李铁林;段传志;韩志安;汪求精;赵刚;苏正;徐如祥
Clontech公司新推出的一种能随着时间的延长而由绿色变为红色的荧光蛋白。这种荧炮蛋白为实时研究启动子的调控时效提供了可能:在活细胞或者活的生物体内,不但可以看到某个启动子启动和关闭基因表达的确切时间和位置,而且不需要辅助因子便可直接进行监测(因为这种报告基因是荧光蛋白)。 这种荧光蛋白在表达后大约3h由绿色荧光变为红色荧光。只要检测红、绿光的比率(重叠时为黄色),就可以推测出这个启动子开启和关闭的时间,也就可以确定目的蛋白的表达时间和存在时间。2h后出现绿色荧光。表明hsp16-41启动子开始表达,50h后绿色荧光消失,表明启动子关闭。
作者: 刊期: 2001年第04期
介绍了 DNA芯片技术作为新一代基因诊断技术的优势及其在基因诊断中的应用。
作者:李凌;马文丽 刊期: 2001年第04期
目的获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)编码区基因。方法采用RT-巢式PCR技术从人胎肝组织总RNA扩增目的cDNA片段,克隆入pGEM-T载体,酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码含信号顺序的MASP-2肽链全长cDNA,将其与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TG1,建立了MASP-2的重组克隆。酶切图谱与微机分析结果无异;序列分析表明,与报道的人MASP-2 cDNA序列一致。结论成功克隆了人MASP-2基因,为深入研究补体凝集素途径的激活机制和甘露聚糖结合凝集素基因突变引起免疫缺损的发病机制奠定了基础。
作者:陈政良;张丽芸;卢晓;乔贵林 刊期: 2001年第04期
目的检测大鼠牙槽骨成骨细胞中IL-1β在正常及增强咀嚼压力状态下的动态表达,探讨IL-1β在牙槽骨改建中的分子机制。方法采用HE染色和免疫组化的方法,观察牙周形态变化以及牙槽骨成骨细胞中IL-1β蛋白表达。结果生理限度内咀嚼压力增强时,形态学显示大鼠牙周膜增宽、牙槽骨新骨形成;免疫组化观察到成骨细胞中IL-1β表达较正常咀嚼压力时明显增强。结论咀嚼压力增强促使牙周组织产生IL-1β明显增多,诱发了破骨功能,同时,还激活了成骨功能。提示IL-1β在咀嚼压力影响牙槽骨改建的过程中起着重要的调节作用。
作者:袁林;周伟东;赵云凤 刊期: 2001年第04期
总结我院256例急性肠套叠的临床资料,认为空气灌肠透视既是诊断急性肠套叠的简便方法,又是治疗的可靠措施;B超检查对诊断有很大帮助。发病<24 h而无腹胀、腹膜炎者均可应用空气灌肠复位;凡复位失败或套叠时间>48 h,而且有腹胀、发热、腹膜炎者应立即手术。
作者:吴彩新;李泰辉;朱法清;黄虹;揭育畴 刊期: 2001年第04期
:以0.2%康威达消毒片(主要成份为三氯异氰脲酸)的水溶液,对两种实验菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)悬液分别作用5、10、15 min,杀菌率达100%。对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性血清作用30 min,HBsAg抗原破坏率达96.88%。表明此消毒剂杀菌效果好、作用持久。
作者:张亚莉;陈进华;李岚;汪能平;耿穗娜 刊期: 2001年第04期
目的比较盆腔细菌、沙眼衣原体感染所致不孕症的临床特征及腹腔镜下特点。方法随机选择盆腔细菌、沙眼衣原体感染所致不孕症各50例,进行临床观察和腹腔镜检查。结果盆腔细菌感染组中有宫腔操作史、急性盆腔炎史、下腹痛史依次为24.4%、43.3%、78.6%,盆腔沙眼衣原体感染组中则分别为6.2%、8.9%和37.5%(P<0.05)。腹腔镜检中,盆腔细菌感染组中引起盆腔粘连、输卵管肿胀或积水、输卵管不全堵塞分别为35.7%、14.4%、17.4%,盆腔沙眼衣原体感染组发生盆腔粘连14.2%、输卵管肿胀或积水27.9%、输卵管不全堵塞39.6%(P<0.05)。盆腔细菌感染组中原发性不孕为30.3%、继发性不孕为69.7% (P<0.05),盆腔沙眼衣原体感染组中分别为52.7%和47.3%。结论盆腔细菌感染临床表现较为典型,常有宫腔操作史、急性盆腔炎史、明显下腹痛,腹腔镜下主要表现为盆腔粘连、输卵管损伤;盆腔沙眼衣原体感染临床表现不典型,腹腔镜下主要表现为输卵管损伤,不易早期诊治,并均可导致不孕。
作者:全松;杨晓燕;徐静萍;张军;田京梅;余艳红 刊期: 2001年第04期
目的探讨肾上腺骨髓脂肪瘤的诊断和治疗。方法对1988~1998年收治的15例髓脂脑瘤病例进行回顾性分析。结果肾上腺骨髓脂肪瘤为无功能的良性肿瘤,瘤体增大或其内部有出血时可产生症状,多为腰部或上腹部胀痛感;CT示肾上腺区近水样、脂肪密度或低密度实性肿瘤,B超示边界清楚的强回声或低回声肿块;病理示瘤组织由脂肪和骨髓组织构成,骨髓组织为多少不等的原始或不同成熟程度的髓细胞和各种血细胞。12例行11肋间切口,3例行12肋缘上切口手术治疗。结论 CT和B超检查可为髓脂脑瘤的诊断提供可靠依据;手术治疗是佳治疗方法,常用11肋间切口,而以肋缘上切口为好。
作者:蒋立城;郑少斌;陶冶;王体柱;谭万龙;左翼;马乃绪;王洪生 刊期: 2001年第04期
间变性大细胞性淋巴瘤( ALCL)是近年引起人们注意的一种少见淋巴瘤,常易与何杰金氏病、恶性组织细胞增生症、转移癌、恶性黑色素瘤等混淆。复习文献,对其细胞起源、免疫表型、病理形态特点与临床诊断要点作简要综述。
作者:陈琪;丁彦青 刊期: 2001年第04期
目的探讨非开胸食管内翻剥脱术在治疗下咽、颈段食管及贲门癌中的应用。方法 18例中逆行食管内翻剥脱10例,顺行食管内翻剥脱8例;胃代食管15例,结肠代食管3例;咽、喉切除,气管永久性造瘘2例。结果全部病例无手术死亡;术后吻合口瘘2例,喉返神经损伤2例,肺部感染3例,切口感染1例;术后随访15例,生存率1年以上者占77%,3年以上者占44%,5年以上者占22%。结论该方法对心肺功能影响小,使高龄及合并心肺等重要脏器疾病的食管癌患者获得手术机会;下咽、颈段食管癌应积极手术治疗,可提高患者的生存率;胸段食管癌应尽量避免使用该方法。
作者:蔡开灿;王武军;王文林;陈钢;蔡瑞君 刊期: 2001年第04期
坏死性淋巴结炎是以淋巴结组织形态学改变为诊断依据的疾病,临床上较为少见,因其病因不清,临床症状无特异性,给临床诊断带来一定的困难,现对8例经组织切片确诊为坏死性淋巴结炎的病例总结如下。
作者:崔丽娟;李娟;吕瑞和;林乐运 刊期: 2001年第04期
目的了解常规血清学试验为RhD阴性者中RhDel(D极弱型)的情况,并探讨其临床价值。方法采用PCR-SSP技术,检测33例常规血清学试验为RhD阴性,18例为RhD阳性样本的D基因外显子。并对33例RhD阴性样本进行吸收放散试验。结果 33例RhD阴性样本D基因外显子有8例无缺失、5例部分缺失、20例完全缺失,其中8例无缺失样本可以吸收并放散出D抗体,为RhDel型。18例RhD阳性样本D基因无缺失。结论 RhDel型常规血清学试验易被误认为RhD阴性,其D抗原虽然表达极弱,但外显子无缺失。提示凡常规血清学方法检测为RhD阴性的供血者,必须进一步作吸收放散试验作Del排除,以确保输血安全。
作者:张志梅;兰炯采 刊期: 2001年第04期
目的探讨N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)和非NMDA类受体在基本呼吸节律发生和调节中的作用。方法在新生SD大鼠离体延髓脑片上记录舌下神经的呼吸节律性放电活动,在改良的Krebs液中加入兴奋性氨基酸类递质及相应的拮抗剂, 观察其RRDA的影响。结果使用非NMDA受体激动剂海人酸(Kainic acid, KA)后,可见呼吸周期及呼气时间有所延长, NMDA受体激动剂对呼吸活动则没有明显影响(P>0.1);相应的拮抗剂6-氰基-7-硝基喹恶啉土卫四(6,7-dinitroquinoxaline-2, 3-dione, DNQX)和2-氨基磷酸戊酸(D-2-amino-5- phosphonopentanoic, AP5)均可使放电频率和积分幅值明显降低吸气时间显著缩短(P<0.01),DNQX同时可致呼吸周期和呼气时间明显缩短(P<0.05)。结论在哺乳动物基本呼吸节律的产生和调节中,NMDA类受体主要对呼吸活动的强度产生调节作用;而非NMDA类受体不仅可以影响呼吸的强度,同时对呼吸的频率也发挥调节作用。
作者:潘秉兴;吴中海;王宁黔 刊期: 2001年第04期
目的构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体。方法应用重组DNA技术,将人工合成的尿激酶原信号肽基因与鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合基因连接,并保证在同一阅读框架,然后分别插入到pcDNA3和PMJK3两种真核表达载体中。结果构建成可以在真核细胞中分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的重组质粒pcDNA3-D1和pMJK3-D1。结论为建立稳定分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的细胞工程株奠定了基础。
作者:舒东;徐兵;俞炜源;罗深秋 刊期: 2001年第04期
目的研究血小板α颗粒膜蛋白-140 (GMP-140)在脑血栓形成患者急性期和恢复期的变化。方法测定50例(其中30例急性期患者,20例恢复期患者)脑血栓形成患者血浆GMP-140的含量,并分别与26名健康人作比较。结果脑血栓形成患者急性期GMP-140浓度明显高于恢复期和正常对照组(P<0.01),恢复期与正常对照组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论脑血栓形成患者急性期血浆GMP-140含量处于较高水平。
作者:赵东红;周玥;王运良;王芹 刊期: 2001年第04期
目的观察烟碱对牛脑微血管内皮细胞(Bovine cerebral microvascular endothelial cells, BCMEC)表达αvβ3整合素的影响。方法离体培养新生牛脑微血管内皮细胞;血细胞计数仪测定BCMEC粘附大鼠血单核细胞(MN)的数目;应用ELISA法检测BCMEC对αvβ3整合素的表达量。结果高浓度烟碱(10-5mol/L)单独作用于BCMEC 2 h 后,使BCMEC对MN的粘附率从(12.9+0.4)% 增至(15.7+0.6)%, 且BCMEC也可表达少量的αvβ3整合素; 而当烟碱与BCMEC作用2 h后,再经白细胞介素-1β (IL-1β) 诱导4 h,烟碱可浓度依赖性(10-7~10-5 mol/L)地增强IL-1β的诱导作用,增加BCMEC对MN的粘附率以及E-选择素的表达量; 抗αvβ3整合素抗体(αβAIAb)能显著阻断IL-1β诱导BCMEC后对MN的粘附率。结论烟碱具有增强IL-1β诱导的脑微血管内皮细胞表达αvβ3整合素的作用。
作者:徐江平;杨雪梅 刊期: 2001年第04期
我们都知道两个中心体对于有丝分裂中形成双极纺锤体是必需的,如果中心体过多则会导致基因组的不稳定,所以中心体在每个细胞周期中,只被复制一次是很重要的。那么此过程是如何调节的呢? 一月份《Nature》杂志中,Steven Reed 和同事们提出了酵母中中心体的等价物SPB(spindle pole body)复制的模型,基于DNA复制与细胞周期进行相吻合的观点,认为cyclin/CDK可能也与SPB的复制激活及抑制其再复制有关。 研究者还发现,芽殖酵母中的3个G1 cyclin(clns1, 2, 3)与调控SPB的复制有关。在后来的成熟中,SPB复制前,由两个S期B类cyclin clb5,clb6和一个有丝分裂期B类cyclin调控,后由4个有丝分裂B类cyclin阻止SPB的复制。
作者: 刊期: 2001年第04期
探讨网络环境下医学文献检索课教学内容的新变化,并指出网络信息检索、网络信息资源的筛选与甄别、多种搜索引擎的比较研究和搜索引擎的选择及联合使用、印刷本检索工具、光盘检索和网络版检索工具的使用转换应当成为文献检索课教学的新内容。
作者:夏旭;李健康 刊期: 2001年第04期
目的研究HBV T1862变异的生物学意义。方法采用分子生物学方法,构建HBV前C/C基因EB病毒真核表达载体,利用体外定点突变技术诱导前C/C基因T1862变异,经PCR-RFLP初筛并经测序终鉴定出阳性克隆后,以脂质体介导方法将突变前后的重组质粒转染Cos7细胞, 以ELISA 检测HBeAg的表达量。结果未突变的重组质粒可稳定表达HBeAg,突变后的重组质粒未能检测到HBeAg表达。结论 HBV前C/C基因1862点突变的真核表达载体的构建,为体外研究该点突变引起HBV的一系列生物学改变奠定基础。
作者:林裕龙;侯金林;王战会;阎丽;周福元;骆抗先 刊期: 2001年第04期
目的探讨腹腔镜手术治疗卵巢子宫内膜异位囊肿的临床疗效。方法应用电视腹腔镜手术治疗卵巢子宫内膜异位囊肿90例,其中伴不孕者52例。所有病例均行子宫内膜异位囊肿剔除术,全部过程在腹腔镜下完成,无中转开腹者,无严重并发症发生。对其中52例合并不孕症患者随访,已妊娠者16例,妊娠率30.8%。结论腹腔镜下卵巢子宫内膜异位囊肿手术具有较传统治疗方法更佳的疗效。
作者:杨进;何援利;胡冬梅;温总莲;陈炜;彭冬先 刊期: 2001年第04期