赵强强;冯建明;李文倩;沈括;陈绍斌;解友邦;赵长明;侯艳
目的 针对广西HIV-1 B亚型毒株构建一种优化的假病毒耐药检测模型,为表型耐药检测提供成本较低、简便易行的研究工具.方法 从质粒pSV-EGFP中扩增出EGFP基因,采用双酶切法将EGFP基因克隆至骨架质粒pNL4-3.Luc.E-R-,以此构建假病毒重组骨架质粒;采用RT-PCR方法从HIV-1 B亚型慢性感染者RNA中获得包膜蛋白基因,采用双酶切法将env基因克隆至真核表达质粒pcDNATM3.1 (+),以此构建重组包膜质粒;单转染重组包膜质粒至293t细胞验证表达;共转染重组质粒至293t细胞获得假病毒;采用与TZM-b1细胞共培养法,通过荧光表达检测验证假病毒感染性.结果 两种质粒以质量比2:1(pcDNA3.1-env:pNL4-3.EGFP.E-R-)共转染至293t细胞,48 h后收集细胞上清获得假病毒.将假病毒加入到TZM-bl细胞共培养48 h后,可以观察到荧光表达.结论 带有EGFP基因重组假病毒的系统构建成功.
作者:黄春湲;王洪;梁浩;叶力;梁冰玉;蒋俊俊;陈荣凤;宁传艺;廖艳研;余军;黄颉刚 刊期: 2018年第12期
目的 探讨二甲双胍(Met)对2型糖尿病(T2DM)大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)相关的肝功、慢性炎症及肝纤维化的影响.方法 建立4组大鼠模型:对照组(A组)、T2DM组(B组)、T2DM+NAFLD组(C组)、T2DM+NAFLD+Met组(D组).造模结束后,取血及肝组织,检测肝功、C反应蛋白(CRP)等指标,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)等水平,评估其胰岛素抵抗情况;采用HE染色、油红O染色、Masson染色及网状纤维染色法检测肝脏的病理改变,免疫组化法检测肝组织TNF-α、IL-6及CRP表达情况.结果 (1)B、C组胰岛素抵抗及肝功异常程度均高于A组,D组低于C组.(2)B、C组炎症因子水平均高于A组,D组低于C组.(3)肝病理检测结果示,C组肝脏存在明显的脂肪变、脂肪性炎变及纤维化改变,D组较C组改善.结论 二甲双胍具有改善2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病相关的胰岛素抵抗、肝功异常、慢性炎症及肝脏纤维化的作用,其机制可能与降低炎症因子的表达、改善慢性炎症状态有关.
作者:蔡凤;刘钜荣;范德美;沈静雪 刊期: 2018年第12期
目的 对比经脐单孔腹腔镜(LESS)与多孔腹腔镜行双侧输卵管结扎术的围手术期资料,术后行体外受精-胚胎移植术(IVF-ET)助孕的临床结局.方法 2016年1月至2017年12月双侧输卵管积水患者经脐LESS双侧输卵管结扎术32例,多孔腹腔镜双侧输卵管结扎术60例,对比两组手术时间、出血量、术后住院时间;术后IVF-ET,窦卵泡数(AFC)、抗苗勒氏管激素(AMH)、促性腺激素(Gn)总量、Gn天数、获卵数、优胚率、种植率、妊娠率、早期流产率.结果 LESS组与多孔组相比,手术时间延长(P <0.001)、住院时间缩短(P<0.001).LESS组与多孔组术中出血量比较,差异无统计学意义(P=0.40).LESS组与多孔组术后IVF-ET,其AFC、AMH、Gn总量、Gn天数、获卵数、优胚率、种植率、妊娠率、早期流产率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 经脐LESS双侧输卵管结扎术安全可行.
作者:翁慧男;阮建兴;王媛媛;陈烨;刘风华 刊期: 2018年第12期
目的 探讨轻症结直肠穿孔患者行腹腔镜病变肠段切除治疗的可行性.方法 回顾性研究我院2006年6月至2016年6月间收治的61例病变肠段切除治疗的轻症结直肠穿孔患者的临床资料,对开腹手术组与腹腔镜手术组患者的术中及术后临床指标进行比较分析.结果 腹腔镜手术组相较开腹手术组,术中失血量相对较少[(100 ± 165)mL vs.(200 ± 205)mL,P=0.032],术后住院时间短[(7 ± 5.21)d vs.(10 ± 9.2)d ,P=0.009],但手术时间偏长[(213.7 ± 65.7)min vs.(173.5 ± 47.2)min,P=0.047];开腹组与腹腔镜组在术中输血量[(0.8 ± 1.1)U vs.(0.4 ± 0.7)U ,P=0.270]、术后ICU监护时间[(2 ± 0.9)d vs.(2 ± 0.7)d,P=0.009]、术后并发症(25/38 vs. 14/23,P=0.70)、住院费用[(31 758 ± 29 283)元vs.(36 243 ± 27 584)元,P=0.673]均未有明显差异.结论 轻症结直肠穿孔患者选择性的采用腹腔镜肠切除是安全可行的.
作者:彭吉祥;梁顺宇 刊期: 2018年第12期
目的 探究循环中解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)水平与慢性稳定性冠心病(stable cor-onary artery disease,SCAD)及其冠状动脉病变程度(Gensini评分和罪犯血管支数)的相关性,并比较分析UCP2与尿酸(urine acid,UA)预测SCAD的价值.方法 回顾性纳入330例住院患者,根据临床表现、实验室检查、心电图及冠状动脉造影(CAG)诊断SCAD患者(SCAD组)240例,非冠心病患者(对照组)90例.均于清晨空腹抽取患者外周静脉血检查肾功能,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)双抗体夹心法检测UCP2水平并进行统计学分析.结果 SCAD组循环中UCP2水平[1.60(0.67,4.60)ng/mL]显著高于对照组[0.42(0.28,0.59)ng/mL](P<0.05);多因素Logistic回归分析提示,UCP2水平与SCAD独立相关(OR=1.010,95% CI :1.001~1.020,P=0.025);UCP2水平与Gensini评分、病变罪犯血管支数呈正相关(分别r=0.780,P<0.01;r=0.543,P<0.01).受试者工作特征曲线(ROC)显示,UCP2预测SCAD的佳界值为0.64 ng/mL,敏感度为0.833,特异度为0.944.循环中UCP2与UA两者曲线下面积差异(ΔAUC)并无统计学意义(ΔAUC=0.027,95% CI:-0.083~0.137,P>0.05).结论 SCAD患者循环中UCP2水平越高,冠状动脉病变程度越重;UCP2与传统氧化应激相关指标UA水平预测SCAD价值无明显差异,可望成为预测SCAD的新指标.
作者:刘森;王丹;侯霁芯;万进东;阚竞宇;刘家欣;王沛坚 刊期: 2018年第12期
目的 观察七氟醚对单肺通气(OLV)大鼠肺癌缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/上皮间质转化(EMT)通路和侵袭力的影响.方法 建立大鼠肺癌模型.将造模大鼠随机分为4组(n = 6):对照组(C组)、双肺通气组(T组)、单肺通气组(O组)和七氟醚+单肺通气组(SO组).T组气管插管后行双肺通气2.5 h;O组和SO组气管插管后行OLV 2 h,双肺通气0.5 h.SO组OLV期间维持呼气末七氟醚浓度2.6% (相当于人1.5 MAC),双肺通气0.5 h时处死大鼠取左肺组织,Western blot测定肺癌组织低氧诱导因子(HIF)-1α、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(Fibronectin)表达水平.RT-PCR检测肺癌组织基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达.结果 与C组和T组比较,O组和SO组HIF-1α、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平升高,MMP-2和MMP-9 mRNA表达上调;与O组比较,SO组HIF-1α、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平下调,MMP-2和MMP-9 mRNA表达下调(P<0.05).结论 七氟醚抑制OLV上调大鼠肺癌HIF-1α/EMT通路活性及侵袭力的作用.
作者:熊艳峰;赖晓红;梁桦;张涛;周桥灵;杨承祥 刊期: 2018年第12期
急性早幼粒细胞白血病(APL)是一种较为凶险,且具有重现性细胞遗传学异常的血液恶性肿瘤.研究发现,微小RNA(miRNAs)对血液系统肿瘤的不同细胞发展阶段进行调控,其作用形式是通过降解目标RNA或者抑制目标蛋白质的翻译进行转录后调控.既往研究表明,miRNAs在APL中起着重要的作用,它们不仅可以作为癌基因,还可以作为抑癌基因,这为APL的诊断以及治疗的提供了新型标志物.本文综述了miRNAs与APL之间的关系,为进一步研究APL精准诊疗提供理论基础.
作者:陈诚;陈占国 刊期: 2018年第12期
目的 探讨Neuritin与HSP60在肝损伤修复过程中的表达变化以及可能的分子机制,为研究肝损伤修复提供实验基础.方法 将48只Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为空白组(n=6)和实验组(n=42),空白组不做任何处理,实验组均行70%肝左叶切除以诱导急性肝损伤,并于术后6、12、24、48 h和3、7、14 d再次切除残余肝左叶,采用免疫印迹技术(Western blot)检测Neuritin与HSP60在相应时间点肝组织中的表达变化差异,行苏木精-伊红染色(HE)观察各时间点肝脏病理学改变,同时于尾缘静脉采血检测ATL和AST水平变化.结果 (1)与空白组相比,实验组于术后6、12、24、48 h血清ALT、AST含量持续增高并于48 h达到高峰,3 d开始降低、7 d几乎接近正常,差异具有统计学意义(P<0.05).病理学提示:与空白组相比,实验组肝小叶结构排列紊乱,气球样变明显,在术后48 h为明显;(2)在肝损伤修复的整个过程中,Neuritin与HSP60的表达变化呈现截然相反的差异,Neuritin的表达与肝损伤的加重或修复存在显著的负相关性(P<0.001),并且在肝损伤重的48 h时其表达量低;HSP60的表达与肝损伤的加重或修复存在显著的正相关性(P<0.001),并且在肝损伤重的48 h时其表达量高.结论 (1)采用单纯性70%肝左叶切除术,成功建立了SD大鼠的肝损伤修复模型,其损伤在术后第48小时重,该方法造模成功率为100%(42/42),操作简单、实用性强,为研究肝再生、肝损伤、肝移植等提供了一种可靠且简便的动物模型;(2)Neuritin的表达在肝损伤后逐渐降低,并在第48小时达到低,而HSP60的表达逐渐升高,并在第48小时达到高;(3)Neuritin与HSP60的表达变化与肝损伤修复过程密切相关(P<0.001),呈现出一定变化规律,两者可能通过某种相互作用而产生相应的生物效应,共同参与并促进了肝损伤的再生修复.
作者:王朝阳;朱美意;欧阳军;张宏伟 刊期: 2018年第12期
血透通路是晚期肾功能衰竭患者的生命线.自体血管通道因感染率低且并发症少等特点,优于人工血管透析通道或中心静脉插管透析[1-2].我科于2014 年开始对前臂血管条件差及前臂自体内瘘失功无法行重建、上臂头静脉无法满足高位透析通道的患者选择行上臂贵要静脉一期转位(onestagebasilic vein transposition,BVT)内瘘手术,取得了较好的临床效果,现报告如下.
作者:万正东;王玖言;宋斌 刊期: 2018年第12期
目的 利用原核细胞体系表达、纯化GRIK3胞内区蛋白.方法 构建带有His标签的GRIK3胞内区蛋白原核表达质粒pCzn1-GRIK3-intra,转化至大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达His-GRIK3-intra融合蛋白后,Ni柱亲和层析纯化获得的目的蛋白.结果 成功构建插入序列正确的GRIK3胞内区原核表达质粒,该质粒能在E.coli中高效表达GRIK3胞内区蛋白;经Ni柱亲和层析后获得了纯化的目的蛋白.结论 成功表达和纯化出GRIK3胞内区蛋白,为探索膜蛋白GRIK3的胞内信号转导机制奠定了基础.
作者:高永辉;肖斌;刘明;廖扬;唐荣芝;孙朝晖;李林海 刊期: 2018年第12期
哮喘是一种具有明显异质性的慢性气道炎症疾病,给社会、医疗造成了极大负担.哮喘患者常因急性发作而入院治疗,而这种急性发作是哮喘患者死亡的重要原因.哮喘的急性发作与气道炎症有着密切关系,气道炎症表型影响着哮喘的临床表现和对治疗的反应性.然而哮喘患者的气道炎症表型并不是一成不变的,多数患者在哮喘急性发作时,其炎症表型可能已经发生了改变.早期明确哮喘急性发作时的气道炎症表型,可以尽快评估患者吸入及全身使用糖皮质激素的用量,制定个体化的哮喘治疗方案,从而缓解患者的临床症状.
作者:段留路;董航明;蔡绍曦 刊期: 2018年第12期
目的 观察右美托咪啶复合芬太尼对纤支镜引导下清醒经鼻气管插管的镇静效果.方法 择期行经鼻气管插管全麻口腔颌面部手术患者120例,ASAⅠ~Ⅱ级,将患者随机分为右美托咪啶1 μg/kg(L组);右美托咪啶2 μg/kg(H组);右美托咪啶1 μg/kg+芬太尼1 μg/Kg(DF组).插管前三组患者分别按照上述剂量缓慢静脉泵注相应的药物(15 min内泵注完毕),完善表面麻醉后行纤支镜引导下经鼻气管插管.记录入室安静5 min(基础值,T0)、纤支镜置入前(T1)、插管后即刻(T2)时心率、平均动脉压;并记录插管评分(声带闭合情况、呛咳、肢体运动)、纤支镜插管舒适度评分、经鼻气管插管后评分和气道阻力评分;术后随访患者对插管过程中的记忆水平、不良反应和满意度评分.结果 T1时三组MAP、HR明显低于T0时(P<0.05);T2时L组MAP、HR明显高于H、DF组(P<0.05).L组出现声带闭合、重度咳嗽、中度至重度肢体运动的次数明显多于H、DF组.L组出现重度痛苦表情和插管后反抗的次数明显多于H、DF组.H组出现气道梗阻及心动过缓的次数明显多于L、DF组.L组患者关于麻醉前准备、局部麻醉和插管的记忆明显多于H、DF组,且L组患者术后满意度评分更低.结论 1 μg/kg右美托咪啶复合1 μg/kg芬太尼与2 μg/kg右美托咪啶都能为清醒纤支镜经鼻气管插管提供满意的镇静作用,但1 μg/kg右美托咪啶复合1 μg/kg芬太尼的气道梗阻发生率低,是较为合理的临床用药方案.
作者:彭盛亮;黄丹;肖凡;卢俊;周斌;胡海军;徐国海;罗振中 刊期: 2018年第12期
目的 探讨早期使用孟鲁司特钠预防儿童肺炎支原体感染后喘息发作的有效性.方法 选取于儿科门诊确诊为肺炎支原体感染而尚无喘息发作患儿共120例,其中60例(观察组)在抗支原体常规治疗基础上加用孟鲁司特钠咀嚼片治疗1个月,另60例(对照组)仅接受抗支原体常规治疗,比较两组患者临床治疗效果和喘息发生率.结果 观察组临床疗效及体温、咳嗽、啰音等控制显著优于对照组(P<0.05);急性期和随访期间,观察组喘息发生率明显低于对照组(P<0.05).观察组CRP和嗜酸性粒细胞计数水平较对照组明显降低(P<0.05).结论 早期预防性使用孟鲁司特钠可显著改善肺炎支原体感染后患儿临床症状、减少喘息发作.
作者:曾军;何丽雅 刊期: 2018年第12期
目的 研究硝苯吡啶对HK-2细胞铁超载引起的氧化应激的作用和可能的机制.方法 HK-2细胞分成空白组、铁超载组、硝苯吡啶组和共处理组,用柠檬酸铁铵和(或)硝苯吡啶处理细胞24 h后检测细胞丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,谷胱甘肽(GSH)含量,细胞内铁含量以及二价金属离子转运蛋白1(DMT1)和膜铁转运蛋白1(FPN1)的表达.结果 与铁超载组相比硝苯吡啶组和共处理组MDA含量降低(P<0.05),T-SOD活性增加(P<0.05),GSH含量增加(P<0.05),细胞内铁含量降低(P<0.05),DMT1表达增加(P<0.05),FPN1表达增加(P<0.05).结论 硝苯吡啶在铁超载HK-2细胞的氧化应激中有保护作用,这一作用与硝苯吡啶促进DMT1和FPN1的表达、降低细胞内铁含量有关.
作者:吕小梅;冉兵;杨茂;李雪森;蔺艳 刊期: 2018年第12期
目的 研究PM2.5联合中波紫外线(UVB)处理对人皮肤角质形成细胞HaCaT的影响.方法 收集环境中PM2.5并进行其金属成分分析;MTT法测定PM2.5对HaCaT细胞的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为空白对照组(NC组)、单纯IC50浓度的PM2.5处理组(PM2.5组)、单纯30 mJ/cm2的UVB照射组(UVB组)和PM2.5联合UVB处理组(联合处理组),MTT法检测不同处理组对细胞活力的抑制;流式细胞术检测不同处理对细胞凋亡的影响;Western blot检测不同处理后PARP、LC3的蛋白表达变化.结果 PM2.5样品中金属成分有Ca、Ba、Al、Cu、Pb等;PM2.5对HaCaT细胞的IC50约为300 μg/mL;不同处理组之间,在处理后24 h,对细胞活力的抑制差异显著(P<0.001),其中联合处理组细胞对比NC组活力低(P<0.001);流式分析结果显示,与NC组比,PM2.5组、UVB组以及联合处理组细胞凋亡率增加(P<0.01),联合处理组凋亡率较PM2.5组增加(P < 0.05),但低于UVB照射组(P < 0.01);Western blot显示PM2.5组、UVB组以及联合处理组LC3-Ⅱ、PARP蛋白较NC组均有增加,联合处理组PARP较UVB组减少,LC3-Ⅱ较PM2.5组、UVB组增加.结论 PM2.5能增加UVB对HaCaT细胞的损伤,其主要可能通过增加细胞自噬,而非凋亡方式.
作者:牛梦鸽;谢雄雄;王超鹏;周美娟 刊期: 2018年第12期
目的 对腹腔镜Soave术(LS)和改良腹腔镜Swenson术(MLSw)在儿童短段型巨结肠的治疗效果和并发症进行比较分析.方法 回顾分析我科自2007年3月至2016年12月收治的77例儿童短段型巨结肠临床资料.LS术26例,MLSw术51例.收集两组术前、术中和术后临床资料进行分析,随访12~48个月.结果 MLSw组平均手术时间、术中出血量和住院时间比LS组少.两组术后平均进食时间无明显差异. MLSw组术后早期并发症的发生率较LS组低,但两组术后晚期并发症发生率无明显差异.结论 LS和MLSw术都适用于儿童短段型巨结肠的治疗.但MLSw操作更简单,术后早期的排便控制更好.更重要的是,MLSw术可完全切除无神经节细胞肠段,而无需保留直肠肌鞘.
作者:伍耀豪;曾乐祥;邱荣林;张杰;周嘉嘉;蒋雯丽;邓小耿 刊期: 2018年第12期
目的 探讨国产血管内无载体含药物洗脱支架(Nano支架)治疗不稳定型心绞痛患者的安全性及有效性.方法 选取在我院住院的不稳定型心绞痛患者,分为两组,比较术后12个月心血管事件、靶血管小内膜腔面积、小支架截面积及内膜增生面积.结果 随访12个月,组1心血管事件7例,组2心血管事件6例,两组差异无统计学意义(P=0.727);术后12个月,组1共有4例患者因冠状动脉严重狭窄再次行支架植入术,组2共有3例再次行支架植入术,两组差异无统计学意义(P=0.672);术后12个月,两组靶血管内膜均有增生,差异无统计学意义(P=0.985);术后12个月两组患者靶血管小内膜腔面积差异无统计学意义(P=0.921);两组患者小支架截面积差异无统计学意义(P=0.934).结论 Nano支架治疗不稳定型心绞痛患者临床疗和Endeavor Resolute支架相当,心血管事件较少、临床应用安全可靠.
作者:陈新军;郑若龙;黄凤娇;杨增芯;徐卓文;李伟章;张华 刊期: 2018年第12期
目的 探讨未足月胎膜早破产妇及新生儿结局的影响因素.方法 选自我院未足月单胎胎膜早破产妇326例作为研究组;选自我院足月单胎胎膜早破300例作为对照组.回顾性调查孕产妇和新生资料.结果 经单因素分析,两组妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、子宫发育异常、瘢痕子宫发生率比较无统计学差异(P>0.05);研究组生殖道感染率和胎位异常发生率高于对照组(P<0.05).将上述单因素分析具有统计学差异的纳入多因素Logistic回归分析生殖道感染和胎位异常为影响单胎未足月胎盘早破独立危险因素.研究组新生儿窒息和新生儿肺炎发生率高于对照组,且研究组新生儿体重低于对照组,以及研究组新生儿Apgar评分低于对照组(P<0.05).结论 生殖道感染和胎位异常为影响单胎未足月胎盘早破独立危险因素,单胎未足月胎盘早破新生儿结局不良,新生儿窒息和肺炎发生率高,且体重轻,具有重要研究意义.
作者:朱薏;路妍妍;田耕 刊期: 2018年第12期
目的 比较自动弹力线痔疮套扎术(RPH)联合外剥内扎术与吻合器痔上黏膜环切术(PPH)治疗重度混合痔的临床效果.方法 重度混合痔分为观察组与对照组各84例,对照组给予PPH治疗,观察组给予RPH联合外剥内扎术治疗.结果 所有患者均成功完成手术,在手术时间、住院时间等方面,观察组比对照组明显要少(P<0.05).而且术后3个月,观察组的尿潴留、肛门失禁、肛门直肠狭窄、继发性肛裂等并发症低于对照组(P<0.05).观察组与对照组术后3个月的总有效率分别为97.6%和85.7%,观察组高于对照组(P<0.05).观察组与对照组3个月的肛管大峰值流速(PSV)与小峰值流速(EDV)值都低于术前1 d(P<0.05),观察组3个月的肛管PSV与EDV值与对照组相比降低(P<0.05).结论 RPH联合外剥内扎术治疗重度混合痔能减少痔血管血流,具有更好的微创性,能减少术后并发症的发生,从而提高治疗效果.
作者:雷新益;张志云;吉祖进;蒋学军;杨勇 刊期: 2018年第12期
目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对成年大鼠脊髓中央管膜下神经干细胞(NSCs)体外增殖能力的影响,为临床进行成体脊髓中央管膜下NSCs自体移植或异体移植治疗脊髓损伤提供实验室理论依据.方法 通过显微外科方法分离成年大鼠脊髓中央管膜下NSCs行体外培养,利用CCK8检测筛选EPO促进NSCs增殖的适宜处理时间,并检测96 h的EPO对NSCs的细胞计数和Cyclin D1表达的影响.结果 成年SD大鼠脊髓中央管膜下可提取出稳定表达Nestin蛋白和Sox2转录因子的NSCs;CCK8结果示20 U/mL、96 h可能为EPO促进NSCs增殖的适宜浓度和处理时间,细胞计数及荧光定量PCR结果示EPO处理NSCs 96 h后可明显促进细胞增殖.结论 EPO可促进行体外培养的成年大鼠脊髓中央管膜下NSCs的增殖,且20 U/mL和96 h可能为EPO促进NSCs体外增殖的适宜浓度和适宜处理时间.
作者:周潇齐;吴波;严鑫平;朱美松;彭延凯;陈仲 刊期: 2018年第12期