学术投稿

恶性疟原虫pGST-HT1融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

徐劲;叶苓;余新炳;魏泉德;吴忠道

关键词:恶性疟原虫, 己糖转运体蛋白, 构建融合表达载体
摘要:目的构建pGST-HT1融合表达载体,并观察其在大肠杆菌中的表达情况.方法基因扩增,融合表达载体的构建,SDS-PAGE电泳和Western blot分析.结果对重组质粒进行酶切鉴定证实HT1片段已克隆到pGSTag的EcoRI和SalI位点之间.表达产物经SDS-PAGE电泳后显示在相对分子质量82000处出一条新生蛋白带,与HT1/GST(56/26)融合蛋白大小一致,提示成功表达HT1融合蛋白.Western印迹杂交结果也显示在相对分子质量82000处出现阳性着色条带.结论本实验成功构建pGST-HT1表达载体,并诱导表达出HT1融合蛋白,为HT1蛋白功能和免疫原性的进一步研究奠定了基础.
中国热带医学杂志相关文献
  • 恶性疟原虫Pf332基因片段的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒的构建

    目的构建包含恶性疟原虫Pf332基因片段的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒.方法从FCC1/HN株基因组DNA中PCR扩增Pf332基因片段,P332-RO、P332-R1和P332-R2;用PCR扩增法合成鼠IgG轻链隹号肽的编码序列.用定向克隆法分别构建分泌型重组质粒pcDNA3-s-P332-RO、pcDNA3-s-P332-R1、pcDNA3-s-P332-R2和非分泌型重组质粒pcDNA3-s-P332-RO、pcDNA3-s-P332-R1、pcDNA3-s-P332-R2.阳性克隆的重组质粒DNA经酶切、PCR扩增及测序鉴定.结果 PCR扩增得到特异的FCC1/HN株Pf332基因片段,P332-RO、P332-R1、P332-R1,大小分别为489、429和393 bp.用PCR扩增法合成63bp的Balb/c小鼠IgG轻链信号肽的编码序列.酶切、PCR及测序鉴定表明获得了正确的含Pf332基因片段的分泌型、非分泌型重组质粒.结论成功构建分别包含恶性疟原虫Pf332基因片段-P332-R0、P332-R1和P332-R2的分泌型、非分泌型真核表达重组质粒.

    作者:单志新;余新炳;卞国武;马长玲;陈守义;周永安 刊期: 2001年第04期

  • 海南省三市县登革热血清流行病学调查

    目的了解海南经过两个型别DGV2(登革2型病毒)、与DGV3(登革3型病毒)引起的登革热流行之后,人群中抗体状况,探讨人群对登革病毒的免疫屏障.方法采用免疫荧光技术检测相关抗体者,阳性抗体者用同样方法检测乙脑抗体,排除交叉免疫的可能性.结果从流行区275份标本中,查获DGV3抗体31份,占11.27%;检获DGV2抗体53份,占19.27%,从非流行区的54份标本中,检获DGV3抗体4份,占7.40%,检获DGV2抗体3份,占3.70%.未检获DGV1与DGV2抗体.结论 DGV3流行后17~20年,DGV2流行后8~10年,人群中仍可查获相应抗体;所有人群未查获DGV1与DGV4抗体.

    作者:黎正伦;陈玉本;符艳;曾祥洁;邝继深 刊期: 2001年第04期

  • 线索调查提高肺结核病人发现率的效果分析

    目的通过下乡设立诊疗点,以提高肺结核病人登记率水平,使项目工作取得显著成效.方法1992~1999年间,逐年分批下乡镇,宣传发动,使可疑者主动就诊,通过胸透、查痰、拍X光片等手段发现肺结核病人.结果下乡设点30个接诊可疑者8638人,占全市所有就诊病人数的57.1%;发现肺结核病人1438例,占登记病人数的51.8%;其中涂阳病人947例,占登记涂阳病人数的53.5%.活动性肺结核登记率从1992年33.7/10万上升到1999年69.8/10万,涂阳新登记率从1992年24.1/10万上升到1999年55.4/10万,登记率呈逐年增高态势,病人中涂阳占63.7%,涂阳病人中新发占86.1%.讨论政府重视,是下乡设点取得良好成效的关键.下乡设点方便可疑者就诊,使病人早发现、早治疗、减少传播.下乡设点体现了党和政府为人民服务的宗旨.

    作者:吕伟平;张继洪 刊期: 2001年第04期

  • 经胸超声心动图诊断风湿性心脏病左房血栓的价值

    目的分析风湿性心脏病左房血栓的经胸超声心动图表现,探讨影响左房血栓形成的因素.方法收集205例风湿性心脏病患者经胸超声心动图资料,分为血栓组与无血栓对照组,分析左房血栓形成与年龄、左房大小、房颤、二尖瓣口面积及二尖瓣返流量之间的关系.结果与对照组比较,血栓组左房较大,心房纤颤发生率明显增高,二尖瓣狭窄程度重,返流量明显小,均有统计学显著性差异.结论经胸超声心动图能检出大部分左房血栓.左房血栓的形成与心房纤颤的发生、左房增大、二尖瓣狭窄及返流量明显相关.

    作者:林凌;杨炳昂;钟文津;刘起珠;黄秋云 刊期: 2001年第04期

  • 恶性疟原虫pGST-HT1融合表达载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

    目的构建pGST-HT1融合表达载体,并观察其在大肠杆菌中的表达情况.方法基因扩增,融合表达载体的构建,SDS-PAGE电泳和Western blot分析.结果对重组质粒进行酶切鉴定证实HT1片段已克隆到pGSTag的EcoRI和SalI位点之间.表达产物经SDS-PAGE电泳后显示在相对分子质量82000处出一条新生蛋白带,与HT1/GST(56/26)融合蛋白大小一致,提示成功表达HT1融合蛋白.Western印迹杂交结果也显示在相对分子质量82000处出现阳性着色条带.结论本实验成功构建pGST-HT1表达载体,并诱导表达出HT1融合蛋白,为HT1蛋白功能和免疫原性的进一步研究奠定了基础.

    作者:徐劲;叶苓;余新炳;魏泉德;吴忠道 刊期: 2001年第04期

  • 糖尿病酮症酸中毒27例临床分析

    糖尿病酮症酸中毒(diabetic ketoacidosis.DKA)是由于体内的胰岛素缺乏引起的以高血糖、高酮症和代谢性酸中毒为首要改变的临床综合症,是糖尿病(DM)的急性合并症,也是内科常见急症之一.我院1993年1月~1998年12月共收治27例DKA.现作临床分析如下.

    作者:程金凤 刊期: 2001年第04期

  • 野生灵芝胶囊的安全性毒理学评价

    目的为评价野生灵芝胶囊作为保健食品的食用安全性.方法采用急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验和30天喂养试验进行检测.结果雌雄大、小鼠急性经口LD50>21.5/kg体重,属无毒级;Ames试验、小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验三项遗传毒性试验结果均为阴性;30天喂养试验未显示明显毒性.结论野生灵芝胶囊属安全性保健食品.

    作者:林卫华;赵毓梅;郑定仙;黄业宇;王湛 刊期: 2001年第04期

  • 噻唑蓝比色法测定药物低抑菌浓度初步研究

    目的用噻唑蓝(MTT)比色法测定药敏试验低抑菌浓度(MIC).方法利用数理统计方法确定了药物浓度和吸光度的关系式为:lgC=a+bA(C:药物浓度,A:吸光度,a,b:常数).当A趋近于零时,药物浓度C就是该药物的MIC,即:1gMIC=(A1/A21gC2-1gC1)/(A1/A2-1).通过该药物两种浓度C1、C2及其相应的吸光度值A1、A2就可以求出该药物的MIC,这样求得的MIC并非直接实验得出,而是由两个确定的药物浓度及相对应的吸光度值计算得出的.结果该方法已应用于临床标本40株大肠埃希氏菌,35株金黄色葡萄球菌,33株铜绿假单孢菌.该方法和稀释法比较,回归方程分别为:Y本法=1.03X+2.79(N=40),Y本法=1.03X+3.05(N=35),Y本法=1.14X+0.67(N=33),相关系数分别为:0.996、0.990和0.990.结论该方法简便、快速、准确、重复性好.

    作者:张淑芳;野丽丽;白淑晶;朴美花;尤新 刊期: 2001年第04期

  • 广东地区HDV感染性标志物的调查

    目的了解广东地区的一般人群、HBsAg阳性者和临床肝炎患者中HDV感染现状.方法ELISA方法检测HDV相关的指标.结果一般人群HDV阳性率为1.29‰(2/1545);体检人群HBsAg携带者HDV阳性率为2.56%(9/352);临床肝炎HBsAg阳性患者HDV阳性率为5.03%(9/179),HBsAg阳性合并HAV、HCV感染肝炎患者的HDV阳性率为6.67%(2/30).结论广东地区一般人群HDV感染率低于全国平均感染率(1.65‰);临床肝炎HBsAg阳性患者HDV感染率高于HBsAg携带者.

    作者:黄平;刘家碧;叶高龙;林萍;陈伟频 刊期: 2001年第04期

  • 海南省性罪错妇女11年性病感染情况调查分析

    目的通过对11年来性罪错人员性病感染情况的调查分析,掌握性病在性罪错妇女中流行的特点,为政府部门对性病防治政策的制定提供科学依据.方法对1990年元月至2000年12月海南省妇女收容教育所被收教的性罪错妇女进行性病检查,统计其各种性病的发病人数,然后进行分析.结果 11年中共收教4780人,其中感染淋病、非淋菌性尿道炎(宫颈炎)、尖锐湿疣、梅毒、生殖器疱疹、HTV共2967例,阳性率为62.07%,其中非淋菌性尿道炎(宫颈炎)1826例(38.20%)、淋病469例(9.81%)、梅毒414例(8.7%)、尖锐湿疣246例(5.14%)、生殖器疱疹11例(0.23%)、HTV阳性1例(0.02%).结论性罪错妇女六种性病的患病率很高,达62.07%,其中非淋菌性尿道炎(宫颈炎)为其主要病种,淋病的患病率逐年下降,梅毒的患病率逐年上升,尖锐湿疣基本稳定,其流行特点值得我们重视.

    作者:杨斌;赖声正 刊期: 2001年第04期

  • 海口市2000年脊髓灰质炎的免疫监测及其评价

    海口市自1992年底出现脊髓灰质炎(脊灰)后一次局部暴发以来,按国家与省的布置落实免疫措施,1993-2000年实施22轮全市范围的强化免疫,接种率均在96%以上,常规免疫保持正常运转,接种率均在97%以上,已连续8年无脊灰野毒株病例发生,成为无脊灰地区,为评价我市脊灰免疫措施实施的效果,我们于2000年7-12月对全市3个区进行了一次脊灰免疫成功率调查和健康人群免疫水平调查,现将结果报告如下.

    作者:李克柠;黄桂忠;谢敏;林瑞仪 刊期: 2001年第04期

  • 武汉市进口食品、化妆品现状调查分析及建议

    为了认真贯彻执行国务院关于整顿和规范市场经济秩序、严厉打击假冒伪劣商品的决定,做好进口食品、化妆品的监督检验管理工作,根据<中华人民共和国食品卫生法>、<化妆品卫生监督条例>以及国家质量监督检验检疫总局颁布的<进出口食品标签管理办法>、<进出口化妆品监督检验管理办法>等的规定,湖北出入境检验检疫局(以下简称湖北局)近日对武汉市的各大商场、超市、专卖店、美容院等七十余家进行了调查,现把结果报告如下:

    作者:石长华 刊期: 2001年第04期

  • 浅谈加强手术室消毒隔离的措施和体会

    手术室消毒隔离工作直接影响手术的成功率,包括手术切口正常愈合和手术病人尽快康复.因此认真执行和全面落实好手术室消毒隔离制度,是避免交叉感染和医院内感染的重要措施[1-2].我院近几年来共做手术上万例,从未有因手术室的消毒隔离问题而造成感染,无菌合格率达100%.兹谈谈我们加强手术室消毒隔离的措施和体会.

    作者:李洁玲 刊期: 2001年第04期

  • 世界卫生组织与热带病防治

    简述世界卫生组织之缘起、架构、工作、人事及各区域分署等,及其热带病,例如疟疾、血吸虫、丝虫病、登革热、黑热病、麻风及锥虫病的防治状况.

    作者:周钦贤 刊期: 2001年第04期

  • 关于征集召开中南地区预防医学学术交流会论文的通知

    作者: 刊期: 2001年第04期

  • 1986~1999年珠海市疟疾流行趋势分析

    目的掌握珠海市疟疾流行特点,为制定相应控制措施提供科学依据.方法通过比较不同时间、地点和人群疟疾分布情况分析珠海市1986~1999年疟疾流行趋势和特点.结果自80年代中期到现在,珠海市疟疾流行经历了低流行期、高流行期及有效控制期三个不同阶段,流动人口对于该地区疟疾的流行构成了一个极重要的影响因素.结论针对流动人口开展的疟疾防治工作仍有待进一步完善,应在流动人口登记或就业查询等方面加强流动人口疟疾病例追踪和查治工作.

    作者:谭爱军;黄利群;彭瑜;黄宏瑜 刊期: 2001年第04期

  • 海南省首次从餐饮业人员分离出产色素弗尼斯弧菌

    弗尼斯弧菌原名为产气河弧菌或河弧菌生物型Ⅱ型,是近年来国内外学者公认的新的致病性弧菌之一,主要引起感染性腹泻及食物中毒.2000年8月,我们在一起细菌性食物中毒病原学检测工作中,从一餐饮业人员检出一株产色素的革兰氏阴性弧菌,经初步鉴定其生物学性状符合弗尼斯弧菌定义,现报告如下:

    作者:周登仁;王艳燕;黄桂花 刊期: 2001年第04期

  • 三亚地区土壤和建筑材料放射性水平调查

    目的了解三亚地区各类土壤和建筑材料中的放射性核素水平.方法采用γ谱法测定238U、232Tn、226Ra、40K的含量,用发烟硝酸法分析总α、总β活度.结果建筑材料空气吸收剂量率红砖>碎石>大理石>水泥>石灰,与广东的同类产品相比,红砖、水泥、石灰结果相近,碎石低于广东;土壤中238U、226Ra以燥红壤高,40K以潮沙泥土高,滨海沙土各类核素含量低.三亚土壤天然放射性核素算术均值低于深圳、广东高本底地区,高于世界均值和广东对照地区.结论三亚建材内、外照射指数除红砖超标外,其余均符合国家建筑材料放射卫生防护标准要示.

    作者:陈毓瑚;王维谦;陈志勇;张智宏;陈人强 刊期: 2001年第04期

  • 深圳市宝安区1994~2000年急性弛缓性麻痹监测结果分析

    目的了解宝安区急性弛缓性麻痹(AFP)病例发病情况,为继续巩固消灭脊髓灰质炎工作提供参考.方法通过对1994~2000年报告的AFP病例进行回顾性调查.结果宝安区1994~2000年15岁以下儿童非脊髓灰质炎AFP病例报告发病率均在1/10万以上.其它各项监测指标报告及时率、合格粪便采集及时率、随访及时率都达到100%.结论 AFP监测各项指标都符合规范要求.

    作者:邱星元;曾桂盛;陈静浓;李苑 刊期: 2001年第04期

  • 海南省大劣按蚊实验室自然交配的驯化研究

    目的建立实验室大劣按蚊自然交配繁殖种群,为同类研究提供依据.方法将野外捕捉并在实验室人工交配繁殖至第61代的大劣按蚊,按不同雌雄比例先后顺序置于大、中、小三种不同型号的蚊笼中喂养、驯化、观察产卵情况并计算产卵数和孵化率.结果在大、中、小蚊笼内的分别驯化至第15、10和18代时成蚊卵的孵化率各达到82%、83.4%和80.7%,成功建立小蚊笼自然交配的大劣按蚊种群.结论经实验室驯化的大劣按蚊能够自然交配、产卵、繁殖,有助于建立实验室自然种群.

    作者:王赛梅;王志光;梁启昌 刊期: 2001年第04期

中国热带医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心