学术投稿

人工合成人表皮生长因子在大肠杆菌中的表达

余榕捷;林剑

关键词:人表皮生长因子, 融合蛋白, 非融合蛋白, 大肠杆菌表达系统
摘要:目的:在大肠杆菌中高效表达人表皮生长因子(hEGF), 并探索提高外源基因在pE T-3c:BL(DE3)表达系统的表达水平的途径.方法:根据大肠杆菌对密码的偏爱性, 合成编码53个氨基酸的hEGF基因,分别以非融合蛋白和融合蛋白两种方式表达.计算机分析两者mRNA的翻译起始区(translation initiation region,TIR)的结构.结果 :融合蛋白表达产量为27%,非融合蛋白的表达用SDS-PAGE检测不到,两者均具有促细胞增殖的活性. 融合蛋白mRNA的TIR的ΔG值较非融合蛋白的高.结论:在pET-3c:BL21(D E3)大肠杆菌表达系统中,以融合蛋白方式表达人表皮生长因子,表达效率高且不影响其活性.此外,mRNA 的TIR的结构可能是影响外源基因在本研究的表达系统的表达效率的一个重要因素.
暨南大学学报(自然科学与医学版)杂志相关文献
  • 充血性心力衰竭患者CA125与EF的关系

    目的: 探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清CA125水平与心功能及病因之间的关系.方法:14 5例CHF患者根据纽约心功能分级标准分为心功能Ⅱ~Ⅳ级组.通过超声心动图测定左室内径及射血分数,用酶联免疫法(ELISA)测定血清CA125水平,并选性别、年龄相匹配20例正常人作为对照.结果:CHF患者血清CA125水平高于正常对照组,其升高的水平与左室射血分数(EF)值负相关.在不同病因同等心功能级别的CHF中,扩张型心肌病和缺血性心肌病血清CA125水平高,其次为高血压性心脏病,风湿性心脏病低 .结论:1) CHF患者血清CA125水平升高,升高水平与EF负相关;2) 不同病因的CHF,血清CA125的水平不同,血清CA125的水平升高可能与心肌细胞的坏死和重构的程度有关.

    作者:石丹;董少红;高虹 刊期: 2002年第02期

  • 下颌运动轨迹的描记在口腔修复中的运用(综述)

    下颌运动是在牙合、咀嚼肌及颞下颌关节共同参与下进行的一种复杂的三维运动,对下颌运动的研究是通过下颌运动轨迹描记仪进行的.在口腔修复工作中,下颌运动轨迹描记仪用于确定颌位关系、描记咀嚼运动和下颌边缘运动以及研究下颌运动与颞下颌关节的关系等各方面,提供了准确的下颌运动轨迹的资料,从而为临床口腔修复技术的进一步发展建立了重要的理论和实践基础.

    作者:马达;唐亮;唐昭;赵要武 刊期: 2002年第02期

  • FK506在同种异体兔角膜缘移植中的应用

    目的:研究FK506对同种异体兔角膜缘移植术后免疫排斥反应的抑制效应. 方法:建立48只新西兰白兔角膜缘干细胞缺陷症动物模型,随机分成FK506 治疗组、环孢霉素A治疗组和非治疗组,同种异体角膜缘移植术后分别给予质量分数为0.5%FK506滴眼液、1 %环孢霉素A 滴眼液和生理盐水点眼, 用药4周.术后持续观察10周,以角膜缘植片水肿、混浊程度、排斥反应发生时间、角膜新生血管和假性胬肉作为眼表评估指标.结果: 观察期内,FK506组上皮排斥反应发生率、移植排斥指数均低于环孢霉素A组,差异有显著性(P<0.05) ;而两组在新生血管和假性胬肉指数方面,无显著性差异(P>0.05).结论: 同种异体角膜缘移植术后早期应用FK506眼液点眼可以抑制排斥反应发生.

    作者:周清;陈剑;徐锦堂;赵松滨;王彦平 刊期: 2002年第02期

  • 延髓精原细胞瘤并广泛肺转移一例

    1 病例患者,男,32岁.因左下肢麻木6月,加重并累及右下肢、左上肢1月疑 1)颈椎病 2)颅内病变收入我院骨科.因核磁共振(MRI)发现延髓占位病变转神经外科.查体:神清语晰,左侧鼻唇沟稍浅,口角稍左偏,伸舌无偏斜,舌苔黄厚,咽反射正常,悬雍垂右偏,耸肩不对称,右侧较左侧高,无吞咽困难、呛咳等,眼球运动正常.跛行,左下肢肌力Ⅳ级,右下肢肌力Ⅴ-级,双上肢肌力Ⅴ级,双下肢肌张力稍增强,以左侧为甚,双上肢肌张力正常.双侧膝反射、踝反射亢进,以左侧为甚.

    作者:许典双 刊期: 2002年第02期

  • 大鼠心脏移植中Fas、FasL、Bcl-2和Bax的表达及意义

    目的:探讨Fas、FasL、Bcl-2和Bax在大鼠心脏移植急性排斥反应中的表达及意义 .方法:进行大鼠心脏移植,原位末端标记(TUNEL) 技术检测移植心的凋亡细胞,免疫组织化学方法检测Fas、FasL、Bcl-2和Bax的表达并用计算机图像分析定量测定. 结果:随着术后天数增多,排斥反应分级上升,细胞凋亡增加,FasL表达升高,Bcl-2表达下降而 Fas、 Bax无明显变化,AI于第7 d达高峰(11.46±5.35),FasL上升第5 d达高峰(32.17±8.15 ),Bcl-2 第5 d下降低(8.79±1.98).结论: FasL和Bcl-2与心脏移植急性排斥及组织损伤密切相关,FasL、Bcl-2的检测可作为急性排斥的监测指标.

    作者:钟红兴;韩辉;章咏裳 刊期: 2002年第02期

  • 通脑活血汤加味治疗缺血性脑血管病68例疗效观察

    目的:评价以活血化瘀为立法的通脑活血汤对缺血性脑血管病的疗效 .方法: 临床随机将98例缺血性脑血管病患者分为治疗组及西药组.西药组静滴脑组织注射液加低分子右旋糖酐注射液.治疗组除用上述西药治疗外,辨证口服通脑活血汤(丹参、当归、川芎、地龙)加味.15 d疗程结束后,比较两组疗效及治疗前后各组血液流变学指标变化. 结果:治疗组总有效率为85.29%,血液粘度(ηb)、还原粘度(ηr)、血浆粘度(ηp)、红细胞压积(HCT )、纤维蛋白原(PFC )、循环滞留时间(MST )等指标明显下降.西药组总有效率为70%,上述指标变化不明显,两者差异有统计学意义.结论:通脑活血汤对缺血性脑血管病治疗确有疗效,其疗效机制可能与改善血液流变学性能有关 .

    作者:李洁华;孙立;陈超;郑仕富 刊期: 2002年第02期

  • 鼻咽癌P53和c-erbB-2蛋白的表达与临床分期和复发的关系

    目的:探讨鼻咽癌(NPC)P53、c-erbB-2蛋白的表达与临床分期和复发的关系. 方法:搜集NPC蜡块标本70例,应用免疫组化LSAB法,检测P53和c-erbB-2 基因蛋白的表达 ,将其表达结果与NPC临床分期和复发的关系进行研究分析.结果: P53阳性表达率68.57% , 其与颈淋巴结转移与否无关, 但P53表达阳性者,其转移之颈淋巴结多小于4 cm(P< 0.05); Ⅲ、Ⅳ期P53阳性表达率较Ⅰ、Ⅱ期高(P<0.05);P53的表达与放疗后鼻咽局部复发和远处转移无关.c-erbB-2阳性率为84.29%, 与NPC临床分期和复发无相关性.结论: P53蛋白在NPC病程的晚期表达较高,与转移之颈淋巴结大小有关.

    作者:李恒国;钟兴;康举龄;夏明汉 刊期: 2002年第02期

  • 男性假两性畸形——不完全性雄激素不敏感综合征一例

    性别可以根据性染色体、生殖腺结构、外生殖器形态及第二性征加以区别.男性假两性畸形患者的染色体为46XY,性腺已分化为相对正常的睾丸,但由于各种原因,外生殖器缺乏雄激素的刺激作用,不能正常发育,呈现不同程度的女性化,并在青春期出现完全或不完全的女性第二性征.其发病率约占新生男婴的1/200 000到1/640 000[1].现将1例不完全性雄激素不敏感性男性假两性畸形报告如下.

    作者:李莉平;徐建平 刊期: 2002年第02期

  • MRI与CT对恶性胸膜间皮瘤的诊断价值比较

    目的: 探讨、比较MRI和CT在恶性胸膜间皮瘤临床诊断中的意义.方法: 25例经病理组织学或细胞学证实的恶性胸膜间皮瘤患者,术前均进行了MRI和CT检查;比较分析其影像学表现特点及其临床意义.结果:MRI除了对肿瘤内钙化的显示率低于CT 外,对恶性胸膜间皮瘤形态学的观察普遍优于或等于CT,尤其对叶间胸膜及横膈胸膜增厚的显示、肿块侵犯胸壁或膈肌以及肺门或纵隔淋巴结的显示优于CT.恶性胸膜间皮瘤在T1WI上呈低信号或等信号,而在T2WI及增强T1WI上绝大部分呈高信号.结论:与CT比较,MR I对恶性胸膜间皮瘤的TNM分期以及治疗方案的制订更具指导意义.

    作者:罗良平;张缨;陈金城;林志超;吴何嘉;朱彬;夏建东 刊期: 2002年第02期

  • 腰椎间盘突出症手术381例分析

    目的:证实腰椎间盘摘除加侧隐窝扩大术在腰椎间盘突出症手术治疗中的优越性,提高对侧隐窝狭窄的认识.方法:治疗组112例采取腰椎间盘摘除加侧隐窝扩大术治疗;对照组169例单独行腰椎间盘摘除术,随访3~22个月,对两组之手术效果进行统计分析.结果:治疗组112例中优79例,良20例,可12例,劣 1例,有效率99.1%;对照组169例中优69例,良40例,可38例,劣22例,有效率87%.二组有效率比较示P<0.05,说明治疗组疗效优于对照组.结论:在治疗腰椎间盘突出症时,应考虑到合并侧隐窝狭窄的可能.术前应根据症状、特征、CT 片明确诊断,了解侧隐窝的情况.术中应注意对侧隐窝进行探查和扩大,使神经根得到彻底松解,以提高手术疗效.

    作者:梁伯进;杨运东 刊期: 2002年第02期

  • ESBLs病原菌医院下呼吸道感染临床及耐药性38例分析

    目的: 了解产ESBLs病原菌医院下呼吸道感染的临床特点、菌群分布、耐药状况、治疗效果,为临床诊治提供依据. 方法:对产ESBLs病原菌医院下呼吸道感染的临床特点、治疗有效率、细菌清除率等资料进行分析,用常规痰培养方法检测病原菌,Ki rby-Bauer方法测定药敏,Etest 确定ESBLs阳性菌株.结果:38株ESBLs阳性菌中,肺炎克雷伯菌占39.5%、大肠埃希氏菌占36.8%、阴沟肠杆菌占13.2%、铜绿假单胞菌占7.9%、产气肠杆菌占2 .6%;对ESBLs阳性菌的耐药率亚胺培南为5.3%、阿米卡星为57.9%、庆大霉素为60.5%、头孢他啶为68.4%;肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率为6.7%、对环丙沙星耐药率为73.3%, 对其余抗生素耐药率高达80%~100%,大肠埃希氏菌耐药率亚胺培南为0、阿米卡星为35.7%、妥布霉素为50%、头孢他啶为42.9%、庆大霉素为64.3%,其余抗生素达78.6%~100%, 阴沟肠杆菌耐药率亚胺培南为20%、环丙沙星60%,其余抗生素80%~100%,铜绿假单胞菌、产气肠杆菌均对亚胺培南敏感;临床有效率、细菌清除率亚胺培南分别为71.4%、64.3%,明显高于其他抗生素.结论:产ESBLs病原菌菌种有增加趋势,产ESBLs病原菌对亚胺培南敏感性高,对常用抗生素耐药严重,临床疗效亚胺培南较好,氟喹诺酮类、氨基糖甙类有一定疗效,青霉素类及其复合制剂基本无效.

    作者:吴义;刘升明;肖增璜 刊期: 2002年第02期

  • B超定位电磁波源碎石机治疗泌尿系结石3480例

    目的: 评价B超定位电磁波源碎石机对泌尿系结石的治疗效果.方法:利用B超定位电磁波源碎石机对3 480例泌尿系结石患者进行冲击波碎石治疗.结果: 肾结石900例,治疗成功率为91%;输尿管上段结石548例,治疗成功率为97%;输尿管下段结石1 932例,治疗成功率为98.5%;膀胱及后尿道结石100例,治疗成功率98%.结论:B超定位电磁波源碎石机治疗泌尿系结石安全、疗效满意.

    作者:邝荔;钟红兴;李宇同;林雪莹;邱月琼;欧阳健明 刊期: 2002年第02期

  • 急性外伤性听力障碍182例分析

    目的:总结近5年我院急性外伤所致听力障碍的临床特点 .方法:回顾182例急性外伤致听力障碍患者的资料,主要分析其临床特点及纯音测听的结果. 结果:182例患者中男121例(66.5%),女61例(33.5%);车祸伤23例,掌击伤70例,爆震伤38例 ,其它51例.患者主诉听力障碍有207耳,检测结果听力正常的64耳,传导性聋50耳,感音神经性聋26耳,语言频率正常高频下降46耳,语言频率正常低频下降3耳,混合性聋18耳. 结论:在急性外伤引起的听力障碍中男性发病率较高;引起掌击伤和爆震伤的人为因素较大, 若采取必要的防范措施多能避免或将损失减小到低限度;其它几种外伤性听力障碍及时的就诊及治疗对患者的听力恢复非常有利.同时,临床医师要注意排除人为因素对听力检测的干扰.

    作者:练兵;山艳春 刊期: 2002年第02期

  • 腹腔镜手术治疗良性肾上腺疾病21例

    目的: 探讨腹腔镜手术治疗良性肾上腺疾病的方法与疗效.方法:对21例患良性肾上腺疾病的患者进行腹腔镜手术治疗,13例经腹腔途径手术,8例经腹膜后途径手术.结果:21例手术20例成功,手术时间经腹腔途径为60~280 min,平均130 mi n;经腹膜后途径为50~190 min,平均95 min.术中失血50~200 mL,均未输血.所有患者于术后3 d即可下床自由活动.1例改开放手术.术后无严重并发症发生.结论:腹腔镜手术治疗良性肾上腺疾病具有手术创伤小、治疗效果好、住院时间短等优点.

    作者:杨江根;兰文纲;黄东龙 刊期: 2002年第02期

  • 用于牙体雕塑练习的单个石膏牙模型的制做方法

    在口腔基础教学,特别是口腔基础实验教学中,常应用和借助于石膏牙模型,通过观看石膏牙模型标本,使学生获得了牙体解剖、牙列、牙弓及牙合等基础知识的感性认识,再通过在石膏牙模型上进行牙体解剖形态的雕塑和制作各种各类修复体等,既巩固了所学的理论知识,又增加了实际操作的机会,培养了学生的操作技能.在口腔修复实验教学和口腔内科实验教学中,我系和其他医科大学也都是通过自制改良的离体牙石膏模型供学生实习[1 ],以使他们了解牙体解剖形态及掌握各种病的基本操作方法.

    作者:周慈文;唐昭;刘卫军;杨春芝 刊期: 2002年第02期

  • 组织学配型与肾移植效果的影响因素(综述)

    HLA抗原系统分为Ⅰ类抗原(A、B、C)和Ⅱ类抗原(DR、DP、DQ). 国内外的临床研究资料表明,HLA配型在改善肾移植效果方面起着重要作用.不同位点的HLA抗原所起的作用不同,其重要性为DR>B>A>C.良好的HLA配型,特别是DR位点的相合,可明显改善高群体反应性抗体(PRA)受者的肾移植效果.

    作者:尹良红;郑绮宜;陈湛华;蔡启德;朱宁;王平 刊期: 2002年第02期

  • 基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子促进创面愈合的临床研究

    目的:观察基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)对急性创面和慢性创面愈合的促进作用.方法:治疗组(1 282例)和对照组(439例)被分为深Ⅱ度烧伤、浅Ⅱ度烧伤、供皮区(包括刃厚和中厚供皮区)和慢性(包括残余小创面和慢性溃疡)创面4大类 .分别观察应用rbFGF后不同时间创面愈合面积的百分比、创面完全愈合时间,以及用药前后的全身情况和不良反应.结果:浅Ⅱ度烧伤8 d愈合率和创面完全愈合时间,对照组为51.7%±26.4%和(12.6±2.9)d(P<0.001),治疗组为70.6%±25.0% 和(10.5±2.4 )d(P<0.001).深Ⅱ度烧伤15 d愈合率和创面完全愈合时间,对照组为53.3% ±25.4% 和(21.9±5.5)d(P<0.001),治疗组为69.7%±27.0%和(18.5±4.4) d(P<0.001) .供皮区创面8 d愈合率和创面完全愈合时间,对照组为57.6%±29.4%和(11.4±2 .7) d(P<0.001),治疗组为72.1%±28.0%和(9.5±2.4)d(P<0.001) .慢性创面完全愈合时间,对照组为(28.0±18.0)d,治疗组(22.1±16)d(P=0.068).用药前后血常规、肝、肾功能无异常变化.结论:基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子能够显著地促进创面愈合.

    作者:李校坤;洪岸;许华;姚成灿;付小兵;林剑 刊期: 2002年第02期

  • 过期妊娠产妇外周血和羊水雌二醇及孕酮水平的测定

    目的: 测定过期妊娠产妇外周血血清和羊水中的雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平,探讨E2 、P4水平变化与过期妊娠及宫缩发动的相关性.方法:放射免疫法测定过期妊娠与足月妊娠产妇(各20例)羊水和外周血血清E2、P4浓度 .结果:1)过期妊娠组产妇外周血血清和羊水P4水平明显高于足月妊娠组(204.13±41.16 vs 176.46±24.89, t=2.586 ,P<0.05;107.06±28 .66 vs 71.23±13.67,t=5.046,P<0.01),E2/P4值明显低于足月妊娠组(0.78±0.17 vs 0.90±0.16 ,t=-2.247,P<0.05;0 .19 ±0.10 vs 0.26±0.06 ,t=-2.552,P<0.05),差异有显著性.2)临产组与未临产组产妇外周血血清中E2、P4水平及E2/P4值均无明显差异(147.98± 12.00 vs 162.05±28.38,t=-1.762, P>0.05; 175.02±22.84 vs 19 8.52±40.08, t=-2.017,P>0.05; 0.88±0.18 vs 0.82±0.17 ,t=1.136,P>0.05);而临产组羊水中的P4水平低于未临产组(74.39±1 6.73 vs 97.09±30.77,t=-2.554,P<0.05), E2/P4值高于未临产组(0.29±0.09 vs 0.18±0.06,t=-4.441,P<0.01),差异有显著性 .结论:外周血及羊水E2/P4值低下与过期妊娠发生有关.分娩发动后羊水E2/P4值高于临产前.

    作者:卢凤昕;王自能 刊期: 2002年第02期

  • 淋巴瘤白血病患者TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性

    目的:了解B细胞淋巴瘤白血病(LL)患者TCR Vβ亚家族T细胞的分布及其克隆性.方法:利用RT-PCR分别扩增3例LL患者外周血单个核细胞的 TC R Vβ 24个亚家族基因的CDR3,以了解患者各Vβ亚家族的利用情况,然后将阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞克隆性.结果:患者中仅存在2~6个Vβ亚家族T细胞.基因扫描分析显示,2例患者外周血中的Vβ1 、Vβ 3或Vβ4亚家族出现克隆性增殖T细胞. 结论:LL患者外周血存在倾斜性分布和克隆性增殖的Vβ亚家族T细胞,这可能是机体T细胞受白血病细胞相关抗原的刺激作用而引起机体产生相应的特异性抗白血病的免疫反应.

    作者:杨力建;李扬秋;陈少华;卢育洪;罗更新 刊期: 2002年第02期

  • 足月新生儿微量血胆红素的测定及其临床应用

    目的:(1)制定清远地区足月新生儿不同日龄(1~10 d)的微量血胆红素动态变化值;(2)探讨黄疸的临床分度与微量血胆红素测定值的相关性.方法:00例正常足月新生儿为A组,于出生后第1~10 d,每天同一时间测定微量血胆红素一次; 200例黄疸组为B组,于出生后第3~7 d每天测一次微量血胆红素,由专人用双盲法对黄疸进行分度 ,分别计算出相应胆红素(SB)均值及标准差.结果:(1)正常足月新生儿生后第2~3 d开始出现黄疸,第5~6 d达高峰,平均峰值为(212.25±57)μmol/L,第10 d下降至(171.45±28.8)μmol/L,男女性别无显著性差异(P>0.05).(2)临床判断无、轻度、中度、重度黄疸所对应的胆红素分别为(128.25±33.60)、 (202.35±43.05) 、 (263.70±64.20)、 (295.50±51.90) μmol/L.结论:正常足月新生儿黄疸出现的时间与国内外其他报道相似,但其生理性黄疸的诊断标准略高于传统标准.当胆红素大于相应的±s、±2s或临床诊断为中度、重度黄疸,则应给予适当治疗.

    作者:郭晓燕;雷慧中;邱瑞霞;温穗文;章顺桃 刊期: 2002年第02期

暨南大学学报(自然科学与医学版)杂志

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主管:广东省教育厅

主办:暨南大学