范义湘；罗荣城；方永鑫；严晓
目的探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力学对人胃癌细胞MGC-803的治疗作用.方法将不同浓度的5-ALA加入细胞培养基中,随之给予相同剂量的激光辐射;之后用固定浓度的5-ALA处理细胞,并给予不同剂量的激光辐射.MTT法测定细胞生存率.结果在相同的辐射剂量下,经0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L的5-ALA处理的细胞生存率分别为(70.07±5.37)%、(50.04±4.99)%、(34.53±5.30)%、(26.89±4.44)%和23.90%±2.80%,除2.0和4.0 mmol/L5-ALA两组间外,其余各组间具有显著性差异(F=266.39,P＜0.001).在相同的5-ALA的浓度下,辐射剂量为6.25、12.5、25.0、50.0、100 J/cm2的细胞生存率分别为(83.50±10.43)%、(67.96±9.23)%、(33.80±8.26)%、(23.31±5.98)%和(14.96±3.50)%,各组之间有显著性差异(F=226.31,P＜0.0001).而单用5-ALA处理细胞,对应于其浓度为0.25、0.5、1.0、2.0,和4.0 mmol/L时的细胞生存率分别为(96.46±6.72)%、(97.48±5.27)%、(98.33±6.67)%、(99.47±6.97)%和(95.66±7.72)%,各浓度之间无显著性差异(F=0.79,P=0.5383).单纯激光辐射,其剂量为6.25、12.5、25.0、50.0、100.0 J/cm2时的细胞生存率也无显著性差异(F=0.61,P=0.6551).结论在较低的浓度范围内,5-ALA介导的光动力学治疗对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-ALA浓度的增加而增加,在较高浓度时则存在饱和现象,杀伤力与光剂量成正比.单纯激光不能产生光动力效应,5-ALA本身对细胞无毒性作用.5-ALA介导的光动力学治疗是很有希望的胃癌治疗方法.
作者：黄宗海；周广军；俞金龙；厉周；丁涟沭；徐如祥；姜晓丹 刊期： 2006年第03期
目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染ECV304血管内皮样细胞的致病机制.方法常规方法传代细胞和接种病毒.以PCR法和间接免疫荧光法检测病毒即刻早期基因(IE gene)及其蛋白表达;相差显微镜及电子显微镜观察病毒感染后细胞和细胞器形态变化;DNA梯度法和流式细胞术检测细胞凋亡.结果病毒感染后72 h开始出现胞体变圆、缩小、脱壁,胞质内颗粒增多,细胞边缘模糊不清的特征,可明显检测出病毒特异IE gene及其蛋白表达;电镜结果显示病毒感染96 h后,胞质内明显空泡化,细胞膜微绒毛减少,核染色质浓集、边缘化,线粒体出现溶酶体化、空泡化和自噬现象,呈早期凋亡特征;DNA梯度电泳结果显示感染细胞DNA片段化特征的条带;流式细胞仪检测发现感染4 d和6 d时,细胞调亡率分别为4.1%和45.7%.结论巨细胞病毒在体外细胞培养中可诱导ECV304血管内皮样细胞的凋亡.
作者：张亚莉；马文丽；莫小阳；赵海全；柯昌文；郑焕英；郑文岭 刊期： 2006年第03期
目的构建人微小抗肌萎缩蛋白基因(microdystrophin)的真核表达载体,转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC),研究其体外表达情况.方法限制性酶切PBSK-MICRO质粒的微小抗肌萎缩蛋白基因片段,插入到真核表达质粒pcD-NA3.1(+)的NotⅠ位点内,克隆出真核表达载体pcDNA3.1(+)/microdystrophin.通过酶切和测序对质粒进行鉴定.用脂质体将重组质粒转染入rMSCs中,经过G418筛选后,用RT-PCR及间接免疫荧光技术检测表达产物.结果pcDNA3.1(+)/micro dystrophin经过NotⅠ、HindⅢ酶切鉴定及测序证实插入片断正确.提取转染重组质粒rMSCs的总RNA,进行RT-PCR可见mRNA的转录;对G418筛选后rMSCs进行免疫荧光检测可见细胞内亮丽的红色荧光,说明转染后的rMSCs有微小抗肌萎缩蛋白的表达.结论成功构建了人microdystrophin基因真核表达载体,将其转染入rMSCs内有微小抗肌萎缩蛋白的表达,为进一步研究体外修饰自体干细胞移植治疗DMD奠定了基础.
作者：王淑辉；张成；陈松林；于美娟；张雅妮；李美山；熊符；尚延昌；冯善伟；申本昌 刊期： 2006年第03期
目的比较脑电非线性参数近似熵(ApEn)和双频指数(BIS)在异丙酚靶控输注(TCI)镇静时意识消失的预测概率(Pk).方法随机选择20例美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ～Ⅱ级行择期下肢手术患者,硬膜外麻醉完善后,异丙酚TCI起始血药浓度为0.5μg/ml,然后以0.3～0.5μg/ml的梯度递增直至意识消失,再递减至意识恢复.每个靶浓度维持12min,双盲记录患者意识清醒·消失时的EEG非线性参数ApEn值和BIS值.计算ApEn和BIS对意识消失的Pk值,并进行比较.结果意识清醒和消失阶段,ApEn值分别为0.84±0.05,0.71±0.06,BIS值分别为80.2±6.2,67.3±7.9.ApEn、BIS对意识消失的Pk值分别为0.97±0.06、0.91±0.11,无显著性差异(P＞0.05).结论ApEn与BIS一样可有效地用于异丙酚TCI时意识反复消失-清醒的预测.
作者：欧阳铭文；张宏 刊期： 2006年第03期
目的考察丹参酮传递体的制备工艺,并评价其质量.方法用薄膜分散法制备丹参酮传递体,考察其形态、含量、包封率、粒径、多分散度及Zate电位;并对传递体的稳定性和变形性进行研究.结果丹参酮传递体球形圆整,大小较均匀,含量为(1.0192±0.075)mg/ml,包封率为(62.3±0.08)%,算术平均粒径110 nm,多分散度为0.19,Zate电位为-15mV;丹参酮传递体分散于0.9%氯化钠注射用水中,4℃避光保存3个月稳定;证实了含有胆酸钠的传递体在外压作用下特定的变形性.结论丹参酮传递体的制备工艺对其质量有较大影响,选择薄膜分散法优化工艺制备得到的丹参酮传递体包封率较高,稳定性较好.表面活性剂胆酸钠的存在促进脂质体的变形,这种作用与胆酸钠在磷脂双分子层中所占比例及外压有关.
作者：胡玉佳；张忠义；李红磊；张守尧 刊期： 2006年第03期
目的探讨心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在病人出现急性胸痛症状早期区分诊断急性冠脉综合征(ACS)患者与正常人的效果.方法人为纳入正常人、急性心肌梗死(AMI)确诊病人比例2:1以及正常人、不稳定心绞痛(UAP)确诊病人比例2:1的小样本人群.采用双抗体夹心ELISA法对40例正常人、19例AMI患者以及20例UAP患者血清H-FABP浓度进行定量.分别绘制H-FABP在正常人、AMI患者组成的人群以及正常人、UAP患者组成的人群中用于诊断AMI和UAP者的特征曲线(ROC曲线)并比较曲线下面积(AUC)与0.5的大小,0.5被认为是确定一项指标是否具有任何诊断意义的AUC临界值.结果H-FABP浓度定量正常人组为(1.29±0.64)ng/ml、AMI组为(24.45±32.40)ng/ml、UAP组为(1.95±3.11)ng/ml,依此绘制出的ROC曲线其AUC分别为AUC-AMI:0.978(95%CI:0.948～1.000),AUCUAP:0.503(95%CI:0.334～0.671).前者与0.5相比具有显著差异而后者没有.结论H-FABP具备在急性胸痛症状出现早期区分AMI与正常人的能力,但不具备早期区分UAP与正常人的能力.H-FABP定量检测可用于AMI早期诊断.
作者：张鹏；王前；郑磊；曾方银；裘宇容 刊期： 2006年第03期
目的应用基因芯片技术筛选瘢痕疙瘩组织的差异表达基因,探讨异常瘢痕发生的分子机制.方法应用含有8064个人类靶基因的表达谱芯片,检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中基因的差异表达变化,筛选出差异表达基因,应用RT-PCR验证芯片结果;建立与瘢痕疙瘩形成相关的基因表达谱并进行生物信息学分析.结果与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织中发生显著性差异表达变化的基因有277个,其中上调163个、下调114个,涉及到各种信号传递及基因调控的改变.RT-PCR检测结果与芯片结果呈一致性趋势.结论创面过度愈合形成瘢痕疙瘩是一个复杂的病理生理过程,受多种基因表达调控;差异表达基因谱的建立和研究较全面反映了瘢痕疙瘩发生的分子生物学概貌,有助于认识异常瘢痕形成的机制.
作者：胡振富；高建华；李薇；宋艳斌；李朝龙 刊期： 2006年第03期
目的重建L4、L5神经前支和腰骶干以及与骨盆的三维图像,使之得以直观、形象和生动地体现.方法福尔马林灌注固定的成年男性尸体标本1具.显露L4、L5神经前支、腰骶干和骶髂关节前方,将钛粉和粘合剂的混合物均匀涂抹在L4、L5神经前支、腰骶干、股神经神经以及闭孔主干表面.神经表面涂抹的混合物固化变干后,在螺旋CT下行二维断层扫描,层厚3mm,获取159张连续的二维CT断层图像.将获取的二维图像数据在个人电脑上采用3D-DOCTOR软件进行三维重建.结果重建的三维图像,可以直观形象生动的体现神经与骨盆的空间位置关系,并可按各种方向任意旋转演示.结论三维重建图像较好地描述了神经与骨盆的相关关系,同时还可应用于临床教学.
作者：张景僚；顾立强；王龙江；谢颍涛 刊期： 2006年第03期
目的建立家族性肌萎缩侧索硬化症(FALS)转基因模型鼠的繁育方法,并对其子代鼠进行基因鉴定.方法(1)以6只B6SJL SOD1G93A/+半合子雄鼠与6只B6SJLF1/J+/+雌鼠(1:1)交配;(2)由鼠尾血提取基因组DNA,PCR扩增hmSOD1基因的片段,电泳后观察结果;(3)对PCR产物进行纯化测序,并通过BLAST验证.结果6对种鼠交配产鼠仔53只,存活率为98%(52/53);G93AhmSOD1阳性鼠约占44.2%(23/52);PCR扩增产物分别为内对照(IL-2):324bp;Tg(hmSOD1):236 bp;测序证实PCR产物的基因序列和hmSOD1基因片段中的序列一致,并存在G93A突变.结论B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J雄鼠与B6SJLF1/J雌鼠配种能成功繁育出Tg(hmSOD1)阳性的ALS半合子子代鼠;本实验的PCR法能准确鉴定hmSOD1基因阳性鼠,并证实该转入的基因按近似孟德尔方式遗传,为ALS实验研究奠定了基础.
作者：黄慧；张成；席静；姚晓黎；邱国光；熊符 刊期： 2006年第03期
目的观察应用重组人表皮生长因子(rhEGF)促进宫颈糜烂愈合的情况.方法对48例宫颈患者用rhEGF治疗,30例用自凝刀(射频治疗仪)治疗,观查两组糜烂面愈合情况、愈合时间、阴道流液流血及持续时间.结果rhEGF组创面愈合时间较对照组明显缩短,且阴道流液量少、持续时间短、无阴道流血.结论重组人表皮生长因子可明显促进宫颈糜烂愈合.
作者：胡彩华；许红雁；张德君；黄志锋；祝文峰；范舒舒；徐静；何剑芬；彭金秀；刘春梅 刊期： 2006年第03期
目的探讨吻合器痔上直肠黏膜环切除手术前两种肠道准备方法的效果.方法将100例病人随机分为甲组和乙组,甲组采用生理盐水进行清洁灌肠;乙组采用口服蓖麻油行肠道准备,对比肠道清洁度及不良反应等.结果和结论两者在肠道清洁度上无显著性差异,均是有效的灌肠准备方法.口服蓖麻油对患者造成的不良反应低于生理盐水清洁灌肠,而且经济,患者容易接受.
作者：张海平；肖梅；何丽芳；黄永红 刊期： 2006年第03期
1临床资料患者女,38岁.因发热、下腹部疼痛6月,加重并眼黄、尿黄3天于2005年2月15日入本院.
作者：郑瑞丹；孟家榕；黄俊达；赵海东 刊期： 2006年第03期
目的制备光敏剂血卟啉(HP)-单克隆抗体赫赛汀的光敏免疫偶联物,并观察偶联物对BT-474人乳腺癌细胞的杀伤及凋亡作用.方法以碳二亚胺为缩合剂,化学制备HP-赫赛汀光敏免疫偶联物.给予波长630 nm激光照射后,用MTT法、FCM检测比较免疫偶联物和游离HP对BT-474人乳腺癌细胞的杀伤及凋亡作用.结果含同剂量HP的偶联物较游离HP对BT-474细胞的杀伤及凋亡效果明显增强(P＜0.05).结论成功制备HP-赫赛汀光敏免疫偶联物,该偶联物对BT-474人乳腺癌细胞的杀伤作用强于游离HP.
作者：陈璐；罗荣城；李黎波；严晓；丁雪梅 刊期： 2006年第03期
目的观察Linker介导的乙型肝炎靶向核糖核酸酶(HBV-TRL)重组腺病毒载体(RAd)对HBC复制的抑制作用.方法使用构建载体pcDNA3.1(-)/TRL、TR、TRmut、乙型肝炎病毒核心蛋白(HBVc)、人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN),分别将各目的片段亚克隆入穿梭质粒pDC316,与辅助质粒用磷酸钙法共转染HEK293细胞,分别产生载体RAd/TRL、RAd/TR、RAd/TRmut、RAd/HBVc、RAd/nEDN,其中RAd/TRL组为实验组,其余为对照组.感染HepG2.2.15细胞,应用RT-PCR、间接免疫荧光法检测TRL的表达,放免法测定细胞上清中HBsAg、HBeAg的含量.结果成功获得了含TRL、TR、HBVc、hEDN等不同目的片段的RAd,在HepG2.2.15细胞中得到有效表达,并且明显降低了细胞上清中HBsAg、HBeAg的含量.结论腺病毒载体介导的乙肝靶向核糖核酸酶具有明显的抑制HBV复制的作用.
作者：宫卫东；李鹏；赵亚；刘军；薛采芳 刊期： 2006年第03期
目的研究以survivin为靶标的小干扰RNA(siRNA)与化疗药5-FU联合应用抑制MCF-7细胞增殖的作用.方法利用T7 RNA聚合酶体外转录合成siRNA并筛选出一条RNA干扰survivin基因的靶序列.以脂质体为载体,将survivin siRNA转染至人乳腺癌MCF-7细胞中,用四氮唑盐(MTT)法染色并计算siRNA联用5-FU对MCF-7细胞的抑制率,用SAS统计软件及金正均Q值法进行统计分析.结果单用5-FU处理细胞,其IC50为4.42 μg/ml,而加入5 nmol/L siRNA后,其IC50降为1.18 μg/ml,siRNA与5-FU联用对MCF-7细胞的抑制作用较单用5-FU明显增强(F=26.74,P＜0.01);Q值分析表明survivin siRNA与中低浓度的5-FU联用,有较好的协同作用(Q≥1.15).结论survivinsiRNA可显著增强5-FU对MCF-7细胞增殖的抑制,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,克服耐药性的产生.
作者：张淑群；张淑慧；薛兴欢；王西京；姜建涛 刊期： 2006年第03期
目的观察己酮可可碱(PTX)对人肝癌细胞株Hep3b的放射增敏作用.方法以Hep3b人肝癌细胞株为研究对象,应用MTT法检测PTX的药物毒性;应用克隆形成实验(colony forming assay)观察PTX对Hep3b细胞株的放射敏感性的影响;流式细胞仪(FCM)技术测定照射后Hep3b细胞株细胞周期的再分布并观察PTX能否去除放射引起的细胞周期阻滞.结果不同浓度的PTX作用于人肝癌Hep3b细胞株48 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性,适浓度为2 mmol/L.PTX能明显降低放射后Hep3b细胞的克隆形成率,其放射增敏比为2.68±0.24(P＞0.05).FCM实验结果显示,照射明显导致Hep3b细胞株G2期阻滞,Hep3b细胞在照射后20 h G2/M期比例分别为86.8%和14.8%(P＜0.05),PTX能够去除放射引起的Hep3b细胞G2期阻滞.结论PTX对Hep3b细胞株有放射增敏作用,其作用机制可能与PTX去除放射引起的G2期阻滞有关.
作者：吴德华；刘莉；陈龙华 刊期： 2006年第03期
目的本研究旨在探讨运动神经损伤后运动终板退变的预防方法.方法SD大鼠30只,等分成3组.处理组切断右侧腓总神经,修复神经,酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)纤维蛋白凝胶载体植入失神经支配的胫前肌神经区周围的肌间隙,设立对照.观察6周,进行形态学及电生理检查.结果采用aFGF纤维蛋白凝胶载体组,运动终板结构基本正常,肌肉无明显萎缩;对照组运动终板明显退变或消失,肌肉明显萎缩;采用aFGF纤维蛋白凝胶载体组低频重复电刺激(RNS)衰减率明显低于对照组.结论aFGF纤维蛋白凝胶载体可以有效保护失神经支配肌运动终板,防止肌肉萎缩,促进神经肌肉接头功能的恢复.
作者：杨绍安；靳安民；邹小英；肖晓桃；肖莎 刊期： 2006年第03期
目的筛选和鉴定膀胱肿瘤异质性生物学表型相关的基因.方法以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系为材料,采用抑制性削减杂交技术筛选差异表达的基因片段,构建cDNA文库;挑取克隆进行筛选,获得差异表达片段,测序并与Genbank比对,Northern blotting验证差异片段在两株细胞系的不同表达.结果建立了两个消减文库,分别含有168和206个白色克隆,白色克隆含有约200～700 bp的插入片段,对这些克隆进行筛选,获得35个差异表达基因片段,其中15个对应于细胞骨架蛋白、细胞代谢酶基因等已知基因,另外19个为未知功能基因,1个为新EST片段,注册Genbank(注册号为DR008207).结论抑制性消减杂交技术是筛选、克隆差异表达基因的有效手段;kratin 7、Vimentin等细胞骨架蛋白的不同表达,与细胞形态的表型差异有关;DDH等代谢基因的不同,与细胞的药物敏感性差异相关;筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础.
作者：杨玉琮；李旭；陈葳 刊期： 2006年第03期
目的检测肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者外周血中性激素水平,探讨IBS发病与外周血性激素的关系.方法对符合罗马Ⅱ标准的48例IBS患者及30例健康对照者的外周血中雌激素、孕激素和睾酮激素的水平用放射免疫r计数器测定,并用自动软件分析.结果对于男性IBS患者,其外周血中睾酮激素含量低于健康对照组(P＜0.05),而雌激素、孕激素含量与健康对照组差异无显著性(P＞0.05).对于女性IBS患者,其外周血中雌激素含量低于健康对照组(P＜0.05),而孕激素、睾酮激素含量与健康对照组差异无显著性(P＞0.05).结论男性IBS患者外周血中睾酮激素含量下降,女性IBS患者外周血中雌激素含量下降,提示IBS患者的发病可能与体内性激素水平紊乱有关.
作者：崔楠；吴保平；吴赛珠 刊期： 2006年第03期
目的探讨大鼠脑外伤后P-selectin的表达变化及其与脑水肿等继发性脑损伤的关系.方法采用Feeney大鼠脑损伤动物模型,将60只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组:A(标准对照组),B(轻伤组)、C组(重伤组),每组20只.分别于脑外伤后6 h、24 h、3 d、7 d随机各取标本5只,测量脑水肿程度以及P-selectin在脑组织的表达变化以及免疫阳性染色血管,并进行计算机图像分析系统和统计学分析.结果外伤后6 h P-selectin的表达及粒细胞在脑组织的浸润显著升高(P＜0.05),于伤后24h达到高峰,然后逐渐降低.结论脑外伤后P-selectin的表达及粒细胞在脑组织的浸润显著升高,其时程和空间分布与脑外伤后继发性损伤相吻合.提示P-selectin的表达增加可能参与了脑外伤后的继发性损伤.
作者：张荣军；游潮；蔡博文；贺民；杨咏波；刘展；焦庆芳 刊期： 2006年第03期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
