学术投稿

利用RT-PCR和Dig-cDNA探针检测百合无症病毒

林石明;陈青;李燕;陈毓荃;郑国华;明艳林

关键词:LSV, RT-PCR, Dig-cDNA探针, 斑点杂交, 检测
摘要:根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带;进一步克隆测序表明,该序列与已知的LSV序列有96%的同源性.用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针,建立了核酸斑点杂交检测体系.本研究分别建立了用于LSV的特异性的高灵敏度RT-PCR检测体系(其检测灵敏度为1.4ng/叶片)和适合大通量检测的Dig-cDNA(地高辛标记)核酸斑点杂交检测体系(其检测灵敏度为20μg/叶片).
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