常全忠;胡德辉;陈明;王颖;高天明
目的研究比较链霉亲合素(SA)-DTPA-Gd经腹腔和静脉注射后对荷瘤裸鼠体内肿瘤的强化效应,以提高磁共振(MR)靶向成像的敏感性.方法12只荷人结肠癌裸鼠经尾静脉注射生物素化单抗600μg,24 h后腹腔注射80μg亲和素,30 min后分别经静脉和腹腔给予SA-DTPA-Gd.分别在给药前和给药后20、60 min和3、6、9、12、24 h进行MR扫描并记录比较肿瘤和肝脏的信号强度.结果静脉组和腹腔组中肿瘤的大强化率分别为70.2%和46.4%,两者具有显著性差异;静脉组和腹腔组中肝脏的大强化率分别为20.4%和23.7%,两者间差异不显著.结论生物素化单克隆抗体和SA-DTPA-Gd对肿瘤具有特异性靶向增强作用;血药浓度较高是静脉注射SA-DTPA-Gd比腹腔注射更有利于皮下肿瘤强化的原因.
作者:叶靖;许乙凯;刘岘;吕国士 刊期: 2006年第02期
目的探讨用磁控溅射涂层作为钛与瓷间的中间层,增强钛/瓷结合强度的可行性.方法对钛试件表面采用4种不同方法(磨光、磨光后磁控溅射CrTiAlN梯度涂层、喷砂、喷砂后磁控溅射CrTiAlN复合涂层)处理后,测试钛试件表面硬度及涂层厚度,对表面进行Duceratin瓷粉烧结.根据ISO 9693标准,对钛/瓷间的三点弯曲结合强度进行测试,并对钛/瓷结合界面和瓷剥脱面进行SEM/EDS观察与分析.结果磨光组和喷砂组涂层处理厚度一致,涂层处理可使钛表面硬度显著提高;磨光涂层组钛/Duceratin瓷结合强度显著大于磨光空白组(P<0.01),喷砂涂层组钛/瓷结合强度和喷砂空白组无统计学差异(P>0.05).喷砂空白组、喷砂涂层组钛/瓷结合强度显著大于磨光涂层组(P<0.05).磨光空白组钛瓷界面可见连续且较宽的裂隙;磨光涂层组可见钛瓷结合较好,界面散在不连续的点块状裂隙;喷砂空白组钛瓷界面结合较好,无明显裂隙;喷砂涂层组钛瓷结合良好,钛表面凸凹不平,与瓷相互嵌合.结论钛表面磁控溅射CrTiAlN梯度涂层在光滑钛表面可有效地提高钛/瓷结合强度,磁控溅射涂层是一种有前景的钛瓷界面中间层.
作者:张惠;郭天文;李均明;潘景光;党勇刚;佟宇 刊期: 2006年第02期
目的采用RNA干扰技术(siRNA)阻断survivin基因的表达,观察其抑制胰腺癌细胞增殖及诱导胰腺癌细胞凋亡的作用.方法构建靶向survivin的siRNA质粒表达载体,采用LipofectamineTM2000转染胰腺癌细胞PC-2,采用半定量RT-PCR、免疫组化技术检测转染前后PC-2细胞survivin基因表达的变化;采用MTT法检测对PC-2细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测其诱导PC-2细胞凋亡的作用.结果靶向survivin的序列特异性的siRNA可以高效地抑制PC-2细胞survivin基因表达,在mRNA水平其表达抑制率为81.25%,在蛋白质水平其表达抑制率为74.24%.转染靶向survivin的siRNA质粒表达载体可以显著抑制PC-2细胞的增殖,细胞接种24、48 h后其增殖抑制率分别为28.00%和33.38%;转染后24、48 h可以诱导8.46%、7.53%的细胞凋亡.结论所构建的靶向survivin的siRNA质粒表达载体可以有效地阻断PC-2细胞survivin基因表达,阻断survivin基因表达可以显著地抑制PC-2细胞的增殖并在一定程度上诱导其凋亡,靶向survivin的siRNA在胰腺癌的基因治疗中具有一定的价值.
作者:管海涛;薛兴欢;王西京;李昂;秦兆寅 刊期: 2006年第02期
目的明确是否存在症状轻微或无症状SARS冠状病毒感染者.方法以SARS冠状病毒全病毒裂解液作抗原,利用ELISA技术检测血清中SARS冠状病毒抗体,调查具有明显传染特征和呼吸道症状的SARS患者以及无明显临床症状表现的医务人员血清中SARS冠状病毒抗体的存在情况.结果共调查SARS患者19例,血清中抗SARS冠状病毒抗体全部阳性;因工作需要与SARS患者或患者的血、尿、粪、痰等排泄物有接触的医务人员共200名,发现血清中抗SARS冠状病毒抗体阳性20例.结论在部分无症状医务人员血清中存在低水平的抗SARS冠状病毒IgG抗体,SARS冠状病毒感染可仅引起轻微的症状,甚至可无临床表现.
作者:司建华;谭家驹;杨光;汤丽霞 刊期: 2006年第02期
目的探讨辛伐他汀(Sim)对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)DNA合成的影响及甲羟戊酸(MVA)的干预效应.方法采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CFs,以3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定DNA合成,观察不同浓度Sim及MVA分别作用不同时间对CFs DNA合成功能的影响.结果(1)CFs的3H-TdR掺入率随着Sim干预浓度的增加而降低,其中10-6和10-5mol/L Sim组的3H-TdR掺入率分别为(1175±202.66)、(771±164.86)cpm/2000细胞,显著低于对照组的(1608±204.32)cpm/2000细胞(均P<0.01);(2)10-5mo1/L Sim作用CFs 6、12、18、24、30、36、42、48 h,随着Sim作用时间的延长,CFs的3H-TdR掺入率呈递减趋势,与时间呈明显的负相关(r=-919,P<0.01);(3)CFs的3H-TdR掺入率随着MVA干预浓度的增加呈进行性上升,其中10-4、10-3 mo1/L MVA+10-5 mol/LSim组3H-TdR掺入率分别为(1612±308.57)、(1995±353.83)cpm/2000细胞,显著高于对照10-5mol/L Sim组的(771±164.86)cpm/2000细胞(P<0.01);(4)10-3mol/LMVA分别作用CFs 6~48 h,CFs的3H-TdR掺入率随着MVA作用时间的延长而逐渐增加,呈明显的正相关(r=0.968,P<0.01).结论Sim呈浓度-时间依赖方式抑制CFs DNA的合成且可被MVA拮抗,提示Sim可抑制CFs增殖,延缓心肌纤维化,其作用可能通过MVA途径实现.
作者:徐琳;李志梁;赵连友;刘映峰;李公信;丁明学;赵一俏;傅强;赵霞 刊期: 2006年第02期
目的探讨人表皮生长因子受体2(Her-2)、表皮生长因子受体(EGFR)、雌激素调节蛋白(PS-2)、雌激素受体(ER)在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法用免疫组织化学方法检测108例乳腺癌患者Her-2、EGFR、PS-2、ER的表达情况,并进行比较.结果Her-2、EGFR、PS-2、ER表达阳性者分别为40例(37.0%)、44例(40.7%)、62例(57.4%)和58例(53.7%).Her-2的表达与EGFR无相关性(P>0.05),与PS-2呈负相关(P<0.05),与ER呈负相关(P<0.05).Her-2、EGFR、PS-2、ER表达与乳腺癌的组织学分级相关(P<0.05).Her-2、EGFR、ER表达与淋巴结转移相关(P<0.05),Her-2、EGFR、PS-2、ER与乳腺癌的病理学类型、患者年龄及肿瘤大小无关(P>0.05).结论乳腺癌中Her-2、EGFR表达提示患者预后不良;PS-2、ER表达提示患者预后良好;Her-2、EGFR、PS-2、ER是判断乳腺癌预后的有效指标.
作者:徐蕾;白中红;许软成;闫辉;王方聚;罗荣城 刊期: 2006年第02期
目的探讨逆行交锁髓内钉治疗股骨远端骨折的疗效与特点.方法2003年1月~2005年1月间对3l例股骨远端骨折患者采用逆行交锁髓内钉进行手术治疗,术后持续被动运动功能锻炼.结果所有病例进行半年以上的随访,骨折愈合良好,膝关节功能较满意.结论逆行交锁髓内钉治疗股骨远端骨折结合膝关节持续被动运动功能锻炼可以获得满意疗效.
作者:魏巍;李健;庄岩;张堃;王浩;赵恺 刊期: 2006年第02期
目的检测肝移植受者外周血淋巴细胞CD95和CD95LmRNA的表达,并探讨其在移植肝急性排斥反应中的意义.方法采用SYBR荧光实时定量PCR法检测56例肝移植受者外周血淋巴细胞CD95和CD95LmRNA的表达.结果CD95和CD95L mRNA在移植肝急性排斥患者外周血中的表达均显著升高(P<0.01),时间上平均早于血肝功能酶谷丙转氨酶、谷草转氨酶升高2 d.结论CD95和CD95L与移植肝急性排斥反应密切相关,CD95和CD95L mRNA可作为移植肝急性排斥反应发生的预测和诊断指标之一.
作者:于立新;韩述岭;苗芸 刊期: 2006年第02期
目的探讨断指再植术后注射神经生长因子对感觉恢复的作用.方法2000~2004年48例断指再植成活者,其中24例常规术后肌肉注射神经生长因子,另24例未给予任何神经生长药物作为对照组.两组术后平均随访8.5个月,均以术后12周随访时测试患指指端的两点分辨觉为统计数据.结果神经生长因子注射组两点分辨觉的距离明显小于对照组(P<0.01).结论再植指术后给予神经生长因子有助于患者感觉功能的恢复.
作者:赵广跃;闫铭;杨旻;孟国林;朱庆生 刊期: 2006年第02期
目的研究妊娠兔结扎冠状动脉后外周血干细胞变化及其与雌激素的关系.方法实验分3组:妊娠心肌梗死组、非妊娠心肌梗死组及妊娠假手术组.妊娠组于怀孕第10天结扎冠状动脉左室支建立心肌梗死模型.通过流式细胞计数仪检测外周血CD90阳性细胞比例,同时测定血清雌二醇浓度.术后4周检测血流动力学指标.并使用ImageJ 1.31软件测量心肌梗死面积.结果妊娠心肌梗死组左室收缩末压、+dp/dtmax均高于非妊娠心肌梗死组.而左室舒张末压及-dp/dtmax均低于非妊娠心肌梗死组.非妊娠心肌梗死组各时间点外周血CD90+细胞均低于妊娠组和妊娠假手术组(P<0.01),且峰值在心梗后第5天,而妊娠心肌梗死组术后1 d外周血CD90+细胞升高显著(P<0.05).妊娠心肌梗死组和妊娠假手术组外周血CD90+细胞随孕期逐渐增加,至孕末达高峰,产后迅速下降.相应时间点血清雌二醇浓度妊娠兔显著升高.非妊娠心肌梗死组心梗后,血清雌二醇浓度无明显变化;妊娠组与妊娠假手术组血清雌二醇浓度随孕期逐渐增加,至孕末达高峰;血清雌二醇浓度与CD90+细胞比例呈显著正相关(r=0.725;P<0.01).与非妊娠心肌梗死组相比,妊娠心肌梗死组梗死面积较小(22.17±6.34%vs38.86±5.97%;p<0.05).结论妊娠兔外周血干细胞明显升高;并随孕期增加,至孕末达高峰.产后10 d恢复正常,其外周血干细胞数量与血清雌二醇浓度成正相关.妊娠兔心肌梗死后,干细胞动员提前发生心肌梗死面积小,且心脏收缩及舒张功能优于非妊娠者.
作者:郑小璞;马爱群;张伟;董安平;王锐;耿涛 刊期: 2006年第02期
目的探讨胞二磷胆碱对大鼠局部脑缺血后空间学习和记忆能力的影响.方法实验分为正常对照组、缺血对照组和胞二磷胆碱组.线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型,术后2周内腹腔注射胞二磷胆碱,第15天开始采用Morris水迷宫装置评价大鼠的空间学习和记忆能力.结果脑缺血对照组大鼠在定向航行试验和空间探索试验中均表现出明显的空间认知功能的障碍,胞二磷胆碱组大鼠平均逃避潜伏期与缺血对照组比较明显缩短(P<0.01).在空间探索试验中,胞二磷胆碱组大鼠原平台象限停留时间百分比以及穿过原平台位置次数均大于脑缺血对照组(P<0.01).缺血对照组多采用边缘式和随机式搜索策略;正常对照组多采用直线式和趋向式搜索策略;胞二磷胆碱组采用趋向式和随机式搜索策略的频数较多.结论胞二磷胆碱可以明显改善大鼠永久性局部脑缺血后空间学习和记忆能力.
作者:赵建军;刘勇;陈新林;刘建新;田英芳;张蓬勃;康前雁;邱芬 刊期: 2006年第02期
目的研究131I标记的rituximab对CD20高表达的B细胞淋巴瘤细胞的生物学效应,为放射免疫导向治疗提供实验依据.方法IODO-GEN法将131I标记于抗CD20单抗rituximab,用Annexin V-FITC/PI双染法检测131I-rituximab对Raji细胞的诱导凋亡作用,PI染色法检测细胞周期分布.结果Annexin V-FITC/PI双染法检测凋亡率:131I-rituximab组凋亡率为51.99%,1311I组为42.71%,rituximab组为29.42%,对照组为26.17%.对照组和rituximab组凋亡率明显低于131I组和131I-rituximab组(P<0.05).PI染色法对比各组的凋亡率(亚二倍体峰):131I-rituximab组细胞凋亡率为4.32%,131I组为1.47%,rituximab组为1.39%,对照组仅0.37%,131I-rituximab组凋亡率明显高于其他各组(p<0.05).131I-rituximab组Raji细胞周期发生变化,细胞大部分被阻滞于G1/G2期.结论131I-rituximab能够调控Raji细胞的细胞周期并诱导其凋亡,从而抑制Raji细胞增殖.
作者:魏莉;罗荣城;张军一;严晓;方永鑫;费丽华 刊期: 2006年第02期
目的探讨米索前列醇用于改良法宫颈Bishop评分≤3分伴宫颈分泌物胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGF-BP-1)阴性的延期妊娠孕妇促宫颈成熟的效果与风险.方法观察组阴道后穹隆放置米索前列醇25μg,对照组按照催产素点滴促宫颈成熟常规.使用米索前列醇或催产素后24 h无效重复应用,不超过3次.宫颈Bishop评分、胎心监护1次/24 h,用药后24、48 h检测宫颈分泌物IGFBP-1.结果观察组促宫颈成熟效果优于对照组(P<0.001);观察组用药24、48 h后宫颈分泌物IGFBP-l阳性率明显高于对照组(P<0.01和0.001);对照组以宫颈不成熟作为剖宫产指征者明显高于观察组(P<0.001);两组产后出血、过强子宫收缩、羊水粪染发生率和新生儿Apgar评分比较,差异无显著性(P>0.05).结论米索前列醇用于延期妊娠宫颈Bishop评分≤3分伴宫颈分泌物IGFBP-1阴性孕妇促宫颈成熟安全、有效;宫颈Bishop评分≤3分伴宫颈分泌物IGFBP-1阴性的延期妊娠孕妇不宜使用催产素促宫颈成熟;宫颈分泌物IGFBP-1可作为评估宫颈成熟度的生物学指标之一.
作者:尹春艳;周敬珍;王保平;吕小燕 刊期: 2006年第02期
目的通过与化学发光法比较,了解双色红外荧光技术在目标蛋白磷酸化检测中的优势.方法分别取内毒素休克小鼠不同时间肺组织,制备组织匀浆蛋白样品.用SDS-PAGE电泳分离后转膜,将膜分别与磷酸化的或/和总的p42/44 MAPK抗体孵育,二抗用耦联有Alexa Fluor 680和IRDye 800的荧光抗体或辣根过氧化物酶抗体,通过双色红外荧光系统和化学发光法进行蛋白质磷酸化检测.结果红外荧光检测技术和化学发光检测结果均显示内毒素处理后小鼠肺组织p42/44 MAPK磷酸化水平发生了改变,1 h高,12 h以后逐渐恢复到接近正常水平.两种方法检测结果显示了较好的一致性,相比之下双色红外荧光技术具有更高的灵敏度、操作方便、节省时间及可以同时检测两种蛋白等优点.结论双色红外荧光技术在蛋白磷酸化的检测方面具有较好的应用前景.
作者:刘靖华;唐靖;蓝兴国;刘亚伟;李志杰;陈芳;邓鹏;姜勇 刊期: 2006年第02期
目的探讨钝性肝损伤选择非手术方法治疗的指征和临床疗效.方法回顾性分析1990年5月~2004年10月间252例钝性肝损伤病例的诊治过程,对手术治疗和非手术治疗的临床疗效进行比较分析.结果根据美国创伤外科协会(AAST)HIS标准分级如下:Ⅰ级101例,Ⅱ级71例,Ⅲ级43例,Ⅳ级25例,Ⅴ级9例,Ⅵ级3例.行保守治疗71例,成功64例,成功率90.14%;中转手术7例,平均住院8.3 d,输血3.2单位.并发症包括延迟出血(2.8%)、胆漏(1.3%)、脓毒血症(4.2%)、其他(包括高热、非结石性胆囊炎、膈下脓肿).手术治疗181例,成功162例,成功率89.5%,再手术7例,平均住院14.0 d,输血9.5单位.对于血液动力学稳定的Ⅰ~Ⅲ级肝损伤病例,手术组和非手术组相比较,住院天数和输血量明显减少,而并发症发生率无明显差异.结论闭合性肝外伤病例应严格把握手术治疗指征,合理选择治疗方法,对于适合非手术治疗条件的病例,应首选非手术疗法.
作者:袁向东;彭林 刊期: 2006年第02期
目的应用动态比浊法鲎实验定量测定血液透析滤过液中的细菌内毒素含量.方法对血液透析滤过液中定量添加标准内毒素进行干扰预试验,将血液透析滤过液原液及稀释成5、10、20倍液,定量添加标准内毒素,其回收率分别为58.17%、106.7%、99.00%和98.79%;从中筛选出佳的稀释倍数为10倍,进行3个批号血液透析滤过液(040408、040511、040527)正式干扰试验,血液透析滤过液中定量添加标准内毒素,其回收率分别为76.32%、99.00%和96.24%.结果标准内毒素使用1.00、0.125、0.0156Eu/ml,将血液透析滤过液稀释成10倍,滤过液中定量添加标准内毒素,回收率均为50%~200%,认为血液透析滤过液对试验无干扰作用,可用于样品检查.结论动态比浊法可以测定血液透析滤过液的细菌内毒素含量.
作者:劳海燕;林秋晓;杨敏;梁馨苓;史伟;李慧;冯聚锦 刊期: 2006年第02期
目的探讨胎儿心电图(FECG)检测的临床意义.方法应用浙江省计算技术研究所研制的FECG-D型胎儿心电图仪经孕妇腹壁间接进行1587例FECG检测.结果胎儿心动过速44例,胎儿心动过缓8例,胎儿早搏6例,ST段改变45例,先心2例,胎儿心律不齐13例,FQRS时限增宽9例,FQRS振幅增高39例.结论FECG是判断胎儿在子宫内安危的重要指标,它能早期反映胎儿宫内缺氧情况,尽早排除先天性心脏病,对脐带和羊水异常预测较无负荷试验敏感.FECG是一种值得推广的诊断胎儿心律失常的方法,具有重要的临床价值.
作者:熊鹰 刊期: 2006年第02期
目的应用限制性显示(RD)PCR技术筛选细胞松弛素B(CytochalasinB,CB)诱导K562细胞脱核前后的差异基因,探讨CB诱导细胞脱核的分子机制.方法用CB(终浓度为10μg/ml)处理K562细胞24 h,分别提取对照组和处理组细胞总RNA,将两组等量的细胞总RNA纯化为mRNA,反转录为cDNA,利用RD-PCR技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、筛选CB处理前后差异表达的基因.对筛选出的差异表达基因进行克隆、测序,在GenBank检索进行序列同源性分析.结果筛选及克隆了7个差异表达基因,其中水通道蛋白1(AQP1)基因经反转录PCR验证在CB诱导脱核的K562细胞中表达上调.结论AQP1基因在CB诱导K562细胞脱核过程中特异性高表达,提示其可能与细胞脱核及增殖抑制密切相关.
作者:危敏;马文丽;宋艳斌;毛向明;李凌;郑文岭 刊期: 2006年第02期
目的检测及克隆小鼠B淋巴瘤A20细胞株mCD99L2基因,构建真核表达载体.方法设计寡核苷酸探针,应用原位分子杂交方法检测A20细胞中mCD99L2基因的mRNA表达,RT-PCR法从A20细胞总RNA中获取mCD99L2基因含编码区全长cDNA,克隆入T载体,筛选阳性克隆、酶切鉴定并经序列测定;设计含酶切位点的PCR引物,PCR获取含mCD99L2基因编码区片段,用限制性内切酶EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切取所需目的片段,利用分子克隆技术与pcDNA3.1/MycHis C(+)质粒重组,对产生的重组子进行PCR、双酶切鉴定,并经过测序证实.结果原位杂交方法检测A20细胞中mCD99L2基因mRNA呈阳性表达;RT-PCR法成功获得mCD99L2基因编码区全长cDNA序列,DNA序列测序结果与GenBank提供的已知序列(NM_138309)比较,结果完全一致;重组质粒pcDNA3.1-mCD99L2中的插入片段经DNA测序后与GenBank中mD99L2基因相应序列比较,100%同源.结论小鼠B淋巴瘤A20细胞株存在mCD99L2基因,采用RT-PCR和T-A技术克隆了A20细胞的mCD99L2基因,成功构建了pcDNA3.1-mCD99L2真核表达载体,为下一步探索mCD99L2基因在小鼠B淋巴瘤A20细胞株中的功能奠定了实验基础.
作者:沈丽佳;方唯意;谢思明;何滢;蒋会勇;赵彤 刊期: 2006年第02期
目的比较左旋布比卡因与罗哌卡因、布比卡因复合吗啡用于剖宫产术后硬膜外镇痛的效果和副作用.方法采用随机双盲法,将90例择期行剖宫产术的足月、单胎、年龄25~38岁、体质量59~87kg孕妇均分为3组:左旋布比卡因组(L组)、罗哌卡因组(R组)和布比卡因组(B组).术后分别采用0.125%左旋布比卡因、0.125%罗哌卡因或0.125%布比卡因复合小剂量吗啡(20μg/m1)行病人自控硬膜外镇痛.观察各组术后48 h内镇痛效果、运动阻滞程度以及恶心呕吐、皮肤瘙痒等副作用的发生率.结果3组产妇术后视觉模拟评分、镇痛治疗总体印象评分、改良Bromage评分比较差异均无显著性(P>0.05).3组产妇对病人自控硬膜外镇痛的满意率有显著性差异(L组93.3%,R组70%,B组96.6%,P<0.05).3组不良反应发生率及排气时间无显著性差异(P>0.05).结论0.125%左旋布比卡因混合吗啡用于产科术后硬膜外镇痛可获得满意的镇痛效果,且无明显毒副作用.
作者:张永福;劳建新;刘文兴;李煜;赖国忠 刊期: 2006年第02期