学术投稿

鼠抗CD71单抗轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析

王志友;沈弢;张爱华;闭兰;金玉铃;孙可芳;余模松;史良如

关键词:CD71, 鼠抗体可变区基因, 单克隆抗体, 序列分析
摘要:目的获得鼠抗人CD71分子单抗的轻链及重链可变区基因.方法用一步法提取总RNA,逆转录形成cDNA,设计并合成一套扩增小鼠重、轻链可变区的通用引物,通过PCR扩增基因,分别克隆入pMD18-T载体中,作核苷酸序列分析.结果用重链引物扩增获得长约350 bp的片段,用轻链引物扩增获得长约330bp的片段,序列测定获得它们的DNA序列.结论克隆的重链可变区基因长度为348 bp,属于小鼠H链可变区Ⅰ A亚组;克隆的轻链可变区基因长度为336 bp,属于小鼠κ轻链可变区Ⅱ亚组.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 引用参考文献三原则

    作者: 刊期: 2002年第05期

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    目的建立全血血小板膜糖蛋白粘附受体的流式细胞术检测法并对其进行探讨.方法比较不同实验条件下血小板膜糖蛋白GPⅠb-Ⅰx、GPⅡb-Ⅲa、P-selectin的表达及各种实验要素对它们的影响.结果显示该方法简便快速,灵敏度高,特异性好,所用样品量少,且减少血小板的人为活化.结论流式细胞术是血小板膜糖蛋白粘附分子检测的一个新方法.

    作者:陈练波;董为人;东方 刊期: 2002年第05期

  • 纳米技术在生物医学中的应用

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    作者:赵卫;曹虹;万成松;张文炳 刊期: 2002年第05期

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    作者:姜泊 刊期: 2002年第05期

  • 冠状动脉旁路移植术同期施行二尖瓣置换术1例报告

    报告1例冠心病合并二尖瓣中重度关闭不全的患者,于体外循环直视下行冠状动脉旁路移植术同期行二尖瓣置换术.手术顺利,术后恢复良好.强调了术前明确诊断的重要性,并就手术方式、心肌保护等进行了讨论.

    作者:蔡开灿;王武军;王文林 刊期: 2002年第05期

  • 医学科技论文英文摘要常用结构和句型

    论述了医学科技论文中常用的结构和句型,并对一些常见问题进行了分析.

    作者:王征爱;宋建武 刊期: 2002年第05期

  • 小剂量米非司酮紧急避孕150例临床观察

    在妇科门诊中,经常遇到需紧急避孕的就诊者,由于多种因素影响,各地用于紧急避孕的方法可能有所不同.本文介绍了作者所在的一家市级医院门诊采用小剂量米非司酮(25mg,一次性口服)紧急避孕150例的临床效果,有效率80.89%.

    作者:李飞飞;陈玉霞;唐建华 刊期: 2002年第05期

  • 重组人骨形态发生蛋白-2在大肠杆菌中的表达及纯化

    目的用基因工程技术在大肠杆菌中表达人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2).方法 hBMP-2原核表达载体pYR(pBV220-hBMP-2)转化Ecoli BL21,SDS-PAGE分析工程菌活化状态以及诱导时间与目的蛋白表达率的关系.离子交换层析DEAE和分子筛S-300纯化重组蛋白,自然缓降复性法对其复性.结果 SDS-PAGE显示在相对分子质量约为13 000时出现明显外源蛋白表达带,而且当工程菌30℃活化至D600约为0.45时,其表达效率较高;在此状态下,温度诱导表达4 h,目的蛋白表达量高,以后随着时间的延长,表达量稍下降.重组蛋白经纯化后植入小鼠肌肉,组织学观察到肌肉内大量间充质细胞增生以及软骨与骨形成.结论重组hBMP-2具有良好异位成骨活性.

    作者:熊绍虎;余磊;谭海燕;黄涛;王朝阳;刘大庸;钟世镇 刊期: 2002年第05期

  • 不同孔径骨修复材料消旋聚乳酸对骨再生的影响

    目的探讨不同孔径三维多孔骨修复材料DL-PLA植入兔桡骨骨缺损区对骨长入的影响.方法将采用浇注盐析技术制成的孔隙率为75%而孔径不同的三维多孔 DL-PLA材料植入兔桡骨骨缺损区,并设立空白对照组,分别在术后2、4、8、12周行X线检查、取材做大体观察、组织形态学检查、生物力学检测.结果植入材料孔径为约250、400、750 μm者均有大量新生骨组织形成,而植入孔径为约75μm者及空白对照组12周时骨缺损区两端骨髓腔已闭合.植入250μm者8和12周时抗弯强度高(P<0.01).结论三维多孔材料孔径大小对骨长入起决定性作用,孔径为约250 μm的材料有利于骨长入.

    作者:张亮;靳安民;郭志民;闵少雄;全大萍;卢泽俭 刊期: 2002年第05期

  • 偶极子定位法手术治疗顽固性癫痫

    目的探讨三维颅内癫痫病灶偶极子分析定位系统用于顽固性癫痫患者致痫灶定位以指导手术治疗的方式和效果.方法对1999年8月至2001年5月在作者所在医院住院治疗的240例顽固性癫痫患者运用偶极子三维颅内癫痫病灶定位系统进行顽固性癫痫致痫灶术前、术中定位,指导采用相应手术方式,并探讨其疗效及随访结果.结果随访6个月以上者180例,疗效满意112例,显著改善36例,良好22例,差10例,总有效率为93.4%,显效率82.2%,未发现任何远期功能损害.结论偶极子三维颅内癫痫病灶定位系统是目前较为先进的癫痫病灶定位方法,以其指导手术,可明显增进手术效果,减少并发症.

    作者:徐如祥;刘智良;张新伟;周谷兰;柯以铨 刊期: 2002年第05期

  • 增殖细胞核抗原与下咽癌临床生物学行为及预后的关系

    目的通过原位检测下咽癌增殖细胞核抗原(PCNA)及其基因的表达,探讨PCNA与下咽癌生物学特性与临床行为及预后的关系.方法用免疫组织化学染色SP法检测48例下咽癌手术标本和其中的15例癌旁组织标本PCNA的表达,计算增殖指数,结合临床与随访资料进行分析.结果下咽癌组PCNA表达程度明显高于癌旁组(P<0.001);PCNA指数与癌的临床分期、组织分化程度及预后相关(P<0.05),而与是否有颈淋巴结转移和肿瘤的发生部位无显著关系(P>0.05).结论下咽癌PCNA的表达对判断肿瘤恶性程度及预后可能有一定的参考价值.

    作者:姚连生;李湘平;李琦;张进华 刊期: 2002年第05期

  • 对住院病人医疗服务评价及需求的调查分析

    目的考查医院现有服务结构的合理性和病人对医疗服务的需求.方法对作者所在医院19个临床科室年龄15岁以上的130名病人进行问卷调查,医疗服务评价内容包括:(1)医院饮食、卫生状况;(2)收费合理性;(3)收费透明度;(4)病人总体满意度.医疗服务需求包括:(1)出院后服务;(2)药物类型;(3)病房类型;(4)收费透明度;(5)知情选择.结果 (1)医疗服务评价:87.4%病人对卫生状况满意,51.3%病人对饮食满意;51.3%病人认为收费合理,6.7%病人认为收费不合理;37.2%病人认为收费透明度高,8.3%病人认为收费透明度低,大部分病人希望住院部每3~5 d给一次费用报告单;82.8%病人对医疗服务感到满意.表明医疗服务的综合质量虽然得到了病人的普遍赞同,但在饮食服务、收费透明度和收费合理性方面仍有待提高.(2)医疗服务需求:91.3%病人希望出院后一定时间内可免费看门诊或可通过电话向主管医生咨询有关疾病防治、保健等问题;73.8%病人希望用合资企业生产的或国产药物,26.2%病人喜欢用进口药,仅11.3%病人认为药物越贵治疗效果越好;喜欢住50~70元双人间的病人占40.8%,愿意住30~50元多人间和90~120元单人间的病人比例分别为35.9%、23.3%;调查人群人住单人间、双人间与多人间的比例为2:39:59,病人需求的理想病房结构是36:41:23,矛盾突出表现在单人间设置得太少.93.2%病人希望拥有知情选择权,但仅约半数的病人反映医生在开处方时告之疗效及副作用并尊重病人的选择,而回答医生通常能告之价格的病人不到1/3,表明医生在知情选择方面做得不够,与病人的需求之间存在着显著矛盾.结论联合分析结果表明,提供出院后服务在5个研究因素中的相对重要性大,对病人评价整个医疗服务的影响大.

    作者:关勋强;郑玉华;吴其强;胡登利;刘永光;吴志坚;陈平雁;欧春泉 刊期: 2002年第05期

  • 卡氏肺孢子虫感染大鼠模型的建立及表面糖蛋白基因的克隆

    目的建立卡氏肺孢子虫感染大鼠模型并对卡氏肺孢子虫表面糖蛋白基因进行克隆,为进一步对该基因进行表达作前期准备.方法以地塞米松对大鼠进行免疫抑制,2周后喂予感染卡氏肺孢子虫的大鼠肺组织匀浆,再免疫抑制4周,诱导鼠模产生.经光镜及PCR检测证实阳性后,用PCR法扩增出卡氏肺孢子虫的表面糖蛋白基因并亚克隆入T载体,转化JM109大肠杆菌.结果经光镜和PCR检测证实实验组大鼠均感染了卡氏肺孢子虫;PCR产物经琼脂糖电泳后,扩增片段的长度为319bp.结论通过地塞米松免疫抑制和一次性喂予病原体可以建立卡氏肺孢子虫感染大鼠模型.

    作者:欧阳丽斯;莫庆仪;彭鸿娟;陈晓光;沈树满 刊期: 2002年第05期

  • 生发灵酊活血化瘀及促毛发生长作用的实验研究

    目的探讨生发灵酊剂对大鼠的活血化瘀及促毛发生长作用.方法分别建立大鼠急性血瘀、脱毛、气虚模型,用正常浓度、1/2浓度生发灵酊剂和空白对照液3种药物分别进行处理,检测各有关指标.结果急性血瘀大鼠的全血比粘度、血浆比粘度、全血还原粘度及红细胞比容均显著降低(P<0.05);脱毛大鼠的毛发生长生发灵组较对照组快(P<0.001);气虚大鼠全血粘度和红细胞比容显著降低(P<0.01).结论生发灵酊剂具有良好的活血化瘀和促毛发生长作用.

    作者:马平勃 刊期: 2002年第05期

  • 中文科技期刊图表中的文字用中文还是英文

    作者: 刊期: 2002年第05期

  • 电离辐射致小鼠骨髓基质细胞凋亡的研究

    目的探讨电离辐射致骨髓基质细胞(BMSC)凋亡的规律.方法采用流式细胞仪、电镜技术观察不同剂量60Coγ射线照射后BMSC的凋亡变化.结果经50 Gy剂量照射后,BMSC未见有明显的形态学改变,而经100和200 Gy照射后BMSC出现了明显的凋亡改变.流式细胞检测显示,经50 Gy剂量照射后,BMSC的凋亡率与正常对照相比变化不明显(P<0.05);100 Gy照射后BMSC的凋亡率出现了明显改变(P<0.01),而且这种变化始于照射后4 h,至照后24 h到达高峰,随后凋亡率慢慢下降;200 Gy照射组的凋亡率略高于100Gy组,但差异不明显(P<0.05).结论体外培养的BMSC受一定剂量的60Coγ射线照射后可发生凋亡,并具有较强的辐射抗性.

    作者:杨军;丁振华;罗成基;何佩;郑莉 刊期: 2002年第05期

  • 烫伤豚鼠痂下水肿液诱导肝细胞凋亡和坏死

    目的探讨烧伤痂下水肿液(STF)在诱导肝细胞凋亡和坏死中所起的作用.方法建立Ⅲ°30%体表总面积(TBSA)烫伤的豚鼠模型并提取其STF,将STF与正常肝细胞共同孵育12、24 h后检测细胞凋亡和坏死百分率,同时测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和谷丙转氨酶(ALT)活性.结果 STF刺激肝细胞12 h即可诱导肝细胞凋亡与坏死,随着刺激时间延长,肝细胞凋亡及坏死率增加,且肝细胞培养液中LDH和ALT的活性进一步增强.结论烧伤后STF可诱导肝细胞凋亡与坏死,在烧伤早期脏器损害中可能起重要作用.

    作者:李志清;周一平 刊期: 2002年第05期

  • 创伤后肝细胞凋亡与坏死的检测及其意义

    目的探讨严重创伤后肝细胞凋亡及坏死在急性肝功能障碍发病机制中的作用.方法复制多发性骨折合并休克的大鼠创伤模型,采用Annexin-V-Flous、碘化丙锭(propidiumiodid,PI)双标法经流式细胞仪检测创伤后各时间点肝细胞凋亡与坏死的数量变化,结合光镜、电镜和电泳观察细胞凋亡与坏死,并与肝功能变化相比较.结果创伤后早期肝细胞即发生凋亡和坏死,坏死肝细胞的数量进行性升高,与肝功能变化显著呈正相关;凋亡肝细胞在创伤后3 h达高峰,部分凋亡肝细胞发生继发性坏死,其数量与肝功能变化显著正相关.结论肝细胞坏死与凋亡是严重创伤后肝功能损害的重要原因,坏死肝细胞是肝功能损害的直接因素,凋亡肝细胞通过发生继发性坏死加重肝功能损害.

    作者:官健;吕琦;金大地;金丽娟 刊期: 2002年第05期

  • 基质金属蛋白酶9在异位子宫内膜中的表达

    目的通过研究基质金属蛋白酶(MMPs)在异位及在位子宫内膜中的表达,探讨MMPs在子宫内膜异位症中起的作用.方法采用明胶酶谱法对异位及在位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)进行测定,酶活性由凝胶图象分析系统进行分析.结果异位及在位内膜组织均有MMP-9的表达,异位内膜显著高于在位内膜,并且随子宫内膜异位症严重程度的增强,其表达增高.结论子宫内膜异位症病人异位内膜组织MMPs的表达增高,MMPs在异位组织的种植和侵袭过程中可能发挥重要作用.

    作者:刘学军;何援利;彭冬先 刊期: 2002年第05期

  • 双侧肾上腺原发性非霍奇金恶性淋巴瘤1例

    原发于肾上腺的恶性淋巴瘤非常少见,本文报道1例原发性双侧肾上腺弥漫性大B细胞淋巴瘤.

    作者:耿舰;丁彦青;李祖国 刊期: 2002年第05期

南方医科大学学报杂志

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