学术投稿

改良硅珠法提取DNA的灵敏性及稳定性评价初探

董迎春;李诗柳;朱怡;刘宗伟;言梦非

关键词:法医物证学, 改良硅珠法, 微量物证
摘要:目的 通过比较对改良硅珠法提取DNA的灵敏性和稳定性进行评价.方法 样本模板使用9947A(0.1 ng/μL),以30pg为等差,配置10~700pg共24种不同浓度的DNA模板,分别采用常规硅珠法与改良硅珠法提取并纯化模板DNA,在GeneAmp PCR System 9700上进行PCR扩增,ABI 3500XL型荧光分析仪进行电泳检测.结果 与9947A标准品阳性对照比较,采用常规硅珠法检验,24份样本均未获得成功分型;采用改良硅珠法检验,当模板量达到550pg时,即可得到所有基因座的成功分型;模板量达到580pg及以上时,16个基因座图谱峰值均可超过200RFU,分型稳定准确.结论 改良硅珠法提取DNA易于操作,稳定性较好,灵敏度优于常规硅珠法,可在法医微量物证DNA检验中应用.
中国法医学杂志相关文献
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    作者:叶乾素;蒋阔林;唐剑频;陈祖聪;林汉光 刊期: 2015年第01期

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    作者:王力春;马健;罗敬锋;郭东东 刊期: 2015年第01期

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    1 案例资料简要案情 某女,51岁,某日因“车祸后全身多处疼痛4小时”入院,无遗传病史、近期无感染.临床经过 查体:血压16/10.7kPa(120/80mmHg),双侧瞳孔等大等圆,对光反射迟钝;右侧颞顶部头皮肿胀、压痛;双侧鼻腔有血迹,左耳道有新鲜血液流出.CT示蛛网膜下腔出血、颅底骨折.3个月后因“外伤后头痛、眼胀不适进行性加重、双耳闻及吹风样杂音”再次入院.诉双眼肿胀压痛、结膜充血水肿,右眼视力下降.

    作者:赵丽丽;张玲莉;刘子龙;陈晓瑞 刊期: 2015年第01期

  • 胸部拳脚外伤致主动脉弓破裂出血死亡1例

    1 案例资料简要案情 任某某,男,56岁.2011年12月17日,被发现死于某宾馆房间床上.现场勘查见尸体呈头东脚西,仰卧位,其脚部床单上发现有点状及片状血痕.死者系学校退休体育教师,生前未发现患有高血压等疾病.尸体检验 尸表检查:全身呈明显贫血貌.左、右胸部大面积皮下出血,左侧季肋部检见一15cm×12cm皮下淤血,青紫肿胀.

    作者:李富荣 刊期: 2015年第01期

  • 内蒙古汉族人群19个STR基因座遗传多态性

    本文对居住在内蒙古的汉族人群19个STR基因座遗传多态性进行调查,为该地区汉族人群法医学个体识别、亲权鉴定以及群体遗传学研究提供基础数据.1 材料与方法1.1 样本收集在内蒙古地区居住的汉族无关个体的血样462份,其中男244份,女218份.纳入条件:①三代以上居住内蒙古地区;②三代以内无与其他民族通婚史;③无恶性肿瘤史、取样前1个月无输血史.

    作者:王景舟;钟巧娥;翟志慧;王红梅;张建华;王永在 刊期: 2015年第01期

  • 安徽省公安系统法医2000至2012年中文论文发表情况调查

    和西方国家不同,我国法医从业人员主要集中在公安系统,因此公安系统法医水平也能反映出我国法医队伍的整体水平.法医作为专业技术人员,除了实际工作中的检验鉴定能力可用于评价其专业水平外,专业论文的撰写和发表也能展示其总结工作经验、研究和使用新技术的能力.本文对2000年至2012年安徽省公安系统法医从业人员发表的中文专业论文进行调查分析,并对如何提高法医专业论文撰写水平提出自己的看法以供同行参考.

    作者:方俊杰;杨亮 刊期: 2015年第01期

  • 车祸后左基底节区出血法医学鉴定1例

    1 案例资料1.1 简要案情蒋某,男,50岁.2010年11月15日驾驶摩托车与轿车相撞,致头面部及全身多处损伤,1h后送往医院.查体:血压14.9/8.7kPa(144/95mmHg);神志欠清,呼之不应;双瞳等大等圆,直径约0.25m,光反应存在;下颌见1.0cm伤口,胸部压痛(+).头部CT示左侧额颞顶叶-基底节区脑出血,左侧侧脑室受压,中线结构略向右侧移位.予以降颅压、促醒等治疗,次日14时转上级医院.

    作者:杨帆;施晓玲 刊期: 2015年第01期

  • 广东河源汉族人群17个Y-STR基因座遗传多态性

    父系遗传的Y染色体STR基因座多态性分析技术已广泛应用于犯罪现场生物检材的鉴定、父权鉴定、群体遗传学和人类学等领域.本文对广东省河源市龙川县277个男性个体17个Y-STR基因座的遗传多态性进行调查,为法医学研究及本地区检案提供基础数据.

    作者:经广鑫;李海燕;任鹏 刊期: 2015年第01期

  • 采用LC-MS/MS法检验阿维菌素中毒死亡

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    作者:石银涛;郑经;杜鸿雁;任飞;王俊伟 刊期: 2015年第01期

  • 运用动物实验推断电击后溺水死亡

    1 案例资料1.1 简要案情2013年6月13日在某村鱼塘中发现1具尸体,经辨认死者系江某(男,37岁).案件侦破后嫌疑人供述,其用两根端口均裸露的自制电线分别连接电源(经检测电压为165V)的火线、零线,趁江某不备,用两根电线另一端多次戳击江某头面部至其倒地、口吐白沫后,用3根细绳勒其颈部,随后用“蛇皮袋”套裹江某并将其抛于附近鱼塘内.

    作者:周美新;牛鑫;程昱翰;王俊杰;田伟 刊期: 2015年第01期

  • 砖块上脱落细胞DNA分型检验

    1 案例检验1.1 简要案情郑某,男,2013年11月被发现死于家中床上.经现场勘查及法医检验,郑某系被人用砖块打击头面部致颅脑损伤死亡.提取现场两块沾有血迹的砖块要求进行DNA检验,以提供犯罪嫌疑人分型信息.

    作者:高丽伟;马祥涛 刊期: 2015年第01期

  • 测序新技术Ion Torrent PGM及其法医学应用

    目前,基因测序技术发展迅速,继Roche公司的454系统、Illumina公司的HiSeq 2000系统和AB公司的 SOLiD系统之后,Life Technologies公司于2010年推出了Ion Torrent Personal G enome Machine (PGM)测序仪.Ion Torrent是基于半导体芯片的测序技术,不属于核酸标记、荧光检测的生化技术.与其他测序技术相比,操作简便,费用较低,具有强大的扩展性.本文就Ion Torrent PGM的特点及其在法医学中的应用进行简要介绍.

    作者:刘宇轩;张文琼;黄代新 刊期: 2015年第01期

  • 踝部骨折成伤方式分析1例

    1 案例资料简要案情 张某,女,55岁.自称2013年3月某日与邻居因纠纷在田地内发生打斗,打斗过程中邻居挥动锄头打在其右外踝,只打一次,当即感右踝疼痛,不能活动,致踝部骨折.邻居曾某则否认用锄头打伤张某右踝.因无他人旁证,办案单位提请对张某右踝骨折致伤方式进行鉴定.

    作者:黄新;邓国伟;郭建军 刊期: 2015年第01期

  • 电工胶带上人体接触性DNA检验

    1 案例检验1.1 检材实际案例中提取的电工胶带3份,其中1号检材为某敲诈案犯罪现场(办公室)内针孔摄像头上缠绕的电工胶带;2号检材为某持枪抢劫案现场提取的碎裂枪头碎片上缠绕的电工胶带;3号检材为某爆炸案现场提取散落的电线末端上缠绕的电工胶带.

    作者:黄玥蕾;肖泉;陈海英;唐金晶 刊期: 2015年第01期

  • 乙醇对小鼠口服地西泮半数致死量及早期代谢的影响

    目的 研究乙醇对地西泮半数致死量及早期代谢的影响.方法 ①利用AOT425tatPgm程序测定雌性小鼠经口灌服地西泮单独或与不同剂量乙醇联合染毒时的半数致死量;②低、中、高剂量(50、100、200mg/kg)地西泮单独或与不同剂量乙醇联合染毒,HPLC法测定染毒后15、30、60min时小鼠心血中地西泮及其主要代谢物去甲西泮、奥沙西泮血药浓度,观察染毒早期乙醇对地西泮代谢的影响.结果 ①联合染毒使地西泮LD50值明显降低,且下降幅度随乙醇剂量增加而加剧;②各联合染毒组染毒15、30、60min时地西泮、奥沙西泮血药浓度较单独染毒时低;50、100mg/kg地西泮与乙醇联合染毒60min时去甲西泮浓度较单独染毒显著升高,但乙醇剂量影响不大;高剂量地西泮与低、中剂量乙醇联合染毒60min时去甲西泮浓度较单独染毒组时低.结论 ①地西泮与乙醇确有毒性协同作用,联合中毒时地西泮半数致死量变化与乙醇剂量有关;②染毒早期,乙醇可使地西泮及奥沙西泮血药浓度降低,同时抑制去甲西泮的代谢,使其药浓度升高,在毒性协同效应发生中有意义.

    作者:王荣帅;庄冲;苏军;屈国强;许珊;潘超;刘良;刘茜 刊期: 2015年第01期

  • 应用mtDNA 16S rRNA基因鉴定动物组织种属

    目的 应用线粒体DNA 16S rRNA基因PCR测序方法进行动物组织种属鉴定.方法 未知动物内脏样本8份,已知马鹿、北山羊、绵羊和鹅喉羚肌肉样本各1份作为对照.采用用常规酚-氯仿法提取模板DNA,分别用哺乳动物通用引物和4种已知对照特异性引物扩增16S rRNA基因片段,产物用2.0%琼脂糖电泳检测,并进行序列测定及与基因库已有的序列同源性比对.结果 8份未知样本经哺乳动物16S rRNA通用引物扩增,均检测出阳性条带;用鹅喉羚特异性引物扩增,均检测出阳性特异性条带;用其他3种特异性引物扩增,均未检出阳性条带;未知样本扩增的基因片段经测序及同源性比对,与鹅喉羚的同源性为96%~100%.结论 本文未知动物样本均为鹅喉羚内脏组织.本文方法可在动物检材种属鉴定中选用.

    作者:阿依努尔·阿卜杜艾尼;古再努尔·孜比比拉;夏米西丁·阿不都热依木;马合木提·哈力克 刊期: 2015年第01期

  • 自动化工作站与Chelex-100法对血样本检验效果比较

    目的 比较自动化工作站与Chelex-100法对不同浓度血液样本的检验效果.方法 取新鲜血液,按倍量稀释法制成2~1 024倍10种不同浓度的血样本,分别采用自动化工作站和Chelex-100法提取模板DNA,应用IdentifilerPlus试剂盒进行扩增及毛细管电泳检测,并对电泳结果进行比较.结果 稀释2~32倍的血样本,采用两种方法的检验成功率均可达到100%;稀释64倍的样本,Chelex-100法成功率为41.3%、完整分型数为78.3%,自动化工作站成功率为13.0%、完整分型数为43.5%,两者比较,差异均有统计学意义(P<0.01);稀释128倍的样本,成功率在Chelex-100法(8.7%)和自动化工作站(2.4%)之间比较,其差异无统计学意义(P>0.05);稀释256倍以上,两种方法均无法获得分型结果.结论 自动化工作站适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法的效果可能更优.

    作者:刘冰泉;巴华杰;朱爱华;马骏 刊期: 2015年第01期

  • 犬咬损伤案件的法医学分析2例

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    作者:曹喆;邱海龙;冯向聪 刊期: 2015年第01期

  • 大麻性别连锁SCAR标记特异性检测

    目的 检测分析大麻性别连锁SCAR标记对于中国大麻性别的特异性,为植株性别鉴别研究积累资料.方法 分别收集中国云南、新疆、甘肃、山西等4个不同地区大麻雌雄植株各15份,共计120份.参考文献设计合成SCAR标记引物,对样本进行扩增和琼脂糖凝胶电泳检测,并随机抽取样本进行盲测验证.结果 120份已知性别的大麻样本经检测,其中113份样本结果正确,总正确率94.2%;16份随机盲测样本经检测,15份结果正确,正确率为93.8%.结论 SCAR323与SCAR119标记可被用作中国大麻性别的鉴别.

    作者:张贵芹;冯涛;凃政;彭建雄;裴黎;白雪 刊期: 2015年第01期

  • 大鼠脑挫伤后脑C-FOS、AQP-4表达与损伤时间的关系

    目的 观察大鼠脑挫伤组织周围C-FOS、AQP-4表达的时序性变化规律,分析评价其在脑挫伤时间推断中的价值.方法 采用自由落体撞击法建立SD大鼠开放性脑挫伤模型,于伤后0~168h不同时间点取挫伤区脑组织,应用HE染色及免疫组织化学染色方法,结合图像分析及统计学技术进行分析,并与假手术组和正常对照组进行比较.结果 大鼠脑挫伤后0~ 168h时间内脑皮质挫伤区内C-FOS、AQP-4的表达随损伤时间的变化呈明显的时序性变化,C-FOS阳性表达于伤后12h、AQP-4阳性表达于伤后72h分别达高峰.根据实验组各时间点IOD值,分别建立根据C-FOS、AQP-4表达推断损伤时间的回归方程.结论 脑挫伤部位C-FOS和AQP-4的表达规律在脑挫伤时间推断中有潜在的应用价值.

    作者:胡玉莲;许光亚;刘敏 刊期: 2015年第01期

中国法医学杂志

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主管:中华人民共和国公安部

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