学术投稿

抗人脑源性神经营养因子单克隆抗体的制备及初步鉴定

苏瑾;张亚莉;尤长宣;吴锦雅;车小燕;王小宁

关键词:脑源性神经营养因子, 抗体, 单克隆, 杂交瘤技术, 酶联免疫吸附测定
摘要:目的制备抗人脑源性神经营养因子(BDNF)单克隆抗体.方法利用BDNF纯品与酸处理后的沙门氏菌菌体(抗原:菌体为1:5)混合免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb.结果获得3株抗BDNF的单克隆抗体,分别命名为B1、B2和4D1,mAb的Ig亚类均为IgG1.ELISA间接法测定腹水mAb效价为1×10-6~1×10-5,各单抗相对亲和力结果为B2>B1>4D1.结论成功研制出抗人BDNF单克隆抗体,为进一步研究BDNF在体内组织的表达及分布提供了一种工具,并为基因工程制备BDNF提供了检测方法.
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  • 国产与进口低分子肝素在血液透析中抗凝作用的比较

    目的比较国产与进口低分子肝素在血液透析中的抗凝效果和安全性.方法60例血液透析病人随机分为2组,透析过程中分别注射单剂量国产和进口低分子肝素.透析时取血检测部分凝血活酶时间(aPTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)及因子Xa活性;透析结束后观察透析器及管道凝血情况、动脉穿刺点压迫止血时间.结果两组病人体外循环凝血发生率低且无显著差异,患者均无出血倾向.两组患者在动脉穿刺点压迫止血时间、血浆因子Xa水平及aPTT、TT、PT的变化等方面均无显著差异(P>0.05).结论国产与进口低分子肝素在血液透析中的抗凝效果及安全性基本相同,国产低分子肝素可替代进口低分子肝素.

    作者:刘志强;王力;刘俊 刊期: 2002年第10期

  • 大鼠创伤性休克后血清一氧化氮的动态变化及其机制

    目的探讨创伤性休克后血清一氧化氮(NO)浓度的动态变化及其机制.方法通过外力致鼠双侧后肢骨折,制作创伤性休克模型,Griess法测定休克过程中多时间点血清NO3-/NO2-浓度.结果休克过程中血清NO无明显变化,复苏后早期(1 h)显著下降,6 h达峰值,其后血清NO维持较高水平,24 h仍显著升高.休克未复苏鼠血清NO无显著变化.结论创伤性休克时血中NO无显著变化,复苏后先有一过性NO减少,继而血中NO升高,持续至24 h,再灌注损伤是复苏后期NO合成增多的重要原因.

    作者:冯浩淼;黄宗海;黄绪亮;宋慧娟;孙英刚;林洪武 刊期: 2002年第10期

  • 白细胞介素-1β在体外受精-胚胎移植患者卵巢颗粒细胞的表达及意义

    目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者卵巢黄素化颗粒细胞表面的表达及与生殖内分泌的关系.方法IVF-ET患者36例,采用长周期超促排卵方案,注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)34~36 h后,超声引导下经阴道取卵时留取卵泡液,离心后分离纯化颗粒细胞,应用流式细胞计数检测颗粒细胞表面IL-1β蛋白的表达,酶联免疫吸附试验检测卵泡液中IL-1β的浓度,放射免疫法检测激素浓度.结果行IVF-ET激素刺激周期的妇女,卵泡液中可检测到IL-1β,血清中IL-1β浓度类似黄体生成素的变化规律.阴性对照组与实验组颗粒细胞表面IL-1β表达有显著差异[(0.75±0.12)%与(40.20±3.86)%,P<0.001].注射hCG日血清IL-1β的浓度与血清雌二醇浓度呈正相关(r=0.92,P<0.001),与孕酮浓度呈负相关(r=-0.34,P<0.05).结论卵泡液中IL-1β不仅来源于血浆超滤液,而且由黄素化颗粒细胞分泌,再作用于黄素化颗粒细胞,抑制颗粒细胞分泌孕酮,影响黄体功能.提示IL-1β通过自分泌/旁分泌方式参与生殖内分泌活动.

    作者:王雪峰;邢福祺;陈士岭 刊期: 2002年第10期

  • 钾通道阻断剂对低氧/复氧诱导的培养海马神经元死亡的防护作用

    目的研究钾通道阻断剂对单纯低氧/复氧诱导的培养海马神经元死亡的防护作用.方法培养8 d的海马神经元置于低氧环境(95%N2/5%CO2)6h,复氧再培养直至72 h,复氧后0.5 h培养液内分别给予不同钾通道阻断剂,用细胞计数及MTT比色法检测神经元死亡情况.结果低氧/复氧诱导培养海马神经元出现迟发性死亡;四乙铵以剂量依赖性的方式防护低氧/复氧诱导的培养海马神经元免于死亡;大电导钙激活钾通道(BK通道)阻断剂iberiotoxin(IbTX)可完全消除低氧/复氧诱导的神经元死亡(P<0.001);A型钾通道阻断剂4-氨基吡啶不能防护低氧/复氧诱导的神经元免于死亡(P>0.05).结论钾通道阻断剂四乙铵和IbTX能防护低氧/复氧诱导的培养海马神经元免于死亡,提示某些类型的钾通道尤其是BK通道活动增强可能参与了低氧/复氧诱导的培养海马神经元死亡.

    作者:陈明;孙红宇;王颖;高天明 刊期: 2002年第10期

  • 英文医学科技论文中副词的使用

    简要总结了英文医学科技论文中副词的用法,对副词在句中的位置作了翔实阐述.

    作者:王征爱;宋建武 刊期: 2002年第10期

  • 合并丙型肝炎病毒感染的系统性红斑狼疮患者临床与免疫学特征

    目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者丙型肝炎病毒(HCV)感染的发生率及其临床意义.方法用ELISA-3、RIBA-3及PCR检测134例SLE患者和200名正常献血者的HCV感染情况,并分析临床与免疫学其特征.结果15名SLE患者(13%)和2名正常对照(1%)HCV抗体阳性(P<0.001).与未合并HCV感染的SLE患者相比,合并HCV感染的SLE患者皮肤表现、dsDNA抗体阳性发生率低(P=0.01,P<0.001),肝脏损害、低补体血症、冷球蛋白血症发生率高(P<0.001,P<0.05,P=0.03).结论SLE患者合并HCV感染的发生率显著高于正常人群,HCV抗体阳性SLE患者显示出特异的临床和免疫学表现.

    作者:秦春玲;杨庆永;廖元兴 刊期: 2002年第10期

  • 反应停治疗老年难治性多发性骨髓瘤1例报告

    我们对经大剂量化疗效果不佳的1例难治性多发性骨髓瘤(MM)患者应用反应停治疗,疗效显著,现报道如下.

    作者:平宝红;陈琪;周淑云;王丽 刊期: 2002年第10期

  • 胆囊息肉样病变的手术指征探讨

    目的探讨胆囊息肉样病变的临床和病理学特点及其对判断手术指征的意义.方法对244例经手术切除的胆囊息肉样病变的临床、影像学、病理学资料进行统计分析.结果良性息肉235例(96.31%);恶性息肉9例(3.69%),恶性息肉直径多大于1.0 cm且多为单发.结论单发、直径>1.0 cm、年龄>50岁、合并胆囊结石等为恶性病变的高危因素,宜行手术切除.

    作者:何祖明;胡新桥;周志秀 刊期: 2002年第10期

  • 抗人脑源性神经营养因子单克隆抗体的制备及初步鉴定

    目的制备抗人脑源性神经营养因子(BDNF)单克隆抗体.方法利用BDNF纯品与酸处理后的沙门氏菌菌体(抗原:菌体为1:5)混合免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb.结果获得3株抗BDNF的单克隆抗体,分别命名为B1、B2和4D1,mAb的Ig亚类均为IgG1.ELISA间接法测定腹水mAb效价为1×10-6~1×10-5,各单抗相对亲和力结果为B2>B1>4D1.结论成功研制出抗人BDNF单克隆抗体,为进一步研究BDNF在体内组织的表达及分布提供了一种工具,并为基因工程制备BDNF提供了检测方法.

    作者:苏瑾;张亚莉;尤长宣;吴锦雅;车小燕;王小宁 刊期: 2002年第10期

  • 双黄连注射液致肺水肿1例报告

    双黄连注射液具有抗病毒和抗菌作用,也能增强机体的免疫功能,近年在儿科临床得到广泛应用.我们在用药过程中发现双黄连注射液致肺水肿1例,现报告如下.

    作者:徐静;关英 刊期: 2002年第10期

  • 185例不同龄女胎卵巢发育及卵巢血管观察

    目的为胎儿卵巢移植供体选择和佳移植方法提供理论依据.方法取185例不同胎龄、因胎儿或孕妇疾病不宜继续妊娠而引产的女胎或死胎、死产的女婴卵巢,在显微镜下进行组织切片检查,观察各胎龄卵巢含有初级卵母细胞、原始卵泡和初级卵泡数,测量各胎龄卵巢大小、卵巢血管外径及观察其血管来源.结果孕21周后卵巢即有大量初级卵母细胞和原始卵泡,两者比例大致相等;孕20~32周卵巢血管外径均<2 mm;双侧卵巢血管来自肾动脉者占40.54%,来自腹主动脉者占35.14%,右侧卵巢动脉来自腹主动脉、左侧来自肾动脉者占24.32%.结论孕21周以上的卵巢可作移植,卵巢埋植移植术为首选方法.但因卵巢血管外径太细,血管吻合术要求高、难度大、成功率低.

    作者:杨日普;张晨芳 刊期: 2002年第10期

  • 濒死的失血休克型心脏穿透伤急诊室剖胸成功1例报告

    患者男,23岁,被刀刺伤,左胸第4肋间4 cm伤口,血压0/0 kPa,处于濒死状态.伤后16 min经左前外侧切口第4肋间行急诊室剖胸术,探查见:胸腔积血2 500ml,心包4 cm伤口,心脏2 cm伤口,左肺上叶5 cm伤口.4 min内成功地用心包做垫片缝合心脏3针.病人8d后痊愈出院.

    作者:吴旭;王武军;桑显富;胡振富;陈钢;陈东升;郭刚;向前;田柯;彭月华 刊期: 2002年第10期

  • MN基因型定型在异基因脐血干细胞移植植活证据检测中的应用

    目的探讨异基因脐血干细胞移植植活证据检测中简单易行的方法.方法取供者和受者移植前及移植后15、300d的标本,抽提DNA.根据已发表的基因序列设计合成两对引物,采用PCR-SSP方法检测MN血型基因型.结果供者为NN型,受者移植前为MM型,移植后15 d为MN型(嵌合型),移植后300d为NN型(供者型).NN基因在移植植活证据中作为供者的标记物在受者体内发现.结论采用MN血型基因型检测作为植活证据,可以对异基因脐血干细胞移植进行早期监控,且标本量小,较其他方法更加敏感.

    作者:刘忠;兰炯采;何立群;张印则;吕蓉;方勤;郭晓捷 刊期: 2002年第10期

  • 以胶原为基质的组织工程支架材料的制备及组织相容性研究

    目的制备一种以胶原为基质的组织工程支架材料,并研究其血液相容性及组织相容性.方法采用物理、化学及物理/化学方法对胶原材料进行交联.结果动态凝血试验显示,通过不同方法交联后的胶原材料,D(λ)值随着与血液接触时间的延长而下降,其中,通过碳化二亚胺交联得到的胶原在与血液接触相同时间后测得的D(λ)值高;溶血率的数据表明,交联后的胶原材料溶血率均小于5%;血小板粘附与变形电镜照片显示,血液在3种材料表面均未引起血小板的变形,且粘附数量较少.结论3种交联法制备的胶原材料都有较好的血液相容性,材料表面细胞生长状况良好,表明材料具有良好的组织相容性.

    作者:牟善松;马安德;屠美;李立华;周长忍 刊期: 2002年第10期

  • 鬼臼毒素二棕榈酸磷脂酰胆碱脂质体局部外用的实验研究

    目的观察鬼臼毒素脂质体皮肤外用时的释药方式和药物在皮肤中的滞留量.方法以超声波法制备鬼臼毒素的二棕榈酸磷脂酰胆碱(DPPC)和大豆卵磷脂两种脂质体悬液,将相同浓度的鬼臼毒素酊剂及两种鬼臼毒素脂质体悬液涂于幼猪的背部皮肤上,以空臼脂质体、空白酊剂作为对照.观察48 h内不同时间段、不同制剂中的鬼臼毒素在皮肤中的滞留量.结果鬼臼毒素酊剂在用药l h后皮肤中出现药物高峰,随即很快下降;大豆卵磷脂脂质体鬼臼毒素在皮肤中缓慢释放,无明显药物高峰出现,药物浓度持续高于鬼臼毒素酊剂;DPPC脂质体鬼臼毒素用药后4 h在皮肤中出现药物高峰,然后缓慢下降至一定水平后,药物浓度维持稳定,48 h内药物浓度一直显著高于鬼臼毒素酊剂及鬼臼毒素大豆卵磷脂脂质体.结论DPPC脂质体包裹鬼臼毒素外用具有更好的皮肤靶向性,是较好的皮肤外用制剂.

    作者:江彬彬;张三泉;曾抗;孙乐栋;颉玉胜 刊期: 2002年第10期

  • 二乙基亚硝胺诱导大鼠肝细胞癌过程中明胶酶的动态变化

    目的观察肝癌形成过程中明胶酶表达(蛋白及mRNA水平)的动态变化,探索明胶酶在肝癌生长浸润中的作用.方法应用免疫组化法、明胶酶谱法和RT-PCR法对大鼠肝癌形成过程中各期明胶酶表达情况进行观察,并与正常对照组进行比较分析.结果正常肝组织及肝硬化组织内明胶酶有表达,肝癌形成后主要在癌细胞内表达;明胶酶原在正常肝组织中有低表达,诱癌过程中呈持续增高趋势;明胶酶-2mRNA与其酶蛋白表达趋向一致.结论在肝癌形成过程中明胶酶转录和翻译水平均呈持续增高趋势.

    作者:高教;张志;蒋泽生;方石岗;孙尔维;王宇;陈保华 刊期: 2002年第10期

  • 盐酸丁丙诺啡凝胶体外透皮渗透实验研究

    目的观察透皮促渗剂对盐酸丁丙诺啡凝胶体外透皮特性的影响.方法实验分为无促渗剂组和促渗剂组,其中无促渗剂组又分为含0.5%、1%、2%盐酸丁丙诺啡3组;促渗剂组根据含促渗剂不同又分为氮酮、油酸和混合组,氮酮组再分含1%、2%、4%氮酮3组,油酸组再分含2%、4%、6%油酸3组,混合组含4%油酸+4%氮酮.以无毛小鼠皮肤为渗透屏障,进行体外渗透试验,分析该凝胶稳态透皮速率(Js)和Js提高率.结果无促渗剂3组Js分别为(0.69±0.11)、(0.90±0.14)和(1.18±0.10)μg/cm2@h,Js提高率分别为0.76、1.00和1.31,组间差异不显著(P>0.05);混合组促渗效果明显,Js为(13.22±1.27)μg/cm2@h,与4%油酸组和4%氮酮组比较,Js提高率为1.8和1.3(P<0.05),与对照组比较,Js提高率为14.6(P<0.01).结论盐酸丁丙诺啡凝胶具有良好的透皮特性,适当加入促渗剂油酸或氮酮可以显著提高其Js,使其释放近似零级动力学模型.

    作者:黄波;古妙宁;李国锋;林春水;郭丹 刊期: 2002年第10期

  • 改良EC液低温灌注犬肺离体肺组织形态学变化的研究

    目的观察犬肺移植中供体离体保存后肺组织随时间延长而产生的结构变化.方法4℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺,灌注结束后离体保存30、60、120、180、240min.取材制作组织标本,观察不同时间点肺组织结构变化,以灌注前作为对照组.结果0min时肺组织结构清晰完整,肺泡上皮细胞线粒体轻微肿胀;30min时肺泡壁、血管周围组织轻微水肿;60 min时肺泡壁结构轻度破损,肺泡上皮细胞肿胀,线粒体肿胀较明显;120 min时部分肺泡壁断裂,肺泡腔融合;180min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成少量肺大泡;240min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成多个肺大泡,肺泡上皮细胞泡浆空泡变,Ⅱ型肺泡细胞板层小体模糊不清,空泡变明显,微绒毛已消失.结论改进型EC液离体保存4 h内对离体保存肺组织细胞无明显损伤,4 h后肺损伤较为严重.

    作者:孟辉;高玲;申洪;陈钢;蔡瑞君;穆峰;赵菲 刊期: 2002年第10期

  • 冷藏在无电解质溶液中人精子的受精能力

    目的测定人精子冷藏在4℃无电解质溶液(EF溶液)中是否保持正常受精能力.方法人精子冷藏在EF溶液中,分别测定其活动率、顶体状态和受精指数.结果人精子冷藏在4℃EF溶液中1周,其活动率明显高于冷藏在缓冲的人输卵管溶液中[(43.4±7.9)%比(9.5±2.5)%,P<0.01].虽然冷藏在EF溶液中的人精子顶体状态在重激活前与新鲜精子无明显不同[获能精子为(7.6±1.8)%比(6.4±1.8)%,顶体反应精子为(3.0±1.7)%比(2.4±1.1)%,P>0.05],但是前者在重激活后其获能精子和顶体反应精子的百分率明显增加[获能精子为(16.0±2.3)%比(7.6±1.8)%,顶体反应精子为(9.4±2.1)%比(3.0±1.7)%,P<0.01].冷藏在EF溶液中精子的穿透率和受精指数与新鲜精子相似(48.1%比50.9%,1.38±0.16比1.29±0.13,P>0.05).结论人精子冷藏在4℃EF溶液中1周,不发生获能和顶体反应,重激活后具有与新鲜精子一样的受精能力.

    作者:全松;周海宽;山野修司;中坂尚代;青野敏博 刊期: 2002年第10期

  • 睡眠剥夺对大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响

    目的观察睡眠剥夺对大鼠脑组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLU)含量的影响.方法用小平台水环境法对大鼠进行连续96 h快速动眼相睡眠剥夺,以正常饲养组及大平台组为对照,高效液相色谱法测定睡眠剥夺后大鼠额叶皮质、脑干、下丘脑等脑区GABA、GLU含量的变化.结果睡眠剥夺后大鼠各脑区脑组织GABA含量、GABA/GLU值均较对照组明显增高(P<0.01),而GLU含量在脑干、下丘脑两脑区亦较对照组明显增高(P<0.05).结论睡眠剥夺可伴有大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量及比例的变化.

    作者:王升旭;李求实 刊期: 2002年第10期

南方医科大学学报杂志

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