于立新；叶俊生；邓文锋；徐健；付绍杰；叶桂荣；杜传福；王亦斌；刘小友；苗芸
目的总结腹部多器官联合移植的围手术期处理经验.方法我院自2001年10月至2005年1月共施行19例腹部多器官联合移植术,其中胰肾联合移植6例、肝肾联合移植12例、肝胰联合移植1例;分析手术方法、免疫抑制剂的使用和术后并发症处理的方法.结果19例患者手术均获成功,术后发生FK506中毒1例(5.3%),发生急性排斥反应3例(15.8%),消化道出血发生2例(10.5%),腹腔出血1例(5.3%),肺部感染1例(5.3%),经相应治疗后好转.结论腹部多器官联合移植成功的关键是作好供体选择、保证供器官质量、选择适当手术方式、术后合理应用免疫抑制剂以及有效防治术后并发症.
作者：于立新；叶俊生；邓文锋；徐健；付绍杰；叶桂荣；杜传福；王亦斌；刘小友；苗芸 刊期： 2005年第02期
目的原核表达β-淀粉样蛋白(Aβ42)抗原,建立检测Aβ抗体的间接ELISA技术.方法化学合成Aβ42基因两个互补片段,通过PCR构建人Aβ42基因,克隆至pGEX-2T表达载体中,原核表达并亲和纯化GST-Aβ42融合蛋白.Western blotting检测其抗原特异性.以GST-Aβ42和Aβ42肽分别为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ42免疫的大鼠血清中Aβ抗体.结果原核表达的可溶性GST-Aβ42融合蛋白相对分子质量为31 000,经亲和纯化后,融合蛋白产量为800 mg/L菌液,纯度大于95%;Westem blotting证实纯化的融合抗原与Aβ单抗特异反应;以GST-Aβ42为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ抗体灵敏度为2 ng/ml;以GST-Aβ42和化学合成的Aβ42分别为包被抗原,间接ELISA法检测Aβ42肽免疫大鼠血清中Aβ抗体滴度,两者比较差异无显著性(P＞0.05).结论原核表达的GST-Aβ42融合蛋白可替代昂贵的化学合成的Aβ42肽抗原,用于检测Aβ抗体.
作者：张革；王烈峰；汪华侨；姚志彬 刊期： 2005年第02期
目的建立人巨噬细胞系U937与人脐静脉血管内皮细胞系ECV-304体外共培养模型,以刀豆蛋白A(ConA)作为U937激活剂,研究巨噬细胞调节血管生成的机制.方法实验分4组:ECV-304、ConA+ECV-304、U937+ECV-304和ConA+U937+ECV-304.将ECV-304细胞接种,待60%融合时按照不同的分组进行共培养48 h后,流式细胞仪检测细胞周期的变化:采用3H-TdR掺入试验检测内皮细胞DNA合成变化;RT-PCR技术检测内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR和同源盒(homebox)Hoxb2基因mRNA表达水平的变化;免疫荧光在流式细胞仪上检测整合素受体αvβ3表达的变化.结果ConA激活的U937细胞可使内皮细胞S期、DNA合成明显增加(P＜0.01);ConA刺激的U937细胞使内皮细胞VEGF受体KDR(0.879±0.003)、Hoxb2基因mRNA的表达水平(0.947±0.003)和整合素受体αvβ3的表达水平(10.26±1.73)明显上调(P＜0.01).结论ConA活化的巨噬细胞可通过影响内皮细胞的细胞周期、DNA合成、VEGF受体KDR、Hoxb2及整合素受体αvβ3的表达来促进内皮细胞的增殖、迁移及与基质的黏附,从而调节血管的生成.
作者：刘亮；刘旭盛；张晓启；明佳；徐辉；程天民 刊期： 2005年第02期
原子力显微镜(AFM)是目前新的生物成像操纵技术之一,制样简单,可以在多种环境条件下原子分辨率三维成像以及进行生物分子之间力的测定及操纵调控.目前国际上AFM主要应用于组织、细胞微生物、生物大分子纳米水平形态结构功能研究及生物单分子相互作用、生物过程操纵调控等研究领域.虽然存在着针尖碳纳米管衍化、柔软生物样品硬化、结果解释待改进等局限性,但AFM必将成为生命科学研究的重要手段.
作者：郁毅刚；徐如祥；蔡颖谦；姜晓丹；柯以铨 刊期： 2005年第02期
目的探讨用链脲霉素(Streβtozotocin,STZ)阻断脑内胰岛素信号传导,引起脑能量代谢障碍与Aβ表达及tau蛋白过度磷酸化的关系.方法24只SD大鼠随机分为实验组和生理盐水组,实验组双侧侧脑室注入STZ 3 mg/kg,第3天重复此剂量;生理盐水组手术操作相同,但注入等量的生理盐水代替STZ.21 d后,采用免疫组化方法观测各组大鼠大脑皮层和海马区的Aβ1-40、Aβ1-40、tau202、tau396、tau404阳性细胞表达.结果与生理盐水组相比,实验组皮层和海马Aβ1-40、Aβ1-42、tau202、tau396、tau404阳性细胞明显增多.结论侧脑室注射STZ可以引起脑内Aβ表达增多和tau蛋白过度磷酸化.
作者：褚文政；钱采韻 刊期： 2005年第02期
目的观察广东产的鸸鹋蛋壳粉对小鼠性功能的影响.方法给成年雄性小鼠连续服药21 d后采用小鼠交配试验测其交配的潜伏期及交配次数.给幼龄雄性小鼠连续服药30 d后检测其附性器官的脏器指数.以重复悬吊应激复制小鼠性行为障碍模型,观察雄性小鼠的交配能力.结果鸸鹋蛋壳粉能增加成年雄性小鼠的交配次数,促进未成年雄性小鼠生殖器官的生长发育,对重复悬吊应激引起的雄性小鼠性功能障碍具有一定的促进功能恢复的作用.结论广东产鸸鹋蛋壳粉具有一定的增强小鼠性功能,提高小鼠性器官生长发育的作用.
作者：莫志贤；彭林光；彭旺 刊期： 2005年第02期
目的了解广东地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型特点及其临床意义.方法用特异性引物扩增乙型肝炎病毒S基因区,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因分型方法,对该地区55例慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者感染的HBV进行基因分型,并与其临床生化结果、病毒定量和肝组织病理进行相关性分析.结果B基因型28例(51.0%),C基因型18例(32.7%),D基因型4例(7.3%),B+C型4例(7.3%),未分型1例(1.8%).其中年龄大于30岁的26例患者B和C基因型的丙氨酸转氨酶水平分别为(190.9±270.3)IU和(141.0±83.0)IU(t=0.532,P＞0.05),肝脏病理炎症分级的平均秩次为10.4和11.8(Z=0.561,P＞0.05),肝脏病理纤维化分期的平均秩次为10.5和11.7(Z=0.483,P＞0.05),HBV DNA含量分别为106.8±1.4和108.5±1.1(t=2.989,P＜0.05),HBeAg阳性数分别为2/12和8/9(Fisher's精确概率P=0.002).结论广东地区HBV基因型主要为B型和C型;两种基因型感染者丙氨酸转氨酶水平、病毒复制水平、HBeAg表达水平以及肝脏病理炎症和纤维化程度无显著性差异;然而在年龄大于30岁的CAH患者中,感染C基因型的HBV病毒复制水平和HBeAg表达水平比感染B基因型者显著增高.
作者：樊和斌；郭亚兵；杨洁；侯金林；王战会；朱幼芙；秦劲峰 刊期： 2005年第02期
目的探讨老年人体重指数与糖尿病的关系.方法按统一方法对佛山市60岁以上常住居民3 382人进行现场问卷调查,同时测量血压、身高、体重(体质量)等,并计算体重指数(BMI).结果肥胖、超重、体重正常、体重过低者糖尿病患病率分别为31.58%、22.84%、15.65%和9.40%;高血糖患病率分别为67.94%、56.14%、46.58%和38.35%;随BMI增高,糖尿病、高血糖患病率明显增高.糖尿病组BMI均值为23.9 kg/m2,≥24者占48.7%;高血糖组BMI均值为23.4kg/m2,≥24者占42.9%;血糖正常组BMI均值为22.6 kg/m2,≥24者占32.3%,两两比较有显著性差异(P＜0.01).结论BMI水平与糖尿病密切相关.
作者：陈雪梅；邵虹；邱晓敏；李蜀光；张耿新；潘鉴枝 刊期： 2005年第02期
目的探讨病毒性脑炎患者脑血流动力学变化及其意义.方法对38例病毒性脑炎患者和30例对照组进行经颅多普勒超声(TCD)检查.结果TCD检测显示:正常11例,异常27例,阳性率71%,病毒性脑炎患者急性期大脑中动脉、大脑前动脉、大脑后动脉、椎动脉和基底动脉平均血流速度均明显增快,与恢复期和对照组比较有显著性差异(P＜0.001～0.05).大脑中动脉、大脑后动脉和基底动脉脉动指数均显著升高,与恢复期和对照组比较有显著性差异(P＜0.001).结论TCD研究结果表明病毒性脑炎,尤其是中、重度患者存在不同程度的脑血管痉挛,部分患者主要表现为脑小动脉痉挛.
作者：王群；夏欣；袁惠娟 刊期： 2005年第02期
目的探讨葡萄胎差异表达新基因F10在不同类型滋养细胞肿瘤中的表达及其与恶性滋养细胞肿瘤侵袭的关系.方法采用原位杂交方法检测12例葡萄胎、6例侵袭性葡萄胎、8例绒癌中F10表达情况.结果F10在全部葡萄胎、侵袭性葡萄胎、绒癌中均呈阳性表达,其在葡萄胎、侵袭性葡萄胎、绒癌中的表达强度递增,有显著性差异(P＜0.001).结论F10可能与滋养细胞肿瘤的发生及其侵袭行为相关,在侵袭或滋养细胞恶变中起一定作用.
作者：周瑾；陈士岭；邢福祺；庞战军；李冰；周问渠；付欣；丁彦青 刊期： 2005年第02期
目的探讨多层螺旋CT冠脉造影(multislice spiral CT coronary angiography,MSCTCA)的成像技术及其临床应用价值.方法对79例对象行MSCTCA检查,利用多种重建方法进行重建,分析影响冠脉成像质量的重要因素,MSCT对冠脉的显示能力,冠脉斑块性质及钙化程度,评价管腔狭窄及其程度,并对桥血管和支架的显示及通畅性进行评价.结果左冠脉主干及前降支重建的佳时相为75%R-R时相,左回旋支及右冠脉为62.5%R-R时相.以75%的相位窗重建得到容积再现的图像为佳.MSCTCA对冠脉l～3级分支、甚至部分4级分支显示清晰,对冠脉斑块显示良好,对冠脉狭窄显示较佳,对搭桥血管及内支架显示良好.结论16层MSCTCA可作为冠心病的筛选手段及在血运重建术后复查中有很高的临床应用价值.
作者：许尚文；张雪林；曾建华；王江云；李天然；钱根年；高荣光 刊期： 2005年第02期
目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)佳标记时间、剂量.方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测佳标记剂量;在细胞生长融合前72、48、36、24、12、3 h加入BrdU,使终浓度为10 μmol/L,并分别孵育至细胞融合,测定BrdU的标记率,找出佳标记时间;免疫组化分析BrdU标记率.结果流式细胞仪检测所标记的细胞表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45;终浓度为10μmol/L和孵育48 h BrdU标记率均＞98%,并且连续传5代均可检测到.结论传代后贴壁生长的梭形细胞为MSCs,终浓度为10 μmol/L和孵育48 h BrdU标记率均＞98%,且可以连续检测到,提示BrdU标记可用于MSCs移植入体内后存活、生长和分化的动态观察.
作者：冯善伟；姚晓黎；李中；柳太云；黄文；张成 刊期： 2005年第02期
近年来子宫内膜癌在国内外均呈上升趋势,在我国妇科恶性肿瘤中仅次于宫颈癌居第2位,占女性恶性肿瘤的3%.子宫内膜癌的发病病因至今不清,可能与雌激素对子宫内膜的持续作用有关.子宫内膜癌是否有家族史或遗传史专家尚有不同意见.本文报道两对姐妹患子宫内膜癌的诊治情况.
作者：刘国炳；庞占军 刊期： 2005年第02期
目的了解广州地区医院感染常见革兰阴性细菌分布特征和耐药特点.方法2001年7月～2003年8月,用Kirby-Bauer法检测了从广州地区13家医院分离获得的3 500株革兰阴性细菌对临床常用15～21种抗生素的药敏结果,并按美国临床实验标准委员会2000年判断标准进行判断,用WHONET-5软件分析数据.结果分离出的3 500株革兰阴性菌中前3位细菌依次是大肠埃希菌(Escherichia coli,ECO)1 244株(占35.5%)、肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae,Kpn)900株(占25.7%)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pae)547株(占15.6%).广州地区临床分离革兰阴性菌中产超广谱β内酰胺酶(extended-spectrumbeta-lactamases,ESBLs)菌株的总检出率为31.0%(1 084/3 500),在各种常见菌属中的检出率分别为:大肠埃希菌为38.7%(482/1 244)、肺炎克雷伯菌为37.9%(341/900)、铜绿假单胞菌为5.3%(29/547)、阴沟肠杆菌为55.2%(117/212)、不动杆菌属为8.2%(17/208)、其他肠杆菌属为27.7%(53/191)、嗜麦芽窄食单胞菌为33.3%(37/117)、变形杆菌属为9 2%(8/87).从呼吸道标本中分离获得革兰阴性细菌多,为1 463株(占41.8%);其次为泌尿道标本,为943株(占26.9%).耐药性分析显示:革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的总体耐药率低为亚胺培南(8.7%),其次为头孢哌酮/舒巴坦(13.3%),而高为氨苄西林(90.5%),其次为奈啶酸(69 3%).亚胺培南对广州地区临床分离的大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属、其他肠杆菌属和变形杆菌属的耐药率低,分别为1.1%、0.5%、0.6%、3.2%、0.8%和0%,而头孢哌酮/舒巴坦对广州地区临床分离的铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌的耐药率低,分别为10.8%和15.9%,大部分细菌呈多重耐药.产ESBLs菌株对15～21种临床常用抗菌药物的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株(P＜0.05).结论细菌耐药性仍是目前广州地区临床用药为严重的问题,尤其是产ESBLs菌株有上升趋势.亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦分别对临床分离革兰阴性菌株有较好的抗菌活性,可以作为广州地区临床经验用药的候选药物.
作者：肖庆忠；苏丹虹；江洁华；钟南山 刊期： 2005年第02期
目的以凋亡素基因为例,探讨用寡核苷酸片段体外拼装基因的方法.方法按已知的凋亡素基因序列(GeneBank登录号:AYl71617),设计40 bp的凋亡素基因寡核苷酸片段,并将其中的172位(BglⅡ,agatct→agatcc)和306位碱基(Hind Ⅲ,aagctt→aatcct)进行同义突变,Taq消除这两个酶切位点.在pfu酶的PCR系统中,对寡核苷酸片段进行拼装和扩增.产物稀释后进一步纯化扩增,在Tag酶存在的条件下对产物两末端加T,然后TA克隆于pGEM-T easy载体中.阳性克隆经测序鉴定.结果凋亡素基因寡核苷酸片段第1次PCR拼装后,产物呈拖尾状.但产物经进一步稀释,并用两未端引物进行2次扩增后,即可见明确的产物带及其他梯形带状产物.目的产物TA克隆后,筛选得到阳性克隆,其经测序鉴定,与设计的凋亡素基因序列完全一致.结论体外基因拼装法是一种非常有效的基因克隆方法,可用于基因或载体的合成,及一次性对基因进行广泛的突变.
作者：陈学清；王亚东；孙勇；段佑才；马高峰 刊期： 2005年第02期
目的建立大鼠β-淀粉样肽[Aβ(25-35)]诱导的痴呆模型,探讨知母总皂苷在阿耳茨海默病(AD)发病机制中的作用.方法SD大鼠60只,采用脑立体定位技术在大鼠单侧侧脑室一次性注射老化的Aβ(25-35)建立实验性AD模型.手术24 h后,大鼠经灌胃分别给予3种剂量的知母总皂苷和EGB761,模型组和空白组给予等剂量的蒸馏水,1次/1 d,连续14 d.在给予Aβ(25-35)后的第8天,应用Morris水迷宫法测定大鼠的学习记忆功能,造模后第14天断头取脑,测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力.结果与空白对照组相比,模型组大鼠空间学习记忆能力明显减弱,寻找平台潜伏期明显延长(P＜0.01);脑组织SOD、总抗氧化能力明显降低(P＜0.01),而MDA明显升高(P＜0.05).与模型组比较,给予知母总皂苷治疗后的大鼠学习记忆功能障碍得到明显改善,潜伏期显著缩短(P＜0.05),SOD活力显著提高(P＜0.05),总抗氧化能力也显著增强(P＜0.05),MDA水平明显降低(P＜0.05).结论知母总皂苷可明显改善AD模型大鼠的学习记忆功能,同时可提高模型大鼠的抗过氧化能力,这有可能是其改善学习记忆的原因之一.
作者：欧阳石；孙莉莎；郭胜蓝；刘旭；徐江平 刊期： 2005年第02期
目的研究体外诱导小鼠骨髓基质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的可能性.方法MSCs通过细胞传代培养,并通过流式细胞仪进行鉴定.MSCs经过5-杂氮胞苷诱导后,通过RT-PCR、半定量RT-PCR、Western-blotting和透射电镜检测诱导后的MSCs.结果培养的MSCs为形态均一的梭形细胞,有时可见细胞融合.流式细胞仪显示诱导后的MSCsCD29、CD44表达阳性,而CD34、CD45表达阴性.经过5-杂氮胞苷诱导后的MSCs表达Nkx2-5/Csx、GATA4、β-MHC基因和α-sarcomeric actin和desmin蛋白,透射电镜显示诱导后的MSCs有肌丝形成.诱导后的MSCs DNA甲 基化转移酶表达降低.结论小鼠MSCs能够向前体心肌细胞分化.
作者：张勇；蔡振杰；陈如坤 刊期： 2005年第02期
目的了解烧伤血清对内皮细胞抑制性κB(IκBα)降解、核因子-κB(NF-κB)活化的影响,进一步探讨烧伤血清诱导内皮细胞活化分泌细胞因子的机制.方法采用体外培养的内皮细胞,分别用正常人血清(对照组)、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞.采用Western印迹法检测血清刺激30、60、90、120min后内皮细胞IκBα蛋白降解情况,电泳迁移率分析检测血清刺激30、60、120、240 min后NF-κB活性的变化.结果烧伤血清刺激内皮细胞后30min,IκBα发生明显降解,刺激后60min达高峰,2 h后表达逐渐升高;烧伤血清刺激内皮细胞后30 min,NF-κB活性迅速升高,30～60 min达高峰,2 h后逐渐回复基础状态.PDTC能有效抑制烧伤血清作用条件下内皮细胞IκBα降解、NF-κB活化.结论烧伤血清可诱导内皮细胞IκBα降解,活化NF-κB,从而在烧伤后内皮细胞分泌细胞因子过程中起重要作用.
作者：李志清；黄跃生；杨宗城；王甲汉 刊期： 2005年第02期
目的了解转化生长因子-β超家族(TGF-βs)在调节卵泡发育过程中的信号转导模式,以探讨在不同发育阶段大鼠卵巢中Smad4蛋白及mRNA的表达.方法选择不同发育时期大鼠卵巢,运用免疫组化方法检测卵巢中Smad4蛋白表达,并进行图像分析;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Smad4mRNA在卵巢中的表达,以GAPDH作为内对照与特异性Smad4同时进行扩增,并计算Smad4和GAPDH的RT-PCR产物积分吸光度比值来表示Smad4mRNA的含量.结果Smad4广泛表达于卵巢组织,但主要表达在卵泡中,其表达部位和强度随卵巢的成熟度不同而变化;在卵巢发育早期,Smad4主要在原始卵泡和窦前卵泡中表达,而在间质中的表达较弱;随着卵巢的发育成熟,Smad4在间质中的表达逐渐增强,性成熟后,在窦状及成熟卵泡颗粒细胞和卵泡膜的表达与间质细胞比较无显著差异(P＞0.05).Smad4在卵泡中的表达强度也发生了变化,即随着卵泡的发育,Smad4在窦状及成熟卵泡卵母细胞的表达明显减弱,与窦前卯泡卵母细胞比较有显著差异(P＜0.05,P＜0.01);与窦前卵泡比较,Smad4在卵泡膜细胞的表达逐渐增强(P＜0.01),而在各级卵泡颗粒细胞中的表达无显著差异(P＞0.05).RT-PCR结果显示各阶段卵巢均有mRNA的表达,从第3周起Smad4mRNA的表达明显增强,Smad4和GAPDH积分吸光度比值与出生后1 d的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论卵巢内存在Smad4,提示TGF-β家族对卵泡发育的调节是通过Smad信号转导模式实现的.
作者：苗竹林；王自能；程龙球；章韵 刊期： 2005年第02期
目的观察32P照射对HL-60细胞周期的影响.方法不同剂量32P体外照射HL-60细胞24、48和72 h,流式细胞法检测细胞周期.结果不同剂量32P照射HL60细胞对细胞周期有明显影响,首先发生G2/M期阻滞;随剂量增大,G2/M期和S期均发生阻滞,以G2/M期阻滞为主.结论32P体外照射HL-60细胞对细胞周期有明显的干扰作用.
作者：何子毅；孟庆勇 刊期： 2005年第02期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
