学术投稿

人骨髓及脐血间充质干细胞体外大量扩增及建库的质量控制

吴燕峰;包蓉;张绪超;周敦华;梁舜华;方建培;黄绍良

关键词:间质干细胞, 骨髓, 胎血, 质量控制
摘要:目的:研究人骨髓和脐血间充质干细胞(MSC)的体外培养特性及建立细胞库的可行性.方法:Ficoll离心剂法分离人骨髓及脐血来源单个核细胞,进行体外培养并大量扩增,观察细胞生长特性,流式细胞术检测MSC表面分子标志物表达情况.结果:骨髓样本比脐血标本的MSC更易于体外短期培养扩增,骨髓样本(5×106)体外培养2周约获得MSC 3×107~1.2×108,成功率达100%,而脐血样本的MSC较难培养,成功率低(12.9%),细胞数扩增有限.对冻存复苏前后的细胞进行流式细胞术检测提示MSC表面标志物CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166等均阳性表达,造血细胞标志物CD34、CD14和CD45为阴性表达,提示MSC对本室的冻存复苏程序耐受能力较好,可获得复苏后扩增培养.结论:本研究表明对成人骨髓MSC建库的条件较成熟,获得成功培养的MSC分子表型在冻存复苏前后无明显改变.而脐血来源的MSC培养条件有待改善方能提高MSC培养成功率.
实用医学杂志相关文献
  • 经皮椎体成形术治疗老年骨质疏松性椎体骨折的护理

    目的:观察骨水泥脊柱成形术治疗骨质疏松性椎体骨折的效果及其护理.方法:15例老年骨质疏松性椎体骨折病人在腰麻下进行手术,经皮穿刺用骨水泥固定,严密观察生命体征,以及双下肢感觉运动等情况,如有异常立即停止操作,并行对症处理.护理过程中重视病人的术前、术中、术后护理,同时强调并发症的预防和健康指导,为治疗提供保障.结果:骨水泥椎体成形术治疗骨质疏松性椎体骨折,临床症状明显改善,有效率达100%,无一例发生骨水泥压迫脊髓、神经根严重并发症.结论:骨水泥成形术治疗骨质疏松性椎体骨折是一种安全、有效的方法,护理应重视患者并发症的观察.

    作者:忻佩华 刊期: 2006年第01期

  • 手术加综合治疗大肝癌28例

    我院1991年1月至2005年5月采用肝段切除治疗大肝癌及术后给予介入、化疗等综合性治疗效果满意,现报告如下.1临床资料1.1一般情况男19例,女9例,年龄30~70岁,平均50.3岁.

    作者:郭盖章 刊期: 2006年第01期

  • β-轻型地贫伴戈谢细胞增多症1例

    患者男,1岁9个月,贫血貌.体查:脾脏肋下2 cm,肝脏肋下2 cm,无骨痛,心肺正常,神经精神征未引出.实验室检查:外周血WBC 15.6×109/L,RBC2.18×1012/L,Hb 61 g/L,PLT 282×109/L,MCV 75 fL,RDW 13.3%,分类大致正常.血红蛋白分析示HbA 76.03%,HbF 21.24%,HbA2 2.74%,反向斑点杂交检测该病人基因型为41-42/N,诊断为β-轻型地贫,曾多次进行红细胞输注及有关补血方面的治疗,但症状未有改善,行骨髓穿刺以明确诊断.

    作者:肖燕青;梁绮华 刊期: 2006年第01期

  • 医院感染746例调查分析

    目的:了解住院患者医院感染状况及其影响因素,以便加强对重点科室感染动态监测,预防和控制医院感染发生.方法:对我院2004年1-12月住院患者所发生的医院感染746例进行调查分析.结果:2004年医院感染率为4.33%,综合ICU患者是医院感染高发人群,高危科室是综合ICU、神经内科、口腔科、普儿科、肿瘤科;感染高发部位为呼吸道;真菌已成为医院感染的主要致病菌;基础病严重、侵入性技术操作以及抗生素使用不合理等是造成医院感染的主要危险因素.结论:加强医务人员培训,严格执行无菌技术,减少不必要的侵入性操作,合理使用抗生素,及时、准确的病原菌监测是预防医院感染发生的有效措施.

    作者:林肇得;陈捷;李健平;胡琴;冯毅真 刊期: 2006年第01期

  • 羟基喜树碱和吡柔比星膀胱灌注对膀胱癌患者免疫力的影响比较

    目的:观察羟基喜树碱(HCPT)和吡柔比星(THP)膀胱灌注对膀胱移行细胞癌患者免疫力的影响.方法:临床选择行经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)或膀胱部分切除术的膀胱移行细胞癌患者54例,随机分为两组,术后分别以HCPT和THP膀胱灌注治疗,于治疗前及治疗1疗程后取患者外周血,流式细胞术测定T细胞亚群分布,ELISA测定血清TGF-β1的水平.结果:膀胱灌注治疗后CD4+T细胞亚群均有显著性升高,HCPT治疗组升高(12.92±5.22)%,THP组升高(10.28±4.15)%,组间对比差异无显著性,两组CD8+T细胞亚群变化不明显.浸润性肿瘤及Ⅲ级肿瘤患者TGF-β1均有显著性下降,组间对比差异无显著性,表浅肿瘤及低分级肿瘤患者TGF-β1无显著性变化.结论:HCPT和THP膀胱灌注可抑制肿瘤免疫逃逸、提高机体免疫力.

    作者:刘尚文;王养民;乔够梅;杨琦 刊期: 2006年第01期

  • 眼眶内炎性假瘤的放射治疗

    目的:探讨眼眶内炎性假瘤的临床过程.方法:对43例眼眶内炎性假瘤患者进行回顾性分析.其中42例取得了病理证实.39例为激素治疗失败病例.均采用放射治疗,放疗剂量12~50 Gy,中位剂量34 Gy.结果:29例(67.4%)完全缓解,14例(32.6%)部分缓解或无缓解.放疗损伤发生率低.结论:对激素治疗失败的眼眶内炎性假瘤,通过放疗可以达到较好的效果.

    作者:侯秀玉;李明昱;李高峰;刘明远 刊期: 2006年第01期

  • 来氟米特加甲氨喋呤治疗难治性类风湿关节炎的临床观察

    目的:研究来氟米特加甲氨喋呤对难治性类风湿关节炎的疗效及安全性,并与单用甲氨喋呤进行对照.方法:39例难治性类风湿关节炎病人分为治疗组和对照组,治疗组用来氟米特+甲氨喋呤治疗,对照组用甲氨喋呤治疗,疗程为24周,对两组在6周、24周时的疗效进行评估.结果:治疗组在6周、24周时的有效率分别为44.4%和82.4%,对照组分别为47.6%和61.9%,显示来氟米特+甲氨喋呤对难治性类风湿关节炎疗效比单用甲氨喋呤好.来氟米特+甲氨喋呤能显著改善临床症状和实验指标,其耐受性与单用甲氨喋呤无明显差别.结论:来氟米特加甲氨喋呤是难治性类风湿关节炎有效的治疗方案,且较安全.

    作者:胡清;王芳;李雪锋;孙明锦 刊期: 2006年第01期

  • 尿Cystatin C的检测及临床应用

    目的:探讨尿Cystatin C检测的临床意义.方法:采用胶乳增强免疫比浊法测定尿中的Cystatin C,同时采用速率散射比浊法测定尿中微量白蛋白(Alb)、α1微球蛋白(α1m)、免疫球蛋白G(IgG)、转铁蛋白(TRF).结果:肾脏疾病组按α1m水平分为阴性组、微量组和阳性组,Cystatin C和α1m的值除阴性组与正常对照组比较差异无显著性外,微量组、阳性组与正常对照组相比差异有极显著性(P<0.01).各病例组之间的尿Cystatin C的值差异均有极显著性;α1m的值阴性组与微量组差异有显著性(P<0.05),其它各组间差异均有极显著性(P<0.01).肾脏疾病组尿Cystatin C与αt1m呈极显著性相关(r=0.69,P<0.01).结论:尿Cystatin C是肾脏疾病时肾小管损伤的敏感指标.

    作者:曹华军;王旭;范存琳;刘日旭 刊期: 2006年第01期

  • 男性泌尿生殖道支原体感染与耐药性变迁

    目的:观察本地区男性泌尿道支原体感染率分布情况及药敏变化,为临床用药提供依据.方法:使用MycoplasmaIST2试剂盒对982例疑似支原体感染患者进行解脲脲原体和人型支原体的检测,并做体外药物敏感性分析.结果:测出支原体261例,其中Uu阳性208例,阳性率79.7%;Mh阳性14例,阳性率5.4%;Uu+Mh阳性39例,阳性率14.9%.药敏结果显示不同型别支原体对一些抗生素敏感性具有显著差别.2002-2005年总体药敏趋势表明原始霉素(敏感率97.3%)、交沙霉素(敏感率94.6%)敏感性较高且较稳定,强力霉素(敏感率88.9%)其次,敏感率低的抗生素为环丙沙星和氧氟沙星,四环素和红霉素敏感呈增强趋势.结论:加强支原体药敏检测,合理选用敏感抗生素,进行规范治疗.无务件进行药敏检测情况下,治疗本地区男性支原体感染宜首选交沙霉素.

    作者:杨怡;李晖;张小伟 刊期: 2006年第01期

  • 小剂量瑞芬太尼复合异丙酚用于人工流产术

    目的:探讨小剂量瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉用于人工流产术的临床效果和安全性.方法:选择门诊ASAⅠ~Ⅱ早孕需人工流产者150例,随机分成3组,每组50例.R1组,瑞芬太尼0.5μg/kg持续静注60 s,随后静注异丙酚2.0 mg/kg;R2组,瑞芬太尼1.0μg/kg持续静注60 s,随后静注异丙酚2.0 mg/kg;C组,单用异丙酚2.0 mg/kg诱导,术中维持每次追加异丙酚0.5~1.0 mg/kg.观察麻醉前后SBP、DBP、HR、SpO2的变化,呼吸抑制发生情况,注射痛和术后宫缩痛的发生情况,记录异丙酚总用量、手术时间、术毕呼之睁眼时间、离院时间及不良反应.结果:3组患者诱导后SBP、DBP、HR、SpO2均有所下降,R1、C组呼吸抑制发生率明显低于R2组(P<0.01);R1、R2组心动过缓、低血压发生率明显高于C组(P<0.05),注射痛和术后宫缩痛的发生率明显低于C组(P<0.01),术毕呼之睁眼时间明显短于C组(P<0.01),异丙酚总用量明显少于C组(P<0.01).结论:小剂量瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉用于人工流产术具有麻醉效果好,镇痛作用强,呼吸抑制发生率低,能显著减少异丙酚用量等优点.

    作者:李步龙;李明睿;詹鸿;吴涯雯;石磊 刊期: 2006年第01期

  • 地尔硫(艹卓)、美托洛尔、地高辛控制快速房颤心室率的安全性及疗效评价

    目的:观察地尔硫革、美托洛尔、地高辛控制快速房颤心室率的有效性及安全性.方法:选择快速房颤心室率患者(HR>100次/min)95例采用随机方式分为地尔硫革组(32例),90~240 mg/d,分3次口服;美托洛尔组(32例),12.5~50 mg/d,分2次口服;地高辛组(31例),0.125~0.25 mg/d,1次口服.观察其有效率(心室率下降≥20%)及症状体征变化.结果:地尔硫革、美托洛尔及地高辛控制房颤的快速心率总有效率分别为91%、92%、71%,心室率分别下降为(84.2±21.2)次/min、(83.7±18.9)次/min、(95.3±19.3)次/min,平均起效时间分别为(23.5±5.2)h、(24.5±3.8)h、(45.1±7.5)h,3组复律分别3例、3例、1例,地尔硫革组出现低血压3例,窦性心动过缓1例;美托洛尔组出现低血压4例,窦性心动过缓1例;地高辛组出现窦性心动过缓1例,均自行缓解,未发生心衰加重.结论:与地高辛相比,口服地尔硫革、美托洛尔能有效控制其静息及活动后心室率,起效迅速,且均无明显副反应.

    作者:邱峰 刊期: 2006年第01期

  • 免疫固定技术在轻链型多发性骨髓瘤分型中的应用

    目的:探讨免疫固定技术在轻链型多发性骨髓瘤(MM)分型中的应用价值及分析其实验室检查特征.方法:利用免疫固定技术对265例MM患者的血清和尿进行游离轻链检测,分析阳性患者的血清免疫球蛋白定量、血清蛋白电泳、尿液本-周蛋白定性及尿蛋白定性等结果的特征.结果:从265例MM患者中成功筛选出45例轻链型MM(κ型21例、λ型24例)占MM的17%.κ轻链型与λ轻链型两组免疫球蛋白IgG、IgA和IgM结果组间比较,差异无显著性意义(P>0.05),但与正常对照组相比较明显偏低(P<0.05);而两组κ/λ值与正常对照组比较差异极具显著性(P<0.01).结论:应用高灵敏度的免疫固定技术对轻链型MM患者的血清和尿液进行M蛋白检测,并结合病人的血清免疫球蛋白等结果对其分型,能提高其诊断效率.

    作者:颜绵生;孙艳虹;廖慧芳;姚少羽;冯品宁;潘锡龙 刊期: 2006年第01期

  • 以吡柔比星为主的联合化疗对初治急性白血病的疗效观察

    目的:观察以吡柔比星为主的联合化疗对初治急性白血病的疗效.方法:治疗组,61例初治的急性白血病患者,其中急性非淋巴细胞白血病(ANLL)43例,予TA方案化疗[吡柔比星(THP)联合阿糖胞苷(Ara-C)],急性淋巴细胞白血病(ALL)18例,予VTLP方案化疗[THP联合长春新碱(VCR)、左旋门冬酰胺酶(L-Asp)、强的松(Pred)];对照组,53例初治的急性白血病中ANLL 36例,予DA方案化疗,ALL 17例,予VDLP方案化疗[两方案均以柔红霉素(DNR)代替THP].2个疗程后比较两组疗效.结果:治疗组2疗程的完全缓解(CR)率(81.97%)明显高于对照组(50.94%)(P<0.05),但两组的总有效率差异无显著性(P>0.05).结论:以吡柔比星为主的联合化疗可作为初治急性白血病的有效治疗方案.

    作者:何慧清;许晓军;任志娟;邱大发;林淑华;郭子文;古滔华 刊期: 2006年第01期

  • 造血干细胞的可塑性研究进展

    近年来,关于成体干细胞(adult stemcells)可塑性(plasticity)的研究在学术界引起了极大轰动.作为研究早和为深入的干细胞,造血干细胞(hemotopoieticstem cells,HSC)首当其冲,成为这类研究的代表.我们就HSC可塑性研究方面的进展作一综述.

    作者:郑守虎;段海锋 刊期: 2006年第01期

  • 血液系统疾病所致颅内出血的临床分析

    目的:探讨血液系统疾病所致颅内出血的临床表现、影像学、血液系统变化特点及其诊疗措施及预后.方法:分析27例血液系统疾病所致颅内出血的住院病人的临床资料,其中急性白血病11例,原发性血小板减少性紫癜3例,急性弥散性血管内凝血5例,骨髓增生异常综合征5例,急性再生障碍性贫血3例.详细分析其临床表现、影像学、血液系统变化特点及其诊疗措施及预后.结果:临床表现有头痛、呕吐、偏瘫、偏麻、视力障碍、血压增高、皮肤瘀点、瘀斑、发热、脸色苍白等.头颅CT检查为点状、斑片状、不规则高密度灶.血液系统改变:血小板均小于20×109/L;PT延长13例;APTT延长13例;纤维蛋白原减少8例;3P试验阳性8例.在治疗原发病的基础上用甘露醇脱水控制颅内压,控制血压,输血小板悬液.结果:存活4例并且遗留下严重神经系统并发症.结论:这类患者一般无高血压史,出血部位和大小不一,往往伴有血液系统方面改变及全身出血改变,预后差.

    作者:周旭东;张力明 刊期: 2006年第01期

  • 老年支气管扩张症合并肺癌38例

    老年支气管扩张症(支扩)合并肺癌38例,占同期收治老年支扩的15.9%(38/239).现结合临床报告如下.

    作者:李叶芳;李伟峰;李楚儒 刊期: 2006年第01期

  • Noggin诱导泌乳素腺瘤细胞凋亡的实验研究

    目的:探讨骨形态生成蛋白4(BMP-4)拮抗剂Noggin诱导人泌乳素(PRL)腺瘤细胞的凋亡作用.方法:用MTT法和流式细胞仪检测研究Noggin诱导细胞凋亡的情况;用免疫组化和RT-PCR检测分析Noggin诱导细胞凋亡后对BMP-4蛋白和BMP-4 mRNA的影响.结果:MTT法测定Noggin对PRL腺瘤细胞的IC50值为11μg/mL,不同浓度的Noggin对PRL腺瘤细胞具有抑制作用,并呈现剂量-效应关系.Noggin处理PRL腺瘤细胞后,AnnexinV标记的凋亡细胞增多,电镜观察细胞凋亡增多,同时Noggin可使BMP-4 mRNA及BMP-4蛋白表达下降.结论:Noggin能诱导PRL腺瘤细胞发生凋亡,可有抗PRL腺瘤的作用.

    作者:王雄伟;范月超;张洪涛;雷霆;李龄 刊期: 2006年第01期

  • 威灵仙对尿酸性肾病大鼠肾小管间质病变的保护作用

    目的:观察威灵仙对尿酸性肾病大鼠肾小管间质病变的保护作用.方法:将60只SD雄性大鼠分为6组,即正常对照组、模型空白组、苯溴马隆治疗组、小、中和大剂量威灵仙治疗组,每组10只,用腺嘌呤100mg/(kg·d)连续18 d灌胃造模,同时分别给予上述药物治疗6周后,检测各组大鼠血尿素氮、肌酐、尿酸和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性等指标,用HE染色观察肾小管间质尿酸盐结晶沉积及炎性细胞浸润情况,用免疫组化技术检测大鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达情况.结果:6周后各治疗组血尿酸和尿NAG活性降低,肾小管间质尿酸盐结晶沉积及炎性细胞浸润减少,肾组织NF-κB和MCP-1的表达下调(P<0.05).结论:威灵仙对尿酸性肾病大鼠肾小管间质病变具有保护作用,其机制至少部分与下调肾小管间质中NF-κB和MCP-1蛋白的表达有关.

    作者:林凤平;任开明;宋恩峰;胡家才;吴凡 刊期: 2006年第01期

  • 惠州市2004年恶性肿瘤死因分析

    目的:了解广东省惠州市居民恶性肿瘤死亡状况,为预防和治疗恶性肿瘤提供科学依据.方法:对2004年惠州市10个样本区(镇)全部人口共230 786人进行死亡人口登记,对恶性肿瘤死亡资料进行统计分析,计算其死亡率、死因构成及死因顺位等.结果:2004年惠州市10个样本区(镇)总死亡人数863例,其中恶性肿瘤181例,死亡率为78.43/10万,包括男116例,女65例,男女死亡人数之比为1.78:1.恶性肿瘤前9位死因死亡人数及其死亡率分别为肝癌58例(25.13/10万),肺癌33例(14.30/10万),胃癌20例(8.67/10万),大肠癌17例(7.37/10万),白血病14例(6.07/10万),乳腺癌8例(3.47/10万),食管癌7例(3.03/10万),宫颈癌5例(2.17/10万),鼻咽癌6例(2.60/10万),其它13例.消化系统恶性肿瘤106例,占恶性肿瘤总构成的58.56%.结论:肝癌、肺癌、胃癌、大肠癌和白血病是影响惠州市居民身体健康的主要恶性肿瘤,占恶性肿瘤死因的78.45%.

    作者:余志金;许岸高;张晓慧;钟旭辉 刊期: 2006年第01期

  • 肺癌并自发性气胸23例临床分析

    目的:了解肺癌并自发性气胸的临床特点.方法:对1999年1月1日至2003年12月31日期间在上海市肺科医院住院的肺癌并自发性气胸23例患者的年龄、性别、肺癌分期、病理类型、发病机制及预后进行回顾性分析.结果:自发性气胸首发症状主要有胸闷、胸痛和气促.10例患者有吸烟史,6例患者于胸水引流过程中出现自发性气胸,8例患者于化疗后出现气胸.3例患者气管镜检查示气管或支气管不完全阻塞.结论:临床上肺癌并自发性气胸少见,临床表现无特异性,预后差.

    作者:韩志青;徐晓雯;罗艳蓉;徐瑛 刊期: 2006年第01期

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主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所