学术投稿

弓形虫依钙蛋白激酶Calpain-like的克隆及生物学特性

陈雪艳;付玉才;李璐;耿艺介;黄达娜;高世同;张仁利

关键词:弓形虫, Calpain(依钙蛋白酶)-lik, 基因克隆, RT-PCR
摘要:目的 克隆弓形虫RH株Calpain(依钙蛋白酶)-like基因,分析免疫生物学功能,筛选预防弓形虫感染的疫苗候选分子. 方法 利用人类、鼠类和其它寄生虫的Calpain基因同源性比较的保守区域合成混合引物,以弓形虫的RNA为模板.应用RT-PCR扩增弓形虫Calpain-like 基因片段,扩增的片段通过TA克隆插入克隆载体pET32A,筛选阳性克隆进行双酶切鉴定和DNA序列分析,用克隆的基因片段制备特异性基因探针,经Northern blot技术证实弓形虫Calpain-like基因mRNA. 结果 RT-PCR扩增了316bp弓形虫Calpmn-like基因,其DNA序列与日本血吸虫Calpain基因同一区域的同源性为70%,与计算机推测的弓形虫Calpain-like基因的同源性为100%.Northern blot显示了弓形虫Calpmn-like基因mRNA的大小约6300bp. 结论 弓形虫RH株基因组中存在Calpmn-like基因,Calpain-like基因在弓形虫RH株中高度表达.
中国热带医学杂志相关文献
  • 宁波市2001~2005年健康人群麻疹抗体水平监测分析

    目的 了解宁波市健康人群中麻疹抗体水平,为制订消除麻疹策略提供科学依据.方法 采用微量血球凝集抑制试验对2~4.6~8、13~15和25~39岁4个年龄组健康人群检测麻疹血凝抑制抗体. 结果 不同年份之间抗体阳性率、抗体保护率及几何平均倒数滴度(GMRT)均存在显著性差异;4个年龄组抗体保护率及几何平均倒数滴度(GMRT)也均存在显著性差异(P<0.05),但抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05). 结论 及时掌握人群的免疫水平.进一步提高麻疹疫苗的常规接种率和加强大年龄组人群麻疹疫情的监测是消除麻疹关键所在.

    作者:傅燕;胡逢蛟;张姝;高红;边国林 刊期: 2008年第04期

  • 免疫印迹法与间接免疫荧光法检测抗核抗体对照分析

    目的 探讨欧蒙免疫印迹法不同项目阳性与间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)不同核型的相关性.方法 对比分析251例欧蒙印迹法不同项目阳性病例的抗体谱类型与其ANA阳性核型. 结果 欧蒙印迹法抗体类型不同,ANA荧光核型有很大差别,规律不明显. 结论 依据荧光核型来推断抗ENA等抗体不可靠.

    作者:张铁汉;赵永新;郑辉;王伟娟 刊期: 2008年第04期

  • 茂港区一起流行性腮腺炎爆发疫情调查

    目的 分析探讨流行性腮腺炎爆发的流行特征和流行因素,为今后的防制提供科学依据. 方法 对本次爆发的所有病例进行个案调查,采用描述性流行病学方法 进行分析. 结果 2005年11~12月茂名市茂港区那花小学发生流行性腮腺炎爆发疫情,疫情波及茂港区12个自然村,流行曲线呈双峰型,发病以学龄儿童为主. 结论 基层防保机构对传染病监测报告不灵敏,延误了对疫源的处理,是造成疫情爆发的主要原因;防制措施不力.使疫情出现了两个流行峰波.应提高基层防保工作质量以及时有效地控制疫情.

    作者:张松梅;许桂锋;方正杰;刘美珍 刊期: 2008年第04期

  • 海南白沙县2003~2005年流动人口疟疾感染情况分析

    目的 通过分析白沙县流动人口疟疾感染情况,为控制流动人口疟疾感染,减少疟疾发病和传播提供依据.方法 收集全县各乡(镇)卫生院及农场医院门诊医生、防保人员和乡村医生卫生员对3年来在县内流动和进入本县的外来流动人口的血检结果 进行统计分析. 结果 流动人口疟疾感染率4.29%(536/12 501),占全县疟疾阳性病例总数的44.12.%(536/1 215).其中县内流动人口血栓7349人次,阳性356例,阳性率4.84%;省内、县外流动人口血检2311人次,阳性40例,阳性率1.73%;省外流动人口2841人次,阳性140例,阳性率4.93%. 结论 流动人口是疟疾传播的高危人群,加强流动人口管理落实防治措施是白沙县当前疟疾防治工作的重点之一.

    作者:蔡开宁;符样志 刊期: 2008年第04期

  • 感染性腹泻流行病学研究现况

    感染性腹泻是全球发病率高和流行广泛的传染病,对人类尤其是儿童健康危害严重,是发展中国家的重要公共卫生问题,我国感染性腹泻病的发病率一直住居肠道传染病的首位.由于大多数病人患病后不到医院就诊以及疫情漏报等原因.从法定传染病报告系统获得的发病率不能真实反映该病的发病水平,根据我国一些省份的入户调查资料表明,该病全人口的腹泻病发病率为0.17-0.70次/人年,5岁以下儿童则为2.50-3.38次/人年.本文就该病的流行强度、流行病学特征、病原谱、危险因素调查及预防措施等方面的进展进行了综述.

    作者:林玫;董柏青 刊期: 2008年第04期

  • 457例宫颈鳞状上皮细胞病变的病理学研究

    目的 探讨组织病理学诊断时宫颈不典型鳞状上皮(ASC)病变的价值. 方法 对457例宫颈液基细胞学检查结果 为ASC患者,做5%醋酸宫颈染色肉眼观察,阴道镜检查及宫颈多点活检行组织学检查.细胞学诊断采用IBS(2001)分级报告系统,阳性诊断包括意义不明的不典型鳞状细胞(ASC-US)及以上病变与组织病理学诊断结果 对照分析. 结果 457例宫颈液基细胞学与组织病理学结果 显示:ASC-US组CINⅡ以上者34例,占8.15%;ASC-H组CINⅡ以上者14例,占35%;2组之间差异有统计学意义(χ2=59.17,P<0.01). 结论 重视液基细胞学检查不典型鳞状上皮细胞及以上病变患者准确掌握TBS分级诊断标准,提高宫颈早期病变的检出率.

    作者:陈浩华 刊期: 2008年第04期

  • 磷酸哌喹用于人群疟疾预防服药的副反应调查

    目的 分析服用磷酸哌喹人群中预防疟疾副反应的发生频率和类型及其相关因素,探讨减少服药后副反应的措施,为今后调整改进磷酸哌喹使用方案提供依据. 方法 2007年7-9月在安徽省蒙城县对240名服用磷酸哌喹预防疟疾的村民进行问卷调查,调查分3次在每月的预防服药结束后两日内进行. 结果 调查对象中副反应发生率为43.3%(103/238),以轻微头晕、恶心和口周脸颊发麻的表现为主;其中,90.2%的人在服药后2h内出现症状(体征),有90.3%的人在24h以内消退;发生副反应的人群中,不同年龄组无差别.女性高于男性.空腹服药者高于非空腹服药者. 结论 磷酸哌喹的副反应发生率相对较高,但均轻微,持续时间短,对生活生产不构成影响,餐后服药利于减少副反应的发生.

    作者:苟锦博;冯子键;李华忠;郑灿军;葛军;朱刚;尤芳红;朱东山 刊期: 2008年第04期

  • 台州市354名吸毒人员调查

    目的 了解台州市吸毒人员构成,规模及艾滋病和梅毒感染情况,为开展相关工作提供参考依据. 方法 对2007年2~5月新入戒毒所的人员进行流行病学调查,并检测HIV抗体和梅毒抗体,将上述资料录入EPIDATA数据库进行分析. 结果 吸毒人员构成,本省占48.59%,外省占51.41%;以烫吸为主,发生率为71.46%,注射吸毒发生率为26.27%,毒品以海洛因为主;93名注射者中,23.66%的人共用注射器吸毒,其中,男16名,女6名,共用注射吸毒率分别为24.62%、21.43%,男女注射吸毒差别无统计学意义;354名吸毒者中,49名发生商业性服务,发生率13.84%,每次使用安全套者为(2名)比率4.08%;吸毒人员HIV感染率0.85%,其中注射吸毒感染率3.23%;梅毒感染率0.85%. 结论 建议开展预防综合性控制措施,以消除毒品带来的社会、环境和健康问题.

    作者:章亚夫 刊期: 2008年第04期

  • 乳果糖溶液通便功能人体试食试验研究

    目的 观察乳果糖溶液的通便功能. 方法 采用双盲法将127例受试者按其便秘症状随机分为试食组和对照组,试食样品组服用受试样品,对照组不进行任何处理.连续服用7d后,观察两组排便次数、排便状况和粪便性状的变化. 结果 对照组试食前后排便次数均为0.3次/d,排便状况积分均为1.7分/便次,粪便性状积分均为1.1分/便次,差别无统计学意义;试食样品组试食前后排便次数分别为0.3次/d和0.7次/d,排便状况积分分别为1.7和0.5分/便次,粪便性状积分分别为1.1和0.4分/便次,差别均有统计学意义(P<0.01);试食后试食样品组与对照组的排便次数、排便状况和粪便性状差别均有统计学意义(P<0.01).试验前后对照组和试食组均未见不良反应,各项安全性指标均未见异常. 结论 乳果糖溶液对人体具有明显通便功能.且对机体健康无不良影响.

    作者:李燕俊;韩春卉;江涛;赵熙;钟凯;张宏元;张靖;计融 刊期: 2008年第04期

  • 尿素氮尿酸及钙检测在妊高征诊断中的价值

    目的 探讨妊娠高血压综合征(妊高征)患者血清尿素氮、尿酸与血清钙浓度检测的临床价值. 方法 检测50例正常孕妇及50例妊高征患者血清尿素氮(BUN)、尿酸(UA)和血清钙(Ca2+)值,并进行比较. 结果 妊高征孕妇组血清尿素氮及尿酸浓度明显升高,与正常孕妇组相比,差异显著(P<0.01);妊高征孕妇组血清钙浓度明显低于正常孕妇组,且差异显著(P<0.01). 结论 联合检测血尿素氮、尿酸及血清钙浓度可作为预测与判断妊高征发生的监测指标,对妊高征的诊断和治疗也均具有参考价值.

    作者:王莉平;资捷;林立鹏 刊期: 2008年第04期

  • 慢性乙肝和慢性重型乙肝患者外周血清IL-6的变化

    目的 探讨慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者血清白细胞介素6(IL-6)的变化及意义. 方法 ELISA法检测30例正常对照、31例慢性乙型肝炎患者和30例慢性重型乙型肝炎患者外周血清IL-6的水平,荧光定量PCR法检测血清HBV DNA并取对数作为复制水平的指标,总胆红素(TB)、白蛋白(A)、球蛋白(c)和凝血酶原时间(PT)的检测按照本院常规检测.均数间的比较采用Student-t检验;两组数据间的相关性分析采用线性相关分析;P<0.05为有统计学意义. 结果 自正常对照组到慢性乙型肝炎组及慢性重型乙型肝炎组外周血清IL-6水平均依次升高,且各组间比较均具有显著性差异;慢性重型乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组比较血清HBV DNA对数值间无显著差异;外周血清IL-6水平与TB及PT呈现显著的正相关,与A/G比值间呈现显著的负相关,但与血清HBVDNA对数值间无显著的相关性. 结论 IL-6可能参与慢性乙型肝炎及慢性重型乙型肝炎的发病.

    作者:尉秀清;郭云蔚;文卓夫;郑丰平 刊期: 2008年第04期

  • 新登记涂阳肺结核患者家庭密切接触者筛查分析

    目的 了解涂阳肺结核病人家庭密切接触者中新病人的发现情况. 方法 对确认的家庭密切接触者875人做PPD试验,14岁以上的并作胸透,对于PPD强阳性反应和胸透异常者拍胸片l张,痰涂片3张. 结果 查出活动性肺结核病人51例,肺结核患病率为582.8/10万,其中痰涂片阳性24例,涂阳患病率274.2/10万.51例中,强阳性45例.占88.2%,都高于普通人群. 结论 对涂阳肺结核病人的家庭密切接触者进行检查,可以较早期的发现活动性肺结核病人,特别是传染性肺结核病人,从而早期治疗,达到控制结核病传播的目的 .

    作者:谢美凤;钟思财;钟耀宗 刊期: 2008年第04期

  • 淄博市农村流行性出血热鼠间带毒状况调查

    目的 了解淄博市农村鼠密度、鼠间带毒率以及流行性出血热的流行情况,以制定有效综合防制措施提供科学依据. 方法 选择流行性出血热发病率较高的淄川区、沂源县和博山区为调查点.各调查点同时用标准鼠夹,晚放晨收.记录有效鼠夹数、捕获鼠数并分类.采集样本应用间接免疫荧光法(IFAT)检测抗原. 结果 2004-2007年三区县调查点平均鼠密度为2.81%,其中室内、外鼠密度分别为2.38%和3.27%,褐家鼠、小家鼠为优势种群;平均鼠间带毒率为8.05%. 结论 淄博市流行性出血热鼠间带毒率较高,应进一步加强有效综合防制措施,降低鼠密度,灭鼠重点放在经济发展相对落后的农村.

    作者:杜俊;唐学慧;石志恺;李源;张峰 刊期: 2008年第04期

  • 变应性接触性皮炎动物模型的研究进展

    变应性接触性皮炎(ACD)是迟发型变态反应引起的炎症性皮肤病,涉及多种炎症介质和瘙痒介质.ACD的发生机制及其免疫反应机制在国内外已有较多的研究,但有关ACD伴发的瘙痒机制研究甚少,瘙痒介质也不明确.评价ACD的方法 有多种,可归纳为炎症评价和瘙痒评价.目前公认的被用于评价实验动物瘙痒程度和作为临床观察瘙痒的客观指标为动物的搔抓行为.

    作者:陈蕾;樊翌明 刊期: 2008年第04期

  • 老年冠心病患者社区综合干预前瞻性对照研究

    目的 研究综合干预对社区老年冠心病患者生命质量的影响,并进行社区综合干预的成本效益分析. 方法 将我院所属34个社区内55岁以上的老年冠心病患者随机分成对照组和干预组.对干预组进行综合干预.随访2年,比较两组的并发症、住院率、病死率,并进行卫生经济学调查,进行成本效益分析. 结果 干预组较对照组并发症少,住院率、病死率低.且干预组医疗成本明显降低,效益/投入比为5.89. 结论 综合干预可提高社区老年冠心病患者生命质量,并降低医疗成本.

    作者:王正英;邓振宇;徐庆十 刊期: 2008年第04期

  • 三亚市乙型肝炎报告质量调查

    目的 了解三亚市乙肝病例报告的实际情况,为规范乙肝报告工作提供科学依据.方法 抽取乙肝报告发病数相对较多的各级各类医院,调查核实乙肝登记及诊断符合以及临床医生对乙肝知识掌握情况. 结果 临床诊断率59.4%,乙肝病例网络直报准确率30.0%,误报占已报告数的20.0%,乙肝病例重复就诊率达55.2%.大部分医生不能正确掌握乙肝诊断标准. 结论 减少乙肝病例报告中的重报、错报等报告质量问题.是今后加强乙肝报告管理工作中的重点.

    作者:郑家耿;李大章;杨海文;周林;郑惠斤 刊期: 2008年第04期

  • HPLC法测定三十六味消渴胶囊中靛玉红的含量

    目的 建立三十六味消渴胶囊中的靛玉红的HPLC测定方法. 方法 以靛玉红对照品作对照,采用HPLC法测定三十六味消渴胶囊中的靛玉红含量.色谱柱:依利特色谱柱C18 SinoChrom ODS-BP 51xrn(4.6mm.I.D.×200mm);检测波长:280nm;流动相:0.02mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇(22:78);柱温:40℃;进样量:10μl,采用外标法. 结果 在优化色谱条件下,三十六味消渴胶囊中的靛玉红线性范围0.02148-0.5370μg,r=0.9997,回归方程为:A=4783.6449C-24.4227,含量测定的回收率为:98.18%,RSD=0.89%. 结论 所建立的方法 专属性强,操作简便,结果 准确,重现性好,适用于对三十六味消渴胶囊中的靛玉红含量的测定.

    作者:常一丁;栾国华;李立冬 刊期: 2008年第04期

  • 胰岛素强化治疗对急性胰腺炎患者血清炎症因子水平的影响

    目的 探讨胰岛素强化治疗对急性胰腺炎患者血清炎症因子的影响. 方法 79例未合并糖尿病的急性胰腺炎患者随机分为常规治疗组(n=39)和胰岛素强化治疗组(n=40).常规组使用常规药物治疗;胰岛素强化治疗组在常规治疗基础上加用胰岛素治疗,将血糖维持在4.4-6.1mmol/L.分别于治疗前和治疗24、72h抽血测定IL-6及超敏C反应蛋白(CRP)水平.同时设70例正常健康人群用于分析比较.用酶联免疫吸附法检测IL-6.用免疫比浊法测定CRP. 结果 ①与健康对照组相比,急性胰腺炎患者外周血IL-6(58.7±9.6ng/L Vs.6.4±2.4ng/L,P<0.01)和CRP(118.1±13.2mg/L Vs.2.7±1.1mg/L,P<0.01)均有显著性升高.②外周血IL-6(18.4±6.2ng/Lvs.60.7±10.1ng/L,P<0.01)、CRP的水平(15.6±6.3mg/L Vs.121.1±14.3mg/L,P<0.01)在胰岛素强化治疗72h后有显著性降低. 结论 胰岛素强化治疗可降低急性胰腺炎患者血清IL-6和CRP的炎症因子水平.

    作者:曾候霖 刊期: 2008年第04期

  • 儿童全血锌铁钙铅检测结果分析

    目的 了解平项山市儿童锌、铁、钙、铅体内含量现状,指导临床合理使用营养补剂和排铅品. 方法 对幼儿园与学校健康体检的238名儿童进行血锌、铁、钙、铅4种元素检测并统计分析. 结果 238名儿童中锌、铁、钙均有不同程度的低标人群,其中锌低标人群比例高,占73.1%,P<0.05,铁和钙低标儿童仅有16.0%和22.7%.锌和铁的低标人群均以7岁以下年龄组较高,P<0.05,铁有15.1%的人群超标;钙低标人群以0-3岁组比例较高,P<0.05;铅中毒儿童占46.2%;铅中毒与锌缺乏率有明显相关性,与铁和钙缺乏率无明显相关性. 结论 我区儿童锌、铁、钙均有不同程度低标人群,锌缺乏和铅中毒的流行率较高,服用锌、铁、钙补充品应参照膳食结构和体内元素含量,不可盲目补充,同时应防治铅中毒.

    作者:陈敏;和春霞;张俊杰 刊期: 2008年第04期

  • 湖南狂犬病毒P基因和M基因分子遗传特征

    目的 了解湖南省狂犬病毒的分子流行病学特征以及其与疫苗株的差异. 方法 对4株湖南狂犬病病毒P和M基因同时进行了RT-PCR扩增、克隆和测序. 结果 同源性分析表明,4株湖南街毒P和M基因核苷酸同源性分别为97.3%~99.4%和98.4%~99.8%;与其它I型狂犬病病毒和疫苗株核苷酸同源性比较.P基因分别为78.4%~90.2%和81.8%~86.8%;M基因的分别为81.8%~92.1%和84.7%~90.6%.4株野毒P和M基因氨基酸同源性分别为98.0%~99.3%和98.5%~99.0%. 结论 4株病毒P基因和M基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列与我国现用的人用及兽用疫苗株存在一定差异.进化关系表明,4株病毒均为基因I型狂犬病毒;与我国宁夏分离株近;与其它I型毒株分离自菲律宾和泰国等东南亚的毒株亲缘关系较近;而与翼手目的 毒株关系远.

    作者:谢新遥;张永振;李明慧;祝建波 刊期: 2008年第04期

中国热带医学杂志

中国热带医学杂志

主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心