林源泉;贾军;刘文锋;张浚
目的研究药物1,25-二羟基维生素D3(二羟维D3)在高危角膜移植模型中对免疫排斥反应及新生血管生长情况的影响,揭示1,25-二羟维D3作为免疫抑制剂在角膜移植中的治疗作用及机制.方法建立大鼠高危角膜移植模型,按不同浓度的1,25-二羟维D3(1×10-5和1×10-7mol/L)及环孢霉素A(CsA)分组,连续用药2周,观察移植物排斥情况并于术后4、7、14 d取材行原位杂交等实验,分析各组细胞因子:白介素1α(IL-1α)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平的变化情况.结果在1,25-二羟维D3作用下,高危角膜移植物的存活时间明显延长;新生血管生长受抑制;合用CsA后效果更明显.原位杂交实验证实1,25-二羟维D3能显著抑制植片IL-1α、TNF-αmRNA表达(P<0.01);对VEGF表达无直接影响.结论1,25-二羟维D3能有效地抑制新生血管生长及角膜移植急排期的免疫哌排斥反应,机制可能包括对前炎症因子(IL-1α、TNF-α)生成的抑制作用,而对VEGF无明显直接作用.
作者:党森涛;陆晓和;周瑾;白浪 刊期: 2004年第08期
目的研究犬单侧膈神经离断后不同时期呼吸肌腺嘌呤核苷酸含量变化.方法选取8只成年健康杂种犬,离断其左侧膈神经,分别取其同侧肋间肌和膈肌组织,用高效液相色谱法测量膈神经离断前及离断后1、2个月呼吸肌中腺嘌呤核苷酸含量.结果犬肋间肌三磷酸腺苷(ATP)的含量三个时间组相比均无差别;而二磷酸腺苷(ADP)的含量上升,膈神经离断后2月组与离断后1月组相比,有统计学差别(P<0.05);犬肋间肌总腺苷酸(TAN)含量以膈神经离断后1月组为低,但并无统计学差别;肋间肌腺苷酸能荷(AEC)以膈神经离断后1个月为低,与离断前组和离断后2月组相比,均有统计学差别(P<0.05).犬的膈肌ATP、ADP及TAN、AEC含量在膈神经离断后2个月分别为:9.05±12.70,2.99±2.57,14.72±13.98,0.57±0.29;与膈神经离断前及离断后1个月相比,有统计学意义(P<0.05).结论犬膈神经离断后膈肌能量代谢明显下降,肋间肌有一定程度代偿.
作者:田建昌;陈钢;肖飞;马俊杰;蔡瑞君 刊期: 2004年第08期
目的探讨住院肺结核病人延误诊断的原因.方法对我所1999年1月~2003年12月住院的458例入院前延误诊断肺结核患者进行回顾性分析.结果与结论延误诊断的原因为:(1)患者对某些呼吸系统症状未引起重视,延误就诊时间;(2)首诊医师仅依靠胸部X线检查,忽视了痰菌及其它检查;(3)非专科医师对因症就诊患者忽略了结核病的存在.
作者:董秋兰;李艳明;吴东玲;郭红革;魏长春 刊期: 2004年第08期
目的探讨P糖蛋白(P-gp)对肿瘤细胞放射敏感性的调控效应.方法以经与未经维拉帕米处理的MCF-7/Adr细胞分别作为抑制和对照组,运用流式细胞仪检测X射线照射后不同时间点细胞凋亡率和线粒体膜电位(△ψm)的动态变化.结果抑制组细胞在X射线照射后6、12、24 h细胞凋亡率分别是25.53%±2.85%、30.43%±2.21%、39.03%±2.60%,对照组分别是16.13%±1.16%、21.73%±1.31%、27.53%±2.55%;抑制组在6、12、24 h的△ψm平均荧光强度值分别是75.27±4.90、96.47±5.59、57.77±2.55,对照组分别是54.17±4.05、62.30±5.93、39.53±2.65.各时间点抑制组的细胞凋亡率和△ψm平均荧光强度值均明显高于对照组(P<0.01).抑制组经X射线照射后24 h细胞凋亡率高(F=47.870,P=0.000).照射后12 h平均荧光强度值高(F=74.485,P=0.000).结论抑制MCF-7/Adr细胞的P-gp功能上调了细胞的放射敏感性,这可能与线粒体膜电位改变有关.
作者:余志坚;陈俊;袁亚维;肖明星;陈春 刊期: 2004年第08期
目的探讨纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)基因4G/5G多态性与广东汉族人2型糖尿病肾病(DN)发病的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析,对147例病史7年以上的2型糖尿病患者[其中DN患者77例,糖尿病非肾病(DNN)患者70例]和26名健康人进行了PAI-1基因4G/5G多态性分析.结果DNN组PAI-1基因的4G/4G基因型、基因频率显著高于DN组(x2=13.008,P<0.01);与5G/5G基因型相比,DNN组PAI-1基因4G/4G型对DN组的比数比为1.447,95%的可信区间:0.533~3.934(P<0.05),差异有显著性.而DN与DNN组PAI-1基因4G等位基因频率无显著差异(x2=1.22,P>0.05);结论PAI-1基因4G/4G基因型与广东汉族人2型DN的发病有关联,4G/4G基因型广东汉族2型糖尿病人易发生DN.
作者:刘仕群;薛耀明;杨光彩;何飞英;赵小山 刊期: 2004年第08期
目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制.方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1 cDNA(3 878 bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1.通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定.同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Western blotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达.结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3 878bp).重组质粒经HindⅢ-Not Ⅰ酶切后,得到3 878bp(PLCγ1基因)及6 100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约4300bp及约8 500bp两个片段,与预期一致.DNA测序也证实了重组质粒的正确.经RT-PCR和Western blot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞.结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础.
作者:李秀梅;邓凡;曾位森;华亮;陆地;李明;王宏;刘忠英;罗深秋 刊期: 2004年第08期
目的研究猫在低速弹所致火器性颅脑损伤(CMW)后软脑膜微循环的改变.方法用气枪制作猫CMW模型,观察损伤前后软脑膜微血管的管径(D)、血流速度(V)、血流量(Q)及脑组织的病理学变化.结果(1)软脑膜细动脉Da、Va和Qa在伤后5~20 min期间明显降低,45 min后逐渐恢复,并且Qa和Da超过伤前水平.(2)伤后软脑膜细静脉Dv即超过伤前水平,而Vv伤后一直偏低,Qv在45min后升高超过伤前呈淤血状态.结论(1)CMW后出现微循环障碍,导致脑缺血缺氧,引起神经功能障碍;(2)CMW45 min后挫伤区、震荡区脑微循环出现代偿性微血管血流量增加,进一步导致缺血后再灌流损伤.
作者:王凡;陈长才;毛伯镛;游潮;徐如祥 刊期: 2004年第08期
目的研究鼻咽癌常规放疗和调强放疗(IMRT)受照剂量的差异.方法用放疗计划系统分别进行鼻咽癌常规放疗和调强放疗计划设计,计算肿瘤量70 Gy时正常组织受照剂量-体积直方图和所需照射的总跳数.用X射线能量为6MV的加速器实施放疗计划.根据方野散射线和漏射线剂量率的测量值和总跳数,估算射野外不同距离正常组织所受辐射剂量.结果调强放疗射野内正常组织受照剂量低于28 Gy的体积是常规放疗的1.43~1.81倍,而高于35 Gy时,受照体积仅为常规放疗的0.73~0.30倍;射野外正常组织所受散射线和漏射线照射剂量的估计值约为常规放疗的2倍.结论鼻咽癌常规放疗与调强放疗相比,正常组织受照剂量和受照体积具有成倍差异,调强放疗漏射线和散射线是常规骀放疗的2倍.
作者:张书旭;徐海荣;林生趣;李文华 刊期: 2004年第08期
目的分析甲状腺癌骨转移的临床及影像学表现,探讨其临床及影像特点和诊断价值.方法经病理证实为甲状腺癌骨转移10例,对其X线、CT表现进行回顾性分析.10例均行X线平片检查,其中3例做CT扫描.结果甲状腺癌具隐匿病史,在骨转移病例,先发现骨转移,后查出原发灶者3例,7例在原发灶或甲状腺结节的基础上出现骨转移.甲状腺癌骨转移以溶骨性转移为主,多发于上半身的骨骼,表现为膨胀性囊状破坏区,呈大片状、地图样骨缺损,范围大、广泛为其特点.结论甲状腺癌可发生骨转移,以溶骨型为主,可有成骨性转移.
作者:刘光俊 刊期: 2004年第08期
目的观察抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体对小鼠肉瘤S180生长的影响.方法在对小鼠Toll样受体2(mTLR-2)B细胞优势表位预测的基础上,合成B细胞识别表位20 mer短肽,将其与载体蛋白偶联,制备免疫原.所得兔抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位多克隆抗体TSP-1纯化后,采用Westem blotting、免疫组织化学和流式细胞仪进行初步鉴定.小鼠肉瘤株S180细胞注射小鼠左后肢,其中实验组混合100μg纯化抗体TSP-1,无关免疫球蛋白对照组混合100 μg正常兔IgG,空白对照组仅接种S180.小鼠经麻醉分别于10、14、18 d处死,称量瘤质量并计算抑瘤率.结果Western blotting显示在相对分子质量约95 000处可见清晰的反应条带;免疫组织化学和流式细胞术检测显示抗体可与表达天然mTLR-2的J774A.1细胞反应;实验组小鼠肉瘤生长明显受到抑制,其瘤质量在10、14、18 d与对照组相比差异显著(P<0.05);抑瘤率分别为77%、51%和53%.结论局部应用抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位抗体可抑制小鼠肉瘤S180生长,且表现在肿瘤生长的早期.
作者:赵文忠;刘艳君;朱平;刘洁;韩强涛;富宁 刊期: 2004年第08期
目的构建PcDNA4/His C-MBL表达载体,在哺乳细胞中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL).方法应用PCR从含有中国人野生型MBL cDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至PcDNA4/His C真核表达载体.经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO细胞,以RT-PCR分析其mRNA表达,通过Ni-NTA琼脂糖柱层析纯化目的蛋白并以SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,以其为免疫原免疫小鼠后取鼠血清进行ELISA检测分析目的蛋白的免疫活性.结果从pGEM-MBL中扩增得到约750 bp的cDNA片段,构建成重组载体经酶切出现约5 100和750 bp片段,测序鉴定与预期的完全一致.RT-PCR证实转染细胞有MBLmRNA表达,纯化蛋白经SDS-PAGE电泳可见约29000、58 000和87 000条带,其中29 000蛋白带可与6-His抗体反应.纯化蛋白免疫小鼠所获抗血清ELISA效价是1:819 200,与天然人MBL和重组MBL三聚体糖识别域反应的ELISA效价均为1:25 600.结论获得了表达中国人MBL的CHO细胞株和重组人MBL,为MBL分子的进一步研究提供了条件.
作者:白志军;张丽芸;林佐贤;卢晓;陈政良 刊期: 2004年第08期
目的了解对专业不同满意程度军校医学生的心理健康状况及其人格特征.方法采用自编大学生一般情况调查问卷(其中一项是调查被试对录取专业的满意度)、症状自评量表(SCL-90)、艾森克个性问卷(EPQ),对4294名军校医学生进行测试和评定.结果对专业不同满意程度军校医学生在个性和心理健康水平上存在显著差异.军校医学生对专业的满意程度与个性因素和心理健康水平存在一定相关关系.结论人格特征表现为较内向、高神经质、高精神质的军校医学生更容易对专业不满意;对所学专业越不满意的军校医学生则表现出越多相应的心理问题.
作者:刘欢欢;张小远;肖蓉;冯现刚 刊期: 2004年第08期
目的检测广东汉族人群HLA-Cw及HLA-A、B、DRB1基因频率,分析该人群HLA-Cw等位基因多态性及其单体型特点.方法骨髓移植供者185例,抗凝血提取DNA,半量全自动PCR-RSSO分型检测HLA-A、B、Cw、DRB1基因型.结果在分辨水平检出Cw等位基因11个,其中分布频率较高的依次为:Cw*03(0.2580)、Cw*07(0.1887)、Cw*01(0.1732)、Cw*08(0.1070).统计分析呈现显著连锁不平衡的HLA-Cw-A单体型7个,HLA-Cw-B单体型20个,HLA-Cw-DRB1单体型10个.结论广东汉族群体HLA-Cw基因具有较为丰富的多态性,其与HLA-A、B、DRB1间连锁不平衡单体型具有地区性遗传特征.
作者:马红京;肖露露;尹晓林;郭坤元;叶欣 刊期: 2004年第08期
采用回顾性分析对31例75岁以上高龄人工髋关节置换术患者进行术前常规检查和特殊检查,对合并其他脏器疾病的情况进行分类汇总,予以相应的术前内科治疗.结果表明,对高龄患者进行准确的术前评估,积极控制其并发疾病,使人工髋关节置换术取得良好疗效.
作者:禹旭 刊期: 2004年第08期
目的探讨腹腔镜手术对人体氧化应激的影响.方法测定20例子宫肌瘤患者在接受腹腔镜手术前、手术结束时(气腹解除后5 min)及术后24 h血浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和血浆总抗氧化能力(AOA)的水平,并与20例开腹手术患者术前、手术结束时(缝合腹壁时)及术后24h的水平进行比较.结果手术结束时2组血浆MDA水平均增加(腹腔镜组P<0.01,开腹组P=0.19);术后24 h腹腔镜组恢复至术前水平(P=0.20),而开腹组与术前比较继续升高(P<0.01).血浆GPx活性及AOA水平在手术结束时两组均降低(腹腔镜组P<0.01、P<0.01;开腹组P=0.23、P=0.43);术后24h与术前比较腹腔镜组GPx活性部分恢复(p=0.11),AOA维持在手术结束时的水平(P<0.01),而开腹组GPx活性和AOA水平继续下降(P<0.01,P<0.01).两组相比腹腔镜组术后24 h MDA水平低(P<0.01),GPx活性高(P<0.05),AOA水平无差异(P=0.33).结论腹腔镜手术过程中有氧化应激现象产生,但术后基本得以恢复,优于开腹组.
作者:张广亮;刘国炳;黄琦丽;邢福祺 刊期: 2004年第08期
目的对导致泌尿生殖系感染的大肠埃希菌对抗菌素的耐药趋势进行调查分析.方法应用纸片扩散法(K-B法)对分离的148株大肠埃希菌进行药敏测试与分析,并用纸片扩散法对β-内酰胺酶(ESBLs)菌株作确认试验.结果对28种抗生素的耐药检测结果显示,大肠埃希菌对青霉素类和喹诺酮类抗生素耐药率达73.6%~86.4%;对一代、二代头孢菌素(头孢拉啶、头孢唑啉、头孢克洛)耐药率在44%以上;对三代头孢菌中的头孢他啶耐药率低,为10.1%;对哌拉西林、头孢哌酮和氨苄西林的耐药率为84.5%、44.6%、83.0%;对含酶抑制剂的复合β-内酰胺类抗生素的耐药率(哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和氨苄西林/舒巴坦为4.1%、10.8%和52.0%)要明显低于单剂型的同种抗生素,抗菌敏感率均有不同程度的提高(P<0.001).148株大肠埃希菌中,产ESBLs菌株有38株(25.7%),不产ESBLs菌株有110株(74.3%).产ESBLs菌株对多种抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs的菌株(P<0.05).结论对于治疗因大肠埃希菌引起的泌尿生殖系感染,应该根据实验室的药敏和ESBLs的检测结果来指导合理用药,以提高治疗效果.呋南妥因和含酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素比较有效.
作者:崔伟历;徐德兴;李文玲;王露霞 刊期: 2004年第08期
目的观察双开门颈椎管成形合并羟基磷灰石人工骨材料植骨术治疗颈椎管狭窄症的效果.方法采用双开门法行颈椎管成形、椎管扩大及羟基磷灰石人工骨植骨术治疗12例颈椎管狭窄症.结果经过5年随访,11例发育性颈椎管狭窄患者临床症状明显缓解、体征改善,1例疗效不佳.结论双开门颈椎管成形及人工骨材料植骨术是治疗颈椎管狭窄症的一种安全有效的手术方法.羟基磷灰石载体具有良好的生物相容性及骨传导性,是理想的骨移植替代材料,在颈椎椎管成形术中具有良好的应用价值.
作者:吕琦;庄颜峰;陈学明;王万明 刊期: 2004年第08期
目的观测并评价止血气雾剂对肢体动脉破裂伤口的止血效果.方法剪断30头猪的共30条股动脉,按照向伤口喷洒止血气雾剂前是否辅助其他止血方法分为:指压止血+止血气雾剂、止血带止血+止血气雾剂和单纯喷止血气雾剂止血这3种方法制作动脉破裂止血模型,每种模型均制作10个,术后12 h内观察止血效果.结果止血带组的止血成功率为90%,指压法组的止血成功率30%,单纯喷止血气雾剂的止血成功率为10%.结论对于肢体动脉破裂伤口,采用先扎止血带暂时止血,之后喷洒止血气雾剂,10min后放松止血带的止血方法成功率高,是首选的止血方法.
作者:孙鸿涛;裴国献;王运斗;张洪涛;张敬良 刊期: 2004年第08期
目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子.方法应用RT-PCR的方法得到survivin的cDNA,并构建成pBV220-survivin原核表达质粒,将其导入E.coli B121(Gold)中,诱导表达survivin蛋白.通过DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白.用Western blotting检测表达产物.结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致,表达质粒在E.coli B121(Go1d)中得到高效表达,表达的survivin蛋白占总蛋白含量的30%以上,表达产物以包涵体的形式存在.通过离子交换柱和分子筛二步柱纯化及复性后获得的目的蛋白,其纯度达到95%以上.Western blotting证明表达产物具有特异性.结论获得了较高纯度的survivin蛋白,为进一步深入研究该蛋白的细胞凋亡调控功能提供了工具.
作者:别俊;孙茂盛;孙强明;郑建平;孙雯佳 刊期: 2004年第08期
目的探讨重型脑损伤患者亚低温(33~35℃)治疗前后颅内压(ICP)、脑组织氧分压(PO2)的变化及临床意义.方法32例重型颅脑损伤患者分为亚低温组及对照组,放置ICP脑组织PO2光纤探头,持续监测ICP及脑组织PO2.结果亚低温治疗24h后ICP逐渐下降,脑组织PO2逐渐上升,与对照组比较差异有显著性(P<0.05).结论亚低温治疗能明显降低重型颅脑损伤患者ICP,改善脑组织氧代谢,使患者死亡率及致残率降低.
作者:林源泉;贾军;刘文锋;张浚 刊期: 2004年第08期