学术投稿

恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定

李林海;李明;吴英松;王萍;田泽维

关键词:疟原虫, 恶性, 谷氨酸脱氢酶, 免疫活性
摘要:目的在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性.方法采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)GDH基因,双酶切后克隆人pGEX-4T-1载体中进行诱导表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western blotting检测重组抗原的免疫活性.结果获到了重组表达的抗原蛋白,表达产物能与鼠抗恶性疟原虫血清发生特异反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法检测抗体滴度为1:16.结论恶性疟原虫GDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性.
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  • 钾通道阻断剂对低氧/复氧诱导的培养海马神经元死亡的防护作用

    目的研究钾通道阻断剂对单纯低氧/复氧诱导的培养海马神经元死亡的防护作用.方法培养8 d的海马神经元置于低氧环境(95%N2/5%CO2)6h,复氧再培养直至72 h,复氧后0.5 h培养液内分别给予不同钾通道阻断剂,用细胞计数及MTT比色法检测神经元死亡情况.结果低氧/复氧诱导培养海马神经元出现迟发性死亡;四乙铵以剂量依赖性的方式防护低氧/复氧诱导的培养海马神经元免于死亡;大电导钙激活钾通道(BK通道)阻断剂iberiotoxin(IbTX)可完全消除低氧/复氧诱导的神经元死亡(P<0.001);A型钾通道阻断剂4-氨基吡啶不能防护低氧/复氧诱导的神经元免于死亡(P>0.05).结论钾通道阻断剂四乙铵和IbTX能防护低氧/复氧诱导的培养海马神经元免于死亡,提示某些类型的钾通道尤其是BK通道活动增强可能参与了低氧/复氧诱导的培养海马神经元死亡.

    作者:陈明;孙红宇;王颖;高天明 刊期: 2002年第10期

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    作者:冯浩淼;黄宗海;黄绪亮;宋慧娟;孙英刚;林洪武 刊期: 2002年第10期

  • 185例不同龄女胎卵巢发育及卵巢血管观察

    目的为胎儿卵巢移植供体选择和佳移植方法提供理论依据.方法取185例不同胎龄、因胎儿或孕妇疾病不宜继续妊娠而引产的女胎或死胎、死产的女婴卵巢,在显微镜下进行组织切片检查,观察各胎龄卵巢含有初级卵母细胞、原始卵泡和初级卵泡数,测量各胎龄卵巢大小、卵巢血管外径及观察其血管来源.结果孕21周后卵巢即有大量初级卵母细胞和原始卵泡,两者比例大致相等;孕20~32周卵巢血管外径均<2 mm;双侧卵巢血管来自肾动脉者占40.54%,来自腹主动脉者占35.14%,右侧卵巢动脉来自腹主动脉、左侧来自肾动脉者占24.32%.结论孕21周以上的卵巢可作移植,卵巢埋植移植术为首选方法.但因卵巢血管外径太细,血管吻合术要求高、难度大、成功率低.

    作者:杨日普;张晨芳 刊期: 2002年第10期

  • 以胶原为基质的组织工程支架材料的制备及组织相容性研究

    目的制备一种以胶原为基质的组织工程支架材料,并研究其血液相容性及组织相容性.方法采用物理、化学及物理/化学方法对胶原材料进行交联.结果动态凝血试验显示,通过不同方法交联后的胶原材料,D(λ)值随着与血液接触时间的延长而下降,其中,通过碳化二亚胺交联得到的胶原在与血液接触相同时间后测得的D(λ)值高;溶血率的数据表明,交联后的胶原材料溶血率均小于5%;血小板粘附与变形电镜照片显示,血液在3种材料表面均未引起血小板的变形,且粘附数量较少.结论3种交联法制备的胶原材料都有较好的血液相容性,材料表面细胞生长状况良好,表明材料具有良好的组织相容性.

    作者:牟善松;马安德;屠美;李立华;周长忍 刊期: 2002年第10期

  • 大分割适形放疗和常规分割放疗对非小细胞肺癌原发灶的疗效分析

    目的探讨提高非小细胞肺癌放射治疗疗效而不增加放射损伤的方法.方法135例非小细胞肺癌患者中62例行大分割适形放疗,6~8 Gy/次,隔日1次,总剂量48~64 Gy,共6~8次,总疗程2~3周;73例行常规分割放疗,2 Gy/次,5次/周,总剂量60~70 Gy,共30~35次,总疗程6~7周.对比观察治疗后1、2年肺内局部病灶控制率、生存率以及放射性肺、食道损伤发生率.结果放疗后3个月,常规分割放疗组和大分割适形放疗组病灶完全消失率分别为44.9%和77.8%,有效率分别为94.4%和100%,两组治疗效果有显著差异(P<0.01);两组1年生存率分别为42.5%和77.8%(P<0.01),2年生存率分别为30.1%和48.6%(P<0.01),两组局部病灶控制率有显著差异(P<0.01);两组放射性肺、食道损伤发生率无统计学差异.结论非小细胞肺癌大分割适形放疗疗效优于常规分割放疗.

    作者:徐素俊;石玉生;宋海春;陈龙华 刊期: 2002年第10期

  • 改良EC液低温灌注犬肺离体肺组织形态学变化的研究

    目的观察犬肺移植中供体离体保存后肺组织随时间延长而产生的结构变化.方法4℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺,灌注结束后离体保存30、60、120、180、240min.取材制作组织标本,观察不同时间点肺组织结构变化,以灌注前作为对照组.结果0min时肺组织结构清晰完整,肺泡上皮细胞线粒体轻微肿胀;30min时肺泡壁、血管周围组织轻微水肿;60 min时肺泡壁结构轻度破损,肺泡上皮细胞肿胀,线粒体肿胀较明显;120 min时部分肺泡壁断裂,肺泡腔融合;180min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成少量肺大泡;240min时肺泡壁断裂,肺泡腔融合形成多个肺大泡,肺泡上皮细胞泡浆空泡变,Ⅱ型肺泡细胞板层小体模糊不清,空泡变明显,微绒毛已消失.结论改进型EC液离体保存4 h内对离体保存肺组织细胞无明显损伤,4 h后肺损伤较为严重.

    作者:孟辉;高玲;申洪;陈钢;蔡瑞君;穆峰;赵菲 刊期: 2002年第10期

  • 胆囊息肉样病变的手术指征探讨

    目的探讨胆囊息肉样病变的临床和病理学特点及其对判断手术指征的意义.方法对244例经手术切除的胆囊息肉样病变的临床、影像学、病理学资料进行统计分析.结果良性息肉235例(96.31%);恶性息肉9例(3.69%),恶性息肉直径多大于1.0 cm且多为单发.结论单发、直径>1.0 cm、年龄>50岁、合并胆囊结石等为恶性病变的高危因素,宜行手术切除.

    作者:何祖明;胡新桥;周志秀 刊期: 2002年第10期

  • 咬合力丧失对大鼠牙周组织白细胞介素-1β表达的影响

    目的检测正常咬合力及咬合力丧失状态下,白细胞介素-1β(IL-1β)在大鼠牙周细胞中的动态变化,初步探讨IL1β在牙周组织改建中的作用.方法选用Wistar大鼠建立正常咬合力及咬合力丧失动物模型.采用HE染色和免疫组化方法,观察两种咬合力状态下牙周形态的变化以及牙周组织中IL-1β表达的动态变化.结果咬合力丧失状态下,形态学显示牙周膜稀疏、结构紊乱,牙槽骨吸收;免疫组化显示咬合力丧失诱导IL-1β在牙周细胞中表达较正常咬合力时显著增强.结论牙周组织结构与功能在改建中具有一致性.

    作者:袁林;周伟东 刊期: 2002年第10期

  • 恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定

    目的在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性.方法采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)GDH基因,双酶切后克隆人pGEX-4T-1载体中进行诱导表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western blotting检测重组抗原的免疫活性.结果获到了重组表达的抗原蛋白,表达产物能与鼠抗恶性疟原虫血清发生特异反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法检测抗体滴度为1:16.结论恶性疟原虫GDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性.

    作者:李林海;李明;吴英松;王萍;田泽维 刊期: 2002年第10期

  • ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ及广东人参考值的测定

    目的探讨可溶性人类白细胞抗原-Ⅰ(sHLA-Ⅰ)的定量检测技术,并用于检测广东地区人群的参考值.方法以W6/32包被酶标板,捕捉样品中sHLA-Ⅰ,β2微球蛋白抗体为一抗,再加酶标二抗及底物显色.根据不同浓度标准sHLA-Ⅰ显色后Dλ值的标准曲线,检测60例正常广东人的sHLA-Ⅰ含量.结果sHLA-Ⅰ低检测限为2.84 ng/ml,批内变异系数为5.80%,批间变异系数为9.00%,回收率为98.57%~100.15%.广东人sHLA-Ⅰ正常值为(699.54±360.10)ng/ml.结论ELISA法检测sHLA-Ⅰ具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点.

    作者:吴涛;兰炯采;张泓;王从容;毛高才 刊期: 2002年第10期

  • 国产与进口低分子肝素在血液透析中抗凝作用的比较

    目的比较国产与进口低分子肝素在血液透析中的抗凝效果和安全性.方法60例血液透析病人随机分为2组,透析过程中分别注射单剂量国产和进口低分子肝素.透析时取血检测部分凝血活酶时间(aPTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)及因子Xa活性;透析结束后观察透析器及管道凝血情况、动脉穿刺点压迫止血时间.结果两组病人体外循环凝血发生率低且无显著差异,患者均无出血倾向.两组患者在动脉穿刺点压迫止血时间、血浆因子Xa水平及aPTT、TT、PT的变化等方面均无显著差异(P>0.05).结论国产与进口低分子肝素在血液透析中的抗凝效果及安全性基本相同,国产低分子肝素可替代进口低分子肝素.

    作者:刘志强;王力;刘俊 刊期: 2002年第10期

  • MN基因型定型在异基因脐血干细胞移植植活证据检测中的应用

    目的探讨异基因脐血干细胞移植植活证据检测中简单易行的方法.方法取供者和受者移植前及移植后15、300d的标本,抽提DNA.根据已发表的基因序列设计合成两对引物,采用PCR-SSP方法检测MN血型基因型.结果供者为NN型,受者移植前为MM型,移植后15 d为MN型(嵌合型),移植后300d为NN型(供者型).NN基因在移植植活证据中作为供者的标记物在受者体内发现.结论采用MN血型基因型检测作为植活证据,可以对异基因脐血干细胞移植进行早期监控,且标本量小,较其他方法更加敏感.

    作者:刘忠;兰炯采;何立群;张印则;吕蓉;方勤;郭晓捷 刊期: 2002年第10期

  • 坏疽性脓皮病12例临床分析

    报告12例坏疽性脓皮病患者的性别与年龄构成、并发症、实验室检查、治疗经过和结果,对该病的病因、治疗和预后进行了讨论.

    作者:颉玉胜;曾抗;彭学标;颉乐栋 刊期: 2002年第10期

  • 胸段食管癌外科治疗326例报告

    目的总结326例胸段食管癌外科治疗经验.方法回顾性分析1990年1月~2001年1月间手术治疗326例胸段食管癌的临床资料.肿瘤位于食管胸上段32例、胸中段213例、胸下段81例.左颈、右胸、腹正中三切口食管胃左颈吻合79例,三切口食管结肠吻合术5例,左颈、左胸二切口食管胃左颈吻合156例,左开胸食管胃弓上吻合53例,左开胸食管胃弓下吻合33例.结果手术病死率为1.23%(4/326),术后5年生存率为35.3%.结论胸段食管癌应提倡食管次全切除加彻底淋巴结清扫,以提高术后生存率及病人的生活质量.

    作者:黄少明;郑镇木;吴晓翔;黄炳忠;黄志玲;李彦文 刊期: 2002年第10期

  • 双黄连注射液致肺水肿1例报告

    双黄连注射液具有抗病毒和抗菌作用,也能增强机体的免疫功能,近年在儿科临床得到广泛应用.我们在用药过程中发现双黄连注射液致肺水肿1例,现报告如下.

    作者:徐静;关英 刊期: 2002年第10期

  • 幽门螺杆菌4种黏附素基因保守区的克隆、序列及其生物信息学分析

    目的克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)4种黏附素(BabA、AlpA、AlpB和HopZ)的保守区,并对其进行序列及生物信息学分析,为研究Hp黏附素的分子机制和免疫原性提供实验基础.方法利用ANTHEPROTV4.3c软件分析已证实的Hp4种黏附素蛋白序列,发现共同保守区(命名为CB),推导出其DNA序列,设计CB特异引物,将PCR产物定向插入pET-22b(+)载体,构建保守区的重组克隆.DNA自动分析仪进行序列测定,生物信息学软件对其生物学特性进行分析.结果构建了4种黏附素共同保守区的重组质粒,测序显示CB基因长588 bp,该基因编码195个氨基酸,与4种黏附素保守区的同源性均达50%以上,ANTHEPROTV4.3c软件预测其蛋白质相对分子质量约为22 500,并显示出了良好的抗原性和疏水性.BLAST分析了836 767个序列,与其同源性达40%的均为Hp序列.结论Hp4种黏附素存在同源性接近的保守区,表明其黏附作用可能有相似的分子基础,生物信息学分析表明其具有优良的免疫原性和严格的种属特异性.

    作者:白杨;张亚历;王继德;林焕健;张兆山;周殿元 刊期: 2002年第10期

  • 婴儿颅内出血微创手术治疗22例报告

    目的探讨婴儿期颅内出血的手术治疗方法.方法对22例晚发性维生素K缺乏颅内出血患儿临床资料进行回顾性分析.结果所有患儿在儿科诊断和治疗基础上施行微创手术,清除颅内血肿,疗效显著,均治愈出院.结论微创手术清除婴儿颅内出血可减轻神经系统后遗症,降低婴儿期颅内出血的死亡率.关健词:脑出血;维生素K缺乏;微创手术;婴儿

    作者:邓景阳;吴立平;陈亚德 刊期: 2002年第10期

  • 合并丙型肝炎病毒感染的系统性红斑狼疮患者临床与免疫学特征

    目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者丙型肝炎病毒(HCV)感染的发生率及其临床意义.方法用ELISA-3、RIBA-3及PCR检测134例SLE患者和200名正常献血者的HCV感染情况,并分析临床与免疫学其特征.结果15名SLE患者(13%)和2名正常对照(1%)HCV抗体阳性(P<0.001).与未合并HCV感染的SLE患者相比,合并HCV感染的SLE患者皮肤表现、dsDNA抗体阳性发生率低(P=0.01,P<0.001),肝脏损害、低补体血症、冷球蛋白血症发生率高(P<0.001,P<0.05,P=0.03).结论SLE患者合并HCV感染的发生率显著高于正常人群,HCV抗体阳性SLE患者显示出特异的临床和免疫学表现.

    作者:秦春玲;杨庆永;廖元兴 刊期: 2002年第10期

  • 阔韧带室管膜瘤1例报告

    1 临床资料患者女,66岁,因右下腹部胀痛7d入院.妇科检查右下腹部可触及一包块,约12 cm×12 cm×11cm,囊实性,边界清楚,有轻压痛.B超提示盆腔混合性占住病变,以囊性为主.剖腹探查见子宫右前方与右侧盆壁之间有一12cm×12cm×11cm大小的实性肿物,与右侧子宫阔韧带相连,表面与膀胱后壁、子宫前壁、肠管及右盆壁紧密粘连.行右阔韧带肿物切除术.临床诊断:右阔韧带肿物,性质待查.

    作者:刘真喜;杨光之;朱梅刚 刊期: 2002年第10期

  • 冷藏在无电解质溶液中人精子的受精能力

    目的测定人精子冷藏在4℃无电解质溶液(EF溶液)中是否保持正常受精能力.方法人精子冷藏在EF溶液中,分别测定其活动率、顶体状态和受精指数.结果人精子冷藏在4℃EF溶液中1周,其活动率明显高于冷藏在缓冲的人输卵管溶液中[(43.4±7.9)%比(9.5±2.5)%,P<0.01].虽然冷藏在EF溶液中的人精子顶体状态在重激活前与新鲜精子无明显不同[获能精子为(7.6±1.8)%比(6.4±1.8)%,顶体反应精子为(3.0±1.7)%比(2.4±1.1)%,P>0.05],但是前者在重激活后其获能精子和顶体反应精子的百分率明显增加[获能精子为(16.0±2.3)%比(7.6±1.8)%,顶体反应精子为(9.4±2.1)%比(3.0±1.7)%,P<0.01].冷藏在EF溶液中精子的穿透率和受精指数与新鲜精子相似(48.1%比50.9%,1.38±0.16比1.29±0.13,P>0.05).结论人精子冷藏在4℃EF溶液中1周,不发生获能和顶体反应,重激活后具有与新鲜精子一样的受精能力.

    作者:全松;周海宽;山野修司;中坂尚代;青野敏博 刊期: 2002年第10期

南方医科大学学报杂志

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