霍云华；王学良；李俊；朱春燕；孙晓敏；赵晓山；张超；罗仁
目的 筛选特异高效抗乙型肝炎病毒(HBV)的小干扰RNA分子(siRNA),评价其干扰效果.方法 在HepG2.2.15细胞内导入筛选的3条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平;Western blot检测细胞上清中乙肝表面抗原(HBsAg),分析siRNA对HBV基因表达的抑制作用.结果 导入特异siRNA分子细胞中HBV的mRNA表达量明显降低(P＜0.05),上清中HBsAg含量显著减少.阴性对照细胞中HBV的mRNA含量和上清中HBsAg含量基本不变(P＞0.05).结论 所筛选的siRNA分子能特异性抑制HBV的mRNA和蛋白的合成.
作者：焦京；曹虹；周美娟；刘志华；丁振华 刊期： 2007年第04期
目的 构建人双突变型HIF-1α-Ala402-Ala564腺病毒表达载体,研究人双突变型低氧诱导因子1α基因对冠心病的血管新生作用.方法 在业已完成的pShuttle2-HIF-1α-Ala564的基础上,用PCR定点突变的方法将其第402位脯氨酸密码子CCA突变为丙氨酸密码子GCA,构建成双突变HIF-1α真核表达载体pShuttle2-HIF-lα-Ala402-Ala564,通过体外连接法与线性化的腺病毒骨架质粒连接,重组成pAdeno-HIF-1α-Ala402-Ala564腺病毒质粒,经酶切及测序鉴定正确后,包装成为重组Adeno-HIF-1α-Ala402-Ala564腺病毒.结果 经酶切鉴定及基因测序证实重组腺病毒质粒构建成功.结论 成功构建重组腺病毒Adeno-HIF-1α-Ala402-Ala564(双突变型),为冠心病的突变型HIF-1α基因治疗研究奠定基础.
作者：童锴；谢宜军；王月刚；郭寿贵；赖文岩；吴平生 刊期： 2007年第04期
目的 确定颈椎定点旋转手法所致咔哒声响的确切小关节位置.方法 对30名健康成年人施行定位于C4棘突的颈椎定点旋转手法,左右各1次,同时运用自行设计的声响采集定位系统对手法所致的咔哒声响进行采集,分析其发出声响的确切小关节,并进行统计学分析.结果 颈椎定点旋转手法所致的咔哒声响主要集中在C3～7间小关节,这些小关节发生声响的次数与其他颈椎间小关节发出声响的次数有显著性差异(P＜0.05).结论 颈椎定点旋转手法只是相对的定点,而不是精确的定点.
作者：金斌；邱桂春；李义凯 刊期： 2007年第04期
目的 了解广东省某高校职工亚健康状态常见的临床表现.方法 采用现场调查的方法,对参加体检的职工发放亚健康调查表,将合格问卷录入Epidata3.02,然后进行统计学分析.结果 共有891名职工问卷合格,其中510人出现亚健康状态,亚健康发生率为57.2%,其临床表现很多,涉及到躯体、心理及社会等多种症状.应用多因素Logistic回归分析显示:苦闷、疲倦乏力、失眠、腰背酸痛、时常叹气、眼涩、注意力差、急躁易怒、手脚发凉、容易感冒等为亚健康状态的常见临床表现.结论 亚健康状态的临床表现非常复杂.
作者：霍云华；王学良；李俊；朱春燕；孙晓敏；赵晓山；张超；罗仁 刊期： 2007年第04期
目的 探讨利多卡因对失血性休克兔肺损伤的保护作用.方法 18只兔随机分为3组,每组6只:利多卡因组(L组)、失血性休克组(H组)和对照组(C组).L组于放血前静脉注射2.5 mg/kg利多卡因,此后每隔1 h静脉注射1 mg/kg利多卡因维持;L组与H组建立失血性休克模型后,分别于放血前(T0)、休克2 h(T1)、复苏2 h(T2)各从股静脉取血测定血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);C组在上述对应时间点测定血浆MDA和SOD.3组动物复苏2 h后处死,取左上肺测肺组织的湿/于重比值(W/D).结果 H组与L组在T1、T2时点,与T0时点及C组相比,MDA含量均显著升高(P＜0.05),L组MDA低于H组(P＜0.05);SOD含量则显著下降(P＜0.05),L组SOD高于H组(P＜0.05);L组肺组织W/D比值低于H组而高于C组(P＜0.05).结论 早期静脉注射利多卡因可抑制MDA产生,增加SOD含量,降低肺含水量,从而减轻失血性休克兔肺组织的损伤.
作者：阮骆阳；林春水；刘莹莹；古妙宁 刊期： 2007年第04期
目的 研究不同激活状态的单核细胞在乳腺癌发展中的作用,探索肿瘤相关巨噬细胞在乳腺癌中的作用机制.方法 体外分离培养人外周血单核细胞,分为经典激活、替代激活、空白对照3组,分别采用细菌脂多糖IL-4、培养基进行相应激活.48～72 h后,采用RT-PCR、与人乳腺癌细胞株SKBR3共培养、建立鸡胚尿膜囊血管生成模型等方法检测各组TNF-α、AMAC-1、β-actin mRNA表达的差异,观察3种不同活化状态的单核巨噬细胞对乳腺癌细胞生长的影响以及对肿瘤诱导新生血管形成的影响.结果 经典激活组高表达TNF-α,替代激活组则高表达AMAC-1,3组间分子标志物的表达差异具有统计学意义(P＜0.05).共培养实验显示经典激活的单核细胞呈现出明显抑瘤效应,3 d后效应明显高于其他两组(P＜0.05),替代激活的单核细胞则在第5天开始呈现出明显促肿瘤效应(P＜0.05).在鸡胚尿囊膜血管生成模型中,替代激活的单核细胞可以明显促进肿瘤新生血管的生成(5733±14.82),与经典激活(20.44±6.50)及未激活组(32.22±8.33)相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-4可以促进人外周血单核细胞向替代激活的方向分化并高表达替代激活的分子标志物AMAC-1,而替代激活的单核巨噬细胞在与肿瘤细胞的共培养中可以促进肿瘤细胞的生长以及刺激肿瘤新生血管的生成.提示肿瘤相关巨噬细胞在体内很可能主要以替代激活的方式存在,从而直接或间接地促进了肿瘤的进展.
作者：郭巨江；苏逢锡；姚和瑞；陈积圣 刊期： 2007年第04期
目的 探讨应用Nuss手术微创矫正小儿漏斗胸的疗效及Nuss手术中支气管封堵技术替代人工气胸技术的作用.方法 15例胸腔镜辅助下行Nuss手术微创矫正漏斗胸,术中应用支气管封堵技术替代人工气胸技术.其中男14例,女1例,年龄6～15岁.结果 15例术中生命体征稳定,均顺利完成手术,无术中并发症,疗效均满意.手术时间25～45min;所有病儿均应用钢支撑架;术中平均出血25 ml;术后平均住院7 d.随访1～10月,术后无并发症.结论 Nuss手术方法安全可行值得推广.支气管封堵技术是替代人工气胸技术的有效方法.
作者：郑俊猛；陈勇；李斌飞；梁爱群；姜海明；王得坤 刊期： 2007年第04期
目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养的人脐静脉内皮样细胞株ECV304增殖及syndecan-4蛋白表达的影响.方法 体外培养人脐静脉内皮样细胞株ECV304,分别应用1、10、20、100 ng/ml的TNF-α作用24 h及36 h并设立对照组进行比较,采用MTS/PES法确定人脐静脉内皮样细胞的增殖状态.利用Western blotting蛋白免疫印迹法测定细胞syndecan-4蛋白的表达情况.结果 24 h各组细胞增殖率分别为对照组(1.956±0.214),TNF-α100 ng/ml组(2.154±0.250),TNF-α20 ng/ml组(2.26±0.151),TNF-α10 ng/ml组(2.118±0.205),TNF-α1 ng/ml组(2.106±0.136).统计分析显示低至1 ng/ml的TNF-α仍能明显刺激人脐静脉内皮样细胞的增殖(P＜0.05),其中以TNF-α 20 ng/ml组细胞增殖显著P＜0.05).36 h各剂量组的细胞增殖率均明显低于24 h的细胞增殖率(P＜0.05).TNF-α对人脐静脉内皮样细胞的syndecan-4蛋白表达有显著的增强作用(P＜0.05).结论 TNF-α对体外培养的人脐静脉内皮样细胞的增殖及syndecan-4蛋白表达均有明显的促进作用,但随着时间的改变,这种作用有所变化.
作者：张彬；欧阳平；陈烨；赖文岩；谢晋国；许顶立 刊期： 2007年第04期
目的 评价硝酸甘油对局部心肌氧代谢和心肌收缩功能的影响.方法 实验应用8只具有静息状态血流限制的左前降支或左回旋支近端狭窄的开胸犬.以二维超声心动图评价室壁增厚率(%WT),放射性微球定量心肌血流量(MBF),用磷猝熄法在体直接测定心肌组织氧压(tPO2).分别在静息和左冠脉主干内输注硝酸甘油(0.3～0.6 mg·kg-1)状态下,进行二维超声检查、核素微球注射,以及tPO2和心肌氧耗量(MVO2,ml·min-1·100 g-1)测定,MVO2等于冠状动脉与冠状静脉氧浓度差乘以MBF,心肌氧输送能力等于冠状动脉氧浓度差乘以MBF.结果 与静息状态相比,经左冠脉主干内输注硝酸甘油时,无论是正常灌注区抑或是缺血灌注区的MBF明显增加(P＜0.05),同时伴有%WT明显增加(P＜0.05).正常和缺血灌注区的心肌氧输送能力明显增加(P＜0.05),尽管缺血灌注区的MVO2有明显增加(P＜0.05),但是缺血灌注区的tPO2仍明显增高(P＜0.05).缺血区心肌tPO2增加的程度明显大于MBF增加的程度.结论 硝酸甘油可明显提高正常和缺血灌注区心肌氧浓度,提高缺血灌注区血氧的解离和释放,可能具有正性肌力效应.除了其直接血管效应之外,硝酸甘油还通过对心肌氧代谢和收缩功能的影响在心血管中发挥重要的调节作用.
作者：宾建平；D.Elizabem Le；陈少敏；查道刚；刘伊丽；Sanjiv Kaul 刊期： 2007年第04期
目的 探讨吻合器痔上粘膜环切术(PPH)治疗重度痔的临床效果及应用价值.方法 应用国产的肛痔吻合器对30例重度痔患者行PPH术治疗,术后观察随访3～5个月并评价临床效果.结果 30例重度痔中,术后脱出肛外痔块均回纳肛内,无1例便后再脱出,24例3个月后痔核明显萎缩,6例仍在随访观察中,12例(其中包括4例PPH+血栓性外痔切除术)术后疼痛明显,需止痛治疗,22例发生尿潴留,6例发生术后出血,经保守治疗后治愈,目前无1例复发,患者术后排便控便均无异常.结论 PPH是治疗重度痔的佳选择.
作者：郭晓城；姜学辉 刊期： 2007年第04期
目的 探讨CD-TK融合双自杀基因对前列腺细胞的杀伤作用.方法 应用缺陷性腺病毒载体将CD-TK融合双自杀基因以及绿色荧光蛋白基因(GFP)转染RM-1细胞,以GFP是否表达作为间接鉴定转染成功的标志,以RT-PCR鉴定作为是否转染的标准.联合前药5-FC和/或GCV作用于转染了CD-TK基因的RM-1细胞,以MTT法检测自杀基因系统对转染后的RM-1细胞的杀伤作用,以未转染的RM-1细胞作对照.结果 以腺病毒感染RM-1细胞72 h后,在荧光显微镜下可见每个细胞都能发出淡绿色荧光,表明该基因已转染到RM-1细胞中,RT-PCR可检测到转染双基因的RM-1细胞含有CD-TK基因.与对照组相比较,当GCV浓度为125 μg/ml时,转染了CD-TK基因的RM-1细胞的存活率为47.27%;与对照组相比较,当5-FC浓度为160 μg/ml时,RM-1细胞的存活率为71.56%;而两种前药联合应用时RM-1细胞的存活率为18.45%,低于单一用药组(P＜0.05).结论 CD/5-FC、TK/GCV自杀基因系统对前列腺癌细胞具有较强的杀伤作用,而应用CD-TK融合自杀基因系统明显优于单一的自杀基因系统.
作者：朱文辉；谭万龙；黄河；石向华；谢毅 刊期： 2007年第04期
目的 研究腺病毒介导的HSV-TK系统联合羟基喜树碱(HCPT)对人膀胱癌细胞的体外杀伤作用.方法 使用含有HSV-TK基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因的复制缺陷腺病毒转染人膀胱癌细胞T-24细胞,表达GFP为转染成功标志,同时观察转染率,PCR检测TK表达.以正常T-24细胞为空白对照,转染成功后分别加入GCV、GCV+HCPT,采用MTT法测定单纯HCPT作用于人膀胱癌细胞72 h细胞增殖抑制率、各组治疗转染后人膀胱细胞24、48、72 h细胞存活率;流式细胞仪检测GCV(0.5 mg/ml)+HCPT(10 mg/L)作用T-24细胞4h后的凋亡情况.结果 随着浓度的增高,HCPT对T-24细胞的生长抑制率逐渐增高,HCPT浓度为0.01 mg/L时T-24生长抑制率为14%,50 mg/L时T-24生长抑制率为63%,当HCPT浓度大于100 mg/L时,抑制作用无明显增加(P=0.216).GCV组、GCV+HCPT各组对转染后细胞有明显杀伤作用(P=0.00),GCV+HCPT组随HCPT浓度增高和作用时间的延长,杀伤效率明显增高.0.5 mg/ml GCV单独作用于转染后的膀胱癌细胞72 h后,细胞存活率为34.6%,GCV(0.5 mg/m1)+HCPT(10 mg/L)组的细胞存活率仅为8.07%(P=0.00).GCV+10 mg/mlHCPT作用后4h,T-24细胞出现M1期前典型的细胞凋亡峰,凋亡率达52.93%.结论 HSV-TK/GCV系统联合HCPT治疗能增强自杀基因系统对人膀胱癌的杀伤作用,能够良好地诱导人膀胱癌细胞的凋亡.
作者：黄河；谭万龙；朱文辉；梁仲琨 刊期： 2007年第04期
目的 观察活动舌弓+再曲簧临床扩弓效果,寻找一种简便、有效,尤其对下颌牙弓更理想的扩弓方法.方法 选择临床牙弓狭窄伴牙列轻度拥挤患者.其中上颌扩弓者9例,下颌扩弓者8例,随机分为两组,分别采用活动舌弓+再曲簧和四眼簧进行扩弓,比较两组的扩弓效果.结果 通过8周的扩弓治疗,活动舌弓组U4-U4及U5-U5间宽度分别平均扩大2.2 mm和3.0 mm,四眼簧组U4-U4及U5-U5间宽度平均扩大2.3 mm和3.5 mm,两处理组组间比较无显著性差异(P＞0.05).通过12周的扩弓治疗,活动舌弓组L4-L4及L5-L5间宽度分别平均扩大2.3 mm及2.5 mm,四眼簧组L4-L4及L5-L5间宽度平均扩大1.0 mm和1.2 mm,两处理组组间比较有显著性差异(P＜0.05).结论 活动舌弓+再曲簧可明显扩大牙弓中段(前磨牙区),尤对下颌牙弓的扩弓作用明显优于四眼簧.
作者：孙风阳；张宇 刊期： 2007年第04期
目的 了解尿毒症患者肾移植前后精子形态及精子受精能力的变化.方法 对20例尿毒症患者接受肾移植手术前后的精液进行精子运动参数、精子形态学及顶体反应率的检测.结果 尿毒症患者肾移植手术前的精液主要参数明显低于正常对照组(P＜0.05).接受肾移植手术后前向运动精子百分率有显著提高(P＜0.05),而精子密度与术前无统计学差异(P＞0.05).肾移植术后,正常形态精子百分率有明显提高,为(19.58±7.73)%,但仍低于正常对照组(P＜0.05).尿毒症患者肾移植手术前精子顶体反应率平均为(11.20±4.38)%,低于正常对照组(32.44±12.91)%(P＜0.05),接受肾移植手术后,精子顶体反应率为(14.18±5.97)%,较术前稍增高,但无统计学差异(P＞0.05).结论 尿毒症患者肾移植术后生育能力有所改善,但其精子受精能力仍低于正常男子.
作者：程学军；郭新宇；谢晓萍；李小庭；陈焱 刊期： 2007年第04期
目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病的CT诊断与鉴别诊断.方法 对86例有明确围产期窒息史,且有临床症状的病例进行CT扫描,取得完整的临床及CT诊断资料后加以分析.结果 结合文献进行临床分度及CT分度,临床分度中轻度占32例,与CT分度轻度相符合;中度占44例,其中8例、27例、9例分别与CT分度中的轻、中、重度相符合;重度占10例,符合CT分度重度,可见CT分度与临床表现有一定的差异性,病灶CT值改变与正常部位相比差异有显著性.蛛网膜下腔出血是常见的并发症.结论 新生儿缺氧缺血性脑病的CT诊断要密切结合临床资料,才能作出正确的诊断.
作者：阎晓宇；董刚 刊期： 2007年第04期
目的 探讨影响结核性脑膜炎(TBM)预后的因素.方法 对54例TBM患者的发病年龄、病程、治疗时的病期、分型、脑脊液参数、EEG表现、影像学改变等相关因素进行对照研究.结果 有显著性差异的因素为治疗时病程、病期、分型、脑脊液参数.结论 影响TBM预后的因素是多方面的,尤其早期诊断、规范治疗、病期、分型、脑脊液参数变化等与结脑预后有密切联系.
作者：于娜；姚其英；胡福永 刊期： 2007年第04期
目的 了解尖锐湿疣(CA)表皮中CCL20及CXCR4的表达,并探讨它们对CA表皮朗格汉斯细胞的影响.方法 使用Affymetrix寡核苷酸芯片,对3例CA表皮和3例正常表皮中的CCL20及CXCR4的mRNA表达进行检测.采用Western blot法,检测3例CA表皮和3例正常表皮中的CCL20及CXCR4的蛋白表达.结果 基因芯片检测到CCL20及CXCR4的mRNA在CA表皮中表达下调.Western blot法检测到CCL20蛋白及CXCR4蛋白在CA表皮中的显著下调表达.结论 CCL20及CXCR4在CA表皮中表达下调,并可能分别与CA表皮中朗格汉斯细胞的数目减少及回流障碍有关.
作者：冯进云；彭振辉；唐小平；王梅菊；刘玉萍 刊期： 2007年第04期
目的 将真核表达载体pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率.方法 将已构建好的重组载体转染骨髓来源nestin阳性细胞,改变DNA的量、转染后培养基中的血清浓度,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48 h用RT-PCR检测目的 基因的表达情况.结果 质粒2～10 μg获得佳的转染效率,提高转染后培养基的血清浓度可提高转染后细胞存活率及转染效率.RT-PCR检测转染后骨髓来源nestin阳性细胞有PDX-1表达.结论 通过优化转染条件提高了pEGFP-C1-PDX-1转染大鼠骨髓来源nestin阳性细胞的效率,为其成为组织工程的种子细胞提供了实验依据.
作者：王海澜；潘明新；张会迎；安靓；高毅 刊期： 2007年第04期
目的 确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子区结合.方法 应用生物信息学方法获得PRL-3基因启动子区域,并对其潜在的Snail结合位点进行预测,进一步应用Snail抗体染色质免疫共沉淀技术结合PCR技术检测PRL-3基因启动子序列,以确定转录因子Snail可与PRL-3基因启动子结合.结果 应用TRED在线分析系统确定PRL-3基因的启动子区域位于PRL-0基因上游-700 bp至299 bp之间,在该启动子区域存在多个转录因子如Snail、n-MYC、ARNT、E74A、NF-kappaB、NRF-2及AML-1等的结合位点;在启动子区域的-500 bp至-451 bp之间存在Snail结合的核心寡核苷酸序列CACCTG,在其他多个区域存在多个类似这一核心序列的DNA序列;应用染色质免疫沉淀技术结合PCR扩增的方法对人大肠癌细胞株SW480细胞进行分析,发现Snail可与人大肠癌细胞株SW480 PRL-3基因的启动子区域的DNA片断结合.结论 转录因子Snail可与人大肠癌细胞SW480 PRL-3基因启动子结合,参与PRL-3基因的调控.
作者：杨发达；李建明；周军；柳玉红；丁彦青 刊期： 2007年第04期
目的 探讨花粉芪奴汤结合伐地那非治疗Ⅲ型慢性前列腺炎(CP/CPPS)合并勃起功能障碍(ED)的疗效.方法 CP/CPPS合并ED患者138例,随机分为两组:治疗组70例,使用花粉芪奴汤4周后加用伐地那非治疗;对照组68例持续使用花粉芪奴汤8周.分别于第4和第8周末进行NIH-CPSI评分和IIEF-5评分观察疗效.结果 4周末治疗组和对照组NIH-CPSI分别为13.1±4.7和13.3±4.5,较治疗前均显著下降(P＜0.01),两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),两组IIEF-5评分分别为14.1±3.3和14.3±5.0,较治疗前有所上升(P＜0.01),但两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).8周后治疗组NIH-CPSI评分7.8±2.8、IIEF-5评分20.1±4.4与4周末比较差异均有统计学意义(P＜0.01);对照组NIH-CPSI评分12.7±2.3、IIEF-5评分14.3±4.5、与4周末比较差异均无统计学意义(P＞0.05);两组间NIH-CPSI与IIEF-5评分比较差异均有统计学意义(P＜0.01),治疗组IIEF-5评分值与NIH-CPSI值呈负相关关系.结论 对CP/CPPS合并ED患者在使用花粉芪奴汤加用伐地那非能有效治疗ED,同时使NIH-CPSI评分降低,促进CP/CPPS恢复.
作者：林中方；陈宝田；曾抗；兰海梅；温炬 刊期： 2007年第04期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
