学术投稿

maltosyl-agarose亲和层析法提取人肺灌洗液中肺表面活性物质结合蛋白 A及其鉴定

李秋平;杜江;樊慧珍;封志纯

关键词:肺表面活性物质, 载体蛋白质类
摘要:目的:提取及纯化人肺灌洗液中肺表面活性物质结合蛋白 A(SP-A).方法:由支气管肺泡灌洗液经 10 000 g离心 40 min获得的沉淀中提取 SP-A.沉淀溶解于 6M的尿素, SP-A蛋白重新复性后上清过 maltosyl-agarose柱进行亲和层析,用梯度 EDTA洗脱 SP-A,并过 surpose 6柱纯化.聚丙烯酰胺电泳和 Western blotting鉴定.结果:经亲和层析法可以从人肺灌洗液中提取出高纯度的 SP-A,聚丙烯酰胺电泳在 36 ku和 70 ku处可见清晰条带,在分子量 118 ku以上亦可看到 3条清晰条带,经 Western blotting鉴定均为特异性 SP-A蛋白.结论:采用 maltosyl-agarose亲和层析法可以从肺灌洗液中获得高纯度的 SP-A.为进一步研究 SP-A的功能和制备 SP-A单克隆抗体提供了充足的 SP-A来源.
实用医学杂志相关文献
  • 本刊关于计量单位及数字用法的说明

    作者: 刊期: 2005年第09期

  • 带状疱疹患者皮肤及皮神经彩色多普勒超声声像改变

    目的:了解带状疱疹患者皮肤、皮下组织及皮神经病变的彩色多普勒超声声像改变及其诊断意义.方法:用 7~ 11 MHz彩色多普勒超声检测 43例带状疱疹患者病变皮肤、皮下组织及皮神经,以患者健侧对应部位为对照.结果:带状疱疹患者患部皮肤、皮下组织的厚度都比对照部位(健侧)明显增厚,皮神经明显增粗,经统计学处理有显著性意义( P均 < 0.01),患部皮肤、皮下组织及皮神经的声像改变主要是回声减低,血流信号增多.结论:带状疱疹患者病变皮肤、皮下组织及皮神经的彩色多普勒超声声像呈炎性改变,可辅助临床诊断.

    作者:林春苗;钟伟邦;杨健 刊期: 2005年第09期

  • CD20单克隆抗体联合自体干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤 1例

    大剂量放、化疗结合自体干细胞移植( ASCT)可明显提高非霍奇金淋巴瘤( NHL)的缓解率,延长患者生存期,但终仍有 40%~ 70%复发.复发的主要原因是体内残留肿瘤细胞重新生长或输注的自体干细胞中存在肿瘤细胞污染. CD20单克隆抗体在降低肿瘤负荷,清除移植物中残留肿瘤细胞具有独特的优势,使 ASCT的疗效得到明显提高.本文通过报道我院 1例 CD20单克隆抗体联合自体外周血干细胞移植治疗 IV期高度恶性 NHL(弥漫性大 B细胞型),探讨 CD20单克隆抗体在这方面的临床应用问题.

    作者:何慧清;许晓军;任志娟;林淑华;郭子文;古滔华;邱大发 刊期: 2005年第09期

  • 暴发型甲型副伤寒 54例临床分析

    2004年 2月至 2004年 4月,在温州苍南望里地区有上千人出现发热,经查为甲型副伤寒水源污染致暴发,在我科共收治的甲型副伤寒病人 54例,所有病人经血和粪便培养得到确诊,通过治疗取得了良好效果,现将其诊治情况分析如下.

    作者:黄德周;林昌平;金尚福 刊期: 2005年第09期

  • 文献计量指标的定义

    作者: 刊期: 2005年第09期

  • 性传播疾病门诊患者泌尿生殖道三种病原体感染情况调查分析

    目的:了解以泌尿生殖道症状为主诉的就诊患者淋球菌( NG)、解脲脲原体( UU)和沙眼衣原体( CT)感染情况及特点.方法:对 854例具有尿道分泌物和阴道分泌物异常的门诊初诊患者,取泌尿生殖道内分泌物标本,应用常规实验室检查方法,检测 NG、 UU和 CT.结果: 854例患者中男 357例,女 497例,共检出 NG 182例( 21.3%), CT 176例( 20.6%), UU 373例( 43.7%).单一病原体感染 403例,一种以上病原体复合感染 164例.结论:本组性传播疾病患者中, UU感染率高, NG次之, CT低.复合感染也较常见.

    作者:张燕;张国娣 刊期: 2005年第09期

  • 远程胎儿监护网络监测高危妊娠的临床意义

    目的:探讨远程胎儿监护网络用于高危妊娠的临床意义.方法:选择 120例高危妊娠孕妇,其中 60例采用远程胎儿监护进行无负荷试验( NST)监测作为研究组,余 60例同期进行常规监护(胎动计数和定期到医院进行 NST监测),分别统计两组 NST、胎儿宫内窘迫、新生儿预后和剖宫产情况.结果:研究组孕期监护次数为 1837次,明显高于对照组 816次( P< 0.05),而远程监护费用每次均低于对照组.研究组新生儿窒息和早产发生率分别为 18.3%和 13.3%,低于对照组的 30.8%和 30.3%,差异有显著性( P< 0.05).研究组 NST异常者新生儿预后不良发生率为 42.9%, NST正常者新生儿预后不良发生率为 18.8%,差异有显著性( P< 0.05).研究组和对照组剖宫产率分别为 41.7%和 36.7%,差异无显著性 (P >0.05).结论:应用远程胎儿监护网络进行高危妊娠的监测,可减少早产和新生儿窒息发生 ,而对剖宫产率无影响.

    作者:朱志俏 刊期: 2005年第09期

  • 椎弓根螺钉应用于腰椎间盘突出症研究进展

    腰背痛仅仅一小部分是由于腰椎间盘突出引起 (lumbar disc herniation)[1],但是腰椎间盘突出症相当常见,仅美国每年就有 28 000台手术前诊断为腰椎间盘突出症而进行的手术.腰椎间盘突出症手术病人占腰椎间盘突出症的 10%~ 20% [2],其中绝大部分只需要做单纯腰椎间盘髓核摘除,但是部分病人合并有其他腰椎退行性病变 (acquired lumbar degenerative disease),特别是退行性腰椎不稳,单纯腰椎间盘髓核摘除效果不理想,需要做脊柱稳定手术,目前以后路腰椎椎弓根螺钉 (pedicle screw)为常用.

    作者:朱慧锋;王珠美;潘子毅;应敏娟 刊期: 2005年第09期

  • 神经刺激器用于腰神经丛及坐骨神经阻滞的临床观察

    近年来,随着神经刺激器的应用、药物的改善,使得外周神经阻滞在下肢手术中的应用越来越广泛,其中腰神经丛-坐骨神经联合阻滞更备受关注.传统的腰神经丛阻滞及坐骨神经阻滞由于是盲探操作,依赖操作者的经验和患者的主诉,故临床上常有阻滞不全或麻醉失败.我院采用 Stimuplex神经刺激器行腰神经丛及坐骨神经阻滞 157例,临床观察效果满意,具有定位准确,成功率高,神经损伤发生率少等优点,现报告如下.

    作者:李勇帅;鲁开智;曹剑 刊期: 2005年第09期

  • 高效液相色谱法测定兔玻璃体内美罗培南浓度的方法研究

    目的:建立一种反相高效液相色谱法紫外线检测法,测定玻璃体内的美罗培南浓度.方法:应用 Agilent 1100系列型高效液相色谱仪,色谱柱为 Eclipse XDB-C8,流动相为乙腈水(乙腈:水 =10∶ 90),检测波长 298 nm,参比波长: 400 nm,加入乙腈自然沉淀,提取剂为乙腈,内标物为对乙酰氨基酚,流速为 0.8 mL/min.结果:本方法测定的线性范围为 0.05~ 2.5 mg/mL,低检测浓度是 0.05 mg/mL,回收率为 98.93%,日内精密度≤ 3.03%,日间精密度≤ 5.49%.结论:该方法简单,准确,适合于玻璃体腔注射美罗培南的药物浓度测量.

    作者:王志立;沈丽君;乔宝笛;胡国新 刊期: 2005年第09期

  • 自体造血干细胞移植治疗淋巴瘤和乳腺癌的临床研究

    近年来外周血干细胞应用于血液系统恶性疾病及某些实体瘤的治疗在国内外进展很快,尤其是恶性淋巴瘤,近年来国内外接受外周血干细胞移植病例数明显增加,治疗效果明显提高.我们总结了我院对 9例淋巴瘤, l例乳腺癌进行自体外周血干细胞移植 (APBSCT)的临床治疗,疗效较为满意.现将干细胞动员、采集、预处理及移植后疗效进行分析.

    作者:彭洪菊;方美云;张建民;孙光;关敬范;孙国珍;王一;姜风 刊期: 2005年第09期

  • 小儿继发性肾小球疾病 121例流行病学特点与病理分析

    目的:研究小儿继发性肾小球疾病的流行病学特点和病理类型分布.方法:对 1996年 7月至 2004年 9月经肾活检确诊继发性肾小球疾病的 121例患儿进行分析.结果: 537例肾活检,继发性肾小球疾病 121例,占 22.5%.继发性肾小球疾病的临床类型:紫癜性肾炎 54例 (44.6% ),男女比例为 1.25∶ 1;乙肝病毒相关性肾炎 35例 (28.9% ),男女比例为 4.83∶ 1;狼疮性肾炎 32例 (26.5% ),男女比例为 0.23∶ 1. 在年龄分布上, 7~ 14岁为高发年龄段,其次 3~ 7岁和 >14岁.继发性肾小球疾病病理类型:膜性肾病 46例 (38.0% ),局灶增殖性肾炎 24例 (19.8% ),系膜增生性肾炎 27例 (22.3% ),轻微病变 9例 (7.4% ),毛细血管内增生性肾炎 8例 (6.6% ),局灶节段性肾小球硬化 5例 (4.1% ),正常肾小球 1例 (0.8% ),硬化性肾炎 1例 (0.8% ).结论:小儿肾小球疾病中,继发性肾小球疾病占 22.5%,临床类型主要为紫癜性肾炎、乙肝病毒相关性肾炎、狼疮性肾炎;乙肝病毒相关性肾炎男性多发,狼疮性肾炎女性多发;在年龄分布上, 7~ 14岁为高发年龄段.病理类型依次为膜性肾病、局灶增殖性肾炎、系膜增生性肾炎等.小儿肾脏疾病经皮肾活检对患者的临床诊断和指导治疗是有益的.

    作者:陈晓英;杨宇真;卢立肖;杨青;庄捷秋 刊期: 2005年第09期

  • 小剂量反应停治疗系统性红斑狼疮难治性皮肤黏膜损害的临床观察

    目的:探讨小剂量反应停治疗系统性红斑狼疮 (SLE)难治性皮肤黏膜损害的疗效及安全性.方法:采用小剂量反应停治疗了 16例 SLE患者的难治性皮肤黏膜损害,分别观察其在治疗 1个月、 3个月后的疗效,评估药物的副作用.结果: 16例患者均顺利完成治疗,其皮肤黏膜损害在治疗 1个月、 3个月后获得完全缓解的例数分别有 12例 (75% )及 14例 (87.5% ),获得部分缓解的例数分别有 4例 (25% )及 2例 (12.5% );所有患者的病情活动度、 C 反应蛋白 (CRP) 、抗 SSA抗体和 (或 )抗 SSB抗体在治疗前后均有明显改善( P< 0.05).主要副作用为恶心、呕吐,通过减量后症状消失,未发现外周神经病变.结论:反应停治疗 SLE患者难治性皮肤黏膜损害的疗效明显,副作用相对较轻.

    作者:汪迅;叶志中;庄俊汉;李博;张丽君;李剑松;钟力 刊期: 2005年第09期

  • 金双歧对新生儿黄疸的治疗作用及单个核细胞凋亡的影响

    目的:探讨金双歧制剂对新生儿高胆红素血症的治疗作用及外周血单个核细胞凋亡的影响.方法:将 2003年 6月至 2004年 10月住院的黄疸新生儿 50例,随机分为观察组和对照组各 25例,对照组采用常规的治疗,观察组则在对照组的基础上加口服金双歧制剂,观察两组患儿黄疸消退时间,并于治疗的第 1天和第 7天分别检测患儿外周血的单个核细胞凋亡情况,同时检测 20例正常儿的外周血单个核细胞凋亡比例,比较两种治疗情况下细胞凋亡率的变化.结果:口服金双歧制剂能有效地促进新生儿黄疸的消退,且能降低黄疸新生儿的外周血单个核细胞凋亡率.结论:口服金双歧制剂对新生儿黄疸有一定的辅助治疗作用,可促进黄疸消退和通过降低单个核细胞的凋亡比例来预防感染.

    作者:严务贞;郭洲;宋文秀;赵华新;林永文;黄桥旺 刊期: 2005年第09期

  • 不同保存温度对血浆部分凝血因子活性的影响

    目的:探讨在不同保存温度,不同保存时间血浆部分凝血因子活性的变化,为临床选择不同血浆输注提供实验室依据.方法:采集 10袋( 200 mL/袋)的 ACD-B血液保存液保存的血液,在采血后 1 h内留样 10 mL作为对照组样本;每份全血在无菌条件下平均分为 2袋,作为 2个实验组,热合封口.第 1组保存于 (4± 2)℃,保存 48 h;第二组先保存于 (22± 2)℃,保存 6 h之后,转移到 (4± 2)℃保存 42 h.两个实验组分别在采血后 6 h, 24 h和 48 h留取样本.将对照组及实验组样本在取样后立即离心,分离血浆,于-18℃保存 30 d后,进行凝血因子Ⅴ( FⅤ)、凝血因子Ⅷ( FⅧ)、纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ的检测.结果:两组血浆在不同温度、不同保存期的凝血因子Ⅴ、纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ水平无显著改变;而在保存 8 h后,实验组血浆凝血因子Ⅷ水平均低于对照组凝血因子Ⅷ水平( P< 0.05).在保存 24 h后,实验组血浆凝血因子Ⅷ水平进一步下降( P< 0.05).结论:在采血后 24 h保存期内,血浆中凝血因子,除凝血因子Ⅷ外,凝血因子Ⅴ,纤维蛋白原和凝血因子Ⅶ活性均没有明显改变;凝血因子Ⅷ水平在 4℃保存 8 h后下降 14%;在保存 24 h后,凝血因子Ⅷ水平下降约 30%;在保存 48 h后,凝血因子Ⅷ水平下降约 40%.实验结果表明,在新鲜冰冻血浆供应紧张的情况下,除非需要大剂量补充凝血因子Ⅷ(病人凝血因子Ⅷ水平低于正常水平 30%),否则可用 24h内冰冻血浆和冰冻血浆替代新鲜冰冻血浆补充凝血因子Ⅴ和纤维蛋白原等稳定的凝血因子.

    作者:聂咏梅;廖剑锋;付涌水;江朝富;周豪杰;陶黎阳 刊期: 2005年第09期

  • maltosyl-agarose亲和层析法提取人肺灌洗液中肺表面活性物质结合蛋白 A及其鉴定

    目的:提取及纯化人肺灌洗液中肺表面活性物质结合蛋白 A(SP-A).方法:由支气管肺泡灌洗液经 10 000 g离心 40 min获得的沉淀中提取 SP-A.沉淀溶解于 6M的尿素, SP-A蛋白重新复性后上清过 maltosyl-agarose柱进行亲和层析,用梯度 EDTA洗脱 SP-A,并过 surpose 6柱纯化.聚丙烯酰胺电泳和 Western blotting鉴定.结果:经亲和层析法可以从人肺灌洗液中提取出高纯度的 SP-A,聚丙烯酰胺电泳在 36 ku和 70 ku处可见清晰条带,在分子量 118 ku以上亦可看到 3条清晰条带,经 Western blotting鉴定均为特异性 SP-A蛋白.结论:采用 maltosyl-agarose亲和层析法可以从肺灌洗液中获得高纯度的 SP-A.为进一步研究 SP-A的功能和制备 SP-A单克隆抗体提供了充足的 SP-A来源.

    作者:李秋平;杜江;樊慧珍;封志纯 刊期: 2005年第09期

  • 高渗钠、门冬氨酸钾镁联合治疗肝硬化低钠血症的临床观察

    目的:探讨肝硬化腹水并低钠血症的治疗方法.方法: 20例患者饮食不限钠,并静脉补 10%氯化钠+门冬氨酸钾镁,第 1天补充总量 1/2,以后根据电解质及患者临床表现的变化来调整,疗程 3~ 5 d.结果:高渗钠、门冬氨酸钾镁联合治疗肝硬化腹水并低钠血症,总有效率为 85%,病死率为 15%.结论:补充高渗钠、门冬氨酸钾镁联合治疗肝硬化腹水并低钠血症,有利于改善临床症状、尿量和病情的预后,但并不增加腹水的产生.

    作者:陈叶青;周国华;周红宇;冷明芳;王丽姣;刘树旗 刊期: 2005年第09期

  • 退黄洗剂治疗新生儿黄疸的临床研究

    目的:观察退黄洗剂治疗新生儿黄疸的疗效,并探讨其可能的作用机制.方法: 203例符合新生儿高胆红素血症 (主要高间接胆红素血症 )的新生儿,随机分 3组,观察组( 93例):常规西医治疗+退黄洗剂外洗;对照组 1( 59例):常规西医治疗;对照组 2( 51例):常规西医治疗+退黄口服液,比较 3组退黄时间及退黄效果 (日均胆红素下降值 ). 结果:日均胆红素下降值及退黄时间在观察组虽不及对照组 2(P< 0. 05)但明显优于对照组 1(P< 0. 05).结论:退黄洗剂对新生儿黄疸有一定治疗作用,可缩短治疗时间,降低血胆红素水平,尤其适用于新生儿黄疸早期治疗、早发性母乳性黄疸的治疗及高胆红素血症的预防.

    作者:张素玲;顾卫;贺慧蕾;叶少霞;徐桂萍;黄壁璇 刊期: 2005年第09期

  • 思密达保留灌肠治疗小儿急性腹泻

    我们于 2002年 7月至 2004年 11月,对我院儿科门诊及住院的急性腹泻患儿进行思密达保留灌肠,避免了经口服给药的困难,提高了疗效,现报道如下.

    作者:张燕;陈胜利 刊期: 2005年第09期

  • 半巢式 PCR检测胃黏膜幽门螺杆菌与其它四种方法的比较

    目的:建立一种半巢式 PCR方法检测幽门螺杆菌 (helicobacter pylori, HP)感染.方法:利用半巢式 PCR方法( heminested PCR assay)扩增磷酸葡萄糖胺变位酶基因( phosphogluco-samine mutase gene)内部片段,从而特异性地检测临床消化道标本中低拷贝数的幽门螺杆菌.并对其特异性和敏感性进行了分析,同时与临床常用的快速尿素酶试验、涂片镜检、 14C尿素呼气试验和细菌培养 4种方法进行了比较. 结果: 半巢式 PCR方法敏感性和特异性分别为 98. 2% and 96. 0%,采用半巢式 PCR方法、快速尿素酶试验、涂片镜检、 14C尿素呼气试验、细菌培养检测 HP的阳性率分别为 69. 5%, 61. 0%, 53. 7%, 67. 1%, 48. 8%. 结论: 半巢式 PCR是一种简便、高敏感性和特异性检测 HP的方法.

    作者:冉向阳;王缚鲲;张林;冯子坛;陈兴;安黎云;王宪灵;刘洁东 刊期: 2005年第09期

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主办:广东省医学情报研究所