阳隽;张天托;朱家馨
目的 探讨微管相关蛋白2 (MAP-2)和巢蛋白(Nestin)与人胚胎胃组织的发育关系.方法 应用免疫组织化学PV法检测第2、3、4三个月龄段,人胚胎胃壁、贲门和幽门组织内MAP-2和Nestin的表达规律.结果 第2、3、4三个月龄段,MAP-2和Nestin阳性表达主要集中于人胚胎胃壁、贲门和幽门组织黏膜下神经丛和肌间神经丛,随胎龄的增大,MAP-2和Nestin蛋白在肌间神经丛内阳性表达细胞数量和强度均呈增高趋势.而MAP-2和Nestin蛋白在胃壁、贲门和幽门组织的黏膜上皮和腺体处均呈阴性表达.结论 MAP-2和Nestin参与调节人胚胎胃组织的生长发育过程.
作者:刘学红;张泳 刊期: 2012年第09期
目的 探讨血管活性肽内皮素-1(ET-1)对新生鼠心室肌细胞起搏通道If表达的影响及其细胞内信号机制.方法 采用酶消化法急性分离1~3 d龄新生大鼠心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录If电流,定量RT-PCR技术检测介导If电流的、超极化激活的环核苷酸门控通道亚型HCN2和HCN4的表达.结果 ET-1呈剂量和时间依赖性增强了HCN2和HCN4通道亚型的表达,ET-1的这一作用可被其ETA受体阻断剂BQ-123阻断,而非ETB受体阻断剂BQ-788,而且特异性p38 MAPK抑制剂SB-203580也不影响ET-1的作用.结论 ET-1通过一种ETA受体介导的、不依赖于p38MAPK的信号转导机制刺激了心肌细胞起搏通道If的表达.这一作用与ET-1致心律失常机制有关.
作者:余良主;李敏才;佘同辉;王帮华;石春蓉 刊期: 2012年第09期
目的 探讨难治复发急性白血病患者接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后感染相关死亡(IRM)的特点.方法 回顾分析127例接受allo-HSCT的难治复发急性白血病患者的临床资料,统计感染相关死亡情况并分析危险因素.结果 观察期内67例死亡.5年总生存率为(35.2±5.3)%,无病生存率为(30.8±5.6)%.28.3% (36/127)患者发生感染相关死亡.Ⅱ~Ⅳ°aGVHD (P=0.049,OR=3.017)和移植后IFI(P=0.032,OR=3.223)是IRM的独立危险因素.结论 感染作为移植相关死亡的主要原因,相对于标危患者,在难治复发患者中占更高的比例.更多的关注严重GVHD后感染的预防和治疗力度是目前减少IRM的主要措施.
作者:林韧;孙竞;毛玉景;赵梦霞;刘启发;周红升;黄芬;宋晓玲;李含;马庆辉 刊期: 2012年第09期
目的 探讨自制可注射性明胶基止血剂在超声造影引导下治疗实验犬Ⅲ~Ⅳ级肝创伤的止血效果.方法 21只健康成年杂种犬戊巴比妥钠全麻后开腹暴露肝脏,制作Ⅲ~Ⅳ级肝创伤模型.实验动物被随机分为治疗组,阳性对照组和阴性对照组.治疗组(n=7)病灶处在超声造影引导经皮注射自制止血剂,阳性对照组(n=7)病灶处注射凝血酶溶液,而阴性对照组(n=7)病灶处注射0.9%生理盐水.比较术后30 min腹腔内总出血量,及术后7d谷丙转氨酶和谷草转氨酶.并于术后7d对每个动物进行超声造影随访.结果 治疗组平均出血量(47.69 ml)显著少于阳性对照组(81.77ml,P<0.01)和阴性对照组(110.35ml,P<0.01).治疗组谷丙转氨酶和谷草转氨酶的平均值均明显低于阳性对照组和阴性对照组(谷丙转氨酶分别为:49.37、62.81、82.83 U/L,P<0.01;谷草转氨酶分别为:48.32、67.16、82.54 U/L,P<0.01).超声造影检查显示治疗组所有动物未见创伤灶及腹腔积液,肝脏灌注均匀一致;而阳性对照组和阴性对照组仍可见创伤灶及腹腔积液.结论 超声造影引导自制可注射性明胶基止血剂可有效控制犬Ⅲ~Ⅳ级肝创伤出血,其止血及促进伤口愈合作用较明显.
作者:谢霞;田江克;吕发勤;武荣;唐文博;罗渝昆;黄雅钦;唐杰 刊期: 2012年第09期
目的 探讨自然杀伤T细胞(NKT)在子宫内膜异位症(EMT)发病机制的作用及其与分期的关系.方法 Ⅰ~Ⅳ期EMT患者各15例,采用流式细胞术检测其外周血及腹腔积液内NKT含量,用ELISA法检查细胞因子IFN-γ及 IL-4的含量,并选取同龄段的20例健康志愿者作为对照.结果 与对照组比较,Ⅰ~Ⅳ期EMT患者外周血NKT、IFN-γ及 IL-4均明显降低,且外周血及腹腔积液内以上三者的含量均呈现Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ>Ⅳ的关系,两组间的含量存在统计学差异(P<0.05).Spearman相关性分析显示,NKT、IFN-γ及IL-4当中任意一个因素均与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ的任意一期呈显著负相关性(r均大于0.06,P均小于0.05).结论 NKT及其细胞因子IFN-γ及 IL-4在EMT发病机制当中具有重要作用,并且与EMT的分期密切相关,可能是该病的一组保护性因素.
作者:郭赛群;张颖;王丽峰;邱文山 刊期: 2012年第09期
目的 研究慢性移植肾病(CAN)发生初期外周血CD4+CD25+Foxp3+T(TREG)细胞变化及意义.方法 对25例初发CAN的受者外周血CD4+CD25+high/CD4+T比率及Foxp3表达进行了检测,同时与使用同一抗排斥治疗方案、移植肾功能正常的30例受者、以及未行肾移植的慢性肾功能不全尿毒症期的20例和正常人20例进行比较,研究了CAN发生初期TREG细胞的变化.结果 CAN发生初期的受者,CD4+CD25+Thigh/CD4+比率为0.71±0.33,Foxp3表达率为62.75±10.80;移植肾功正常者,两指标分别为1.17±0.25及70.42±6.87,移植肾病组两指标均明显低于移植肾功能正常组(P<0.01).无论移植肾功能正常与否,移植受者的CD4+CD25+high/CD4+比率和Foxp3表达率均较未行移植尿毒症患者(1.53±0.35及77.86±7.09)及正常人(1.65±0.28及81.35±2.39)明显降低(P<0.01),而正常人及未移植尿毒症患者两指标无明显差别.结论 与移植肾功能正常者相比,CAN发生初期患者外周血中CD4+CD25+hight/CD4+比率及Foxp3表达率均明显降低,且与肌酐增高无关,提示TREG在CAN的发生中具有一定意义.
作者:杜传福;于立新;付绍杰;徐健;魏强 刊期: 2012年第09期
目的 观察超激光联合汽化药热疗法治疗冻结肩合并糖尿病的临床效果,探讨安全、有效、无创治疗冻结肩合并糖尿病患者的方法.方法 84例冻结肩合并糖尿病的患者随机分为3组,疗程均为20 d.对照组(C组):采用药物治疗和肩关节功能锻炼;超激光组(S组):在对照组的基础上,加用超激光照射治疗,1次/d;超激光+汽化药热疗组(S+P组):在对照组的基础上,加用超激光照射及汽化药热疗法治疗,1次/d.以患肩疼痛程度(采用视觉模拟评分法VAS)及肩关节活动障碍度评估治疗效果.结果 3组患者治疗20 d后VAS评分及肩关节活动障碍度积分较治疗前明显下降,差异有显著性(P<0.01);S+P组患者治疗后VAS评分和肩关节活动障碍度积分低于C组及S组,差异有显著性意义(P<0.05);S+P组治愈率较C组及S组高,差异有显著性(P<0.01).结论 超激光联合汽化药热疗法可明显提高冻结肩合并糖尿病患者的治愈率,是一种无创、短程、高效的好方法.
作者:梁倩;黄锴亮;王小平;李雅兰 刊期: 2012年第09期
目的 筛选白纹伊蚊C6/36细胞表达连接登革Ⅱ型病毒分子.方法 提取C6/36细胞的总蛋白和膜蛋白,收集和纯化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析C6/36细胞的总蛋白和膜蛋白,转于硝纤膜上,用病毒覆盖蛋白结合实验(VOPBA)筛选C6/36细胞表达连接登革Ⅱ型病毒分子.结果 C6/36细胞的总蛋白和膜蛋白经12% SDS-PAGE分离后转膜,分别与纯化的病毒液和阴性对照液孵育,用抗登革病毒Ⅰ~Ⅳ单克隆抗体检测,结果显示病毒孵育组在67 000和30 000的位置有特异性的条带出现,而阴性对照组无此条带.结论 用VOPBA法初步从白纹伊蚊C6/36细胞中筛选67 000和30 000等登革Ⅱ型病毒结合分子,其功能的鉴定正在进行.
作者:郑学礼;雷子庆;潘京 刊期: 2012年第09期
目的 探讨乌司他丁(UTI)预处理对大鼠70%肝切除合并缺血再灌注损伤后残肝再生和TNF-α/IL-6/STAT-3信号通路的影响.方法 健康清洁级雄性SD大鼠120只,体质量230~280 g,随机分为单纯肝切除组(PH)、肝切除合并缺血再灌注组(PHIR)和乌司他丁组(UTI),40只/组.PH组不阻断残肝血流;PHIR组阻断血流30 min后恢复灌注;UTI组于缺血前5min经尾静脉给予UTI 50 000 U/kg.再灌注后1、6、12、24、48 h取各组大鼠残肝组织,测定残肝再生度、PCNA阳性率,TNF-α、IL-6水平,STAT-3、CyclinD1、Cdk4mRNA表达及CyclinD1、Cdk4蛋白表达水平.结果 UTI组24h和48h肝再生度和PCNA阳性率较PHIR组显著升高(P<0.05);UTI组早期TNF-α、IL-6水平较PHIR组显著降低(P<0.05),但再灌注晚期IL-6水显著高于PHIR组(P<0.05);UTI组24 h和48 h STAT-3、CyclinD1、Cdk4 mRNA表达及CyclinD1和Cdk4蛋白表达水平均显著高于PHIR组(P<0.05).结论 乌司他丁对肝大部切除合并缺血再灌注损伤后残肝的再生具有促进作用,其机制与激活IL-6/STAT-3信号通路,促使肝细胞CyclinD1-Cdk4复合物合成,促进肝细胞增殖有关.
作者:朱宇麟;周荣胜;杨会;谭敬;张晓琪;刘齐宁 刊期: 2012年第09期
目的 通过检测接受不同治疗方案的慢乙肝患者的血清白介素21(IL-21)水平,探讨药物对IL-21表达的影响.方法 198例非活动性慢乙肝患者分为干扰素治疗组(IFN,n=38)、核苷类似物治疗组(NA,n=72)和未接受任何抗病毒治疗对照组(Con,n=88).采用ELISA法定量测定IL-21.肝功能指标均采用全自动生化分析仪检测.HBV血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)采用ELISA方法检测.结果 对照组和干扰素治疗组IL-21水平都显著高于核苷类似物治疗组(P<0.05),依次为(102.29±14.03)、(123.01±38.26)、(48.10±7.06) pg/ml.HBeAg阴性组(n=105)的IL-21水平显著高于HBeAg阳性组(n=93),依次为(114.83±19.88)pg/ml、(61.53±6.61) pg/ml (P<0.05).IL-21与肝功能各项指标之间无显著相关性.结论 免疫调节剂干扰素可能具有上调慢乙肝患者IL-21水平的作用,而核苷类似物具有下调作用.HBeAg阴性组的IL-21水平显著高于阳性组,表明HBeAg抗原表达时IL-21水平降低.
作者:邹敏;李珉珉;李晓娟;周元平;刘叔文 刊期: 2012年第09期
目的 探讨新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料对胸腹水细胞形态和性状保存的价值,评价其生物学性能.方法 应用常规HE染色和Western blotting分别检测经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料和95%乙醇常规固定液固定保存的56例胸腹腔积液组织细胞CK、CEA和P53的形态学特点和蛋白表达水平.结果 经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸腹腔积液组织细胞形态保存较完整,细胞核与细胞浆饱满,杂质较少;应用95%乙醇常规液固定的细胞可不同程度损坏细胞结构,尤其损坏细胞浆的结构,杂质相对较多.经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸腹腔积液组织细胞CK、CEA和P53的蛋白表达水平分别是91%、86%和88%,由95%乙醇常规固定液保存的组织细胞CK、CEA和P53的蛋白表达水平分别是46%、38%和31%,两种保存方法相比具有显著性差异(P<0.05).结论 新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料高效、环保、性能优良,能较好保存胸腹水组织细胞的形态学特征,对胸腹腔积液组织细胞蛋白质的固定效果较好,可广泛推广应用于组织细胞的固定和保存.
作者:李笑;万里燕;耿舰;白晓燕 刊期: 2012年第09期
目的 探讨后路复位内固定治疗游离齿突小骨伴寰枢椎脱位的方法及疗效.方法 2007年3月~2010年10月,收治10例游离齿突小骨伴寰枢椎脱位患者,男6例,女4例;年龄20~65岁,平均39.8岁,术前摄颈椎正侧位X片,CT及MRI检查,评价脱位及脊髓受压程度.术前经1~2周牵引,10例患者均属可复性脱位,10例患者均采用颈椎后入路,其中C1侧块、寰枢椎弓根螺钉固定9例,枕骨髁钉C2~C3椎弓根螺钉内固定1例,术后颈托固定3个月.结果 手术时间2~3.5 h,平均3 h;术中出血量250~660ml,平均420ml,术后颈痛和神经损害表现均消失,10例患者均获随访6~52个月,平均22个月,患者均在6~8个月达到寰枢椎及寰枕骨融合,至末次随访,未发现螺钉松动、断钉和寰枢椎再移位现象.结论 齿状突游离小骨是齿状突畸形常见的类型,合并寰枢椎脱位后可致严重的脊髓损伤,采用后路内固定手术,能够重建寰枢椎的稳定性,实现即刻稳定,术后能大限度保留患者头颈部活动度,临床效果满意.
作者:张辉;靳安民;张力;周治来;段扬;闵少雄 刊期: 2012年第09期
目的 研究蛋白激酶C(PKC)在凝血酶诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达信号通路中的作用.方法 分别用几种不同类型的PKC抑制剂预处理HLF-1,再用凝血酶(10nmol/L)刺激HLF-1,利用ELISA法检测上清液中MCP-1的蛋白表达;提取细胞裂解液中总RNA并逆转录合成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA表达水平.结果 广谱型PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I和RO-31-8220可抑制凝血酶诱导的HLF-1 MCP-1蛋白释放及mRNA表达,而Ca2+依赖性PKC抑制剂Gǒ 6976则没有抑制效果.结论 非Ca2+依赖性PKC介导凝血酶诱导HLF -1释放MCP-1.
作者:袁超;许铭炎;陈耿臻;傅玉才;邓小玲 刊期: 2012年第09期
目的 分析比较代谢相关蛋白在成人和胎儿肝脏中的分布及其丰度.方法 使用含19个线粒体单抗的蛋白芯片分析4种肝组织总蛋白样本(成人肝组织匀浆蛋白,胎肝匀浆蛋白,成人肝线粒体蛋白和胎肝线粒体蛋白),通过生物信息学工具对蛋白表达丰度进行比较,探讨蛋白质代谢相关的途径.结果 醛氧化酶和羰基还原酶在成人肝线粒体中的表达较胎儿分别上调2.6和1.7倍.皮质类固醇11-β3-脱氢酶同工酶1,环氧化物水解酶1和纤维蛋白原β链隘蛋白则分别下调1.7,1.9和2.2倍.环氧水解酶1和谷胱甘肽转移ω-1在成人和胎儿肝匀浆样本中存在显著差异.结论 肝脏代谢相关蛋白的表达在成人肝脏和胚胎肝脏中存在显著的差别.该研究将有助于更好地理解代谢蛋白的发生和发展,并确定肝脏代谢标志物.
作者:颜桦;陈超;李铮 刊期: 2012年第09期
目的 探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)通过抑制iNOS减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激.方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和模型组(LPS组).使用ELISA对肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和TNF-α水平进行测定.测量BALF中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平.对肺组织进行湿/干比(wet to dry ratio,W/D)测定.HE染色用于肺组织病理变化观察和肺组织损伤评分测量.RT-PCR被用于iNOS mRNA的测定.使用Western blot测定iNOS和β-肌动蛋白(β-actin)蛋白的表达.结果 LPS干预后小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平明显上升而SOD水平显著下降,W/D比值和肺组织损伤评分明显升高,iNOS mRNA和蛋白的表达明显增加.LPS+DAS组小鼠BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平、W/D比值、肺组织损伤评分、iNOS mRNA和蛋白的表达较LPS组小鼠明显下降;同时BALF中SOD水平较LPS组小鼠明显增加.结论 DAS可能是通过抑制iNOS表达减轻LPS诱导的急性肺损伤导致的氧化应激.
作者:朱涛;管弦;张维;王导新 刊期: 2012年第09期
目的 确定星形胶质细胞瘤中过氧化物酶1(Prxl)、过氧化物酶6(Prx6)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,探讨其表达水平与星形胶质细胞瘤恶性程度的关系.方法 采用Western blot、RT-PCR和免疫组化检测52例星形胶质细胞瘤(Ⅱ级23例、Ⅲ级15例、Ⅳ级14例)和12例正常脑组织标本中Prx1、Prx6和GFAP的表达情况.结果 Prx1、Prx6在正常脑组织、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平逐渐升高,具有统计学意义(P<0.05);GFAP在Ⅲ、Ⅳ级星形胶质细胞瘤中蛋白和mRNA的表达水平低于Ⅱ级星形胶质细胞瘤和正常脑组织(P<0.05).结论 Prx1、Prx6和GFAP可能是临床评价星形胶质细胞瘤恶性程度和侵袭性的潜在生物标志物,可作为星形胶质细胞瘤生物治疗的潜在靶分子.
作者:周金桥;刘秋红;王景涛;郭新宾;宋来君 刊期: 2012年第09期
目的 探讨应用自人脂肪组织来源的不同细胞辅助脂肪移植,寻找促进移植物存活率的佳种子细胞的有效方法,为干细胞进一步运用于临床提供实验依据.方法 从临床抽脂病人获取脂肪组织并提炼细胞,将0.3 ml待移植的脂肪颗粒分别与以下细胞进行混合处理:(1)低氧脂肪来源间充质干细胞(A组);(2)脂肪来源间充质干细胞(B组);(3)血管基质层细胞(SVFs)(C组);(4)加完全培养基的单纯脂肪颗粒为对照组(D组)脂肪颗粒与相应细胞混合后,注射移植于6只裸鼠背部皮下.术后3个月观察移植物情况,通过组织学、HE染色等方法进行分析.结果 A~D组湿重分别为(61.67±8.165)、(91.67±1.472)、(96.67±5.164)和(40.83±4.916)mg,A、B、C组脂肪存活率均高于D组(P<0.05),B、C两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)且都高于A组.A、B、C组血管密度均高于组D,且C组明显高于其他3组(P<0.05).A、B、C组存活脂肪细胞计数均高于D组,且B、C组高(P<0.05),纤维组织计数均低于D组(P<0.05).结论 来源于人自体干细胞复合脂肪颗粒能够显著提高移植脂肪组织的成活率,其中血管基质层细胞及脂肪来源间充质干细胞移植脂肪的存活率高.
作者:朱茗;鲁峰;高建华;廖云君 刊期: 2012年第09期
目的 探讨联合免疫磁珠分选和多重探针连接依赖性扩增(MLPA)技术检测多发性骨髓瘤(MM)分子遗传学异常的可靠性.方法 收集29例初诊MM患者的骨髓细胞,用CD138磁珠进行分选,设计MLPA探针检测分选前后标本TP53和RB1的表达情况,并与FISH检测结果进行对照.结果 MLPA检测成功率100%,与FISH结果吻合度达99.1%,分选后MLPA和FISH阳性率均有显著性提高.结论 MLPA适合临床MM分子遗传学异常检测,标本应在检测前进行磁珠分选.
作者:雷鸣;马莉;邝丽萍;庞妍;伍九龙;肖芷芳;李力 刊期: 2012年第09期
目的 观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B(SEB)对成年子代CD3+ TCR Vβ8+T细胞的影响.方法 在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15 μg SEB,同时设立PBS对照组.孕鼠自然分娩后子代鼠生长至成年,流式细胞仪检测成年子代鼠胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞;并观察成年子代鼠再次给予SEB时胸腺及外周血中CD3+ TCR Vβ8+T细胞的应答变化.结果 妊娠期母鼠给予SEB可导致雌、雄性成年子代鼠胸腺CD3+ TCR Vβ8+T细胞的比例(雌性:1.760,雄性:1.098),较对照组的(雌性:2.714,雄性:2.088)明显减少(P<0.05),其外周血中CD3+ TCR Vβ8+T细胞的变化与胸腺中类似.PBS组的雌雄性成年子代鼠给予SEB后其胸腺及外周血中CD3+ TCR Vβ8+T细胞较同窝对照组明显减少(P<0.05);而SEB组的雌雄性成年子代鼠给予SEB后与其同窝PBS对照组比较,胸腺中CD3+ TCRV β8+T细胞无变化(P>0.05),但外周血中CD3+ TCR Vβ8+T细胞则明显增加(P<0.05).结论 妊娠期母鼠给予SEB改变其成年子代大鼠CD3+ TCR Vβ8+T细胞对再次SEB刺激的应答方式.
作者:管俊昌;刘勇;孔晓明;朱翔;余峰玲;林娜;刘从森;张涛 刊期: 2012年第09期
目的 观察唑来膦酸(密固达)在治疗老年性骨质疏松中骨密度与骨代谢指标的变化.方法 对48例老年性骨质疏松患者随机分为治疗组23例,对照组25例,两组均每日口服维生素D3与钙尔奇-D,治疗组加予密固达5 mg静脉滴注1次,1年后观察两组骨密度与骨代谢指标的变化.结果 治疗前两组无差异(P>0.05).治疗后,治疗组L1-4、Neck、Inter、Ward's骨密度均比对照组明显增加(P<0.05),β-胶原片段(β-CTX)较对照组下降(P<0.05),骨钙素(N-MID)、降钙素(hCT)与对照组相比无明显差异(P>0.05).结论 静滴1次密固达,1年后能有效地降低骨吸收,提高骨密度,可用于治疗老年性骨质疏松.
作者:许翎;邓海鸥;智喜梅;张伟杰;王小娜;吴文 刊期: 2012年第09期