学术投稿

国内首对同一父母来源HLA相同的人胚胎干细胞系的建立

骆玉梅;范勇;陈欣洁;杜红姿;张文红;黎青;李少英;孙筱放

关键词:胚胎干细胞, 相同HLA配型, 同一父母来源, 内对照, 诱导分化
摘要:目的:建立国内首对同父母来源的人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)系,为干细胞的定向诱导分化提供内参对照模型.方法:利用体外受精后第3天不适宜进行胚胎移植的低质量胚胎,采用机械切割法分离囊胚内细胞团(ICM),接种到丝裂霉素C处理的小鼠饲养层上,对建立的hESC进行多能性潜能检测.结果:成功建立一对具有多能特性的hESC系,体外长期培养维持正常核型,STR显示较高的亲缘性,HLA配型完全相同.结论:本研究建立了国内首对同一父母来源的HLA完全相同的hESC,其遗传背景一致,这为细胞的定向诱导分化体系筛选提供一个很好的内参对照,同时也为干细胞的移植排斥反应、培养扩增等研究提供很好的对比参照模型.
实用医学杂志相关文献
  • 沙棘干乳剂治疗小儿厌食症临床疗效观察

    儿童厌食症是儿科常见病、多发病,以儿童较长时间食欲下降、食量减少为主要表现.较长时间的厌食导致儿童营养不良、免疫力下降,影响正常的体格和智力发育.我院对符合诊断标准的病例共120例随机分为治疗组60例和对照组60例,治疗组给予沙棘干乳剂,对照组给予金双歧治疗进行对比观察,疗效满意,现报告如下.

    作者:刘洋 刊期: 2012年第10期

  • 钬激光电灼加干扰素皮下注射联合治疗尿道内尖锐湿疣

    尖锐湿疣(condyloma acuminata,CA)又称生殖器疣或性病疣,是由人乳头瘤病毒(HPV)引起,好发于外阴或肛门,主要通过性接触传播,是较常见的性传播疾病,尖锐湿疣在我国发病率仅次于淋病,位居性病第2位[1],而发生于尿道内的尖锐湿疣,因位置特殊,治疗上极为棘手,极易复发,我院自2009年10月至2010年10月,对46例男性尿道内尖锐湿疣采用钬激光电灼加干扰素皮下注射,效果较明显,复发率低,现报告如下.

    作者:杨远旺 刊期: 2012年第10期

  • 国内首对同一父母来源HLA相同的人胚胎干细胞系的建立

    目的:建立国内首对同父母来源的人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)系,为干细胞的定向诱导分化提供内参对照模型.方法:利用体外受精后第3天不适宜进行胚胎移植的低质量胚胎,采用机械切割法分离囊胚内细胞团(ICM),接种到丝裂霉素C处理的小鼠饲养层上,对建立的hESC进行多能性潜能检测.结果:成功建立一对具有多能特性的hESC系,体外长期培养维持正常核型,STR显示较高的亲缘性,HLA配型完全相同.结论:本研究建立了国内首对同一父母来源的HLA完全相同的hESC,其遗传背景一致,这为细胞的定向诱导分化体系筛选提供一个很好的内参对照,同时也为干细胞的移植排斥反应、培养扩增等研究提供很好的对比参照模型.

    作者:骆玉梅;范勇;陈欣洁;杜红姿;张文红;黎青;李少英;孙筱放 刊期: 2012年第10期

  • 腹腔镜二孔法与三孔法精索静脉高位结扎术治疗精索静脉曲张的对比研究

    目的:比较二孔法及三孔法腹腔镜精索静脉高位结扎术的手术方法优缺点,探讨腹腔镜精索静脉曲张手术方法的选择.方法:回顾性分析腹腔镜二孔法精索静脉高位结扎术(二孔法组)75例和三孔法精索静脉高位结扎术(三孔法组)80例的临床资料,对两种方法的手术时间、出血量、并发症、术后住院时间、治愈率等进行比较.其中二孔法不分离睾丸动脉,对精索血管集束结扎;三孔法分离睾丸动脉后结扎精索内静脉.结果:腹腔镜精索静脉高位结扎术中二孔法组较三孔法组手术时间明显缩短,差异有统计学意义(P<0.01).并发症及术后住院时间两组比较无明显差异(P>0.05).术后随访3~ 42个月,两组均无复发及睾丸萎缩.结论:腹腔镜精索静脉高位结扎术二孔法较传统三孔法少一个切口,术后遗留瘢痕小,手术时间明显缩短,对双侧精索静脉曲张更具有优势,是腹腔镜精索静脉结扎术中较为理想的方法.

    作者:张忠;朱汝健;陈安屏;汪官富 刊期: 2012年第10期

  • 炎症反应在心肌梗死后交感神经重构中的作用

    心肌梗死后存在交感神经重构及再生现象,大量研究表明心律失常及猝死发生与这种交感神经重构有十分密切的关联.心肌梗死的发生发展过程中存在大量炎症反应,受损心肌及其他炎症细胞产生大量炎症细胞因子和炎症介质,有研究证实它们促进交感神经重构.本文从炎症角度对心肌梗死后交感神经重构作一初步综述,并分析药物在这方面的作用,希望对药物干预神经重构提供一个新思路.

    作者:余涛;李京波;魏盟 刊期: 2012年第10期

  • 卵巢肿瘤蒂扭转保守性手术26例.

    目的:探讨卵巢肿瘤蒂扭转复位保留卵巢手术的可行性.方法:卵巢肿瘤蒂扭转患者26例,选择传统开腹或腹腔镜术式,行直接复位或先行卵巢动静脉高位结扎,将扭转附件复位,然后剥除卵巢肿瘤.结果:26例卵巢肿瘤蒂扭转复位手术患者均成功,病理结果显示均为良性,未发生血管栓塞,无严重并发症.卵巢血流及功能短期内恢复.结论:选择传统开腹或腹腔镜术式行卵巢肿瘤蒂扭转复位保留卵巢手术具有可行性,值得进一步探讨.

    作者:李苗;邓清华;肖金贵;林还珠;钟培根 刊期: 2012年第10期

  • VDR基因FokⅠ多态性与Ⅲ型前列腺炎的关系

    目的:探讨维生素D受体(VDR)基因启动子Fok Ⅰ多态性与Ⅲ型前列腺炎的关系 方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对103例Ⅲ型前列腺炎患者(A组)及100例非前列腺疾病患者(B组)进行Fok Ⅰ位点SNP检测,分析两组间基因型和等位基因的频率分布.结果:A组基因型分布FF:28%(29/103),Ff:31%(32/103),ff:41% (42/103);B组FF:31%(31/100),Ff:35%(35/100),ff:34%(34/100),其中ff基因型分布在两组中的差异有统计学意义(P<0.05).A组等位基因频率分布F:44%(90/206),f:56%(116/206);B组为F:49% (97/200),f:51% (103/200),分布频率差异有统计学意义(P<0.05).结论:VDR基因Fok Ⅰ位点SNP与Ⅲ型前列腺炎的发生有一定关系.

    作者:阮黎;李正明;黄文胜;郑荣根;罗彬 刊期: 2012年第10期

  • 大肠腺癌中拓扑异构酶Ⅱα和ki67的表达及意义

    目的:探讨大肠腺癌中拓扑异构酶Ⅱα(topoⅡα)、ki67蛋白表达的关系及临床意义.方法:采用免疫组化SP法检测topoⅡα及ki67在60例大肠腺癌组织中的表达.结果:大肠腺癌中topoⅡα和ki67的表达率分别为46.6%(28/60)和60.0%(36/60).topoⅡα、ki67在大肠癌中的表达具有显著相关性(P<0.05).但两者表达均与年龄、性别、肿瘤直径、分化程度、是否淋巴转移及Dukes分期无相关性(P>0.05) 结论:topoⅡα和ki67均可作为大肠腺癌细胞增殖的特异性标记物,但topoⅡα对临床治疗和预后判断更具有指导意义.

    作者:黄炳臣;覃忠卫;罗春英;陆海善;黄永秩;林洁 刊期: 2012年第10期

  • 血清胱抑素C与冠状动脉狭窄程度间关系的临床研究

    目的:了解胱抑素C (Cys C)在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的水平及其与冠状动脉狭窄程度间的关系,评价Cys C作为冠状动脉狭窄严重程度无创预测因子的可能性.方法:采用Gensini评分系统,将71例AMI患者分为Gensini评分轻度组、中度组、重度组.选取同期住院41例非冠心病患者作为对照组.检测入选者血Cys C、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、肌酐(SCr).结果:与对照组相比,AMI组Cys C降低,LDL值增高(P<0.05).Gensini评分重度组Cys C水平较轻度组降低(P=0.041),重度组较中度组以及中度组较轻度组Cys C均有下降趋势,但无统计学差异.Cys C与Gensini评分呈较弱的负相关(r=-0.347,P=0.038),与SCr呈较弱的正相关.结论:血清Cys C与冠状动脉狭窄严重程度有关,随着狭窄程度的加重,血清Cys C水平下降.

    作者:刘震;陈平安;李韶南;雷晓明 刊期: 2012年第10期

  • 绝经后急性心肌梗死患者行急诊介入治疗并发造影剂肾病的预防与护理探讨

    目的:探讨绝经后女性急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者行经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)术后并发造影剂肾病(contrast-induced nephropathy,CIN)的预防与护理.方法:设立两组进行研究,收集绝经后AMI患者120例,分为干预组与对照组,均按照实验方法执行,分析两组并发CIN的发生率、CIN对住院时间及死亡率等的影响,收集数据进行统计学分析.根据统计分析结果讨论两组患者的差别.结果:干预组CIN发生率要比实验对照组低(P<0.01),有明显差异性,具有统计学意义.结论:对患者进行危险评估及术前健康教育,监测血压、血糖、尿量,观察血肌酐的变化,术前后应用水化治疗,加强饮食及心理护理等,加强对CIN的预防与护理能减少CIN的发生率,减少患者的住院时间及经济负担.

    作者:罗燕华;陈少敏;肖丹;蔡志雄;陈平;洪蝶玟;朱稚丹;倪楚民;马贵洲 刊期: 2012年第10期

  • 早期应用力月西对左主干支架植入术后心功能不全患者的疗效

    目的:观察早期应用力月西治疗左主干支架植入术后合并急性心功能不全的镇静效果及作用.方法:收集急性心肌梗死患者中行冠脉造影提示左主干病变,行支架植入术后合并急性左心功能不全患者12例.观察镇静效果及动态监测给药前、后呼吸、循环参数的变化,并与治疗前进行比较.结果:力月西镇静治疗后,有患者心率、呼吸频率、血氧饱和度、氧分压、氧合指数、BNP浓度明显改善(P<0.05).结论:力月西在左主干病变支架植术入后合并急性心功能不全患者中镇静效果良好,利于患者心功能改善.

    作者:邹育海;李丹辉;林朴卿;邱健 刊期: 2012年第10期

  • 经阴道彩色多普勒超声对异位妊娠孕囊与黄体囊肿的鉴别诊断

    目的:对异位妊娠孕囊与早孕时卵巢黄体囊肿超声特点进行比较,以提高异位妊娠的早期检出率.方法:回顾分析异位妊娠(孕囊型)107例和早孕时卵巢黄体囊肿114例的经阴道超声图像特点,记录异位妊娠孕囊及黄体囊肿大小、灰阶超声图像、彩色血流特点及彩色血流的阻力指数.结果:异位妊娠孕囊平均(1.2±0.5) cm,黄体囊肿平均(2.1±0.7) cm,黄体囊肿有4种类型;有80.37%的异位妊娠孕囊囊壁回声高于卵巢实质回声,而69.30%的黄体囊肿囊壁回声等于或低于卵巢实质回声(P<0.01);黄体囊肿组囊壁血流阻力指数较异位妊娠孕囊低(P<0.05).结论:异位妊娠孕囊与卵巢小黄体囊肿可通过比较囊壁回声、血流阻力指数等超声资料及结合临床资料相鉴别.

    作者:黄政文;黄惠芳 刊期: 2012年第10期

  • Raf-1蛋白突变体的原核表达、纯化及活性鉴定

    目的:将Raf-1蛋白259位丝氨酸(Ser,S)突变成天冬氨酸(Asp,D),构建突变型GST-Raf-1220-268S259D原核表达载体,表达和纯化融合蛋白及鉴定其生物学活性.方法:以pGE X-4T-1-Raf-1220-268为模板,运用PCR定点突变技术扩增出Raf-1220-268S259D基因序列,插入原核表达载体pGEX-6P-1,表达和纯化重组蛋白,GST沉降实验鉴定蛋白的生物学活性.结果:重组质粒测序结果正确,获得模拟磷酸化GST-Raf-1220-268蛋白.GST沉降实验检测到目的蛋白和14-3-3蛋白具有体外特异性结合活性.结论:成功构建GST-Raf-1220-268S259D原核表达载体,并表达及纯化了有生物学活性的融合蛋白,为进一步针对Raf-1的研究提供实验依据.

    作者:刘小会;高学娟;刘朗夏 刊期: 2012年第10期

  • 金属蛋白酶2基因-1306C/T多态性与冠心病的关系

    目的:研究金属蛋白酶2(MMP-2)基因-1306C/T多态性与冠心痛(CAD)发病的相关性.方法:采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS),检测283例冠心病患者与161例对照组人群MMP-2基因-1306C/T位点的基因型和等位基因的分布.结果:MMP-2基因-1306C/T位点基因型频率及等位基因频率在两组分布差异有统计学意义(P<0.01),经Logistic回归分析后,CC基因型携带者患冠心病风险是T等位基因携带者(CT+TT)的2.038倍(OR=2.038,95%CI=1.193-3.481,P<0.01).结论:MMP-2基因-1306C/T位点与冠心病发病的危险性相关,CC基因型可能是冠心病发病的遗传危险因素.

    作者:徐峰;金可可;张怀勤;徐力辛 刊期: 2012年第10期

  • 超微超顺磁性氧化铁对兔动脉粥样硬化斑块的MRI研究

    目的:利用超微超顺磁性氧化铁(USPIO)对兔动脉粥样硬化斑块进行磁共振成像,分析其磁共振表现特点及其价值.方法:实验组以球囊导管损伤腹主动脉内膜+高脂饮食的方法建立兔动脉粥样硬化模型12只,对照组3只行假手术和普通饲料喂饲.12周后对所有动物行USPIO增强前后的腹主动脉磁共振扫描,连续跟踪扫描6d(每隔24h 1次),在T2WI序列上观察血管壁信号变化情况,比较管壁信号噪声比(SNR),并将磁共振结果与病理学相对照.结果:USPIO增强后显示实验组在T2WI序列上腹主动脉管壁信号逐渐降低,在第4天SNR值达到低点,较增强前信号差异有统计学意义(P<0.05),而对照组腹主动脉在增强前后管壁信号无变化.病理证实所有动物模型兔腹主动脉都发生动脉粥样硬化病变,注射USPIO后处死的实验组兔普鲁士蓝染色为阳性,电镜显示USPIO颗粒存在于巨噬细胞胞浆的细胞器内.对照组兔腹主动脉病理检查为阴性.结论:USPIO颗粒可以被兔动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞特异性吞噬并引起相应的磁共振信号改变,USPIO磁共振成像有望在体观测动脉粥样硬化斑块内的炎症反应.

    作者:姚秋英;刘晓晟;王余椿;池嘉昌;路青;许建荣 刊期: 2012年第10期

  • 弥散加权成像与多层螺旋CT多期增强扫描对肝癌检测的比较研究

    目的:通过比较弥散加权成像(DWI)与多层螺旋CT(MSCT)多期增强扫描对肝癌的检出敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值,评价DWI对肝癌的诊断价值.方法:对55例CT平扫疑为肝癌的患者进行常规磁共振扫描+DWI及MSCT多期增强扫描.由两名高级职称的影像诊断医师进行双盲阅片,达成一致的诊断意见,统计两种检查方式对小肝癌(直径≤3 cm)和非小肝癌(直径>3cm)病灶的检出敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值,并对两种检查方式对小肝癌的诊断能力行受试者工作曲线(ROC)分析.结果:对于小肝癌病灶,DWI对病灶的检出敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为94.4%、50.0%、94.4%、50.0%,而MSCT多期增强扫描为55.6%、50.0%、90.9%、11.1%;对于非小肝癌病灶,DWI对病灶的检出敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值分别为89.4%、66.7%、97.2%、33.3%,而MSCT为92.3%、33.3%、94.7%、25.0%.对于小肝癌病灶,ROC曲线下平均面积DWI为0.944,高于MSCT多期增强扫描的0.889,并且差异有统计学意义(P<0.05).结论:应用DWI有助于提高肝癌尤其是小肝癌的检出敏感性、阳性预测值及阴性预测值.

    作者:张虎;秦东京;曹新山;姜兴岳;张升华;王静 刊期: 2012年第10期

  • 全反式维A酸增强双自杀基因系统对乳腺癌旁观者效应的观察

    目的:观察全反式维A酸(ATRA)对腺病毒为载体的双自杀基因系统治疗乳腺癌旁观者效应的增强作用及与Cx43表达的关系.方法:MTT法观察ATRA对双自杀基因系统治疗乳腺癌旁观者效应的影响;RT-PCR和FCM法检测ATRA作用前后乳腺癌MCF-7细胞内连接蛋白Cx43基因和蛋白的表达情况.结果:以不同比例混合MCF-7和MCF-7/CDTK细胞在前药作用下细胞存活率ATRA组较对照组明显降低(P<0.05).RT-PCR和FCM分析结果表明,经ATRA处理的MCF-7细胞,其Cx43基因和蛋白的表达明显提高.结论:乳腺癌MCF-7细胞中,ATRA具有明显增强CD/TK双自杀基因系统旁观者效应的作用,细胞内Cx43的表达增强可能是旁观者效应增强的机制之一.

    作者:孔恒;陶霖玉;齐柯;周培;杜冀辉;王红鲜 刊期: 2012年第10期

  • 重度肺动脉瓣狭窄合并房间隔缺损同期介入治疗的临床评价

    目的:探讨重度肺动脉瓣狭窄(PS)合并房间隔缺损(ASD)介入治疗的临床可行性、安全性及其疗效.方法:9例患者,年龄2 ~ 34(11.5±10.6)岁,其中7例<20岁;经胸超声心动图(TTE)及右心导管诊断为重度PS合并ASD,TTE测量房间隔缺损大直径为6~ 32(16.6±9.6)mm,其中4例房水平双向分流,无完全右向左分流.5例有轻度三尖瓣反流,1例有中度三尖瓣反流.先行经皮球囊肺动脉瓣成形术(PBPV),均采用巴特球囊;而后置入国产先健房间隔缺损封堵器闭合缺损,选择的封堵器直径为8.0 ~ 36.0(21.1±10.2)mm.结果:本组9例行PBPV术均获得成功,成功率为100%:PBPV术后即刻右室收缩压由术前(118.0±10.5)mmHg降至(48.7±12.2) mmHg,肺动脉右心室跨瓣压差(PTG)由术前(100.0±11.3) mmHg降至(20.0±7.8)mmHg(均P=0.00),PBPV术后即刻PTG下降达优良为8/9(88.9%).同期行ASD介入封堵治疗,8例获得成功,成功率为88.9%.术后超声心动图随访于1、3、6个月,疗效满意,房间隔未见残余分流结论:同期介入治疗重度肺动脉瓣狭窄合并房间隔缺损安全可行,效果良好.

    作者:陈宇明;黄凯;伍伟锋;郭盛兰;吴棘;张炳东;曾雪梅 刊期: 2012年第10期

  • 先天性心脏病矫治术并发膈肌麻痹的危险因素分析

    目的:分析先天性心脏病矫治术并发膈肌麻痹的危险因素.方法:2007年1月至2011年7月期间,施行先天性心脏病手术7 017例,诊断膈肌麻痹51例,发生率为0.73%,进行单变量及多变量危险因素分析.结果:单变量分析显示,先天性心脏病矫治术合并膈肌麻痹患者的手术年龄(5.9±20.3)个月小于无合并膈肌麻痹患者的手术年龄(47.3±66.3)个月(P<0.001);大血管调转术膈肌麻痹发生率4.8%,高于其他术式的发生率(P<0.001);主动脉弓缩窄/室间隔缺损矫治术膈肌麻痹发生率2.6%,高于其他术式的发生率(P=0.006);完全肺静脉异位引流矫治术膈肌麻痹发生率1.6%,高于其他术式的发生率(P=0.047).多变量Logistic回归分析显示:较低的手术年龄(P=0.01)、大血管调转术(P< 0.001)、主动脉弓缩窄/室间隔缺损矫治术(P=0.005)、完全肺静脉异位引流矫治术(P=0.023)为膈肌麻痹的危险因素.结论:较低的手术年龄、大血管调转术、主动脉弓缩窄/室间隔缺损矫治术、完全肺静脉异位引流矫治术为膈肌麻痹的危险因素.

    作者:罗丹东;陈寄梅;岑坚正;丁以群 刊期: 2012年第10期

  • 不同液体血液稀释对大鼠颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶和血脑屏障的影响

    目的:不同液体的血液稀释对大鼠急性颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和血脑屏障的影响.方法:成年雄性SD大鼠128只,随机分为假手术组(A)、模型组(B)、晶体血液稀释组(C)、万汶血液稀释组(D)各32只,采用feeney自由落体颅脑外伤模型(每组分为2、6、24、48 h亚组,每个亚组8只),采用干湿重法测定脑水含量,通过ELISA法检测血清NSE的浓度,伊文氏蓝(EB)法测定血脑屏障通透性.结果:D组脑组织含水量在24 h时与B和C组相比明显降低(P<0.05),在2、6、48 h时与B组相比明显降低(P<0.05);血清中NSE浓度在6、24 h与B组相比明显降低(P<0.05),在24、48 h与C组比较明显降低(P<0.05);脑组织中EB含量在2、6、24、48 h与B组相比明显降低(P<0.05),在6h与C组比较明显降低(P<0.05).结论:万汶血液稀释可改善血脑屏障的通透性,进一步降低血清NSE的浓度,减轻颅脑外伤后脑水肿.

    作者:张慧玲;刘俊伟;王均炉;林海;张钧凯 刊期: 2012年第10期

实用医学杂志

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