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改良分子信标-实时PCR快速检测霍乱弧菌

扈庆华;郑薇薇;石晓路;叶宝英;李庆阁;王冰;庄志雄;刘小立

关键词:霍乱弧菌, 改良分子信标, 实时PCR, ctxA, 快速检测
摘要:目的建立改良分子信标-实时PCR检测霍乱弧菌的快速方法,应用于霍乱监测.方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)的保守序列,设计一对引物和改良分子信标探针,并进行特异性和灵敏度分析;同时以11种细菌作对照,建立改良分子信标检测霍乱孤菌的实时PCR反应体系,应用于霍乱监测.结果霍乱弧菌改良分子信标检测体系检测12种细菌,只有霍乱弧菌有荧光信号,与其他细菌无交叉反应,DNA灵敏度为102.4fg/ul,菌液灵敏度为32cfu/ml或3 cfu/PCR反应体系.对100份海产品和30份腹泻病人大便标本进行检测,结果都为阴性.检测时间仅需2h.结论改良分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱的快速诊断,为霍乱的分子流行病学调查提供新的检测手段.
中国热带医学杂志相关文献
  • 改良分子信标-实时PCR快速检测霍乱弧菌

    目的建立改良分子信标-实时PCR检测霍乱弧菌的快速方法,应用于霍乱监测.方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)的保守序列,设计一对引物和改良分子信标探针,并进行特异性和灵敏度分析;同时以11种细菌作对照,建立改良分子信标检测霍乱孤菌的实时PCR反应体系,应用于霍乱监测.结果霍乱弧菌改良分子信标检测体系检测12种细菌,只有霍乱弧菌有荧光信号,与其他细菌无交叉反应,DNA灵敏度为102.4fg/ul,菌液灵敏度为32cfu/ml或3 cfu/PCR反应体系.对100份海产品和30份腹泻病人大便标本进行检测,结果都为阴性.检测时间仅需2h.结论改良分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱的快速诊断,为霍乱的分子流行病学调查提供新的检测手段.

    作者:扈庆华;郑薇薇;石晓路;叶宝英;李庆阁;王冰;庄志雄;刘小立 刊期: 2004年第04期

  • 淋巴结外淋巴瘤的临床特点分析(附89例临床报告)

    目的了解海南省淋巴结外淋巴瘤的临床特点,提高对淋巴结外淋巴瘤的诊治经验. 方法1999~2003年海南省人民医院收治的130例非霍奇金氏淋巴瘤中的89例结外淋巴瘤作为分析对象,从结外淋巴瘤的所占比例、性别、年龄、发生部位、病理、临床分期共6个方面进行统计分析. 结果结外淋巴瘤所占比例比结内淋巴瘤比例高,且结外淋巴瘤的发病率男性高于女性(1.7:1),发病年龄高峰中位数为45岁,结外淋巴瘤的好发部位为胃肠道(37.1%),其次为鼻腔(15.7%).结论应不断积累结外淋巴结诊治经验,提高结外淋巴瘤的早期发现.

    作者:吴斌;林丽娥;吴萍 刊期: 2004年第04期

  • 人芽囊原虫感染致慢性腹泻18例临床分析

    目的分析人芽囊原虫感染致慢性腹泻病人临床资料,评价人芽囊原虫病的临床诊断及治疗效果. 方法诊断用直接涂片法检查病人粪便中的人芽囊原虫包囊;治疗用甲硝唑,成人250~400mg/次,3次/d,7d为一疗程.结果18例慢性腹泻病人病程为3~24个月,粪便中均查到人芽囊原虫包囊(包括阿米巴型、空泡型和颗粒型);用甲硝唑治疗的治愈率1个疗程为38.89%,2个疗程为100%. 结论粪便直接涂片镜检原虫包囊是确诊人芽囊原虫感染的有效方法,用甲硝唑治疗人芽囊原虫感染所致的慢性腹泻疗效显著.

    作者:徐凤全;林玲;李军;时发茂 刊期: 2004年第04期

  • 29例SARS患者恢复期并发症追踪调查

    目的了解SARS患者恢复期并发症的发生情况及严重程度,为更全面认识SARS和及时制订合理的防治措施积累基础资料. 方法查阅相关的医疗记录和实验室检查结果,对2003年初广州市某医院受感染发生SARS的29位医护人员的康复情况进行问顾性调查.结果除3人因并发症需医疗干预外,其余26人健康状况良好,已恢复正常工作.3例SARS恢复期并发症分别是创伤后应激障碍1例、神经症(广泛性焦虑、惊恐发作)1例、肌炎1例.结论SARS病人大多预后良好;加强健康教育以及进行SARS患者的恢复期随访十分重要.

    作者:蔡衍珊;刘子凡;周端华;刘于飞;秦鹏哲 刊期: 2004年第04期

  • 74例麻风畸残康复观察

    目的分析通过特别护理、安全生活及体育疗法对74例麻风手、足畸残者感觉恢复和溃疡痊愈的效果.方法对74例麻风手、足畸残者通过辅导护理、安全及体育疗法等知识,以提高其自我护理水平.结果1年后Ⅰ级手及足畸残者感觉恢复各为3只,部分恢复分别为2只和6只,手部溃疡痊愈1只,手部有效率为14.3%(6/42),足部为14.8%(9/61);对18例(21处)足底溃疡的预防效果较显著,有效率为47.6%(10/21).Ⅱ~Ⅲ级畸残未见加重.结论对麻风畸残者进行预防性护理效果明显能有效防止Ⅰ级畸残的加重.

    作者:陈唯娃 刊期: 2004年第04期

  • 妊娠合并ITP行脾切除2例临床分析

    妊娠对于已缓解多年的原发性血小板减少性紫癜(ITP)妇女增加了疾病复发的危险,对活动性ITP妇女可以使病情加重.孕期ITP的治疗首选肾上腺糖皮质激素,其次输注丙种球蛋白,输注血小板只有在病情危及需要控制急性出血、以及分娩时或剖宫产时才使用,经过上述治疗失败时可考虑行脾切除术.本文2例行脾切除效果满意,预后良好,本方法有可行性.

    作者:王红霞 刊期: 2004年第04期

  • 高血压认知调查及防治模式探讨

    目的为进一步有针对性地做好高血压病患者的健康教育,以提高高血压病人的人群防治. 方法采用国际通用的现场测量和问卷调查相结合的标准方法,统一自制门诊急诊高血压人群高血压认知抽样调查表,以随机抽样的方法进行调查,并对所得数据进行统计学分析. 结果在234例门诊急诊确诊高血压的调查者中,知晓正常血压标准者35人,占15.0%,173人接受治疗,占73.9%,但接受规范治疗者仅104人,占44.4%,75.2%的高血压病人的血压没有得到有效控制,家族史、高盐、吸烟、饮酒等仍是主要危险因素.结论本组高血压病人高血压病的知晓率和治疗率低,控制率不理想,探讨有效地高血压防治新模式极为迫切.

    作者:欧阳艳红;覃颖鲜;何平 刊期: 2004年第04期

  • 几种增菌液对志贺菌增菌效果的研究

    目的筛选对志贺菌高效果增菌的增菌液.方法应用6种增菌液对30株志贺氏菌增菌,分离培养并计数.结果增菌6h以SS、HE增菌液增菌效果佳,检出率皆为100%;增菌22h以SS、肠道增菌液和亚硒酸盐增菌液增菌效果好,检出率为60%. 结论若增菌时间为6h,以HE和SS增菌液增菌效果好;长时间增菌22~24h,以肠道增菌液,亚硒酸盐增菌液效果好.

    作者:林一曼;邱亚群;张倩;黄新凤 刊期: 2004年第04期

  • 海南省舰员心理健康调查研究

    目的了解热带地区舰员在平时和军事演习条件下的心理健康状况,探索影响热带地区水面舰艇部队士兵心理健康水平的因素,为今后提高官兵心理健康水平提供理论依据.方法采用军人心理症状问卷调查表(SCL-90),抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS),对研究对象进行研究,并与正常人常模、军人模和中国军人常模进行比较.结果调查组在SCL-90表中多个因子分显著高于正常人常模,显著低于军人常模,而在SDS、SAS方面显著高于军人常模;独生子女兵员在SCL-90表中多个因子分及SDS显著高于非独生子女兵员,而在SAS显著低于非独生子女兵员;北方籍兵员在强迫症状、人际关系敏感、忧郁、敌对、恐怖、偏执、精神病性等因子显著高于南方籍兵员.结论调查组的心理健康状况优于军人常模而逊于正常人常模,非独生子女比独生子女更容易适应军营生活,南方籍舰员比北方籍舰员更容易适应亚热带地区的海军生活.

    作者:聂岁锋;李雪宏;李日光;杨碧青;陈静;洪迎辉 刊期: 2004年第04期

  • 丹参和地塞米松电离子透入治疗视网膜震荡临床观察

    目的评价丹参和地塞米松电离子透入治疗视网膜震荡的临床效果.方法用10%丹参注射液和15%地塞米松溶液交替电离子透入,每日上下午1次,每次持续时间15min. 结果治疗5~7d检查视力明显好转,1个疗程后97.35%患者视力恢复正常.结论药物通过电离子透入视网膜,促进网膜水肿消退,作用快,是一种快速有效的方法.

    作者:许喜容;谢桂红;黄秀卿 刊期: 2004年第04期

  • 健康教育干预对女性劳教人员STD/AIDS知信行的影响

    目的了解深圳市宝安区妇女教养人员关于性传播疾病艾滋病(STD/AIDS)的知识、态度、信念和行为现状,探索行之有效的健康教育和行为干预的方法.方法对深圳市某收容所2002年5~9月收容教养的500名妇女教养人员进行基线调查和干预后调查,收集并分析所获取的各项数据资料.结果妇女教养人员以青年、初中以下文化、未婚为主,对STD/AIDS知识有一定的了解,约50%使用安全套,但获取安全套不方便. 结论预防妇女教养人员感染STD/AIDS具有十分重要的社会意义.

    作者:刘益民;刘利共 刊期: 2004年第04期

  • 阿昔洛韦治疗女性复发性生殖器疱疹的疗效观察

    目的了解阿昔洛韦片剂低剂量连续疗法对控制女性生殖器疱疹复发的疗效. 方法选取年龄、病程、病情等无显著差异的门诊患者42例,随机分为治疗组和对照组.治疗组28例口服阿昔洛韦0.2g,5次/d,连服6个月后;对组14例口服阿昔洛韦2g,5次/d,连服1周,随访6个月观察疗效. 结果观察6个月后,治疗组复发率为28.57%,对照组复发率为100%,两组比较差异有显著性(P<0.01). 结论阿昔洛韦低剂量连续疗法对控制GH复发有良好效果.

    作者:蔡志凌;黄小雄;张国辉 刊期: 2004年第04期

  • 动态心电图对诊断冠心病无症状心肌缺血的临床意义

    目的了解动态心电图对诊断冠心病无症状心肌缺血的临床意义.方法选择200例冠心病患者的24h心电资料,参照监测日志,分析24h动态心电图.结果发生缺血性ST段下移432次,其中SMI发作383次(88.7%),有症状发作49次(11.3%),SMI发生于睡眠中(51.2%),及日常活动中(36.7%),有症状心肌缺血多发生在活动(8.4%),睡眠(3.7%)结论动态心电图不仅用于心律失常而且是日常生活中监测一过性心肌缺血的好方法,对早期检出SMI及时诊断及治疗具有重大临床意义.

    作者:古莉 刊期: 2004年第04期

  • 3例适利达眼药水治疗难治性青光眼

    目的探讨适利达(0.005%拉坦前列腺素)眼药水对难治性青光眼的疗效.方法对经一次以上手术后仍未能有效控制眼压的3例5眼开角型青光眼患者,应用适利达眼药水点眼,每晚一次,观察患者用药后的眼压、视野、眼底情况,观察时间3~8个月. 结果3例5眼用药前眼压20~30mmHg,单独用药或合用β-受体阻滞剂后平均眼压11~15mmHg.追踪观察眼底无明显改变,未观察到明显副作用. 结论0.005%拉坦前列腺素能有效治疗多次手术不能控制眼压的难治性青光眼,其降眼压效果可靠,使用方便,患者依从性好,无明显副作用,与β-受体阻滞剂有协同作用.价格昂贵是其主要缺点.

    作者:陈海波 刊期: 2004年第04期

  • 施行阑尾手术40例切口无感染分析

    自2000年以来,新进农场医院共施行阑尾切除40例.术后无1例发生切口感染,现报告如下.1材料与方法1.1临床资料40例均为住院病例.男26例,女14例.年龄6~70岁.其中慢性阑尾炎12例,坏疽并穿孔8例,发病时间1~7d.

    作者:曹军开 刊期: 2004年第04期

  • 氧净(OxyplatesTM)厌氧菌培养法的实验室应用

    目的了解氧净(OxyplatesTM)厌氧菌培养法对厌氧菌的分离情况. 方法比较氧净(OxyplatesTM)厌氧菌培养法和厌氧袋培养法分离检测正常人群肠道中的厌氧菌. 结果氧净(OxyplateTM)厌氧菌培养法分离到厌氧菌262株,厌氧袋培养法分离到厌氧菌260株,两种方法比较差异无显著性(P>0.05).结论氧净(OxyplateTM)厌氧菌培养法能较好地分离出厌氧菌,易于实验室使用和保存,能较好地被大多医院采用开展.

    作者:吴多荣 刊期: 2004年第04期

  • 机械通气加肌松剂治疗重症破伤风的体会

    目的探讨早期气管切开机械通气加肌松剂治疗重症破伤风的价值.方法对22例重症破伤风患者的临床特点和治疗方法进行回顾性分析.结果12例早期气管切开患者中,有6例行机械通气加肌松剂治疗.治愈11例,死亡1例.救治成功率91.7%.10例未行气管切开机械通气患者,治愈4例,死亡6例.结论早期气管切开机械通气加肌松剂治疗重症破伤风疗效满意,能提高救治成功率.

    作者:黎琼强;杨丽云 刊期: 2004年第04期

  • 栖霞市中小学生蠕形螨感染情况调查

    人体蠕形螨是一种条件致病螨,蠕形螨的感染是酒渣鼻、脱发、毛囊炎、皮脂腺炎、痤疮等疾病的病因之一[1~5],同时又影响美容.我们于2002~2003年,对栖霞市部分中小学生进行了蠕形螨感染情况调查,现报告如下.

    作者:李振华;徐韶玲;王克宝;赵玉强 刊期: 2004年第04期

  • 乳房X线摄影术诊断乳腺癌准确性的Meta分析

    目的评价乳腺X线摄影术鉴别诊断乳腺肿瘤良恶性的准确性.方法利用Meta分析综合1995~2003年关于利用乳腺X线诊断乳腺肿瘤的文献.计算合并似然比(OR),并绘制SROC曲线直观评价其准确性. 结果共检索到文献16篇,样本量1 834例.合并后的敏感度、特异度及OR值分别为81.74%、80.12%和13.92,SROC曲线下面积为0.83.结论乳腺X线摄影术在乳腺癌的诊断上有较好的正确性,在阳性病例的检出上有优势.

    作者:柯爱武;彭绩;周华;程锦泉 刊期: 2004年第04期

  • 奉化市阑尾炎病人血吸虫病监测结果分析

    目的分析阑尾切片检查血吸虫卵在血吸虫病监测的效果. 方法将外科切除的阑尾进行病理切片,镜检血吸虫卵.对阳性者进行个案调查、体检、实验室检查、诊断和分析.结果发现36人有血吸虫钙化虫卵,其中26人为首次发现的血吸虫感染者.36人感染疫源清楚,无新疫区发现,血吸虫病查病查漏率高,轻度感染是查漏主要原因之一.结论阑尾病理切片检查血吸虫卵,阳性者进行个案调查,是血防监测中一种简单有效的方法,虽敏感性差,但在一定条件下对血吸虫病流行有确定作用.

    作者:洪飞锵;冯秋雅 刊期: 2004年第04期

中国热带医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心