江培洲；沈新明；乔贵林；黄华；姚开泰
原子力显微镜(AFM)是目前新的生物成像操纵技术之一,制样简单,可以在多种环境条件下原子分辨率三维成像以及进行生物分子之间力的测定及操纵调控.目前国际上AFM主要应用于组织、细胞微生物、生物大分子纳米水平形态结构功能研究及生物单分子相互作用、生物过程操纵调控等研究领域.虽然存在着针尖碳纳米管衍化、柔软生物样品硬化、结果解释待改进等局限性,但AFM必将成为生命科学研究的重要手段.
作者：郁毅刚；徐如祥；蔡颖谦；姜晓丹；柯以铨 刊期： 2005年第02期
目的总结腹部多器官联合移植的围手术期处理经验.方法我院自2001年10月至2005年1月共施行19例腹部多器官联合移植术,其中胰肾联合移植6例、肝肾联合移植12例、肝胰联合移植1例;分析手术方法、免疫抑制剂的使用和术后并发症处理的方法.结果19例患者手术均获成功,术后发生FK506中毒1例(5.3%),发生急性排斥反应3例(15.8%),消化道出血发生2例(10.5%),腹腔出血1例(5.3%),肺部感染1例(5.3%),经相应治疗后好转.结论腹部多器官联合移植成功的关键是作好供体选择、保证供器官质量、选择适当手术方式、术后合理应用免疫抑制剂以及有效防治术后并发症.
作者：于立新；叶俊生；邓文锋；徐健；付绍杰；叶桂荣；杜传福；王亦斌；刘小友；苗芸 刊期： 2005年第02期
目的研究体外诱导小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的可能性.方法MSCs通过细胞传代培养,并通过流式细胞仪进行鉴定.MSCs经过5-杂氮胞苷诱导后,通过RT-PCR、半定量RT-PCR、Western-blotting和透射电镜检测诱导后的MSCs.结果培养的MSCs为形态均一的梭形细胞,有时可见细胞融合.流式细胞仪显示诱导后的MSCsCD29、CD44表达阳性,而CD34、CD45表达阴性.经过5-杂氮胞苷诱导后的MSCs表达Nkx2-5/Csx、GATA4、β-MHC基因和α-sarcomeric actin和desmin蛋白,透射电镜显示诱导后的MSCs有肌丝形成.诱导后的MSCs DNA甲 基化转移酶表达降低.结论小鼠MSCs能够向前体心肌细胞分化.
作者：张勇；蔡振杰；陈如坤 刊期： 2005年第02期
目的原核表达β-淀粉样蛋白(Aβ42)抗原,建立检测Aβ抗体的间接ELISA技术.方法化学合成Aβ42基因两个互补片段,通过PCR构建人Aβ42基因,克隆至pGEX-2T表达载体中,原核表达并亲和纯化GST-Aβ42融合蛋白.Western blotting检测其抗原特异性.以GST-Aβ42和Aβ42肽分别为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ42免疫的大鼠血清中Aβ抗体.结果原核表达的可溶性GST-Aβ42融合蛋白相对分子质量为31 000,经亲和纯化后,融合蛋白产量为800 mg/L菌液,纯度大于95%;Westem blotting证实纯化的融合抗原与Aβ单抗特异反应;以GST-Aβ42为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ抗体灵敏度为2 ng/ml;以GST-Aβ42和化学合成的Aβ42分别为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ42肽免疫大鼠血清中Aβ抗体滴度,两者比较差异无显著性(P＞0.05).结论原核表达的GST-Aβ42融合蛋白可替代昂贵的化学合成的Aβ42肽抗原,用于检测Aβ抗体.
作者：张革；王烈峰；汪华侨；姚志彬 刊期： 2005年第02期
目的介绍腹腔镜下全膀胱切除、去带乙状结肠新膀胱术的经验.方法对2002年7月～2004年9月间26例膀胱癌患者的临床资料进行总结与分析.结果26例患者的手术时间为240～390min,其中腹腔镜下全膀胱切除术120～270min.腹腔镜手术中及术后未见明显出血,出血量＜200ml.开放性原位新膀胱术出血量400～800ml,输浓缩红细胞0～4个单位.术后4～8 d恢复饮食,3～8周拔除输尿管支架管,4周拔除尿管.术后3个月患者白天可完全控制排尿,8例夜间偶有尿失禁.结论腹腔镜下膀胱癌根治切除术创伤小、出血少、恢复快,是全膀胱切除手术中的一种很有前景的方法.全去带可控性乙状结肠新膀胱术具有手术操作简单、需用肠段短、贮尿囊在原位、尿液自尿道可控排出、术后并发症少等优点,具有较好的应用价值.
作者：郑少波；刘春晓；徐亚文 刊期： 2005年第02期
目的探讨孕妇孕前体重(体质量)指数及孕期体重增加情况对妊高征及新生儿出生体重的影响.方法测量769例足月单胎初产妇孕前的身高、体重和孕期体重增加情况,计算孕前体重指数,并随访妊高征、巨大儿和低体重儿的发生情况.结果(1)孕前肥胖孕妇妊高征和巨大儿的发生率明显高于孕前消瘦和理想体重的孕妇(P＜0.01和P＜0.05),而后两组间无差别(P＞0.05);孕前消瘦孕妇低体重儿的发生率明显高于孕前理想体重和肥胖的孕妇(P＜0.01),而后两组间无差别(P＞0.05).(2)无论孕前体重指数如何,当孕期体重增加≥18 kg时妊高征和巨大儿的发生率明显增高(P＜0.01),而当孕期体重增加＜9kg时低体重儿的发生率明显增高(P＜0.01).(3)对孕前消瘦和理想体重的孕妇,孕期体重增加≥18kg时,妊高征的发病率明显增高,而对孕前肥胖的孕妇,孕期体重增加≥9kg时,妊高征的发病率明显增高(P＜0.05);孕前理想体重孕妇孕期体重增加≥18kg时巨大儿的发病率明显增高(P＜0.01),孕前消瘦和肥胖的孕妇随孕期体重的增加巨大儿的发病率也增加,但无统计学意义;对孕前消瘦和理想体重的孕妇孕期体重增加＜9 kg时,低体重儿的发病率明显增高(P＜0.01).结论孕前体重指数和孕期增重是妊高征及新生儿出生体重的重要影响因素.
作者：尹玉竹；谌小卫；李小毛；侯红瑛；周水生 刊期： 2005年第02期
目的探讨低G预适应对高G致大鼠学习记忆功能受损的影响.方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组、+10Gz/3 min组和低G预适应组,每组8只.低G预适应组在+10 Gz/3 min暴露前进行3 d的+4Gz/3 min锻炼(1次/d).观察单次+10 Gz/3 min暴露后0、2、4和6 d大鼠学习记忆功能的变化.结果旷场反应中,+10 Gz/3 min组中央格停留时间在0 d,2 d较对照组显著延长(P＜0.05),总得分在0 d显著降低(P＜0.01);低G预适应组0 d的中央格停留时间显著延长(P＜0.01),总得分显著降低(P＜0.01).与+10 Gz/3 min组比较,低G预适应组中央格停留时间从2 d开始有缩短趋势,6 d时达到显著水平(P＜0.05),各时间点总得分均无显著差异.辨别性学习能力测试中,+10 Gz/3 min组正确反应次数在各时间点均较对照组显著下降,反应时在各时间点均较对照组显著延长(P＜0.01);低G预适应组正确反应次数和反应时在各时间点均与对照组无明显差别;与+10 Gz/3 min组比较,低G预适应组在各时间点的正确反应次数均显著增加(P＜0.01),反应时均显著缩短(P＜0.01).被动回避反应中,与对照组比较,+10 Gz/3 min组的0 d潜伏期显著延长(P＜0.05),6 d潜伏期显著缩短(P＜0.01),学习所用总时间与错误数无显著性变化;低G预适应组各项检测项目均无明显改变;与+10Gz/3min组比较,低G预适应组大鼠的6 d潜伏期显著延长(P＜0.01).结论采用低G预适应措施后,能够显著改善高G导致的大鼠学习和记忆能力受损程度.
作者：曹新生；吴兴裕；孙喜庆；刘挺松 刊期： 2005年第02期
目的探讨磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)信号通路被阻断对大肠癌细胞凋亡状态的影响.方法利用U73122(1、5、10μmol/L)处理细胞以阻断PLC-γ1信号通路,光镜、电镜观察细胞形态改变,MTT法评估细胞杀伤效应,流式细胞仪分析凋亡细胞比例.结果PLC-γ1信号通路阻断后,大肠癌细胞出现了典型的凋亡形态学改变,存活细胞明显减少,流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰,凋亡细胞所占比例达到半数以上.结论阻断PLC-γ1信号通路能够启动大肠癌细胞凋亡.
作者：刘俊；李明；曾位森；白晓春；罗深秋 刊期： 2005年第02期
目的探讨病毒性脑炎患者脑血流动力学变化及其意义.方法对38例病毒性脑炎患者和30例对照组进行经颅多普勒超声(TCD)检查.结果TCD检测显示:正常11例,异常27例,阳性率71%,病毒性脑炎患者急性期大脑中动脉、大脑前动脉、大脑后动脉、椎动脉和基底动脉平均血流速度均明显增快,与恢复期和对照组比较有显著性差异(P＜0.001～0.05).大脑中动脉、大脑后动脉和基底动脉脉动指数均显著升高,与恢复期和对照组比较有显著性差异(P＜0.001).结论TCD研究结果表明病毒性脑炎,尤其是中、重度患者存在不同程度的脑血管痉挛,部分患者主要表现为脑小动脉痉挛.
作者：王群；夏欣；袁惠娟 刊期： 2005年第02期
目的克隆hTERT启动子,并观察hTERT启动子调控下tk/GCV系统对人肺癌细胞系A549的特异性杀伤效果.方法设计特异性引物,以HepG2基因组DNA为模板,用PCR方法扩增hTERT启动子;分别构建hTERT启动子和hCMV启动子调控的LacZ、tk基因真核表达载体;将上述质粒用脂质体转染A549细胞和人胚肺成纤维细胞系MRC5后,通过RT-PCR和β-Gal染色观察hTERT启动子工作情况;用MTT法检测不同浓度的GCV对A549和MRC5细胞的细胞毒作用.结果成功克隆hTERT上游-280 bp～+40 bp的核心启动子.RT-PCR和β-Gal染色显示hTERT启动子能有效地调控其下游tk基因、LacZ基因在端粒酶阳性的肿瘤细胞中特异性转录和表达;hTERT启动子调控的tk/GCV系统对端粒酶阳性的肿瘤细胞系A549有明显的特异性杀伤效应.结论hTERT启动子可特异性地调控目的基因在端粒酶阳性的肿瘤细胞中表达而不影响正常的细胞,表明端粒酶启动子调控自杀基因的表达是一种很有希望的肿瘤靶向基因治疗策略.
作者：李帆；谭晓华；彭晓君；蔡红兵；胡大荣 刊期： 2005年第02期
目的了解转化生长因子-β超家族(TGF-βs)在调节卵泡发育过程中的信号转导模式,以探讨在不同发育阶段大鼠卵巢中Smad4蛋白及mRNA的表达.方法选择不同发育时期大鼠卵巢,运用免疫组化方法检测卵巢中Smad4蛋白表达,并进行图像分析;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Smad4mRNA在卵巢中的表达,以GAPDH作为内对照与特异性Smad4同时进行扩增,并计算Smad4和GAPDH的RT-PCR产物积分吸光度比值来表示Smad4mRNA的含量.结果Smad4广泛表达于卵巢组织,但主要表达在卵泡中,其表达部位和强度随卵巢的成熟度不同而变化;在卵巢发育早期,Smad4主要在原始卵泡和窦前卵泡中表达,而在间质中的表达较弱;随着卵巢的发育成熟,Smad4在间质中的表达逐渐增强,性成熟后,在窦状及成熟卵泡颗粒细胞和卵泡膜的表达与间质细胞比较无显著差异(P＞0.05).Smad4在卵泡中的表达强度也发生了变化,即随着卵泡的发育,Smad4在窦状及成熟卵泡卵母细胞的表达明显减弱,与窦前卯泡卵母细胞比较有显著差异(P＜0.05,P＜0.01);与窦前卵泡比较,Smad4在卵泡膜细胞的表达逐渐增强(P＜0.01),而在各级卵泡颗粒细胞中的表达无显著差异(P＞0.05).RT-PCR结果显示各阶段卵巢均有mRNA的表达,从第3周起Smad4mRNA的表达明显增强,Smad4和GAPDH积分吸光度比值与出生后1 d的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论卵巢内存在Smad4,提示TGF-β家族对卵泡发育的调节是通过Smad信号转导模式实现的.
作者：苗竹林；王自能；程龙球；章韵 刊期： 2005年第02期
目的观察中药常通口服液用于术后腹腔肠粘连的效果.方法选取54只SD雄性大鼠随机分为6组(n=9):正常对照组、模型对照组、四磨汤组、常通口服液低、中、高剂量组.除正常对照组外,其余大鼠均按Ellis法制备成肠粘连模型.正常及模型对照组予以蒸馏水灌胃(10ml/kg);四磨汤组以10ml/kg灌胃给药;常通口服液低、中、高剂量组分别按4.3、8.6、17.2g/kg灌胃给药.各组于术后第7天取血,测定白细胞(WBC)计数及纤维蛋白原(FIB)浓度;同时进行粘连程度肉眼分级.结果常通口服液能明显减轻肠粘连程度,降低大鼠血浆中WBC计数及FIB浓度.结论常通口服液能够预防腹腔术后肠粘连形成.
作者：王春霞；侯连兵；马云 刊期： 2005年第02期
目的评估我院呼吸科住院病人抗菌药物使用情况.方法回顾呼吸科2002年141份病历,计算抗菌药物利用指数(DUI)和每日抗菌药费,同时调查抗菌药物不良反应.结果DUI为0.9～1.1者占66.7%,每日抗菌药费为(317.8±194.3)元,有14例抗菌药物不良反应.结论我院呼吸科抗菌药物使用基本合理,但头孢哌酮-舒巴坦有滥用现象,抗菌药物联合使用不当,药费过高,还需注意抗菌药物对老年人的合理应用.
作者：张庆；许军；郑萍；陈英 刊期： 2005年第02期
目的探讨用链脲霉素(Streβtozotocin,STZ)阻断脑内胰岛素信号传导,引起脑能量代谢障碍与Aβ表达及tau蛋白过度磷酸化的关系.方法24只SD大鼠随机分为实验组和生理盐水组,实验组双侧侧脑室注入STZ 3 mg/kg,第3天重复此剂量;生理盐水组手术操作相同,但注入等量的生理盐水代替STZ.21 d后,采用免疫组化方法观测各组大鼠大脑皮层和海马区的Aβ1-40、Aβ1-40、tau202、tau396、tau404阳性细胞表达.结果与生理盐水组相比,实验组皮层和海马Aβ1-40、Aβ1-42、tau202、tau396、tau404阳性细胞明显增多.结论侧脑室注射STZ可以引起脑内Aβ表达增多和tau蛋白过度磷酸化.
作者：褚文政；钱采韻 刊期： 2005年第02期
目的探讨老年人体重指数与糖尿病的关系.方法按统一方法对佛山市60岁以上常住居民3 382人进行现场问卷调查,同时测量血压、身高、体重(体质量)等,并计算体重指数(BMI).结果肥胖、超重、体重正常、体重过低者糖尿病患病率分别为31.58%、22.84%、15.65%和9.40%;高血糖患病率分别为67.94%、56.14%、46.58%和38.35%;随BMI增高,糖尿病、高血糖患病率明显增高.糖尿病组BMI均值为23.9 kg/m2,≥24者占48.7%;高血糖组BMI均值为23.4kg/m2,≥24者占42.9%;血糖正常组BMI均值为22.6 kg/m2,≥24者占32.3%,两两比较有显著性差异(P＜0.01).结论BMI水平与糖尿病密切相关.
作者：陈雪梅；邵虹；邱晓敏；李蜀光；张耿新；潘鉴枝 刊期： 2005年第02期
目的了解烧伤血清对内皮细胞抑制性κB(IκBα)降解、核因子-κB(NF-κB)活化的影响,进一步探讨烧伤血清诱导内皮细胞活化分泌细胞因子的机制.方法采用体外培养的内皮细胞,分别用正常人血清(对照组)、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞.采用Western印迹法检测血清刺激30、60、90、120min后内皮细胞IκBα蛋白降解情况,电泳迁移率分析检测血清刺激30、60、120、240 min后NF-κB活性的变化.结果烧伤血清刺激内皮细胞后30min,IκBα发生明显降解,刺激后60min达高峰,2 h后表达逐渐升高;烧伤血清刺激内皮细胞后30 min,NF-κB活性迅速升高,30～60 min达高峰,2 h后逐渐回复基础状态.PDTC能有效抑制烧伤血清作用条件下内皮细胞IκBα降解、NF-κB活化.结论烧伤血清可诱导内皮细胞IκBα降解,活化NF-κB,从而在烧伤后内皮细胞分泌细胞因子过程中起重要作用.
作者：李志清；黄跃生；杨宗城；王甲汉 刊期： 2005年第02期
目的了解广州地区医院感染常见革兰阴性细菌分布特征和耐药特点.方法2001年7月～2003年8月,用Kirby-Bauer法检测了从广州地区13家医院分离获得的3 500株革兰阴性细菌对临床常用15～21种抗生素的药敏结果,并按美国临床实验标准委员会2000年判断标准进行判断,用WHONET-5软件分析数据.结果分离出的3 500株革兰阴性菌中前3位细菌依次是大肠埃希菌(Escherichia coli,ECO)1 244株(占35.5%)、肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae,Kpn)900株(占25.7%)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pae)547株(占15.6%).广州地区临床分离革兰阴性菌中产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrumbeta-lactamases,ESBLs)菌株的总检出率为31.0%(1 084/3 500),在各种常见菌属中的检出率分别为:大肠埃希菌为38.7%(482/1 244)、肺炎克雷伯菌为37.9%(341/900)、铜绿假单胞菌为5.3%(29/547)、阴沟肠杆菌为55.2%(117/212)、不动杆菌属为8.2%(17/208)、其他肠杆菌属为27.7%(53/191)、嗜麦芽窄食单胞菌为33.3%(37/117)、变形杆菌属为9 2%(8/87).从呼吸道标本中分离获得革兰阴性细菌多,为1 463株(占41.8%);其次为泌尿道标本,为943株(占26.9%).耐药性分析显示:革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的总体耐药率低为亚胺培南(8.7%),其次为头孢哌酮/舒巴坦(13.3%),而高为氨苄西林(90.5%),其次为奈啶酸(69 3%).亚胺培南对广州地区临床分离的大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属、其他肠杆菌属和变形杆菌属的耐药率低,分别为1.1%、0.5%、0.6%、3.2%、0.8%和0%,而头孢哌酮/舒巴坦对广州地区临床分离的铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌的耐药率低,分别为10.8%和15.9%,大部分细菌呈多重耐药.产ESBLs菌株对15～21种临床常用抗菌药物的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株(P＜0.05).结论细菌耐药性仍是目前广州地区临床用药为严重的问题,尤其是产ESBLs菌株有上升趋势.亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦分别对临床分离革兰阴性菌株有较好的抗菌活性,可以作为广州地区临床经验用药的候选药物.
作者：肖庆忠；苏丹虹；江洁华；钟南山 刊期： 2005年第02期
目的克隆、构建绿色荧光蛋白(GFP)-AWP1(associated with protein kinase C related kinase 1,AWP1)表达载体,观察AWP1在293细胞中表达和定位.方法采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增AWP1 cDNA编码区,并将其重组于GFP表达载体pEGFP-C2中.经酶切、序列鉴定分析后,将该重组质粒通过DOTAP脂质体介导,转染293细胞.荧光显微镜观察AWP1在细胞内的表达和分布.结果GFP-AWP1融合基因表达载体经酶切鉴定和测序分析确认构建成功,并在293细胞中获得了高效表达.荧光显微镜下,在不携带外源基因的空载体pEGFP-C2转染的对照组293细胞,绿色荧光均匀分布于整个细胞中;在重组质粒pEGFP-C2/AWP1转染的293细胞,绿色荧光弥散分布于细胞质内.结论成功构建GFP-AWP1融合基因表达载体并表达于293细胞胞质中.
作者：曹永宽；莫永炎；田伏洲；刘亚伟；邓鹏；秦清和；姜勇 刊期： 2005年第02期
目的探讨多层螺旋CT冠脉造影(multislice spiral CT coronary angiography,MSCTCA)的成像技术及其临床应用价值.方法对79例对象行MSCTCA检查,利用多种重建方法进行重建,分析影响冠脉成像质量的重要因素,MSCT对冠脉的显示能力,冠脉斑块性质及钙化程度,评价管腔狭窄及其程度,并对桥血管和支架的显示及通畅性进行评价.结果左冠脉主干及前降支重建的佳时相为75%R-R时相,左回旋支及右冠脉为62.5%R-R时相.以75%的相位窗重建得到容积再现的图像为佳.MSCTCA对冠脉l～3级分支、甚至部分4级分支显示清晰,对冠脉斑块显示良好,对冠脉狭窄显示较佳,对搭桥血管及内支架显示良好.结论16层MSCTCA可作为冠心病的筛选手段及在血运重建术后复查中有很高的临床应用价值.
作者：许尚文；张雪林；曾建华；王江云；李天然；钱根年；高荣光 刊期： 2005年第02期
目的调查2型糖尿病合并高血压病患者的微量白蛋白尿患病率.方法采用半定量比色尿试纸测定55例2型糖尿病合并高血压病患者的尿微量白蛋白,计算微量白蛋白尿的发生率.结果2型糖尿病合并高血压病患者正常、微量及大量尿白蛋白的患病率分别为66.67%、22.22%和11.11%.结论2型糖尿病合并高血压病患者中可能有约1/3的患者存在肾病损害,应早期筛查并干预治疗.
作者：关美萍；李晨钟；薛耀明；沈洁；高方；罗祥容 刊期： 2005年第02期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
