苗竹林；王自能；程龙球；章韵
目的探讨葡萄胎差异表达新基因F10在不同类型滋养细胞肿瘤中的表达及其与恶性滋养细胞肿瘤侵袭的关系.方法采用原位杂交方法检测12例葡萄胎、6例侵袭性葡萄胎、8例绒癌中F10表达情况.结果F10在全部葡萄胎、侵袭性葡萄胎、绒癌中均呈阳性表达,其在葡萄胎、侵袭性葡萄胎、绒癌中的表达强度递增,有显著性差异(P＜0.001).结论F10可能与滋养细胞肿瘤的发生及其侵袭行为相关,在侵袭或滋养细胞恶变中起一定作用.
作者：周瑾；陈士岭；邢福祺；庞战军；李冰；周问渠；付欣；丁彦青 刊期： 2005年第02期
目的评估我院呼吸科住院病人抗菌药物使用情况.方法回顾呼吸科2002年141份病历,计算抗菌药物利用指数(DUI)和每日抗菌药费,同时调查抗菌药物不良反应.结果DUI为0.9～1.1者占66.7%,每日抗菌药费为(317.8±194.3)元,有14例抗菌药物不良反应.结论我院呼吸科抗菌药物使用基本合理,但头孢哌酮-舒巴坦有滥用现象,抗菌药物联合使用不当,药费过高,还需注意抗菌药物对老年人的合理应用.
作者：张庆；许军；郑萍；陈英 刊期： 2005年第02期
目的调查2型糖尿病合并高血压病患者的微量白蛋白尿患病率.方法采用半定量比色尿试纸测定55例2型糖尿病合并高血压病患者的尿微量白蛋白,计算微量白蛋白尿的发生率.结果2型糖尿病合并高血压病患者正常、微量及大量尿白蛋白的患病率分别为66.67%、22.22%和11.11%.结论2型糖尿病合并高血压病患者中可能有约1/3的患者存在肾病损害,应早期筛查并干预治疗.
作者：关美萍；李晨钟；薛耀明；沈洁；高方；罗祥容 刊期： 2005年第02期
目的建立大鼠β-淀粉样肽[Aβ(25-35)]诱导的痴呆模型,探讨知母总皂苷在阿耳茨海默病(AD)发病机制中的作用.方法SD大鼠60只,采用脑立体定位技术在大鼠单侧侧脑室一次性注射老化的Aβ(25-35)建立实验性AD模型.手术24 h后,大鼠经灌胃分别给予3种剂量的知母总皂苷和EGB761,模型组和空白组给予等剂量的蒸馏水,1次/1 d,连续14 d.在给予Aβ(25-35)后的第8天,应用Morris水迷宫法测定大鼠的学习记忆功能,造模后第14天断头取脑,测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力.结果与空白对照组相比,模型组大鼠空间学习记忆能力明显减弱,寻找平台潜伏期明显延长(P＜0.01);脑组织SOD、总抗氧化能力明显降低(P＜0.01),而MDA明显升高(P＜0.05).与模型组比较,给予知母总皂苷治疗后的大鼠学习记忆功能障碍得到明显改善,潜伏期显著缩短(P＜0.05),SOD活力显著提高(P＜0.05),总抗氧化能力也显著增强(P＜0.05),MDA水平明显降低(P＜0.05).结论知母总皂苷可明显改善AD模型大鼠的学习记忆功能,同时可提高模型大鼠的抗过氧化能力,这有可能是其改善学习记忆的原因之一.
作者：欧阳石；孙莉莎；郭胜蓝；刘旭；徐江平 刊期： 2005年第02期
目的探讨病毒性脑炎患者脑血流动力学变化及其意义.方法对38例病毒性脑炎患者和30例对照组进行经颅多普勒超声(TCD)检查.结果TCD检测显示:正常11例,异常27例,阳性率71%,病毒性脑炎患者急性期大脑中动脉、大脑前动脉、大脑后动脉、椎动脉和基底动脉平均血流速度均明显增快,与恢复期和对照组比较有显著性差异(P＜0.001～0.05).大脑中动脉、大脑后动脉和基底动脉脉动指数均显著升高,与恢复期和对照组比较有显著性差异(P＜0.001).结论TCD研究结果表明病毒性脑炎,尤其是中、重度患者存在不同程度的脑血管痉挛,部分患者主要表现为脑小动脉痉挛.
作者：王群；夏欣；袁惠娟 刊期： 2005年第02期
目的研究体外诱导小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的可能性.方法MSCs通过细胞传代培养,并通过流式细胞仪进行鉴定.MSCs经过5-杂氮胞苷诱导后,通过RT-PCR、半定量RT-PCR、Western-blotting和透射电镜检测诱导后的MSCs.结果培养的MSCs为形态均一的梭形细胞,有时可见细胞融合.流式细胞仪显示诱导后的MSCsCD29、CD44表达阳性,而CD34、CD45表达阴性.经过5-杂氮胞苷诱导后的MSCs表达Nkx2-5/Csx、GATA4、β-MHC基因和α-sarcomeric actin和desmin蛋白,透射电镜显示诱导后的MSCs有肌丝形成.诱导后的MSCs DNA甲 基化转移酶表达降低.结论小鼠MSCs能够向前体心肌细胞分化.
作者：张勇；蔡振杰；陈如坤 刊期： 2005年第02期
目的探讨孕妇孕前体重(体质量)指数及孕期体重增加情况对妊高征及新生儿出生体重的影响.方法测量769例足月单胎初产妇孕前的身高、体重和孕期体重增加情况,计算孕前体重指数,并随访妊高征、巨大儿和低体重儿的发生情况.结果(1)孕前肥胖孕妇妊高征和巨大儿的发生率明显高于孕前消瘦和理想体重的孕妇(P＜0.01和P＜0.05),而后两组间无差别(P＞0.05);孕前消瘦孕妇低体重儿的发生率明显高于孕前理想体重和肥胖的孕妇(P＜0.01),而后两组间无差别(P＞0.05).(2)无论孕前体重指数如何,当孕期体重增加≥18 kg时妊高征和巨大儿的发生率明显增高(P＜0.01),而当孕期体重增加＜9kg时低体重儿的发生率明显增高(P＜0.01).(3)对孕前消瘦和理想体重的孕妇,孕期体重增加≥18kg时,妊高征的发病率明显增高,而对孕前肥胖的孕妇,孕期体重增加≥9kg时,妊高征的发病率明显增高(P＜0.05);孕前理想体重孕妇孕期体重增加≥18kg时巨大儿的发病率明显增高(P＜0.01),孕前消瘦和肥胖的孕妇随孕期体重的增加巨大儿的发病率也增加,但无统计学意义;对孕前消瘦和理想体重的孕妇孕期体重增加＜9 kg时,低体重儿的发病率明显增高(P＜0.01).结论孕前体重指数和孕期增重是妊高征及新生儿出生体重的重要影响因素.
作者：尹玉竹；谌小卫；李小毛；侯红瑛；周水生 刊期： 2005年第02期
目的建立人巨噬细胞系U937与人脐静脉血管内皮细胞系ECV-304体外共培养模型,以刀豆蛋白A(ConA)作为U937激活剂,研究巨噬细胞调节血管生成的机制.方法实验分4组:ECV-304、ConA+ECV-304、U937+ECV-304和ConA+U937+ECV-304.将ECV-304细胞接种,待60%融合时按照不同的分组进行共培养48 h后,流式细胞仪检测细胞周期的变化:采用3H-TdR掺入试验检测内皮细胞DNA合成变化;RT-PCR技术检测内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR和同源盒(homebox)Hoxb2基因mRNA表达水平的变化;免疫荧光在流式细胞仪上检测整合素受体αvβ3表达的变化.结果ConA激活的U937细胞可使内皮细胞S期、DNA合成明显增加(P＜0.01);ConA刺激的U937细胞使内皮细胞VEGF受体KDR(0.879±0.003)、Hoxb2基因mRNA的表达水平(0.947±0.003)和整合素受体αvβ3的表达水平(10.26±1.73)明显上调(P＜0.01).结论ConA活化的巨噬细胞可通过影响内皮细胞的细胞周期、DNA合成、VEGF受体KDR、Hoxb2及整合素受体αvβ3的表达来促进内皮细胞的增殖、迁移及与基质的黏附,从而调节血管的生成.
作者：刘亮；刘旭盛；张晓启；明佳；徐辉；程天民 刊期： 2005年第02期
目的观察32P照射对HL-60细胞周期的影响.方法不同剂量32P体外照射HL-60细胞24、48和72 h,流式细胞法检测细胞周期.结果不同剂量32P照射HL60细胞对细胞周期有明显影响,首先发生G2/M期阻滞;随剂量增大,G2/M期和S期均发生阻滞,以G2/M期阻滞为主.结论32P体外照射HL-60细胞对细胞周期有明显的干扰作用.
作者：何子毅；孟庆勇 刊期： 2005年第02期
目的以凋亡素基因为例,探讨用寡核苷酸片段体外拼装基因的方法.方法按已知的凋亡素基因序列(GeneBank登录号:AYl71617),设计40 bp的凋亡素基因寡核苷酸片段,并将其中的172位(BglⅡ,agatct→agatcc)和306位碱基(Hind Ⅲ,aagctt→aatcct)进行同义突变,Taq消除这两个酶切位点.在pfu酶的PCR系统中,对寡核苷酸片段进行拼装和扩增.产物稀释后进一步纯化扩增,在Tag酶存在的条件下对产物两末端加T,然后TA克隆于pGEM-T easy载体中.阳性克隆经测序鉴定.结果凋亡素基因寡核苷酸片段第1次PCR拼装后,产物呈拖尾状.但产物经进一步稀释,并用两未端引物进行2次扩增后,即可见明确的产物带及其他梯形带状产物.目的产物TA克隆后,筛选得到阳性克隆,其经测序鉴定,与设计的凋亡素基因序列完全一致.结论体外基因拼装法是一种非常有效的基因克隆方法,可用于基因或载体的合成,及一次性对基因进行广泛的突变.
作者：陈学清；王亚东；孙勇；段佑才；马高峰 刊期： 2005年第02期
目的总结腹部多器官联合移植的围手术期处理经验.方法我院自2001年10月至2005年1月共施行19例腹部多器官联合移植术,其中胰肾联合移植6例、肝肾联合移植12例、肝胰联合移植1例;分析手术方法、免疫抑制剂的使用和术后并发症处理的方法.结果19例患者手术均获成功,术后发生FK506中毒1例(5.3%),发生急性排斥反应3例(15.8%),消化道出血发生2例(10.5%),腹腔出血1例(5.3%),肺部感染1例(5.3%),经相应治疗后好转.结论腹部多器官联合移植成功的关键是作好供体选择、保证供器官质量、选择适当手术方式、术后合理应用免疫抑制剂以及有效防治术后并发症.
作者：于立新；叶俊生；邓文锋；徐健；付绍杰；叶桂荣；杜传福；王亦斌；刘小友；苗芸 刊期： 2005年第02期
目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)佳标记时间、剂量.方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测佳标记剂量;在细胞生长融合前72、48、36、24、12、3 h加入BrdU,使终浓度为10 μmol/L,并分别孵育至细胞融合,测定BrdU的标记率,找出佳标记时间;免疫组化分析BrdU标记率.结果流式细胞仪检测所标记的细胞表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45;终浓度为10μmol/L和孵育48 h BrdU标记率均＞98%,并且连续传5代均可检测到.结论传代后贴壁生长的梭形细胞为MSCs,终浓度为10 μmol/L和孵育48 h BrdU标记率均＞98%,且可以连续检测到,提示BrdU标记可用于MSCs移植入体内后存活、生长和分化的动态观察.
作者：冯善伟；姚晓黎；李中；柳太云；黄文；张成 刊期： 2005年第02期
目的探讨低G预适应对高G致大鼠学习记忆功能受损的影响.方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组、+10Gz/3 min组和低G预适应组,每组8只.低G预适应组在+10 Gz/3 min暴露前进行3 d的+4Gz/3 min锻炼(1次/d).观察单次+10 Gz/3 min暴露后0、2、4和6 d大鼠学习记忆功能的变化.结果旷场反应中,+10 Gz/3 min组中央格停留时间在0 d,2 d较对照组显著延长(P＜0.05),总得分在0 d显著降低(P＜0.01);低G预适应组0 d的中央格停留时间显著延长(P＜0.01),总得分显著降低(P＜0.01).与+10 Gz/3 min组比较,低G预适应组中央格停留时间从2 d开始有缩短趋势,6 d时达到显著水平(P＜0.05),各时间点总得分均无显著差异.辨别性学习能力测试中,+10 Gz/3 min组正确反应次数在各时间点均较对照组显著下降,反应时在各时间点均较对照组显著延长(P＜0.01);低G预适应组正确反应次数和反应时在各时间点均与对照组无明显差别;与+10 Gz/3 min组比较,低G预适应组在各时间点的正确反应次数均显著增加(P＜0.01),反应时均显著缩短(P＜0.01).被动回避反应中,与对照组比较,+10 Gz/3 min组的0 d潜伏期显著延长(P＜0.05),6 d潜伏期显著缩短(P＜0.01),学习所用总时间与错误数无显著性变化;低G预适应组各项检测项目均无明显改变;与+10Gz/3min组比较,低G预适应组大鼠的6 d潜伏期显著延长(P＜0.01).结论采用低G预适应措施后,能够显著改善高G导致的大鼠学习和记忆能力受损程度.
作者：曹新生；吴兴裕；孙喜庆；刘挺松 刊期： 2005年第02期
目的探讨磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)信号通路被阻断对大肠癌细胞凋亡状态的影响.方法利用U73122(1、5、10μmol/L)处理细胞以阻断PLC-γ1信号通路,光镜、电镜观察细胞形态改变,MTT法评估细胞杀伤效应,流式细胞仪分析凋亡细胞比例.结果PLC-γ1信号通路阻断后,大肠癌细胞出现了典型的凋亡形态学改变,存活细胞明显减少,流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰,凋亡细胞所占比例达到半数以上.结论阻断PLC-γ1信号通路能够启动大肠癌细胞凋亡.
作者：刘俊；李明；曾位森；白晓春；罗深秋 刊期： 2005年第02期
目的了解烧伤血清对内皮细胞抑制性κB(IκBα)降解、核因子-κB(NF-κB)活化的影响,进一步探讨烧伤血清诱导内皮细胞活化分泌细胞因子的机制.方法采用体外培养的内皮细胞,分别用正常人血清(对照组)、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞.采用Western印迹法检测血清刺激30、60、90、120min后内皮细胞IκBα蛋白降解情况,电泳迁移率分析检测血清刺激30、60、120、240 min后NF-κB活性的变化.结果烧伤血清刺激内皮细胞后30min,IκBα发生明显降解,刺激后60min达高峰,2 h后表达逐渐升高;烧伤血清刺激内皮细胞后30 min,NF-κB活性迅速升高,30～60 min达高峰,2 h后逐渐回复基础状态.PDTC能有效抑制烧伤血清作用条件下内皮细胞IκBα降解、NF-κB活化.结论烧伤血清可诱导内皮细胞IκBα降解,活化NF-κB,从而在烧伤后内皮细胞分泌细胞因子过程中起重要作用.
作者：李志清；黄跃生；杨宗城；王甲汉 刊期： 2005年第02期
目的原核表达β-淀粉样蛋白(Aβ42)抗原,建立检测Aβ抗体的间接ELISA技术.方法化学合成Aβ42基因两个互补片段,通过PCR构建人Aβ42基因,克隆至pGEX-2T表达载体中,原核表达并亲和纯化GST-Aβ42融合蛋白.Western blotting检测其抗原特异性.以GST-Aβ42和Aβ42肽分别为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ42免疫的大鼠血清中Aβ抗体.结果原核表达的可溶性GST-Aβ42融合蛋白相对分子质量为31 000,经亲和纯化后,融合蛋白产量为800 mg/L菌液,纯度大于95%;Westem blotting证实纯化的融合抗原与Aβ单抗特异反应;以GST-Aβ42为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ抗体灵敏度为2 ng/ml;以GST-Aβ42和化学合成的Aβ42分别为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ42肽免疫大鼠血清中Aβ抗体滴度,两者比较差异无显著性(P＞0.05).结论原核表达的GST-Aβ42融合蛋白可替代昂贵的化学合成的Aβ42肽抗原,用于检测Aβ抗体.
作者：张革；王烈峰；汪华侨；姚志彬 刊期： 2005年第02期
目的克隆、构建绿色荧光蛋白(GFP)-AWP1(associated with protein kinase C related kinase 1,AWP1)表达载体,观察AWP1在293细胞中表达和定位.方法采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增AWP1 cDNA编码区,并将其重组于GFP表达载体pEGFP-C2中.经酶切、序列鉴定分析后,将该重组质粒通过DOTAP脂质体介导,转染293细胞.荧光显微镜观察AWP1在细胞内的表达和分布.结果GFP-AWP1融合基因表达载体经酶切鉴定和测序分析确认构建成功,并在293细胞中获得了高效表达.荧光显微镜下,在不携带外源基因的空载体pEGFP-C2转染的对照组293细胞,绿色荧光均匀分布于整个细胞中;在重组质粒pEGFP-C2/AWP1转染的293细胞,绿色荧光弥散分布于细胞质内.结论成功构建GFP-AWP1融合基因表达载体并表达于293细胞胞质中.
作者：曹永宽；莫永炎；田伏洲；刘亚伟；邓鹏；秦清和；姜勇 刊期： 2005年第02期
目的观察中药常通口服液用于术后腹腔肠粘连的效果.方法选取54只SD雄性大鼠随机分为6组(n=9):正常对照组、模型对照组、四磨汤组、常通口服液低、中、高剂量组.除正常对照组外,其余大鼠均按Ellis法制备成肠粘连模型.正常及模型对照组予以蒸馏水灌胃(10ml/kg);四磨汤组以10ml/kg灌胃给药;常通口服液低、中、高剂量组分别按4.3、8.6、17.2g/kg灌胃给药.各组于术后第7天取血,测定白细胞(WBC)计数及纤维蛋白原(FIB)浓度;同时进行粘连程度肉眼分级.结果常通口服液能明显减轻肠粘连程度,降低大鼠血浆中WBC计数及FIB浓度.结论常通口服液能够预防腹腔术后肠粘连形成.
作者：王春霞；侯连兵；马云 刊期： 2005年第02期
近年来子宫内膜癌在国内外均呈上升趋势,在我国妇科恶性肿瘤中仅次于宫颈癌居第2位,占女性恶性肿瘤的3%.子宫内膜癌的发病病因至今不清,可能与雌激素对子宫内膜的持续作用有关.子宫内膜癌是否有家族史或遗传史专家尚有不同意见.本文报道两对姐妹患子宫内膜癌的诊治情况.
作者：刘国炳；庞占军 刊期： 2005年第02期
目的研究不同电融合条件对来源于小鼠卵丘细胞核移植重组胚的融合和早期发育的影响,寻找佳电融合参数.方法将直径10～12mm的C57BL/6j小鼠卵丘细胞核注射到去核卵母细胞透明带下,构建供体核-卵母细胞复合体.在不同电融合条件下诱导两者间的融合,并对重组胚激活以及随后发育的早期阶段包括2细胞、4～8细胞和桑椹胚进行观察和计数.结果电融合时电场强度或脉冲时间在一定范围内允许波动,变动范围分别是电场强度1 000～2000kV/cm和脉冲时程40～160 ms.低于容许范围的电融合参数会降低供体核-卵母细胞复合体的融合率,而高于容许范围的参数会导致供体核-卵母细胞复合体溶解乃至死亡.如果电融合参数在容许范围内,供体核-卵母细胞复合体的融合率无统计学差异,并且融合后重组胚的激活,以及发育至2细胞、4～8细胞和桑椹胚阶段的比率也无统计学差异.此外,脉冲重复次数以1～2次为佳.结论优化的电融合参数是决定供体核-卵母细胞复合体融合与重组胚激活的关键因素.
作者：江培洲；沈新明；乔贵林；黄华；姚开泰 刊期： 2005年第02期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
