89.77±9.92)、羟脯氨酸含量(0.36±0.03 vs 0.52±0.04)、α-SMA的表达(54.11±17.55vs 191.84±31.72)均减少,有统计学意义(P<0.01).结论 Ang-(1-7)对胆总管结扎所致的肝纤维化具有抑制作用.
作者:李旭;宁佐伟;罗薇;张文雍;余常辉;孟莹 刊期: 2012年第07期
目的 探讨CASP8在鼻咽癌中的表达及临床意义.方法 利用基因芯片比较了8组鼻咽癌组织与混合的非癌鼻咽组织之间的差异表达基因.荧光定量PCR和免疫组化鉴定CASP8基因表达结果的可靠性,并分析CASP8在鼻咽癌中的表达与临床参数之间的相关性.结果 荧光定量PCR确证CASP8 mRNA在鼻咽癌组织中表达下调(P<0.0001),与芯片结果相一致.免疫组化结果显示,与非癌鼻咽组织相比,CASP8蛋白在鼻咽癌组织中表达明显下调(P=0.02),且下凋的表达与淋巴结转移(P=0.002)及临床分期(P=0.026)呈负相关.结论 CASP8表达下调作为不利因素促进了鼻咽癌的发生发展.
作者:方唯意;张千兵;刘真;江庆萍 刊期: 2012年第07期
目的 观察铁螯合剂去铁胺(DFA)对脑出血(ICH)后小胶质细胞活化的抑制及其继发性神经损伤的保护作用.方法 随机将大鼠分为假手术组、ICH组和DFA治疗组,利用胶原酶制备大鼠基底节区ICH模型,术后1h开始每12h腹腔注射DFA,共7d.测定给药后不同时间点血肿周围脑组织的铁离子浓度变化.OX42免疫组织化学染色观察血肿周围脑组织小胶质细胞变化.ELISA方法测定脑组织IL-lβ和TNF-α含量变化.神经功能缺失评分和Nissl染色观察DFA处理后大鼠神经功能恢复和神经元丢失情况.结果 ICH后3d开始,血肿周围脑组织铁离子浓度较假手术组动物显著增高,并可持续至28 d,同时伴随有局部小胶质细胞数量的显著性增加.应用DFA后,显著降低了血肿周围脑组织的铁离子浓度,且小胶质细胞的数量显著减少,活化小胶质细胞分泌的神经毒性细胞因子IL-lβ和TNF-α含量显著降低.同时,血肿周围组织神经元的丢失显著减少,神经功能缺失评分显著降低.结论 ICH后血肿持续释放的铁离子可激活局部小胶质细胞,造成继发性脑损伤.DFA通过清除血肿周围脑组织的铁离子,抑制小胶质细胞的过度活化,减少ICH的神经元死亡,从而改善继发性神经功能障碍.
作者:缪星宇;刘晓斌;岳青;秋楠;黄卫东;王继军;许彦钢;张越林;杨军;陈新林 刊期: 2012年第07期
目的 观察不同放疗方式对患者颞颌关节损伤的影响,为不同条件的患者制定个体化的放疗计划提供参考.方法 回顾性分析71例初治鼻咽癌患者,三维适形放疗(3D-CRT)组39例,适形调强放疗(IMRT)组32例,以门齿距及LENT SOMA标准为评价指标,比较两组之间疗效及性价比.结果 3D-CRT组近期局部控制率与IMRT组无差异(P=0.878);3D-CRT组的颞颌关节受量高于IMRT组(平均57.06 Gy和40.90 Gy,P<0.001);比较两组放疗后1年与放疗前 门齿距差值,3D-CRT组缩小较明显,具有统计学意义(P<0.05);两组患者颞颌关节损伤按SOMA分级标准比较,无统计学差异(P>0 05).结论 相对于IMRT技术来说,3D-CRT技术具有很好的经济优势,颞颌关节的损伤可耐受,3D-CRT技术对于经济条件较差的患者仍是性价比较好的治疗选择.
作者:陈冬平;余意;齐斌;刘锦全;李铭仪;梁玉莹 刊期: 2012年第07期
目的 探讨内囊后肢梗死后中央后回皮质下白质纤维的各向异性分数(FA)与体感诱发电位(SEP)的关系.方法 31例累及内囊后肢梗死的患者,通过放置兴趣区(ROI)的方式获得定量部分各向异性分数(FA).ROI放置区为:中央后回皮质下白质区.通过对患者行SEP及感觉功能检测并进行分级.结果 SEP分组后各组患侧中央后回皮质下白质纤维FA值显著低于健侧FA值(P<0.05),患侧SEP分.组后的各组FA值差异具有显著性(P<0.05),SEP异常程度越高,FA值越低;感觉功能程度与SEP的分级呈正相关(r=0.520,P<0.05).结论 急性内囊后肢梗死后患者患侧中央后回质下白质区FA值变化在评价患者预后方面与SEP具有相关性,一致性和互补性.
作者:王齐琦;宋志彬;周雁玲;董延江;梁海毛 刊期: 2012年第07期
目的 通过对慢性微量铬(Ⅵ)染毒动物模型的制备,探讨金属对金属髋关节置换术后铬(Ⅵ)的释放对肝脏氧化应激的影响.方法 80只NIH小鼠随机分为4组,对照组及低、中及高剂量组.隔日1次分别给0、5、0、20 mg/kg体质量的三氧化铬腹腔注射.分别于染毒4、8、12、16周用颈椎脱位法各处死小鼠5只,检测血铬含量、肝细胞活性氧自由基水平(ROS)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及谷氢酸半胱氨酸连接酶(GCL)的表达,并对小鼠肝细胞进行透射电镜观察.结果 与对照组比,5 mg/kg组及10 mg/kg组血铬浓度、ROS升高并在第8周以后趋于稳定;20 mg/kg组血铬浓度及ROS持续升高,呈一定的时间依赖性.各实验组MDA未见明显升高.各实验组GSH含量及GR活性随着染毒时间的延长均下降;5 mg/kg组及10 mg/kg组在各个时间点中GCL表达增加,20 mg/kg组GCL表达随逐渐降低.透射电镜显示20 mg/kg组肝细胞均出现凋亡性改变.结论 金属对金属髋关节置换术后微量铬(Ⅵ)的缓慢蓄积可能会引起肝细胞氧化应激以及抗氧化应激系统的改变.
作者:张西旗;李奇;林荔军;刘成龙;李干 刊期: 2012年第07期
目的 探讨KCa3.1通道对增殖表型大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响.方法 组织贴壁法培养大鼠血管平滑肌细胞,采用光学显微镜、电镜和免疫细胞化学染色法观察初代和9代平滑肌细胞形态学特征.RT-PCR和免疫细胞化学染色法检测初代和9代平滑肌细胞KCa3.1通道mRNA和蛋白表达.MTT和Transwell法观察KCa3.1通道对平滑肌细胞增殖和迁移的影响.结果 初代和9代平滑肌细胞分别表现出收缩表型和增殖表型特征,9代平滑肌细胞KCa3.1通道mRNA、蛋白表达水平、增殖和迁移能力显著高于初代细胞(P<0.01),KCa3.1通道阻断剂TRAM-34可显著抑制9代细胞的增殖和迁移(P<0.01),对初代细胞无明显影响.结论 增殖表型血管平滑肌细胞KCa3.1通道表达增加可能促进了细胞的增殖和迁移.
作者:苏兴利;张鸿;于玮;霍健;郭玉芳;王爽;王湘 刊期: 2012年第07期
目的 探讨C-IAP2 mRNA和蛋白在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的关系.方法 采用荧光定量PCR和免疫组化方法检测肝细胞癌组织及对应的非癌组织中C-IAP2 mRNA和蛋白的表达水平并分析肝癌组织中C-IAP2的表达和临床病理特征之间的关系.结果 肝细胞肝癌中C-IAP2 mRNA的表达是非癌组织的2.70倍(P<0.001).C-IAP2蛋白在肝癌组织阳性表达率为70.8%,显著高于非癌组织中的阳性表达率27.8%(P=0.001).C-IAP2 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达与术前有无癌栓、有无淋巴结转移、甲胎蛋白水平、肿瘤病理分化类型、TNM分期以及术后复发转移时间有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤大小、肿瘤数目、肝硬化以及包膜完整性无关(P>0.05).结论 C-IAP2表达水平与原发性肝癌的转移、复发有关,可作为原发性肝细胞癌预后的新生物学指标.
作者:毕民平;杨定华;李湘竑;钟克波;刘延;李光辉;廖晓明;刘萧 刊期: 2012年第07期