刘真喜;杨光之;朱梅刚
目的克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)4种黏附素(BabA、AlpA、AlpB和HopZ)的保守区,并对其进行序列及生物信息学分析,为研究Hp黏附素的分子机制和免疫原性提供实验基础.方法利用ANTHEPROTV4.3c软件分析已证实的Hp4种黏附素蛋白序列,发现共同保守区(命名为CB),推导出其DNA序列,设计CB特异引物,将PCR产物定向插入pET-22b(+)载体,构建保守区的重组克隆.DNA自动分析仪进行序列测定,生物信息学软件对其生物学特性进行分析.结果构建了4种黏附素共同保守区的重组质粒,测序显示CB基因长588 bp,该基因编码195个氨基酸,与4种黏附素保守区的同源性均达50%以上,ANTHEPROTV4.3c软件预测其蛋白质相对分子质量约为22 500,并显示出了良好的抗原性和疏水性.BLAST分析了836 767个序列,与其同源性达40%的均为Hp序列.结论Hp4种黏附素存在同源性接近的保守区,表明其黏附作用可能有相似的分子基础,生物信息学分析表明其具有优良的免疫原性和严格的种属特异性.
作者:白杨;张亚历;王继德;林焕健;张兆山;周殿元 刊期: 2002年第10期
目的观察犬肺移植中供体离体保存后肺组织随时间延长而产生的结构变化.方法4℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺,灌注结束后离体保存30、60、120、180、240min.取材制作组织标本,观察不同时间点肺组织结构变化,以灌注前作为对照组.结果0min时肺组织结构清晰完整,肺泡上皮细胞线粒体轻微肿胀;30min时肺泡壁、血管周围组织轻微水肿;60 min时肺泡壁结构轻度破损,肺泡上皮细胞肿胀,线粒体肿胀较明显;120 min时部分肺泡壁断裂,肺泡腔融合;180min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成少量肺大泡;240min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成多个肺大泡,肺泡上皮细胞泡浆空泡变,Ⅱ型肺泡细胞板层小体模糊不清,空泡变明显,微绒毛已消失.结论改进型EC液离体保存4 h内对离体保存肺组织细胞无明显损伤,4 h后肺损伤较为严重.
作者:孟辉;高玲;申洪;陈钢;蔡瑞君;穆峰;赵菲 刊期: 2002年第10期
目的测定人精子冷藏在4℃无电解质溶液(EF溶液)中是否保持正常受精能力.方法人精子冷藏在EF溶液中,分别测定其活动率、顶体状态和受精指数.结果人精子冷藏在4℃EF溶液中1周,其活动率明显高于冷藏在缓冲的人输卵管溶液中[(43.4±7.9)%比(9.5±2.5)%,P<0.01].虽然冷藏在EF溶液中的人精子顶体状态在重激活前与新鲜精子无明显不同[获能精子为(7.6±1.8)%比(6.4±1.8)%,顶体反应精子为(3.0±1.7)%比(2.4±1.1)%,P>0.05],但是前者在重激活后其获能精子和顶体反应精子的百分率明显增加[获能精子为(16.0±2.3)%比(7.6±1.8)%,顶体反应精子为(9.4±2.1)%比(3.0±1.7)%,P<0.01].冷藏在EF溶液中精子的穿透率和受精指数与新鲜精子相似(48.1%比50.9%,1.38±0.16比1.29±0.13,P>0.05).结论人精子冷藏在4℃EF溶液中1周,不发生获能和顶体反应,重激活后具有与新鲜精子一样的受精能力.
作者:全松;周海宽;山野修司;中坂尚代;青野敏博 刊期: 2002年第10期
目的探讨提高非小细胞肺癌放射治疗疗效而不增加放射损伤的方法.方法135例非小细胞肺癌患者中62例行大分割适形放疗,6~8 Gy/次,隔日1次,总剂量48~64 Gy,共6~8次,总疗程2~3周;73例行常规分割放疗,2 Gy/次,5次/周,总剂量60~70 Gy,共30~35次,总疗程6~7周.对比观察治疗后1、2年肺内局部病灶控制率、生存率以及放射性肺、食道损伤发生率.结果放疗后3个月,常规分割放疗组和大分割适形放疗组病灶完全消失率分别为44.9%和77.8%,有效率分别为94.4%和100%,两组治疗效果有显著差异(P<0.01);两组1年生存率分别为42.5%和77.8%(P<0.01),2年生存率分别为30.1%和48.6%(P<0.01),两组局部病灶控制率有显著差异(P<0.01);两组放射性肺、食道损伤发生率无统计学差异.结论非小细胞肺癌大分割适形放疗疗效优于常规分割放疗.
作者:徐素俊;石玉生;宋海春;陈龙华 刊期: 2002年第10期
综述了中药通过抑制细胞因子的表达、抑制肾成纤维细胞的增殖和促凋亡及其他途径干预肾间质纤维化的研究进展.
作者:魏连波;马志刚;叶任高;陈宝田;战胜才;黄璜 刊期: 2002年第10期
目的探讨EB病毒感染与人大肠癌发生的关系.方法用原位分子杂交法对130例人大肠癌标本中EB病毒小分子RNA片段进行检测.结果130例标本中有6例(4.48%)癌组织呈阳性反应,其中4例为男性,4例有明显淋巴细胞浸润.结论EB病毒感染可能与我国部分大肠腺癌的发生有关,肿瘤细胞间质中大量淋巴细胞浸润可能是EB病毒感染的重要病理学特征.
作者:刘换新;丁彦青;孙亚欧;梁力;杨玉芳;齐宗利;刘继红;熊萍霞 刊期: 2002年第10期
目的观察透皮促渗剂对盐酸丁丙诺啡凝胶体外透皮特性的影响.方法实验分为无促渗剂组和促渗剂组,其中无促渗剂组又分为含0.5%、1%、2%盐酸丁丙诺啡3组;促渗剂组根据含促渗剂不同又分为氮酮、油酸和混合组,氮酮组再分含1%、2%、4%氮酮3组,油酸组再分含2%、4%、6%油酸3组,混合组含4%油酸+4%氮酮.以无毛小鼠皮肤为渗透屏障,进行体外渗透试验,分析该凝胶稳态透皮速率(Js)和Js提高率.结果无促渗剂3组Js分别为(0.69±0.11)、(0.90±0.14)和(1.18±0.10)μg/cm2@h,Js提高率分别为0.76、1.00和1.31,组间差异不显著(P>0.05);混合组促渗效果明显,Js为(13.22±1.27)μg/cm2@h,与4%油酸组和4%氮酮组比较,Js提高率为1.8和1.3(P<0.05),与对照组比较,Js提高率为14.6(P<0.01).结论盐酸丁丙诺啡凝胶具有良好的透皮特性,适当加入促渗剂油酸或氮酮可以显著提高其Js,使其释放近似零级动力学模型.
作者:黄波;古妙宁;李国锋;林春水;郭丹 刊期: 2002年第10期
目的制备一种以胶原为基质的组织工程支架材料,并研究其血液相容性及组织相容性.方法采用物理、化学及物理/化学方法对胶原材料进行交联.结果动态凝血试验显示,通过不同方法交联后的胶原材料,D(λ)值随着与血液接触时间的延长而下降,其中,通过碳化二亚胺交联得到的胶原在与血液接触相同时间后测得的D(λ)值高;溶血率的数据表明,交联后的胶原材料溶血率均小于5%;血小板粘附与变形电镜照片显示,血液在3种材料表面均未引起血小板的变形,且粘附数量较少.结论3种交联法制备的胶原材料都有较好的血液相容性,材料表面细胞生长状况良好,表明材料具有良好的组织相容性.
作者:牟善松;马安德;屠美;李立华;周长忍 刊期: 2002年第10期
目的从慢性髓系白血病(CML)的诊断、分期、风险率分组及治疗方案等4个方面来探讨患者骨髓细胞遗传学改变与疾病之间的关系.方法155例CML患者按<血液病诊断及疗效标准>及Sokal危险指数进行分期分组,取骨髓行常规G显带后进行核型分析.结果155例CML患者中,Ph1㈩148例(95.5%),Ph1(-)7例(4.5%);21例慢性期CML发生附加染色体畸变,占慢性期患者总数的15.6%;所有急变或加速期患者均发现有Ph1染色体,14例(70%)有附加染色体数量和/或结构异常,比慢性期患者多见;Ph1㈩细胞百分率不随病程而改变.结论慢性期CML是一组高度异质性疾病,肿瘤生物学恶性的高低决定了病人的预后.CML进入加速、急变期是肿瘤演化的结果,多伴有非随机的附加染色体异常,这些染色体的出现可作为预后评估的指标;同时细胞遗传学分析有助于CML的疗效判断及指导治疗,有利于发现新的肿瘤演化克隆.
作者:杜庆锋;刘晓力;宋兰琳;张嵩;周淑芸 刊期: 2002年第10期
目的比较国产与进口低分子肝素在血液透析中的抗凝效果和安全性.方法60例血液透析病人随机分为2组,透析过程中分别注射单剂量国产和进口低分子肝素.透析时取血检测部分凝血活酶时间(aPTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)及因子Xa活性;透析结束后观察透析器及管道凝血情况、动脉穿刺点压迫止血时间.结果两组病人体外循环凝血发生率低且无显著差异,患者均无出血倾向.两组患者在动脉穿刺点压迫止血时间、血浆因子Xa水平及aPTT、TT、PT的变化等方面均无显著差异(P>0.05).结论国产与进口低分子肝素在血液透析中的抗凝效果及安全性基本相同,国产低分子肝素可替代进口低分子肝素.
作者:刘志强;王力;刘俊 刊期: 2002年第10期
报告12例坏疽性脓皮病患者的性别与年龄构成、并发症、实验室检查、治疗经过和结果,对该病的病因、治疗和预后进行了讨论.
作者:颉玉胜;曾抗;彭学标;颉乐栋 刊期: 2002年第10期
目的探讨异基因脐血干细胞移植植活证据检测中简单易行的方法.方法取供者和受者移植前及移植后15、300d的标本,抽提DNA.根据已发表的基因序列设计合成两对引物,采用PCR-SSP方法检测MN血型基因型.结果供者为NN型,受者移植前为MM型,移植后15 d为MN型(嵌合型),移植后300d为NN型(供者型).NN基因在移植植活证据中作为供者的标记物在受者体内发现.结论采用MN血型基因型检测作为植活证据,可以对异基因脐血干细胞移植进行早期监控,且标本量小,较其他方法更加敏感.
作者:刘忠;兰炯采;何立群;张印则;吕蓉;方勤;郭晓捷 刊期: 2002年第10期
目的观察鬼臼毒素脂质体皮肤外用时的释药方式和药物在皮肤中的滞留量.方法以超声波法制备鬼臼毒素的二棕榈酸磷脂酰胆碱(DPPC)和大豆卵磷脂两种脂质体悬液,将相同浓度的鬼臼毒素酊剂及两种鬼臼毒素脂质体悬液涂于幼猪的背部皮肤上,以空臼脂质体、空白酊剂作为对照.观察48 h内不同时间段、不同制剂中的鬼臼毒素在皮肤中的滞留量.结果鬼臼毒素酊剂在用药l h后皮肤中出现药物高峰,随即很快下降;大豆卵磷脂脂质体鬼臼毒素在皮肤中缓慢释放,无明显药物高峰出现,药物浓度持续高于鬼臼毒素酊剂;DPPC脂质体鬼臼毒素用药后4 h在皮肤中出现药物高峰,然后缓慢下降至一定水平后,药物浓度维持稳定,48 h内药物浓度一直显著高于鬼臼毒素酊剂及鬼臼毒素大豆卵磷脂脂质体.结论DPPC脂质体包裹鬼臼毒素外用具有更好的皮肤靶向性,是较好的皮肤外用制剂.
作者:江彬彬;张三泉;曾抗;孙乐栋;颉玉胜 刊期: 2002年第10期
目的观察肝癌形成过程中明胶酶表达(蛋白及mRNA水平)的动态变化,探索明胶酶在肝癌生长浸润中的作用.方法应用免疫组化法、明胶酶谱法和RT-PCR法对大鼠肝癌形成过程中各期明胶酶表达情况进行观察,并与正常对照组进行比较分析.结果正常肝组织及肝硬化组织内明胶酶有表达,肝癌形成后主要在癌细胞内表达;明胶酶原在正常肝组织中有低表达,诱癌过程中呈持续增高趋势;明胶酶-2mRNA与其酶蛋白表达趋向一致.结论在肝癌形成过程中明胶酶转录和翻译水平均呈持续增高趋势.
作者:高教;张志;蒋泽生;方石岗;孙尔维;王宇;陈保华 刊期: 2002年第10期
患者男,23岁,被刀刺伤,左胸第4肋间4 cm伤口,血压0/0 kPa,处于濒死状态.伤后16 min经左前外侧切口第4肋间行急诊室剖胸术,探查见:胸腔积血2 500ml,心包4 cm伤口,心脏2 cm伤口,左肺上叶5 cm伤口.4 min内成功地用心包做垫片缝合心脏3针.病人8d后痊愈出院.
作者:吴旭;王武军;桑显富;胡振富;陈钢;陈东升;郭刚;向前;田柯;彭月华 刊期: 2002年第10期
目的制备抗人脑源性神经营养因子(BDNF)单克隆抗体.方法利用BDNF纯品与酸处理后的沙门氏菌菌体(抗原:菌体为1:5)混合免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb.结果获得3株抗BDNF的单克隆抗体,分别命名为B1、B2和4D1,mAb的Ig亚类均为IgG1.ELISA间接法测定腹水mAb效价为1×10-6~1×10-5,各单抗相对亲和力结果为B2>B1>4D1.结论成功研制出抗人BDNF单克隆抗体,为进一步研究BDNF在体内组织的表达及分布提供了一种工具,并为基因工程制备BDNF提供了检测方法.
作者:苏瑾;张亚莉;尤长宣;吴锦雅;车小燕;王小宁 刊期: 2002年第10期
目的观察睡眠剥夺对大鼠脑组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLU)含量的影响.方法用小平台水环境法对大鼠进行连续96 h快速动眼相睡眠剥夺,以正常饲养组及大平台组为对照,高效液相色谱法测定睡眠剥夺后大鼠额叶皮质、脑干、下丘脑等脑区GABA、GLU含量的变化.结果睡眠剥夺后大鼠各脑区脑组织GABA含量、GABA/GLU值均较对照组明显增高(P<0.01),而GLU含量在脑干、下丘脑两脑区亦较对照组明显增高(P<0.05).结论睡眠剥夺可伴有大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量及比例的变化.
作者:王升旭;李求实 刊期: 2002年第10期
目的探讨可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ(sHLA-Ⅰ)的定量检测技术,并用于检测广东地区人群的参考值.方法以W6/32包被酶标板,捕捉样品中sHLA-Ⅰ,β2微球蛋白抗体为一抗,再加酶标二抗及底物显色.根据不同浓度标准sHLA-Ⅰ显色后Dλ值的标准曲线,检测60例正常广东人的sHLA-Ⅰ含量.结果sHLA-Ⅰ低检测限为2.84 ng/ml,批内变异系数为5.80%,批间变异系数为9.00%,回收率为98.57%~100.15%.广东人sHLA-Ⅰ正常值为(699.54±360.10)ng/ml.结论ELISA法检测sHLA-Ⅰ具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点.
作者:吴涛;兰炯采;张泓;王从容;毛高才 刊期: 2002年第10期
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者丙型肝炎病毒(HCV)感染的发生率及其临床意义.方法用ELISA-3、RIBA-3及PCR检测134例SLE患者和200名正常献血者的HCV感染情况,并分析临床与免疫学其特征.结果15名SLE患者(13%)和2名正常对照(1%)HCV抗体阳性(P<0.001).与未合并HCV感染的SLE患者相比,合并HCV感染的SLE患者皮肤表现、dsDNA抗体阳性发生率低(P=0.01,P<0.001),肝脏损害、低补体血症、冷球蛋白血症发生率高(P<0.001,P<0.05,P=0.03).结论SLE患者合并HCV感染的发生率显著高于正常人群,HCV抗体阳性SLE患者显示出特异的临床和免疫学表现.
作者:秦春玲;杨庆永;廖元兴 刊期: 2002年第10期
目的探讨创伤性休克后血清一氧化氮(NO)浓度的动态变化及其机制.方法通过外力致鼠双侧后肢骨折,制作创伤性休克模型,Griess法测定休克过程中多时间点血清NO3-/NO2-浓度.结果休克过程中血清NO无明显变化,复苏后早期(1 h)显著下降,6 h达峰值,其后血清NO维持较高水平,24 h仍显著升高.休克未复苏鼠血清NO无显著变化.结论创伤性休克时血中NO无显著变化,复苏后先有一过性NO减少,继而血中NO升高,持续至24 h,再灌注损伤是复苏后期NO合成增多的重要原因.
作者:冯浩淼;黄宗海;黄绪亮;宋慧娟;孙英刚;林洪武 刊期: 2002年第10期