陈天艳；刘敏；陈云茹；蔺淑梅；叶峰；张曦；刘锦锋；赵英仁；张树林
目的 优化非分型流感嗜血杆菌Haps蛋白质片段的分离纯化方法.方法 采用盐析、透析脱盐、超滤浓缩、弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化Haps蛋白,优化Haps蛋白质片段的洗脱条件,包括pH值和离子强度,测定各洗脱液样品在280 nm波长处的光吸收值(D280),用折线图显示,SDS-PAGE电泳检测分布图中处于峰值的样品,观察目的 蛋白条带的出现.结果 弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化HapS蛋白,缓冲液1洗脱液的D280分布为基线,缓冲液2洗脱液的D280分布折线图中有峰值出现,但峰有拖尾,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰主要为低分子量的蛋白条带;五种不同离子强度的缓冲液3洗脱液在100mmol/LNaCl离子强度时,D280的分布折线图显示有较高洗脱峰出现,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰有较明显的110 000 D的目的 条带,其余离子强度下均未见明显洗脱峰出现.结论 Sepharose CM FF层析柱分离纯化Haps蛋白质片段时,不同pH值的缓冲液对目的 蛋白的洗脱没有明显影响,而主要影响杂蛋白的洗脱;100 mmol/L NaCl离子强度的缓冲液3洗脱液获得较好的洗脱效果.
作者：李婉宜；邝玉；李明远；杨远；蒋中华；姚锋；陈长春 刊期： 2007年第12期
使用Photoshop和Matlab软件,基于标记点自动配准中国数字人连续断层图像.中国数字人标本在包埋时加入了4根定位杆,在整个冰冻标本内呈直线状态,且均与标本垂直轴平行.4个定位杆在每一断层切面上的相对空间位置是固定不变的,由于照相机与断层切面相对位置的改变,导致图像产生射影失真,从而使得在每一断层图像上4个定位杆的相对空间位置发生改变.首先在Photoshop中处理原始断层图像,获取每一层的4个定位杆图像,在Matlab中计算4个定位杆图像的质心坐标值作为定位杆坐标值,取所有断层图像定位杆坐标值的平均值为基准坐标.其次依据每一层定位杆的坐标值确定二维射影变换参数,对断层图像进行射影变换,消除其射影失真.纠正失真后的断层图像再在Photoshop中处理,获取其4个定位杆中第一个定位杆图像,同样在Matlab中计算其坐标值,基于定位杆坐标值将断层图像裁剪成大小一致的断层图像.使用Photoshop和Matlab进行连续断层图像配准,具有配准精度高、运算量小、易于编程实现等优点.
作者：苏秀云；裴国献；余斌；扈延龄；李谨；黄谦；李旭；张元智 刊期： 2007年第12期
目的 探讨大剂量5-FU致肠黏膜严重损伤时肠上皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其意义.方法 成年C57BL/6J小鼠40只,分为对照组(n=8)和实验组(n=32).对照组给予腹腔注射PBS,实验组给予腹腔注射大剂量5-FU(150 mg/kg.d,连续五d),分别于处理后第1、3、5天,剖杀小鼠取小肠,常规HE染色,免疫组化检测PCNA的表达.结果 与对照组比较,腹腔注射大剂量5-FU后,小鼠肠黏膜遭受严重破坏,黏膜萎缩,绒毛、隐窝结构消失;免疫组化结果显示PCNA表达增加,PCNA指数显著增高(P＜0.01).结论 腹腔注射大剂量5-FU后,肠黏膜细胞中表达PCNA的肠上皮细胞比例增加,可能与肠黏膜损伤后修复有密切的关系.
作者：罗育其；吴承堂；闻英；廖康雄；张军花 刊期： 2007年第12期
目的 评价电子束CT(EBCT)诊断主动脉壁内血肿的价值.方法 采用Imatron C-150型EBCT扫描机,连续容积增强扫描,对25例主诉急性胸背痛患者进行EBCT检查并诊断为主动脉壁内血肿.结果 25例按Stanford分型,A型7例,B型18例.EBCT所见主动脉壁内血肿的直接征象:主动脉壁呈新月形或环形增厚≥5mm,无内膜破裂形成的双腔主动脉征象.间接征象:钙化内移7例,穿透性溃疡征12例,主动脉壁粥样硬化改变18例,内膜渗漏5例.并发征象:心包积液5例,胸腔积液14例,主要分支血管受累5例,主动脉夹层3例,主动脉瘤4例.结论 EBCT能为主动脉壁内血肿的诊断和治疗提供重要信息,且便于治疗后随诊观察.
作者：杜渭清；张雪林；郑敏文；魏梦绮；徐俊卿；徐健 刊期： 2007年第12期
目的 探讨脑桥小脑角区常见肿瘤的MR表现以达到诊断和鉴别诊断的目的 .方法 回顾性分析54例经手术和病理证实的脑桥小脑角区肿瘤,总结其MR表现和特征.结果 54例患者中,男性23例,女性31例,小年龄10岁,大年龄75岁,左侧脑桥小脑角区22例,右侧30例,双侧2例.听神经瘤32例(59%),含双侧发病的神经纤维瘤病2例,脑膜瘤7例(13%),表皮样囊肿(胆脂瘤)8例(15%),血管母细胞瘤3例(6%),髓母细胞瘤、脑脓肿、转移瘤及胶质瘤各1例.结论 MRI在脑桥小脑角区占位性病变的诊断中具有重要作用.
作者：韩路军；张雪林；邱士军；花倩倩；李虹 刊期： 2007年第12期
目的 探讨急性心肌梗死及脑梗死患者组织因子途径相关凝血因子的变化及其临床意义.方法 观察分析69例急性心肌梗死、71例急性脑梗死患者以及50名健康老年人组织因子、组织因子途径抑制物、因子Ⅶ等指标.血浆中组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)活性测定采用发色底物法,抗原测定用ELISA法;凝血因子Ⅶ(FⅦ)促凝活性测定采用一期凝固法,FⅦa水平测定采用重组可溶性组织因子法.结果 与对照组相比,急性心肌梗死患者血浆中TF活性、TF抗原、TFPI活性与TFPI抗原均显著增加(P均＜0.05),而血浆中FⅦ:C无显著变化(P＞0.05),但FⅦa显著增加(P＜0.05);急性脑梗死患者血浆中TF活性、TF抗原均升高(P均＜0.05),TFPI活性、TFPI抗原均降低(P均＜0.05),而血浆中FⅦ:C、FⅦa显著增加(P均＜0.05).两病例组相比,急性心肌梗死组TF活性、抗原升高更为显著(P均＜0.05);急性心肌梗死组TFPI活性、抗原增加,而急性脑梗死组均降低,差异具有显著性意义(P均＜0.05);FⅦ:C在急性脑梗死组显著升高(P＜0.05),而FⅦa两组差异并无显著性(P＞0.05).结论 急性心肌梗死和急性脑梗死患者均存在组织因子途径的启动,血栓形成风险增加,测定上述指标对了解疾病发展趋势具有辅助作用.
作者：熊石龙；王前；郑磊；李俊玲；文志斌；贺石林 刊期： 2007年第12期
目的 评价血清纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅰ型胶原(C Ⅰ)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)、基质金属蛋白酶(MMP-2)及其抑制物(TIMP-1)对肝纤维化诊断的价值.方法 采用放射免疫法检测80例肝病患者肝纤维化血清学标志物水平,并与患者的肝组织病理学检查作对比,同时与正常人血清指标进行比较,根据受试者工作特征曲线评价8项指标对于早期肝纤维化的诊断价值.结果 肝纤维化患者HA、C Ⅰ、PⅢP、CⅣ、LN、MMP-2、TIMP-1比正常人显著升高(P＜0.01),FN比正常人显著降低(P＜0.01).肝组织的炎症活动度与肝纤维化的分期存在显著正相关(P＜0.05).血清HA、C Ⅰ、PⅢP、CⅣ、LN、MMP-2、TIMP-1与肝纤维分期显著正相关(r=0.247～0.643,P＜0.05或0.01);与炎症分级显著正相关(r=0.239～0.611,P＜0.05或0.01).仅FN与肝脏病理分期、分级显著负相关(r=-0.255,-0.261;P＜0.05).血清指标诊断肝纤维化的ROC曲线分析,HA、PⅢP、TIMP-1、CⅣ、MMP-2、C Ⅰ、LN、FN曲线下的面积分别为0.868、0.764、0.741、0.712、0.672、0.647、0.535和0.484.HA、PⅢP、TIMP-1联合诊断肝纤维化灵敏度为91.58%,特异度为93.41%.结论 血清纤维化指标对肝纤维化有较高的预测价值,其中HA、PⅢP、TIMP-1的诊断价值高.
作者：潘爱萍；林英辉；潘元平；以敏 刊期： 2007年第12期
目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合补气活血汤药治疗子宫肌瘤的临床疗效.方法 将82例子宫肌瘤患者随机分为中西医结合组(结合组)和西医对照组(对照组),结合组皮下注射GnRH-a和口服补气活血汤药,对照组仅皮下注射GnRH-a,均连续使用3～6个月.对两组患者的有效率、肌瘤大小、血红蛋白、血球压积、月经情况及随访结果进行比较.结果 结合组显效率、总有效率分别为58.54%和90.24%,明显高于对照组的36.59%和73.17%(P＜0.05);结合组肌瘤缩小比例、贫血缓解状况、月经改善情况等指标均优于对照组(P＜0.05或0.01).结论 GnRH-a联合补气活血汤药治疗子宫肌瘤疗效显著,值得在临床推广应用.
作者：刘秀敏；夏阳 刊期： 2007年第12期
目的 研究siRNA介导的NF-κB P65沉默诱导肝癌细胞凋亡相关机制.方法 实验以肝癌SMMC7721细胞株为材料,分为空白对照(Con)、脂质体对照(LP)以及siRNA干扰实验(siRNA)3组.以体外转录法合成dsRNA,并用脂质体转染SMMC7721细胞株;Western blotting检测NF-κB P65表达水平,MTT检测细胞增殖情况,Annexin V-PI法检测细胞凋亡,免疫组化检测Bcl-2和Bax表达.结果 与Con和LP组相比,siRNA具有抑制SMMC772l细胞NF-κB P65表达的作用,NF-κB P65表达抑制率分别达到64.74%和34.52%.siRNA明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,晚期凋亡细胞分别是Con组和LP组的8倍和7倍.siRNA引起Bcl-2表达下调,而Bax表达上调.结论 siRNA可以有效抑制NF-κBP65蛋白表达,并通过调节Bcl-2和Bax诱导SMMC7721细胞的凋亡.
作者：黄辰；姚嘉宜；李宗芳；刘利英；倪磊；宋土生 刊期： 2007年第12期
目的 研究人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化来源的心肌样细胞中代表性微小RNA(miRNAs)的表达.方法 利用FITC-偶联的CD29、CD34和CD11b抗体在流式细胞仪上检测分离的hMSCs的抗原表型.分别用5-氮胞苷(5-aza)和乳鼠心肌非接触共培养法诱导传至3代的hMSCs分化为心肌样细胞.用免疫化学法检测hMSCs分化来源的心肌样细胞中心肌特异的α-肌节辅肌动蛋白和心肌肌钙蛋白(cTnI)的表达.利用逆转录PCR和DNA测序鉴定5个代表性的心脏特异的初级微小RNA(pri-miRNAs)的表达.结果 hMSC标志分子CD29表达率为98.87%,而造血细胞标志分子CD34和CD11b的表达率只是5%和0.4%.免疫化学分析显示,分别经5-aza和乳鼠心肌非接触共培养诱导的hMSC均可表达α-肌节辅肌动蛋白和cTnI,而在未分化的hMSCs中无表达.miRNA-143,-181可在5-aza诱导的hMSCs中表达,miRNA-143,-181,-206,-208可在乳鼠心肌非接触共培养的hMSCs中表达,而两种诱导方法均未能诱导miRNA-1-2在hMSCs中表达.结论 利用5-aza和乳鼠心肌非接触共培养法诱导hMSCs分化的心肌样细胞中可以表达不同的心脏特异的pri-miRNAs.
作者：单志新；林秋雄；余细勇；邓春玉；李晓红；张绪超；刘晓颖；符永恒 刊期： 2007年第12期
目的 探讨红外线及磁场联合作用对兔膝关节骨性关节炎软骨损伤的治疗效果.方法 采用管型石膏伸直位固定右后肢的方法将24只健康雄性新西兰成年白兔复制出膝骨关节炎模型.6周后将24只兔子全部解除石膏固定,并随机分为4组进行实验处理,即模型组、红外线治疗组(红外组)、磁疗组及红外线和磁场联合治疗组(联合组).分别于治疗开始后1、2、3周处死白兔,每组每周处死2只,观察软骨的大体改变,并切取其造模肢体股骨内髁及胫骨内侧平台关节面软骨行组织病理学(HE染色、免疫组化及原位杂交等)检测,光镜所见依据Mankin's评分标准评分,并作统计学处理.结果 联合组的软骨病变程度(包括软骨面的损伤及软骨细胞的增生、紊乱)有显著减轻,联合治疗比单因子治疗有显著性差异(P＜0.05),两个单因子治疗组之间没有显著差异(P＞0.1).结论 联合应用红外线和磁场能有效减轻骨关节炎的软骨破坏,并可缩短病程,提高疗效,起到相互协同作用.
作者：孙嘉利；范建中；宋桂植；谭晓明；彭楠 刊期： 2007年第12期
目的 探讨牛痘疫苗致炎兔皮提取物治疗老年带状疱疹后遗神经痛(PHN)的临床效果及其对患者血清IL-6的影响.方法 老年PHN44例,随机分为2组,2组均在常规抗病毒的基础上,A组加用牛痘疫苗致炎兔皮提取物注射液,B组加用口服消炎痛(吲哚美辛)片,疗程14 d,以VAS评分法评价治疗前后的疼痛强度变化;检测治疗前和治疗后外周血清IL-6水平变化.结果 A组治疗前后VAS评分显著下降(P＜0.01),B组治疗前后VAS评分降低不明显(P＞0.05).A、B两组患者治疗前血清IL-6较正常对照组显著性增高;A组治疗后血清IL-6显著性降低(P＜0.001);B组治疗前后血清IL-6降低不明显(P＞0.05).结论 牛痘疫苗致炎兔皮提取物对缓解PHN患者的神经病理性疼痛作用快,效果显著,并能明显降低血清IL-6浓度.
作者：杨晓梅；何荣国 刊期： 2007年第12期
目的 自动化提取和分割序列颅脑CT图像颅腔内结构.方法 本研究首先利用颅脑CT的解剖学结构,基于区域生长法和形态学方法提取出序列颅脑CT颅腔内结构.然后针对应用EM(期望大化)算法分割图像时,初始值选取难点,提出了一种改进的基于参数受限高斯混合模型的EM分割算法,实现了对颅内结构的有效分割.结果 实验结果表明,该算法能够实现从颅底到颅顶的所有CT图像颅腔内结构的计算机自动化提取和分割,结果准确.结论 本文算法在绝大多数情况下是有效的.
作者：江少锋；陈武凡；冯前进；杨素华 刊期： 2007年第12期
目的 检测醛固酮作用后早期(6 h)及远期(1月)豚鼠耳蜗水通道及离子通道蛋白基因与蛋白质的表达改变情况.方法 使用RT-PCR方法检测醛固酮腹腔注射后6 h豚鼠耳蜗中Na-KATP酶β1、β3亚单位及钠离子通道蛋白α亚单位(ENaCα Subunit)基因表达的改变情况;使用免疫组织化学染色的方法检测醛固酮作用后1月耳蜗水通道蛋白1(AQP1)蛋白的表达情况.结果 醛固酮作用后早期,在豚鼠耳蜗中Na-KATP酶β1、β3亚单位的表达情况无明显改变,钠离子通道蛋白α亚单位则出现明显上调(P＜0.05);远期则出现AQP1表达的下调(P＜0.05).结论 醛固酮在豚鼠耳蜗中可能通过基因组作用方式发挥作用,并且醛固酮引起膜迷路积水可能是由于其对离子浓度的改变所引起的.
作者：李琦；黄德亮 刊期： 2007年第12期
目的 探讨光动力作用(PDT)对体外培养的人食管癌细胞Eca-109的杀伤效应,初步揭示影响Eca-109细胞光动力疗法杀伤效应的主要影响因素.方法 以两种光敏剂血卟啉衍生物(HpD)和光敏素(Photofrin)不同浓度于特定光照剂量(15 J/cm2)下和不同浓度的HpD在三种不同光照能量密度(10 J/cm2,30 J/cm2,50 J/cm2)下作用于食管癌Eca-109细胞,光源采用DIOMED 630 PDT系统,24 h后通过MTT法检测细胞生存率,并应用荧光分光光度计RT-5000检测不同浓度HpD作用于Eca-109细胞4 h后胞内光敏剂荧光值.结果 两种光敏剂不同浓度间细胞生存率均有明显差异,三种不同光照能量密度下不同HpD浓度细胞生存率间亦存在明显差异(P＜0.05).同一浓度不同光照能量密度的细胞生存率间,前4个低浓度生存率间未见明显差异(P＞0.05),后4个高浓度生存率间则差异有统计学意义(P＜0.05).根据荧光分光光度计RT-5000测得的胞内荧光值及标准曲线取得胞内光敏剂浓度,并与孵育浓度进行回归分析,得相关系数r=0.997,即胞内光敏剂浓度与孵育浓度呈正相关.结论 特定光源下,光照能量密度、光敏剂的种类及其光敏剂的孵育浓度是影响Eca-109 PDT效应的主要因素.
作者：陈晓华；罗荣城；李黎波；丁雪梅；吕成伟；周小平；严晓 刊期： 2007年第12期
目的 研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)在骨肉瘤发生、发展中的作用,构建SAOS-2细胞cDNA文库,寻找与BMP-2相关作用蛋白.方法 从骨肉瘤细胞系SAOS-2中提取总RNA,进而分离poly(A)+RNA,用poly(A)+RNA进行反转录并以SMARTⅢTM和CDSⅢoligo(dT)为引物进行PCR扩增,得到两端具有同源臂的PCR片段,以此同源臂为基础在酵母中实现同源重组.通过文库片段,线形化的pGADT7-Rec和诱饵质粒pGBKT7/HA-BMP-2共转化酵母AH109菌株在文库构建的同时进行与BMP-2相互作用蛋白的筛选;或先将文库片段,线形化的pGADT7-Rec转化AH109,再利用AH109和Y187两种酵母菌株的接合生殖进行筛选.后用Far-Western blotting法进一步从体外论证BMP-2相互作用蛋白.结果 构建了具有基因多样性和库容量足够大的骨肉瘤cDNA文库,双链cDNA片段的长度大小范围为250～5000 bp.共转化的效率为4.3×105,重组效率为1.9×106,筛选的克隆数为4.3×105.接合法筛选时的接合效率为32%,筛选的克隆数为1.0×106.筛选到四个与BMP-2相互作用的阳性克隆.结论 此文库的多样性和库容量均符合筛选需求.可用于骨肉瘤相关基因的进一步筛选.
作者：邓少林；权毅；潘显明；屈波 刊期： 2007年第12期
目的 探讨64层螺旋CT在冠状动脉旁路移植术后诊断桥血管及自体冠状动脉的临床价值.方法 对术后2周～8年58例共140条桥血管(动脉桥43条,静脉桥97条)进行64层CT检查,以冠状动脉造影作为金标准,评价显著狭窄(管径狭窄＞50%)的桥血管及＞1.5 mm管径的所有自体冠状动脉节段.结果 140条桥血管中,38条闭塞,102条开通,CT全部诊断正确.102条开通的桥血管中,18条存在显著性狭窄,CT诊断敏感性100%,特异性95.2%.CT图像能够满足诊断的自体冠状动脉节段占90%.在可评价的冠状动脉节段中,以节段为单位诊断自体冠状动脉显著性狭窄的敏感性84%(87/103)、特异性74%(384/518).临床正确诊断率为91%(53/58).结论 64层螺旋CT可准确诊断桥血管及自体冠状动脉的显著狭窄,是评价桥血管移植术后的一种无创、可靠的检查方法.
作者：黄美萍；余丹青；梁长虹；刘辉；郑君惠 刊期： 2007年第12期
目的 探讨扩散张量成像(DTI)在抑郁症疗效观察中的价值.方法 18例抑郁症患者和13例健康对照组行常规MRI和DTI扫描,DTI确定选定层面额叶白质的各向异性值(FA),对抑郁症患者给予选择性5-羟色胺抑制剂氟西汀治疗8周.采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、临床总体评定量表(CGI)评定临床疗效.结果 氟西汀的治疗总有效率为67%,显效率为56%,无效率为33%,治疗无效患者额叶白质纤维束FA值较低,与治疗有效者和健康对照组相比差异有显著性.结论 DTI能显示抑郁症患者额叶白质纤维束细微结构的异常,这种异常提示其治疗疗效欠佳.
作者：夏军；雷益；徐化剑；冯伟；伍晓六；刘小林 刊期： 2007年第12期
目的 建立大鼠血清中人参皂甙Rb1(G-Rb1)的免疫检识方法.方法 利用杂交瘤细胞技术制备抗G-Rb1单克隆抗体(mAb).含G-Rb1的大鼠血清用甲醇沉淀蛋白,制备供试样品,点样于聚醚砜膜上,以乙腈∶水∶冰醋酸按25∶75∶1的比例展开;NaIO4处理,与BSA结合,使G-Rb1固定于膜上.将PES膜上的G-Rb1与抗G-Rb1 mAb反应后,加过氧化物酶标记的羊抗小鼠IgG,用含0.03%H2O2的1 mg/ml 4-氯-1-萘酚磷酸缓冲液显色.结果 在聚醚砜膜上,在标准品和供试样品的相同位置可清晰地观察到一个青蓝色G-Rb1斑点,该方法检测限为0.25μg.结论 这种G-Rb1的免疫检识方法较薄层层析具有更好的专一性和可靠性,灵敏度接近高效液相色谱,且不需要昂贵的仪器,便于操作.
作者：马丽玲；晁志；田中宏幸；正山征洋 刊期： 2007年第12期
目的 探讨皮肤软组织扩张术修复大面积头皮软组织缺损的手术方法和治疗效果.方法 采用一期置入扩张器行皮肤扩张术,注水充分扩张后,二期合理设计扩张皮瓣转移修复大面积头皮缺损的方法,治疗大面积头皮缺损23例,其中伴有颅骨缺损5例.各种原因引起头皮缺损范围8 cm×6 cm～20 cm×18 cm,颅骨缺损范围4 cm×5 cm～11 cm×9 cm.根据头皮缺损位置、形状置入1～3个扩张器行皮肤扩张,注射壶内置,注水扩张时间5～12周,扩张皮瓣的范围8 cm×8cm～23 cm×20 cm.5例伴有颅骨缺损病例在扩张皮瓣转移修复术时清除失活或浮动的骨碎片3例,咬除颅骨缺损周边患颅骨骨髓炎病骨2例,3～6月后行颅骨修补术.结果 23例大面积头皮软组织缺损均完全修复.5例伴有颅骨缺损病例后期行颅骨修补术成功,无感染,皮瓣坏死等并发症发生.本组出现并发症4例:皮瓣远段表皮坏死2例,经换药治疗后延期愈合;扩张器外露1例,取出扩张器,另一头皮切口再置入,头皮扩张成功;切口裂开1例,抽出扩张器已注入的水,分层严密缝合头皮后消失.术后随访6月～1年头发生长良好,疤痕隐蔽,外观满意.结论 皮肤软组织扩张术是一种修复大面积头皮软组织缺损的理想的手术方法,治疗效果满意.对伴有颅骨缺损病例在头皮软组织缺损修复后再行颅骨修补术成功率高.
作者：刘胜初；张毅；黄建斌；张剑伟 刊期： 2007年第12期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
