韩慧霞；朱梅刚
目的建立家族性肌萎缩侧索硬化症(FALS)转基因模型鼠的繁育方法,并对其子代鼠进行基因鉴定.方法(1)以6只B6SJL SOD1G93A/+半合子雄鼠与6只B6SJLF1/J+/+雌鼠(1:1)交配;(2)由鼠尾血提取基因组DNA,PCR扩增hmSOD1基因的片段,电泳后观察结果;(3)对PCR产物进行纯化测序,并通过BLAST验证.结果6对种鼠交配产鼠仔53只,存活率为98%(52/53);G93AhmSOD1阳性鼠约占44.2%(23/52);PCR扩增产物分别为内对照(IL-2):324bp;Tg(hmSOD1):236 bp;测序证实PCR产物的基因序列和hmSOD1基因片段中的序列一致,并存在G93A突变.结论B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J雄鼠与B6SJLF1/J雌鼠配种能成功繁育出Tg(hmSOD1)阳性的ALS半合子子代鼠;本实验的PCR法能准确鉴定hmSOD1基因阳性鼠,并证实该转入的基因按近似孟德尔方式遗传,为ALS实验研究奠定了基础.
作者：黄慧；张成；席静；姚晓黎；邱国光；熊符 刊期： 2006年第03期
目的构建靶向小鼠RelB基因的小干扰RNA(siRNA)表达框,鉴定针对小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因有效的siRNA序列.方法利用PCR方法构建3个不同位点的表达框,R1/siRNA、R2/siRNA和R3/siRNA分别位于1027、302和1121位点.利用阳离子脂质体AdvantGene转染小鼠骨髓DC,转染24h后,脂多糖(LPS)刺激DC,用RT-PCR和免疫荧光方法检测DC RelB基因表达的变化.结果经LPS刺激后DC成熟,RelB基因表达显著高于未成熟DC;R1/siRNA和R3/siRNA转染DC后,LPS刺激仍然可以增强RelB基因表达,而R2/siRNA转染DC后,LPS刺激不能增加RelB基因表达.结论R2/siRNA可有效抑制RelB基因表达,有望用于构建新的耐受性DC应用于临床免疫耐受的诱导.
作者：郑磊；包杰；王前；杨红玲；裘宇容 刊期： 2006年第03期
目的探讨对兔VX2种植型肝癌模型的成瘤过程进行动态磁共振张量成像(DTI)量化研究的可行性及价值.方法在肿瘤植入后第14、18、22、26天分别对4组共16只新西兰大白兔VX2种植型肝癌模型和4组共4只正常新西兰大白兔进行磁共振成像及DTI;动态量化分析平均弥散系数(ADC)、指数弥散系数(eADC)的变化规律并与病理结果对照.结果兔VX2种植型肝癌模型的ADC呈先递增后递减趋势;eADC呈先递减后递增趋势;与对照组间存在显著性差异;病理结果的多项分析中,瘤内凝固性坏死和纤维增生呈明显递增趋势.结论DTI的量化指标(ADC、eADC)能够动态观测兔VX2种植型肝癌模型的部分生长特性;为DTI对肝脏病变的临床应用提供一定的理论指导.
作者：徐绍斌；全显跃；孙希杰 刊期： 2006年第03期
目的探讨活体质子磁共振波谱(1H-MRS)在蛛网膜下腔出血(SAH)性脑血管痉挛发生时的评价作用.方法采用两次注血法建立狗SAH模型,实验分为注射生理盐水组和注血组.于模型制作成功后3、7、14 d分别进行1H-MRS检查扫描,记录胆碱(Cho)、N-乙酰基天冬氨酸(NAA)和肌酸(Cr)的变化.1H-MRS扫描后即刻进行脑血管造影检查,测定基底动脉血管痉挛发生情况,与1H-MRS扫描结果加以比较分析.结果脑血管造影结果提示在第3天基底动脉血管发生明显痉挛,到第7天各段血管痉挛为显著,第14天血管痉挛明显改善;1H-MRS的检测指标显示注血组各项指标在第3、7天变化较大,其中NAA在第3天下降到低谷,之后逐渐回升,至第14天接近正常水平;Cho在第3天稍有下降,然后上升,至第7天上升至高峰,尔后下降;而Cr则一直表现为上升趋势,但第7天后上升趋势明显放缓,与第14天相对含量相比差异无显著性(P＞0.05).1H-MRS功能检测结果与脑血管造影结果具有一定的吻合性.结论1H-MRS可用来监测蛛网膜下腔出血性脑血管痉挛发生时病程进展,是一种较好的功能影像学评价手段.
作者：全伟；李铁林；陈光忠；姜晓丹；徐如祥；柯以铨；段传志；吕建平；张昊；谢伟；钟文军；陈颖东；陈凡帆 刊期： 2006年第03期
目的总结尿道内留置尼龙线引导下行改良软尿道扩张器尿道扩张的临床经验,提高后尿道狭窄的防治水平.方法创伤性后尿道狭窄男性患者38例,年龄4～45岁,平均25岁.后尿道狭窄长度0.8～4.5 cm,平均2.2 cm.均行内窥镜术或开放手术治疗,术中尿道内留置尼龙线.留置尿管2～4周,拔除尿管后即行尿道内尼龙线引导下改良软尿道扩张器的尿道扩张.结果38例患者经平均3个月、长9个月的尿道扩张,排尿通畅后拔除尼龙线.随访6个月～5年,排尿正常,无尿失禁.结论尿道内留置尼龙线引导下用改良软尿道扩张器行尿道扩张术治疗尿道狭窄效果显著.与金属尿道探子下行尿道扩张相比,具有取材方便,患者易于配合,减少尿道损伤,避免假道形成等特点,减少了因尿道狭窄复发而多次手术的次数,对男性儿童及复杂性后尿道狭窄患者尤为适宜.为创伤性后尿道狭窄的预防和治疗开辟了新方法.
作者：齐桓；付晓幼 刊期： 2006年第03期
目的应用基因芯片技术筛选瘢痕疙瘩组织的差异表达基因,探讨异常瘢痕发生的分子机制.方法应用含有8064个人类靶基因的表达谱芯片,检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中基因的差异表达变化,筛选出差异表达基因,应用RT-PCR验证芯片结果;建立与瘢痕疙瘩形成相关的基因表达谱并进行生物信息学分析.结果与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织中发生显著性差异表达变化的基因有277个,其中上调163个、下调114个,涉及到各种信号传递及基因调控的改变.RT-PCR检测结果与芯片结果呈一致性趋势.结论创面过度愈合形成瘢痕疙瘩是一个复杂的病理生理过程,受多种基因表达调控;差异表达基因谱的建立和研究较全面反映了瘢痕疙瘩发生的分子生物学概貌,有助于认识异常瘢痕形成的机制.
作者：胡振富；高建华；李薇；宋艳斌；李朝龙 刊期： 2006年第03期
目的探讨131I-Herceptin的免疫活性、生物分布及代谢规律,为乳腺癌的131I-Herceptin放射免疫治疗提供实验依据.方法①采用Iodogen法对Herceptin进行131I标记,以HPLC法测定放射化学纯度(RCP).以与BT-474细胞结合率(BR)鉴定131I-Herceptin的免疫活性.②按74 MBq/kg·b.w.对3只新西兰兔注射131I-Herceptin,注射后3 h及第1、3、5天进行透射CT显像.以肌肉为参照,计算各脏器放射性计数比值(O/M).③第5天处死动物,取血、心、肺、肝、肾等脏器,计算每克组织摄取分数(ID%/g),对结果进行统计分析.结果131I-Herceptin的标记率为93%,RCP为95%,在BT-474细胞结合率为(36.9±4.7)%.注射131I-Herceptin后不同时间均以心脏、肺、肝浓聚显著,肌肉、肠影像稀疏.随时间延迟,心影逐渐稀疏,肝脏影像浓聚.注射后3 h,心脏O/M值显著高于肺及肝、肾、肠等脏器.随时间延迟,心脏O/M值于注射后1 d显著降低(t=10.817,P＜0.001),第3、5天亦显著降低,肝脏O/M值在第1、3、5天均比注射后3 h显著下降.每克组织的摄取分数以血液高,为(11.3 ID/g)%、肝为(2.8 ID/g)%、心肌仅为(1.8 ID/g)%.结论131I-Herceptin的免疫活性高.机体分布以血液、肝、肾为主,心肌摄取量低.
作者：范义湘；罗荣城；方永鑫；严晓 刊期： 2006年第03期
目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染ECV304血管内皮样细胞的致病机制.方法常规方法传代细胞和接种病毒.以PCR法和间接免疫荧光法检测病毒即刻早期基因(IE gene)及其蛋白表达;相差显微镜及电子显微镜观察病毒感染后细胞和细胞器形态变化;DNA梯度法和流式细胞术检测细胞凋亡.结果病毒感染后72 h开始出现胞体变圆、缩小、脱壁,胞质内颗粒增多,细胞边缘模糊不清的特征,可明显检测出病毒特异IE gene及其蛋白表达;电镜结果显示病毒感染96 h后,胞质内明显空泡化,细胞膜微绒毛减少,核染色质浓集、边缘化,线粒体出现溶酶体化、空泡化和自噬现象,呈早期凋亡特征;DNA梯度电泳结果显示感染细胞DNA片段化特征的条带;流式细胞仪检测发现感染4 d和6 d时,细胞调亡率分别为4.1%和45.7%.结论巨细胞病毒在体外细胞培养中可诱导ECV304血管内皮样细胞的凋亡.
作者：张亚莉；马文丽；莫小阳；赵海全；柯昌文；郑焕英；郑文岭 刊期： 2006年第03期
1临床资料患者女,38岁.因发热、下腹部疼痛6月,加重并眼黄、尿黄3天于2005年2月15日入本院.
作者：郑瑞丹；孟家榕；黄俊达；赵海东 刊期： 2006年第03期
目的制备葡聚糖包被的超顺磁氧化铁(SPIO)纳米粒子,并对其主要物理性质和磁学性质进行研究,探讨它作为磁共振造影剂的可能性.方法通过共沉淀法获得SPIO纳米粒子,分别采用透射电镜和光子相关光谱仪测定其粒径大小,利用邻苯二氮菲比色法测定铁的浓度,同时用核磁共振仪测定弛豫率等参数.结果X-射线衍射分析确定所制备的葡聚糖磁性粒子主要为Fe3O4晶体,粒子体均粒径为85.9 nm,氧化铁核心大小为15 nm左右,具有超顺磁性,其弛豫率和质量磁饱和度分别达到0.1567mmol/ms和80 emu/gFe.结论所制备的SPIO粒子稳定,其物理性质表明其具有作为磁共振造影剂的特性.
作者：刘世霆；晏媛；陈志良；张玉忠；金星 刊期： 2006年第03期
目的本研究旨在探讨运动神经损伤后运动终板退变的预防方法.方法SD大鼠30只,等分成3组.处理组切断右侧腓总神经,修复神经,酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)纤维蛋白凝胶载体植入失神经支配的胫前肌神经区周围的肌间隙,设立对照.观察6周,进行形态学及电生理检查.结果采用aFGF纤维蛋白凝胶载体组,运动终板结构基本正常,肌肉无明显萎缩;对照组运动终板明显退变或消失,肌肉明显萎缩;采用aFGF纤维蛋白凝胶载体组低频重复电刺激(RNS)衰减率明显低于对照组.结论aFGF纤维蛋白凝胶载体可以有效保护失神经支配肌运动终板,防止肌肉萎缩,促进神经肌肉接头功能的恢复.
作者：杨绍安；靳安民；邹小英；肖晓桃；肖莎 刊期： 2006年第03期
目的比较脑电非线性参数近似熵(ApEn)和双频指数(BIS)在异丙酚靶控输注(TCI)镇静时意识消失的预测概率(Pk).方法随机选择20例美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ～Ⅱ级行择期下肢手术患者,硬膜外麻醉完善后,异丙酚TCI起始血药浓度为0.5μg/ml,然后以0.3～0.5μg/ml的梯度递增直至意识消失,再递减至意识恢复.每个靶浓度维持12min,双盲记录患者意识清醒·消失时的EEG非线性参数ApEn值和BIS值.计算ApEn和BIS对意识消失的Pk值,并进行比较.结果意识清醒和消失阶段,ApEn值分别为0.84±0.05,0.71±0.06,BIS值分别为80.2±6.2,67.3±7.9.ApEn、BIS对意识消失的Pk值分别为0.97±0.06、0.91±0.11,无显著性差异(P＞0.05).结论ApEn与BIS一样可有效地用于异丙酚TCI时意识反复消失-清醒的预测.
作者：欧阳铭文；张宏 刊期： 2006年第03期
目的观察应用重组人表皮生长因子(rhEGF)促进宫颈糜烂愈合的情况.方法对48例宫颈患者用rhEGF治疗,30例用自凝刀(射频治疗仪)治疗,观查两组糜烂面愈合情况、愈合时间、阴道流液流血及持续时间.结果rhEGF组创面愈合时间较对照组明显缩短,且阴道流液量少、持续时间短、无阴道流血.结论重组人表皮生长因子可明显促进宫颈糜烂愈合.
作者：胡彩华；许红雁；张德君；黄志锋；祝文峰；范舒舒；徐静；何剑芬；彭金秀；刘春梅 刊期： 2006年第03期
目的筛选和鉴定膀胱肿瘤异质性生物学表型相关的基因.方法以已建立的两株同一来源、不同生物学表型的膀胱移行细胞癌细胞系为材料,采用抑制性削减杂交技术筛选差异表达的基因片段,构建cDNA文库;挑取克隆进行筛选,获得差异表达片段,测序并与Genbank比对,Northern blotting验证差异片段在两株细胞系的不同表达.结果建立了两个消减文库,分别含有168和206个白色克隆,白色克隆含有约200～700 bp的插入片段,对这些克隆进行筛选,获得35个差异表达基因片段,其中15个对应于细胞骨架蛋白、细胞代谢酶基因等已知基因,另外19个为未知功能基因,1个为新EST片段,注册Genbank(注册号为DR008207).结论抑制性消减杂交技术是筛选、克隆差异表达基因的有效手段;kratin 7、Vimentin等细胞骨架蛋白的不同表达,与细胞形态的表型差异有关;DDH等代谢基因的不同,与细胞的药物敏感性差异相关;筛选到的新基因片段为进一步克隆其全长、研究基因功能提供了实验基础.
作者：杨玉琮；李旭；陈葳 刊期： 2006年第03期
目的探讨内科昏迷病人的院前诊断和急救措施,提高院前急救的成功率.方法回顾分析我院2002年3月至2004年3月170例昏迷病人的院前初步诊断和急救措施.结果150例抢救成功(88.24%),其中初步诊断为猝死的病人20例,全部死亡(11.76%).结论详细询问病人病史、有效的抢救措施和缩短医务人员到达现场的时间是抢救成功的关键.
作者：欧阳新华；韦莉萍 刊期： 2006年第03期
目的探讨吻合器痔上直肠黏膜环切除手术前两种肠道准备方法的效果.方法将100例病人随机分为甲组和乙组,甲组采用生理盐水进行清洁灌肠;乙组采用口服蓖麻油行肠道准备,对比肠道清洁度及不良反应等.结果和结论两者在肠道清洁度上无显著性差异,均是有效的灌肠准备方法.口服蓖麻油对患者造成的不良反应低于生理盐水清洁灌肠,而且经济,患者容易接受.
作者：张海平；肖梅；何丽芳；黄永红 刊期： 2006年第03期
目的观察Linker介导的乙型肝炎靶向核糖核酸酶(HBV-TRL)重组腺病毒载体(RAd)对HBC复制的抑制作用.方法使用构建载体pcDNA3.1(-)/TRL、TR、TRmut、乙型肝炎病毒核心蛋白(HBVc)、人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN),分别将各目的片段亚克隆入穿梭质粒pDC316,与辅助质粒用磷酸钙法共转染HEK293细胞,分别产生载体RAd/TRL、RAd/TR、RAd/TRmut、RAd/HBVc、RAd/nEDN,其中RAd/TRL组为实验组,其余为对照组.感染HepG2.2.15细胞,应用RT-PCR、间接免疫荧光法检测TRL的表达,放免法测定细胞上清中HBsAg、HBeAg的含量.结果成功获得了含TRL、TR、HBVc、hEDN等不同目的片段的RAd,在HepG2.2.15细胞中得到有效表达,并且明显降低了细胞上清中HBsAg、HBeAg的含量.结论腺病毒载体介导的乙肝靶向核糖核酸酶具有明显的抑制HBV复制的作用.
作者：宫卫东；李鹏；赵亚；刘军；薛采芳 刊期： 2006年第03期
目的重建L4、L5神经前支和腰骶干以及与骨盆的三维图像,使之得以直观、形象和生动地体现.方法福尔马林灌注固定的成年男性尸体标本1具.显露L4、L5神经前支、腰骶干和骶髂关节前方,将钛粉和粘合剂的混合物均匀涂抹在L4、L5神经前支、腰骶干、股神经神经以及闭孔主干表面.神经表面涂抹的混合物固化变干后,在螺旋CT下行二维断层扫描,层厚3mm,获取159张连续的二维CT断层图像.将获取的二维图像数据在个人电脑上采用3D-DOCTOR软件进行三维重建.结果重建的三维图像,可以直观形象生动的体现神经与骨盆的空间位置关系,并可按各种方向任意旋转演示.结论三维重建图像较好地描述了神经与骨盆的相关关系,同时还可应用于临床教学.
作者：张景僚；顾立强；王龙江；谢颍涛 刊期： 2006年第03期
目的探讨5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)介导的光动力学对人胃癌细胞MGC-803的治疗作用.方法将不同浓度的5-ALA加入细胞培养基中,随之给予相同剂量的激光辐射;之后用固定浓度的5-ALA处理细胞,并给予不同剂量的激光辐射.MTT法测定细胞生存率.结果在相同的辐射剂量下,经0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L的5-ALA处理的细胞生存率分别为(70.07±5.37)%、(50.04±4.99)%、(34.53±5.30)%、(26.89±4.44)%和23.90%±2.80%,除2.0和4.0 mmol/L5-ALA两组间外,其余各组间具有显著性差异(F=266.39,P＜0.001).在相同的5-ALA的浓度下,辐射剂量为6.25、12.5、25.0、50.0、100 J/cm2的细胞生存率分别为(83.50±10.43)%、(67.96±9.23)%、(33.80±8.26)%、(23.31±5.98)%和(14.96±3.50)%,各组之间有显著性差异(F=226.31,P＜0.0001).而单用5-ALA处理细胞,对应于其浓度为0.25、0.5、1.0、2.0,和4.0 mmol/L时的细胞生存率分别为(96.46±6.72)%、(97.48±5.27)%、(98.33±6.67)%、(99.47±6.97)%和(95.66±7.72)%,各浓度之间无显著性差异(F=0.79,P=0.5383).单纯激光辐射,其剂量为6.25、12.5、25.0、50.0、100.0 J/cm2时的细胞生存率也无显著性差异(F=0.61,P=0.6551).结论在较低的浓度范围内,5-ALA介导的光动力学治疗对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-ALA浓度的增加而增加,在较高浓度时则存在饱和现象,杀伤力与光剂量成正比.单纯激光不能产生光动力效应,5-ALA本身对细胞无毒性作用.5-ALA介导的光动力学治疗是很有希望的胃癌治疗方法.
作者：黄宗海；周广军；俞金龙；厉周；丁涟沭；徐如祥；姜晓丹 刊期： 2006年第03期
1临床资料患者男性,新生儿,34 d,自出生后即发现右耳后、右颈窝、左上腹部、左大腿外侧及右手食指末端等处有多个小米粒大小的皮肤结节,红色,无明显隆起.随后各处结节均有不同程度的增大,但以颈部结节增大较明显,约米粒至黄豆大小,表面有糜烂.新生儿睡眠欠佳,无发热,饮食无明显影响.
作者：韩慧霞；朱梅刚 刊期： 2006年第03期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
