等位基因特异性PCR检测HBV G1896A变异的缺陷和改进

彭晓谋；顾琳；陈雪娟；黄仰甦；高志良

关键词：肝炎病毒, 乙型, 突变, 基因, 病毒, 聚合酶链反应

摘要：目的:探讨AS-PCR检测HBV DNA前C区点突变(G1896A)的缺陷和改进方法.方法: 采用单管双复性温度方案进行AS-PCR检测.以不同浓度的HBV野生型和G1896A突变型重组质粒DNA为模板和不同扩增条件分析AS-PCR的缺陷.收集100例HBsAg阳性/HBeAg阴性患者和60例HBsAg阳性/HBeAg阳性患者的血清,根据荧光定量PCR的检测结果,调整血清中的HBV DNA含量,采用AS-PCR比较检测调整前后的差异,探讨AS-PCR的改进办法.结果: AS-PCR检测质粒DNA时显示,野生模板数量较大和特异性扩增循环次数过多时易出现假阳性,而特异性扩增循环次数过少时检测的敏感性下降.在检测血清标本时,HBeAg阳性患者和血清HBV DNA含量高的HBeAg阴性患者易出现假阳性.调整HBV DNA含量后,AS-PCR的这种假阳性可以消除.改进AS-PCR检测血清标本显示,在HBeAg阴性患者中,血清HBV DNA含量高的G1896A变异检出率显著低于HBV DNA含量较低患者(P＝0.019 2).结论: AS-PCR存在其特异性受野生型原始模板数量影响的缺陷,不适用于检测原始模板数量未知、非均一、且波动较大的临床标本.调整标本中的原始模板数量可提高AS-PCR检测慢性乙型肝炎患者血清中HBV G1896A变异的特异性.G1896A变异不是HBsAg阳性/HBeAg阴性患者出现HBV高复制的主要发生机制.

实用医学杂志相关文献

曲马多在剖宫产术后硬膜外自控镇痛中的应用价值

目的:调查剖宫产术后曲马多硬膜外自控镇痛(PCEA)的效果.方法:选择120例在硬膜外麻醉下行剖宫产术的患者随机等分为3组.A组:负荷量为吗啡2 mg+0.25%布比卡因,维持用药为0.125%布比卡因+吗啡50 μg/mL;B组:负荷量为曲马多100 mg+0.25%布比卡因,维持药为0.125%布比卡因+曲马多4 mg/mL;C组:负荷量同B组,维持用药为0.125%布比卡因+曲马多8 mg/mL.PCEA参数设定:负荷量均为6 mL,单次剂量3 mL,维持剂量2 mL/h锁定时间均为15 min.术后记录24 h安静下VAS(RVAS),24 h以后卧床活动、下床活动时VAS(C-VAS).观察不良反应的发生率.结果:A组与C组病人VAS评分差异无显著意义(P＜0.05).B、C两组术后副作用明显少于A组(P＜0.05).B、C两组搔痒的发生率明显低于A组(P＜0.05).结论:剖宫产术后采用较大剂量的曲马多(浓度达8 mg/mL)行PCEA,镇痛效能与持续应用吗啡复合局麻药的传统配方相当,但可减少副作用的发生.

作者：王丹红；逄博；刘建；王喜红刊期： 2003年第05期
深冷冻同种异体牙移植的研究

目的:探讨深冷冻同种异体牙移植的移植效果及移植失败的原因.方法:对40例患者进行深冷冻同种异体牙移植术,并定期复诊,进行临床及X线检查.结果:移植成功率为87%,对移植失败病例进行修复治疗.结论:同种异体牙牙源广,恢复行使功能时间短,与牙槽骨有较高的生物相容性,相对价廉.

作者：李银珠；容柏成；郑美华；黄妙琼刊期： 2003年第05期
炎症性肠病的内科治疗

炎症性肠病是一种病因未明的炎症状态,包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD),在西方国家相当常见,国内发病率亦呈增加趋势.UC特征为主要累及结肠黏膜层,偶尔累及黏膜下层的反复发作的炎症.CD则可累及从口至肛周的整个消化道,并呈透壁性的炎症的特点.

作者：何瑶；陈旻湖刊期： 2003年第05期
干扰素治疗宫颈糜烂的临床体会

宫颈糜烂是妇女的常见病与多发病,积极防治宫颈糜烂对提高妇女的健康有重要意义.近年来,HPV作为引起宫颈癌发生的首要因素已引起人们高度重视.

作者：郭玉娜；李红刊期： 2003年第05期
丝裂霉素C在眼翼状胬肉术中的应用

目的:观察丝裂霉素C(mitomycin-C,MMC)在翼状胬肉术中的防治效果. 方法: 回顾1998年1月～2001年1月32例38眼翼状胬肉患者施行翼状胬肉切除带蒂结膜瓣移植联合术中一次应用0.2g/L丝裂霉素C棉片5min的预防复发情况.结果: 32例38眼术后随访6～12个月,有2眼复发,复发率5.3%,术中、术后及随访期间未发现严重的眼部并发症及全身毒性反应.结论: 翼状胬肉切除带蒂结膜瓣移植联合术中应用丝裂霉素C是一种简便、安全、有效、经济,减少翼状胬肉术后复发的治疗方法之一.

作者：邓正凤；韩爱荣；黎春连；韩江刊期： 2003年第05期
核因子-κB活化在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的:研究核因子-κB (NF-κB) 活化在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)肺损伤中的作用和NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)的作用. 方法:实验动物随机分成3组,对照组,ANP组,PDTC组,然后逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作ANP模型.观察血清淀粉酶、动脉血氧分压(PaO2)、胰腺、肺组织病理变化、NF-κB抑制蛋白IκBα及NF-κB p65 mRNA在肺组织的表达.结果: 应用PDTC后,PDTC组与ANP组比较,血清淀粉酶明显下降,由(8 231.20±848.70)U/L降至(4 205.20±1 611.49)U/L;PaO2升高,由(80.70±8.05)mmHg升至(86.80±3.58)mmHg;胰腺、肺组织损伤减轻;NF-κB迅速活化,肺组织中IκBα表达升高,NF-κB p65 mRNA表达下降.结论: NF-κB活化在ANP肺损伤发病机制中起作用,抑制NF-κB活化可改善大鼠ANP肺损伤.

作者：左伟刊期： 2003年第05期
12种抗生素对不动杆菌体外抗菌活性分析

目的:了解不动杆菌引起感染疾病的特点及对常用抗生素耐药的监测.方法: 采用美国Microscan Walkaway-40全自动细菌分析系统,药敏采用Etest药敏纸条MIC法进行鉴定及药敏试验.结果: 58株不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/棒酸和阿米卡星的敏感率高达96.6%、96%、88%、88%、84.5%,对环丙沙星、头孢曲松、头孢他定敏感率分别为79%、77.6%、67.2%,对头孢噻肟、庆大霉素、头孢呋新、头孢哌酮敏感率较低,分别为63.8%、60.3%、58.6%、55.2%.结论: 不动杆菌对加酶抑制剂药物和亚胺培南的敏感性较高,对不含酶抑制剂的药物(如头孢噻肟、头孢哌酮、头孢呋新等)敏感率较低.

作者：王媚刊期： 2003年第05期
亚砷酸联合全反式维甲酸、化疗治疗急性早幼粒细胞白血病

目的:观察总结三氧化二坤(As2O3)、全反式维甲酸(ATRA)和化疗联合治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效和副作用.方法:对52例初治或复发APL患者分别采用ATRA、化疗和As2O3诱导缓解,完全缓解(CR)后采用化疗和As2O3序贯维持治疗.结果:33例初治患者CR率100%,19例复发患者CR率78.95%,3年生存率81.82%.结论:APL患者CR后采用As2O3与化疗序贯性维持治疗疗效好,长期生存率高.复发患者As2O3诱导疗程需相应延长.

作者：游伟文；汪明春；蔡云；卓家才；陈俊雄；张锐发刊期： 2003年第05期
炎症性肠病的病理诊断与鉴别诊断

1 克隆病(Crohn's disease,CD)克隆病病变主要累及回肠末端和近段结肠,其次为远段结肠、近端回肠和空肠等处,直肠常不受累.另外还可以累及消化管的任何部位.统计分析提示,约40%的病例病变仅累及小肠,30%病变限于结肠,30%的病例病变同时见于小肠和结肠.典型的病例病变呈节段性,故又有局限性肠炎之称.

作者：梅开勇；林汉良刊期： 2003年第05期
原发性大网膜扭转2例外科治疗体会

我院于1999年6月～2002年12月收治原发性大网膜急性扭转2例,均经外科手术治愈出院,今总结如下.

作者：滕奔宇刊期： 2003年第05期
肝内外胆道结石手术治疗176例临床体会

目的:总结12年来对176例肝内外胆道结石手术治疗的经验.方法:采用回顾性分析方法.本组患者经肝门部Ⅰ～Ⅲ级胆管切开取石、狭窄整形、肝胆管空肠盘式吻合136例(其中28例同时行不规则肝叶切除);经肝门部胆管及经肝表面联合切开取石40例.结果:4例死于严重化脓性梗阻性胆管炎,围手术期再手术5例,术后残石7例,术后胆道感染13例,其余病人全部治愈,成功率达83.5%.结论:只要注意术前综合判断、术中正确处理、术后综合治疗即可提高手术成功率及减少并发症的发生率.

作者：杨则安；陈孝实；邱招涨；林金伟刊期： 2003年第05期
登革热病人住院期间的防护

2002年9～10月我院收治21例登革热病人,现就我们对登革热采取的防护措施及防止疫情扩散的效果进行回顾性总结.

作者：高明凤；刘晓芸刊期： 2003年第05期
长程ABC药物对老年性高血压患者血管结构及功能的影响

目的:探讨长程ABC药物[阿斯匹林(aspirin)、倍他乐克(β-blocker)、舒降之(Cholesterol)]对老年性高血压(EEH)患者血管内皮功能和结构的影响.方法:采用高分辨率超声技术检测经ABC治疗2年前后的33例EEH患者肱动脉流量介导的舒张功能(FMD)和颈总动脉内中膜厚度(IMT),同时分别取30例正常血压的老年人和29例服用双氢克尿噻或(及)复方降压片治疗的EEH患者作对照组并比较分析.结果:两EEH组治疗前较正常对照组的FMD显著降低、IMT显著增厚.经ABC治疗后的FMD显著升高、IMT显著变薄,而EEH对照治疗组的FMD、IMT则无统计学差异.结论:EEH患者存在明显的血管内皮功能障碍和动脉硬化增厚,长程ABC药物具有改善其血管内皮功能和逆转其血管重构的作用.

作者：程旭青；李涵志；邹文刊期： 2003年第05期
面神经垂直段梳理术治疗半面痉挛

目的:探讨面神经垂直段梳理术治疗半面痉挛的疗效.方法: 对5例(5侧)半面痉挛的病人均行乳突经路面神经垂直段梳理术.结果: 5例经随访0.5～2年,3例治愈,2例显效.结论: 面神经垂直段梳理术治疗半面痉挛,安全有效,是多种手术疗法中可取的一种.

作者：曾勇；王跃建；林枫刊期： 2003年第05期
原发性痛风47例误诊原因和防治对策

目的:提高原发性痛风的诊断水平.方法:对48例误诊病例进行回顾性分析.结果:痛风误诊的主要原因是不少基层医院未开展尿酸检查,对非发作期病例病史了解不够全面,过分依赖X线检查,未能和并存症和并发症进行鉴别等.结论:应普及血尿酸检查,提高临床医生对本病的认识.

作者：蔡文哲刊期： 2003年第05期
2型糖尿病合并脑梗塞危险因素分析

目的:探讨2型糖尿病合并脑梗塞的危险因素.方法: 以2型糖尿病合并脑梗塞125例与2型糖尿病无合并脑血管意外158例(对照组)进行对照分析.结果: 2型糖尿病合并脑梗塞患者血糖水平、胰岛素水平、血压、血脂等因素与2型糖尿病患者发生脑梗塞有关.结论: 2型糖尿病患者应严格控制血糖、血压、血脂水平,改善胰岛素抵抗及高胰岛素血症,预防脑梗塞发生.

作者：陈丹杰；杨华章刊期： 2003年第05期
瓣环成形术在功能性三尖瓣关闭不全中的应用

功能性三尖瓣关闭不全绝大多数继发于左心瓣膜病变.因肺循环高压,引起右心室压力负荷过重,而导致心室扩大与心肌肥厚;同时由于三尖瓣环的结构较薄弱,瓣叶的接触面较少,且瓣环在前瓣和后瓣的附着部均为右心室的游离壁;当右心室扩大时前后瓣环也随之扩张,致使三尖瓣叶对合不良,引起功能性反流,长期发展可导致右心室功能不可逆性的损害.因其主要病变在瓣环的扩大,瓣膜本身并无病变.近年来,多数学者主张在行左心瓣膜置换的同时,行三尖瓣环成形术,以改善术后右心功能,提高手术疗效.随着近年各种瓣环成形方法的不断改进,手术成功率和术后心功能恢复程度大大提高.本文就当前瓣环成形术在功能性三尖瓣关闭不全中的应用现况作一综述.

作者：陈天博；蓝斌刊期： 2003年第05期
加强对炎症性肠病的认识,提高临床诊治水平

炎症性肠病(inflammatory bowel diseases, IBD)包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)及克罗恩病(Crohn's disease, CD).该病在欧美国家较常见,UC及CD患病率分别为50/10万～80/10万及20/10万～100/10万,发病率分别为3/10万～10/10万及1/10万～10/10万,亚洲国家较少见.近年来我国不少医生在临床工作中感觉到临床诊断IBD的病例数似有增多的趋势.究竟是IBD发病率真的有所上升,还是与广大医生对IBD的认识有所提高,加上临床诊断手段(如大肠镜)的普及使确诊的病例数增多有关,目前还无法下结论,我国尚未有IBD流行病学的研究报告.

作者：陈旻湖刊期： 2003年第05期
经尿道双极气化切割治疗前列腺增生症280例

目的:探讨双极气化切割治疗前列腺增生症(BPH)的效果.方法:应用英国嘉乐双极气化切割襻对280例BPH行经尿道前列腺气化切除.结果:前列腺平均重量72 g;平均手术时间38 min;平均出血90 mL;平均留置尿管时间48 h;术后平均住院3.5 d.大尿流率由术前5.5 mL/s上升至术后3个月的20.2 mL/s;I-PSS症状评分术前22.3分,术后3个月降至4.6分(P＜0.001).结论:经尿道前列腺双极气化切割出血少,手术安全,治疗效果明显,是治疗BPH有效的治疗方法.

作者：邓交；周兴刊期： 2003年第05期
西脉环抱式接骨板治疗右尺骨上段陈旧性骨折伴桡骨小头半脱位1例

患者男,29岁.因右前臂骨折伴活动障碍4个月余于2002年9月17日入院.患者4个月前不慎摔倒,右手撑地,当时感右前臂剧痛,不能活动,到当地医院摄片示:右尺骨上段骨折,予右前臂管形石膏外固定,2个月后拆石膏,见右前臂畸形肿胀,活动时疼痛.查体:右前臂尺侧上段畸形明显,压痛(+),右肘外侧向外突出 ,按压桡骨小头可将其复位,松手即弹回,右前臂活动受限.X线片示:右尺骨上段骨折成角畸形,骨折断端移位明显,似有少许骨痂生长,右桡骨小头半脱位.初步诊断:右尺骨上段陈旧性骨折;右桡骨小头半脱位.

作者：周海龙刊期： 2003年第05期