学术投稿

基于HPLC-TOF-MS代谢组学方法的溴鼠灵毒性作用评价

严慧;卓先义;沈保华;向平;沈敏

关键词:法医毒理学, 代谢组学, 高效液相色谱-飞行时间质谱, 溴鼠灵, 大鼠
摘要:目的 分析溴鼠灵中毒大鼠尿液的代谢特征,揭示溴鼠灵干预对大鼠毒性作用的分子机制.方法通过构建大鼠溴鼠灵中毒模型,采用高效液相色谱-飞行时间质谱(high performance liquid chromatography-time of flight mass spectrometry,HPLC-TOF-MS)获取大鼠尿液代谢轮廓,并用正交偏小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA)进行多变量统计分析,找出与溴鼠灵毒性作用密切相关的差异代谢物.结果OPLS-DA得分图显示给药前后不同时间的大鼠尿液样本代谢物轨迹在各时间段内相似度较好,呈现各自聚类现象.比较溴鼠灵给药前后大鼠尿液样本,筛选出22个与溴鼠灵毒性相关的差异代谢物.结论溴鼠灵主要通过干扰大鼠体内的三羧酸循环、糖酵解、鞘脂代谢和色氨酸代谢等代谢通路发挥毒性作用,且溴鼠灵毒性作用具有累积效应.基于尿液HPLC-TOF-MS代谢组学方法可为溴鼠灵毒性作用的分子机制研究提供新思路.
法医学杂志相关文献
  • 电击头面部他杀1例

    1 案 例1.1 简要案情梁某,女,40岁,不明原因失踪约半个月后被发现死于自家床上,尸体已高度腐败.1.2 尸体检验尸表检查:尸体高度腐败,呈巨人观.尸体解剖:双耳垂及右前额见小片状表皮剥脱,中央区域凹陷,触之质硬,沿前额发际下、双侧耳廓及下颌切割面部皮肤并剥除,口唇及鼻部周围未见出血.颈部肌肉分层解剖未见出血. 剖开胸腹腔,全身各重要器官(脑、心、肺、脾、肝、双肾)不同程度腐败.

    作者:童昉;张健;梁悦;李文鹤;杨怡;张琳;周亦武 刊期: 2017年第03期

  • 基于HPLC-TOF-MS代谢组学方法的溴鼠灵毒性作用评价

    目的 分析溴鼠灵中毒大鼠尿液的代谢特征,揭示溴鼠灵干预对大鼠毒性作用的分子机制.方法通过构建大鼠溴鼠灵中毒模型,采用高效液相色谱-飞行时间质谱(high performance liquid chromatography-time of flight mass spectrometry,HPLC-TOF-MS)获取大鼠尿液代谢轮廓,并用正交偏小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA)进行多变量统计分析,找出与溴鼠灵毒性作用密切相关的差异代谢物.结果OPLS-DA得分图显示给药前后不同时间的大鼠尿液样本代谢物轨迹在各时间段内相似度较好,呈现各自聚类现象.比较溴鼠灵给药前后大鼠尿液样本,筛选出22个与溴鼠灵毒性相关的差异代谢物.结论溴鼠灵主要通过干扰大鼠体内的三羧酸循环、糖酵解、鞘脂代谢和色氨酸代谢等代谢通路发挥毒性作用,且溴鼠灵毒性作用具有累积效应.基于尿液HPLC-TOF-MS代谢组学方法可为溴鼠灵毒性作用的分子机制研究提供新思路.

    作者:严慧;卓先义;沈保华;向平;沈敏 刊期: 2017年第03期

  • 20723例亲子鉴定中19个STR基因座的突变分析

    目的 观察并分析肯定亲权关系的案件,探索STR基因座的突变规律.方法 采用Goldeneye 20A试剂盒对20723例肯定亲权关系的案件筛选等位基因突变事件,统计各基因座的突变率和突变等位基因的来源、片段大小、突变步数及重复单位的增加或减少情况,分析突变相关因素的特点.结果 19个STR基因座共发现548例突变,观察到557个突变事件,基因座的突变率为0.07‰~2.23‰.父系突变与母系突变的比例为3.06:1.突变以一步突变为主,增加与减少重复单位的情况相当;二步以上(含二步)突变更易出现重复单位减少.突变主要发生于中等位基因,重复单位增减比例相当,长等位基因突变中重复单位减少显著多于增加.父系突变出现重复单位增加与减少的比例相当,母系突变重复单位减少较增加多见.结论 各基因座的突变率差异具有统计学意义,当出现1~2个基因座不符合遗传规律时,应当加测其他检测系统,并结合突变基因座的信息计算PI值,以进一步明确鉴定意见.

    作者:毕洁;畅晶晶;李妙霞;余纯应 刊期: 2017年第03期

  • 事件相关电位客观评估视敏度的法医学应用

    目的 研究不同视敏度水平的事件相关电位(event-related potential,ERP)成分特征,以期为视敏度的客观评定提供理论依据.方法 选取16名被试进行单眼刺激.要求被试眼平视前方屏幕,注意屏幕中央的视觉刺激并对朝向不同的刺激进行计数.屏幕的中央会显示3种不同视敏度水平所对应的视标刺激图片,分别记录其ERP结果.结果 (1)阈上视敏度水平一致刺激的P1振幅高于阈值、阈下视敏度水平一致刺激的P1振幅,阈值和阈下视敏度水平一致刺激的P1振幅差异无统计学意义,冲突刺激与一致刺激在3种视敏度水平的趋势类似.(2)阈上和阈值视敏度水平都出现了潜伏期在340~500 ms内的P300成分;阈下视敏度水平在相应的时间窗内无P 300成分.3种视敏度水平的P 300振幅差异有统计学意义,振幅由大到小分别为阈上、阈值、阈下视敏度水平.结论 ERP技术可以成为法医学客观评定视敏度的新手段.

    作者:罗斌;季萌萌;孟欢欢;陈溪萍;陶陆阳 刊期: 2017年第03期

  • MALDI-TOF-MS对Y染色体上66个二等位基因的检测

    目的 分析华东地区汉族人群Y染色体上66个二等位基因遗传标记的多态性,并评价其法医学应用价值.方法 采用多重PCR联合基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术对华东地区205名汉族男性无关个体Y染色体上66个二等位基因遗传标记进行分型研究,使用直接计数法统计待测位点的等位基因频率,用公式计算基因多样性和单倍型多样性,用Arlequin v3.5.2.2软件检测该体系的单倍型并且进行群体遗传学比较.结果 其中60个二等位基因遗传标记在华东地区汉族男性人群中呈多态性分布,基因多样性为0.0385~0.5019,共检测到85种单倍型,单倍型多样性为0.9703.部分SNP位点的等位基因分布在华东地区汉族人群和新疆汉族人群、广东汉族人群差异具有统计学意义.结论 60个二等位基因遗传标记及其检测体系在亲权鉴定和个体识别中可补充提供遗传信息,MALDI-TOF-MS技术可以进行二等位基因遗传标记的分型检测.

    作者:宋雨桐;李莉;张立男;朱如心;柳燕;林源 刊期: 2017年第03期

  • 宿迁地区汉族人群25个Y-STR遗传标记的遗传多态性

    Y染色体是人类染色体中小的一条,目前已经精确定位到Y染色体上的STR遗传标记有400多个[1],而在法医学领域被广泛研究的只有20多个[2,3]. Y-STR遗传标记被广泛应用于人类进化、群体遗传结构分析、亲子鉴定、性犯罪等领域.Y-STR遗传标记呈现严格的父系遗传特征,在混合斑男性成分分析、男性个体来源推断、父系亲权关系鉴定、性犯罪和重大刑事案件排查等方面发挥重要作用[4-6].本研究采用Yfiler誖Plus PCR扩增试剂盒对宿迁地区639名汉族无关男性个体进行25个Y-STR遗传标记的遗传多态性调查,在群体水平评估其法医学鉴定的可行性,为法医学鉴定应用提供科学的基础数据.

    作者:许淑君;于海龙 刊期: 2017年第03期

  • DNA甲基化检测方法及其法医学应用研究进展

    DNA甲基化是表观遗传标记的重要组成部分,参与基因表达的调控,在生物发育、衰老以及肿瘤学等领域受到广泛关注.由于具有相对稳定性、可遗传、含量丰富、随龄变化等特点,在法医学领域,DNA甲基化可以作为DNA序列相关经典遗传标记的有效补充,用于年龄推断、组织体液来源检测、同卵双生子的鉴定等.DNA甲基化的检测方法主要有基于甲基化敏感限制性内切酶、重亚硫酸盐转化以及甲基化CpG结合蛋白等原理而建立的一系列方法,近年研究表明,第三代测序技术也可用于DNA甲基化检测.本文就DNA甲基化检测方法及在法医学领域的应用研究进行回顾与综述,以期为法医学实践提供参考.

    作者:聂燕钗;俞丽娟;管桦;赵颖;荣海博;姜伯玮;张涛 刊期: 2017年第03期

  • HIF-1α、VEGF-A在心律失常大鼠心肌组织中的变化

    目的 观察大鼠心律失常后缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和心肌血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)的表达变化,探讨心律失常与冠状动脉供血不足引起的急性心肌缺血中两指标表达规律的不同.方法 利用CaCl2诱导大鼠心律失常,应用免疫组织化学染色、Western印迹法和实时荧光定量PCR检测大鼠心律失常后6 h内HIF-1α和VEGF-A的表达及变化情况.结果 心律失常致死的大鼠心肌组织中HIF-1α及VEGF-A呈弥漫性表达,在心律失常发生的早期两者表达均呈增加随后下降;心律失常发生时即产生广泛的心肌缺血且范围不随时间增大.结论HIF-1α和VEGF-A在心律失常大鼠心肌组织中均有表达,可为致死性心律失常和冠状动脉供血不足引起的急性心肌缺血的鉴别诊断提供依据.

    作者:张圆;曹志鹏;毛瑞明;杜仲波;米丽;雒心怡;田美慧;朱宝利 刊期: 2017年第03期

  • 杀人案中接触性DNA再次转移后检出1例

    1 案 例1.1 简要案情某日在一荒山上悬挂经幡处发现一未知名男子死亡. 死者颈部有经幡缠绕但未打结,双腕部被经幡捆绑并打死结,双小腿被经幡捆绑并打活结,其死亡原因为砖石类打击头枕部致颅脑损伤.法医从现场提取死者心血、阴茎拭子、指甲拭子,捆绑死者颈部、双腕部和双小腿的经幡,可疑石块等检材,以及大排查中可疑人员的血样进行DNA检验.

    作者:蒋艳伟;李永强;吴江涛;宋若冰 刊期: 2017年第03期

  • 肺大泡破裂致自发性气胸法医学鉴定1例

    1 案 例1.1 简要案情及病史摘要赖某,男,17岁,身高176 cm,体质量62 kg. 某年5 月20 日被人踢伤胸背部,致左侧胸壁疼痛、胸闷1 d,可放射至背部,深呼吸时加重,伴有气促及干咳等表现,活动时加重. DR片示:左侧气胸,左肺压缩约90%(图1).体格检查:胸廓左侧饱满,左侧肋间隙增宽,左肺呼吸活动度减弱,左胸部触觉语颤减弱,叩诊呈鼓音,左肺呼吸音低. 急诊在胸腔镜下行左肺病损切除+胸腔闭式引流术,术中见左上肺有多个泡状组织,大约0.5 cm×0.5 cm,呈带状分布,其中一个有破口漏气. 术后诊断:左侧肺大泡破裂并气胸.

    作者:杨洁妮;曾海宏 刊期: 2017年第03期

  • 利用Y-STR家系排查外来暂住人口破获杀人案1例

    1 案 例1.1 简要案情某年2月27日, 本市某村公路旁公厕门口发现一具女尸. 经查,死者为杨某(女,44岁),系他杀,死亡原因为机械性窒息. 现场勘验发现,案发地点的公厕分为男厕和女厕两部分,中间间隔一堵墙壁,上有带栅栏的通风窗,女厕由南向北第一个蹲坑旁地面上有一支打火机,男厕由北向南第一个蹲坑地上有3枚新鲜烟蒂.

    作者:林锦锋;胡森杰 刊期: 2017年第03期

  • 北京地区尸食性蝇类调查

    目的 了解北京地区目前尸食性蝇类数目及常见尸食性蝇类的季节分布.方法 采用动物尸体或组织诱捕和饲养的方法采集尸食性蝇类标本,对其进行分类保存后进行观察和统计.结果 北京地区尸食性蝇类为4科9亚科21属46种,其中有12种是北京新记录种.尸食性蝇类具有区域性分布和季节性分布的特性.结论 北京地区尸食性蝇类及常见的尸食性蝇类季节分布数据,可为相关研究提供参考依据.

    作者:陈禄仕;朱光辉 刊期: 2017年第03期

  • 小肠破裂继发弥漫性腹膜炎死亡致医疗损害1例

    1 案 例1.1 简要案情杨某,男,73岁,某年10月13日13时因邻里纠纷被人殴打致伤,后送至某县人民医院治疗,当日21时许死亡. 因家属认为医院在救治杨某过程中存在医疗过错,申请进行医疗损害司法鉴定.1.2 病史摘要10月13日14:00入院.现病史:患者约2 h前被人踢伤下腹部,即感伤处剧烈疼痛,伴恶心不适,无呕吐、呕血,休息无缓解,腹痛持续,急来我院. 查体:T 36.5℃,R 19 次/min,P 96 次/min,BP 16.0/12.0 kPa (120/90 mmHg);腹肌稍紧张,肝、脾肋下未及,全腹压痛,下腹部明显,无反跳痛,移动性浊音(-),肠鸣音5~6次/min.腹穿抽出少许淡血性液体,化验发现红细胞(++++),白细胞(+). 腹部B超示:腹腔积液,肝、脾、肾未见异常,睾丸、附睾未见异常. 腹部X线片:未见膈下游离气体. 初步诊断:腹部闭合伤,肠穿孔?给予补液观察治疗.

    作者:柳鸿麒;张建华 刊期: 2017年第03期

  • 格林-巴利综合征继发肺动脉栓塞致死1例

    1 案 例1.1 简要案情某男,47岁,某日与他人发生矛盾,被人用砖头打伤头部,伴有流血,伤后无昏迷,伴有头痛、头晕、心慌,恶心未吐,无肢体抽搐,无大小便失禁. 就诊于当地某医院,急诊行头颅 CT 未见颅内出血及颅骨骨折,给予缝合头皮裂伤、肌注破伤风抗毒素、补液等对症治疗,患者头痛、头晕症状仍明显.入院完善相关检查,给予消肿、改善脑循环等对症治疗,患者头部伤口对合良好.伤后第5天诉头痛、头晕及伤处疼痛好转,出院. 伤后第7天开始出现全身乏力及四肢麻木,以右上肢为明显.伤后第11天就诊另一家医院,查体见右侧肢体活动不灵,上肢肌力2级,下肢肌力3级;双侧巴彬斯基征(-),颈软无抵抗,脑膜刺激征(-). 肌电图显示左腓总神经F波未引出,右腓总神经F波出现率低、潜伏期延长等.

    作者:于天水;百茹峰;张海东;李明;鄂晓霏;刘冉;梁德明;殷辰吉 刊期: 2017年第03期

  • 急性乙醇中毒基础上干性溺死1例

    1 案 例1.1 简要案情李某,男,67岁,平素健康,但喜欢饮酒,而且经常喝醉. 某年1月9日李某在家喝了一些白酒,当晚18:00参加同学女儿婚宴,又喝了酒,21:20离开酒店独自步行回家. 第2天早上9:00许有市民发现某湖面有件大衣,后又在湖中发现尸体,遂打110报警.民警赶到现场,调取酒店到湖边所有监控,证实李某离开酒店后手拿着一件黑色羽绒大衣,呈醉酒步态行走,路过该湖边时,不慎跌落湖中后死亡.

    作者:郅毅;叶光华;陶陆阳;范琰琰;喻林升 刊期: 2017年第03期

  • GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统22NC在回族人群的法医学调查

    STR基因座及毛细管电泳检测技术是目前法医遗传学中常用的遗传标记及技术检测手段[1]. 目前市场上用于法医学个体识别及亲权鉴定的试剂盒主要纳入的STR基因座为CODIS基因座及欧洲标准化建设数据库(European Standard Set,ESS)核心 STR基因座. 本研究采用的GoldeneyeTM DNA 身份鉴定系统22NC共包含20个非CODIS基因座(D19S253、D6S477、D22-GATA198B05、D15S659、D8S1132、D3S3045、D14S608、D17S1290、D3S1744、D2S441、D18S535、D13S325、D7S1517、D10S1435、D11S2368、D4S2366、D1S1656、D7S3048、D10S1248、D5S2500 )、1 个 CODIS 基因座 D3S1358 和性别基因座 Amelo-genin.其中,CODIS基因座D3S1358包含于日常检案工作常用的STR检测试剂盒中,该基因座的存在可以便于试剂盒之间结果的交叉验证,其余 20 个非CODIS基因座在突变及疑难案件中可以起到补充检测的作用[2].

    作者:付永;刘浩 刊期: 2017年第03期

  • 头发中氯硝西泮的分段分析在药物辅助犯罪案件中的作用

    目的 通过分段分析头发中的氯硝西泮,对药物辅助犯罪案件中受害人的摄药频度及摄药史进行推断.方法 采用液氮冷冻研磨技术联合超声浴技术,以液相色谱-串联质谱法,对6名不同案件中受害人的头发分段分析,并测定各头发段中的氯硝西泮及7-氨基氯硝西泮的含量.结果 6名受害人的部分头发段中均检出氯硝西泮及其代谢物7-氨基氯硝西泮,且头发中药物峰值浓度的出现时间与受害人自述摄药时间相一致.结论 头发分段分析可提供摄药频度与摄药时间信息,在药物辅助犯罪案件中具有独特的证据价值.

    作者:陈航;向平;沈敏 刊期: 2017年第03期

  • 具有凶杀行为的抑郁症与精神分裂症患者的作案特征对比

    目的 探讨抑郁症与精神分裂症患者凶杀行为司法精神病学鉴定的作案特征.方法 将具有凶杀行为的抑郁症(抑郁发作)患者为研究组,共40例;随机抽取具有凶杀行为的精神分裂症患者为对照组,共50例.自制调查表收集两组的一般人口学资料、作案特征等相关数据,并进行比较.结果 研究组和对照组的年龄、接受教育时间、职业差异均无统计学意义(P>0.05).与对照组相比,研究组被害对象多为子女和父母,在杀人后多有自杀行为(70%),凶杀原因以扩大性和间接性自杀为主,以往多有自杀未遂(85%).研究组以限制刑事责任能力者为主(70%),对照组以无刑事责任能力者为主(56%).除案发地点外,其他作案特征两组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 抑郁症与精神分裂症患者凶杀行为司法精神病鉴定的作案特征存在不同,精神病司法鉴定中应需在鉴别诊断时加以考虑.

    作者:王靖;付培鑫;高燕丽;朱明霞;史天涛 刊期: 2017年第03期

  • 腰椎峡部崩裂法医学鉴定32例分析

    目的 探讨运用职工工伤伤残鉴定标准进行伤残评定实践中腰椎峡部崩裂案例创伤、疾病与损害后果之间的因果关系和鉴定意义.方法 收集并回顾性分析32例腰椎峡部崩裂工伤案例的一般资料、致伤方式、临床治疗经过以及影像学检查,根据创伤与损害后果的参与程度,作出因果关系的鉴别和认定,并进行伤残等级评定.结果 32例中,创伤对损害后果没有作用7例,轻微作用5例,次要作用13例,同等作用4例,完全作用3例.存在因果关系的案例,参照职工工伤致残鉴定标准相应条款评定为七级3例、八级5例、九级6例、十级11例.结论 腰椎峡部崩裂的形成与年龄、解剖、职业、致伤方式等因素有关,伤残等级应分析损伤和疾病与损害后果的因果关系后综合评定.

    作者:涂丽芳;陈倚平;张四平 刊期: 2017年第03期

  • 氯氮平投毒未遂后勒死1例

    1 案 例1.1 简要案情肖某,男,51岁,工厂工人. 某年3月21日7时许,其妻金某报警称肖某于卧室内被杀.后据调查,肖某平素体健,末次进餐时间为3月20日20时.1.2 现场勘验死者俯卧于地面,颈部缠绕双股滑动索套. 身下大滩尿渍.尸体周围无悬吊点.当日11:53,于现场测量直肠温度为32.9℃.

    作者:武婷婷;韩鹏;李晖 刊期: 2017年第03期

法医学杂志

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主管:中华人民共和国司法部

主办:司法部司法鉴定科学技术研究所