学术投稿

整合子耐药机制的动态检测

陈丹华;张如霖;丁星;李莉

关键词:假单胞菌, 铜绿, 整合子类, 抗药性, 细菌, 基因表达
摘要:目的 通过对呼吸道反复感染铜绿假单胞菌,久治不愈,药敏试验从全敏感、部分敏感到全耐药所留菌种染色质和质粒上的整合子Ⅰ的基因及其所携带的耐药基因盒的检测,并结合临床症状与病史分析细菌整合子的耐药特性及机制.方法 用VITEK Ⅱ鉴定细菌、KB法药敏试验、试剂盒抽提质粒和基因组DNA经PCR扩增整合酶Ⅰ,基因后琼脂糖凝胶电泳,LA-PCR扩增可变区耐药基因盒并电泳,可变区耐药基因测序,结合患者病史及临床分析耐药现象.结果 该菌株在耐药前后均检测出整合子Ⅰ,耐药前全敏感时未测得耐药基因盒,多重耐药时可变区所测得的耐药基因盒有耐β-内酰胺类、CatB8、aad4以及aac(6')-Ib等耐药基因盒,分别对头孢菌素类、氯霉素类、氨基糖苷类和氨基糖苷-喹诺酮类组合耐药,还测得了MexR-OprD表达系统的基因盒,提示排出泵增强和外膜通透性降低的耐药机制也可以由整合子以基因盒形式摄取并表达.未测得碳青霉烯类耐药基因盒.结论 该菌株在耐药前后均带有整合子Ⅰ,该整合子在铜绿假单胞菌耐药中起重要作用.
国际检验医学杂志相关文献
  • 2种洗板方式对HBsAg检测结果的影响

    乙肝表面抗原(HBsAg)的检测,从血球凝集法发展到现在的酶联免疫吸附试验(ELISA)已经历了十几年.ELISA法因具有操作简单、灵敏度高和特异性强等特点而发展十分迅速,已被广泛应用于医学和生物学科的各个领域.影响它的结果因素有很多,洗板是其中之一,如不按照操作规程来做,随意增减洗板次数,就会对结果产生影响,容易造成漏检,给临床输血带来安全隐患.为了解2种洗板方式对HBsAg检测结果的影响,笔者作了试验,现报告如下.

    作者:孙家志 刊期: 2010年第01期

  • 被动颗粒凝集法测定肺炎支原体抗体的临床应用

    目的 探讨2007年本地区儿童各年龄组呼吸道肺炎支原体(MP)感染情况.方法 用被动(明胶)颗粒凝集法(passive particle agglutination,PPA)对2007年来我院就诊的1 942例急件呼吸道感染患儿测定血清肺炎支原体(MP)抗体.结果 1 942例急性呼吸道感染患儿血清肺炎支原体(MP)抗体阳性622例,总阳件率为32%.其中0~1岁组,1~3岁组、3~5岁组、5~14岁组各组MP抗体检出率分别为24.1%、36.9%、38.1%和26.9%.结论 MP是本地区儿童呼吸道感染的要病原体之一,各年龄儿童普遍易感,尤其是1~3岁、3~5岁组儿童感染率高,经统计学X~2检验,1~3岁、3~5岁组儿童感染率比较,差异无统计学意义(P>0.05);而1~3岁组,3~5岁组儿童感染率与0~1岁组、5~14岁组比较,差异有统计学意义(P<0.01),1~3岁、3~5岁组儿童要注意预防呼吸道肺炎支原体(MP)感染.

    作者:张德文;罗兴旺 刊期: 2010年第01期

  • 全自动血液分析仪新参数在细菌性感染疾病中的变化及临床应用

    细菌性感染是引起WBC和中件粒细胞(NE)增多常见的原因,而且WBC增高的程度与细菌种类、感染部位和程度以及机体的反应性有关,同时伴随的WBC主要为NE核左移和中毒性改变也与感染的程度有关~([1]).

    作者:李振华;许丽娇;韦宁;陆学东 刊期: 2010年第01期

  • NGAL与慢性粒细胞性白血病

    中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是一个25×10~3的分泌蛋向,先在1993年被Kjeldsen L发现存在于人类中性粒细胞的特殊颗粒中.NGAL在小鼠身上的同源基因表达蛋白24p3也已经被确定,它可以诱导正常血细胞的凋亡,包括小鼠原始骨髓细胞、脾细胞、胸腺细胞、人类中性粒细胞以及外周血淋巴细胞.另外,很多以小鼠为实验模型的实验数据也证实其作用机制.本文主要介绍NGAL及其鼠同源基因与慢性粒细胞性白血病的关系.

    作者:陈林兴;张丽玲;黄华;陈慎仁 刊期: 2010年第01期

  • 急性中风病患者白细胞计数及其分类的变化

    目的 研究白细胞计数及其分类在急性中风病患者发病过程中的变化.方法 运卅Sysmex SE-9500全自动血细胞五分类仪对200例急性脑中风病患者白细胞总数及其分类进行连续测定.结果 1)出血性脑中风病患者白细胞计数增高率明显高于缺血性脑中风病患者,且白细胞总数增高的同时伴有中性粒细胞增高,两组间比较差异有统计学意义.2)无论是出血性脑中风,还是缺血性脑中风,中脏腑型患者的白细胞计数增高率明显高于中经络型患者.结论 急性脑中风病患者白细胞计数及其分类的变化,对量化中医诊断、中药疗效评价具有临床研究价值.

    作者:赵立铭;尚晓泓 刊期: 2010年第01期

  • 45株副流感嗜血杆菌感染及耐药性调查

    目的 了解本地区呼吸道感染中副流感嗜血杆菌的感染情况及耐药性,以便有效地指导临床合理用药.方法 对760例呼吸道感染患者的呼吸道分泌物进行剐流感嗜血杆菌的培养及鉴定,以K-B法进行药物敏感性试验.β-内酰胺酶试验采用Nitrocefin纸片法.结果 共分离出副流感嗜血杆菌45株,分离率为5.92%(45/760).药敏结果显示阿莫西林/克拉维酸、阿奇霉素、亚胺培南、头孢他啶、头孢呋辛的耐药性较低,均小于5%.是治疗的首选药物.β-内酰胺酶阳性率为37.78%(17/45).结论 本地区呼吸道感染副流感嗜血杆菌耐约形势严峻,β-内酰胺酶阳性率较高,应引起重视.

    作者:李云 刊期: 2010年第01期

  • 检测输血前4项传染性指标对受血者临床价值与应用

    输血是临床上治疗和抢救危重患者常用的医疗措施.近年来,安全输血越来越受到人们的高度重视,我院自2001年起开展了对受血者输血前HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP 4项传染性指标的检测,现报告如下.

    作者:王丽;张春民;张金波 刊期: 2010年第01期

  • 荧光定量RT-PCR检测类风湿关节炎患者葡萄糖-6-磷酸异构酶mRNA表达水平的研究

    目的 通过比较分析葡萄糖-6-磷酸异构酶(G6PT)mRNA在类风湿关节炎(RA)、其他自身免疫性疾病及健康人群之间的表达差异,探讨其在RA中的致病机制.方法 建立实时定量RT-PCR方法,并利用该法检测128例RA患者(RA组)、32例其他自身免疫件疾病患者(疾病对照组)、100例健康体检者(健康对照组)G6PI基因的表达水平.结果 经GAPDH校正后G6PI基因表达水平在RA组为2.72±2.09,其中活动组和缓解组分别为3.12±2.40和2.13±1.34,疾病对照组为2.14±1.43,健康对照组为1.25±0.73.RA组显著高于健康对照组(P<0.01),RA活动组基因表达水平显著高于缓解组(P<0.01),也显著高于疾病对照组(P<0.01).结论 G6PI在RA患者中表达的显著增加表明G6PI可能参与了RA的发病过程,并与疾病的活动性相关,可作为RA的辅助件诊断指标及早期筛查指标.

    作者:宗明;范列英;杨蔺;杨达人;吕红根;叶勤 刊期: 2010年第01期

  • 鼻咽癌患者外周血中EBV DNA荧光定量PCR研究进展

    鼻咽癌是一种常见的恶性肿瘤,高发于我国南部.荧光定量PCR检测在鼻咽癌诊断、预后判断、复发及转移监测、肿瘤负荷判断等方面的均有重要意义.本文就鼻咽癌患者外周血中EBV-DNA检测的研究进展作一综述.

    作者:李振华;欧启水 刊期: 2010年第01期

  • 整合子耐药机制的动态检测

    目的 通过对呼吸道反复感染铜绿假单胞菌,久治不愈,药敏试验从全敏感、部分敏感到全耐药所留菌种染色质和质粒上的整合子Ⅰ的基因及其所携带的耐药基因盒的检测,并结合临床症状与病史分析细菌整合子的耐药特性及机制.方法 用VITEK Ⅱ鉴定细菌、KB法药敏试验、试剂盒抽提质粒和基因组DNA经PCR扩增整合酶Ⅰ,基因后琼脂糖凝胶电泳,LA-PCR扩增可变区耐药基因盒并电泳,可变区耐药基因测序,结合患者病史及临床分析耐药现象.结果 该菌株在耐药前后均检测出整合子Ⅰ,耐药前全敏感时未测得耐药基因盒,多重耐药时可变区所测得的耐药基因盒有耐β-内酰胺类、CatB8、aad4以及aac(6')-Ib等耐药基因盒,分别对头孢菌素类、氯霉素类、氨基糖苷类和氨基糖苷-喹诺酮类组合耐药,还测得了MexR-OprD表达系统的基因盒,提示排出泵增强和外膜通透性降低的耐药机制也可以由整合子以基因盒形式摄取并表达.未测得碳青霉烯类耐药基因盒.结论 该菌株在耐药前后均带有整合子Ⅰ,该整合子在铜绿假单胞菌耐药中起重要作用.

    作者:陈丹华;张如霖;丁星;李莉 刊期: 2010年第01期

  • OLYMPUS全自动生化分析仪性能鉴定

    目的 探讨全自动生化分析仪的性能鉴定方法和技术要素.方法 对OLYMPUS AU2700生化仪进行温度准确度与波动、杂散光、吸光度线性范围、吸光度稳定性、吸光度重复性、吸光度准确度、加样误差、加试剂误差、样品携带污染率、项目准确性、项目的批内精密度和批间精密度等指标进行检查,并与行业标准和厂家说明书标准进行比对.结果 孵育温度为(36.84±0.07)℃,波动度0.11℃,5只比色杯杂散光均大于4.10.吸光度线性范围不小于2.5时,各测定值相对偏倚在±5%以内.340、380、480、600 nm 4个波长的吸光度变化均远小于0.01.吸光度重复性CV值为0.450%.2 mL样品分配的精确度整体CV≤1.5%;5 mL样品分配精确度整体CV≤0.8%.内、外圈试剂分配精确度CV分别为0.40%和0.32%.5组测定的平均携带污染率为0.241 1%.ALP、Mg、P、AMY、Ca、AST、TP、ALB 8个项日定值质控的测定结果均在质控靶值±2sd范围之内.批内精密度与批间精密度介于0.953%~4.713%之间.ISE单元电极选择性[Na]=150 mmol/L,[K]=4 mmnl/L.结论 OLYMPUSAU2700生化仪的性能符合新的行业推荐标准,生化仪的性能鉴定应进一步完善与规范.

    作者:曾方银;刘飞;包杰;张鹏 刊期: 2010年第01期

  • 1898例胎膜早破临产妇宫颈分泌物细菌培养及药敏分析

    目的 了解胎膜早破临产妇宫颈分泌物中病原菌的分布及药物敏感性情况.方法 标本经需氧培养分离后,再鉴定到种并进行相应的药敏试验.结果 1 898例胎膜早破临产妇宫颈分泌物标本分离出507例阳性标本,培养阳性率为26.7%.这507株病原菌中,革兰阳性菌占检出菌的66.2%,以葡萄球菌和白色念珠菌占多数.革兰阴性菌占检出菌的33.8%,以大肠埃希氏菌为主.常见的致病菌依次为大肠埃希氏菌(占22.3%)、真菌(占21.7%,以白色念珠菌为主,占检出真菌的90%)、表皮葡萄球菌(占19.9%)和金黄色葡萄球菌(占15.4%).大肠埃希氏菌对丁胺卡那、环丙沙星、氧氟沙星、第三代头孢类抗菌素的耐药率在13%以下,对第一、二代头孢类抗菌素、氨曲南的耐药率均在40%以上,而对青霉素类的耐药率在60%以上,对第四代头孢类抗菌素(头孢吡肟)的耐药率为零;葡萄球菌对万古霉素和第四代头孢类抗菌素(头孢吡肟)的耐药率也为零,对第一,二、三代头孢类抗菌素的耐药率在30%左右,对青霉素类、红霉素的耐药率均在60%以上,对环丙沙星的耐药率在10%以下、对氧氟沙星的耐药率在20%以下,对阿奇霉素的耐药率在50%以上.真菌感染率明显上升.结论 临床医生要重视胎膜早破临产妇宫颈分泌物的细菌培养结果,及时采取控制措施,预防减少母婴感染.

    作者:刘秀卿;张镇松 刊期: 2010年第01期

  • HBV-LP在乙型肝炎诊断及判断预后中的作用

    目的 探讨乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)与乙型肝炎病毒复制的关系和在诊断和预后中的作用.方法 采用ELISA和荧光定量PCR(FQ-PCR)法,检测200例HBsAg阳性患者血清中HBV-LP、HBVM、HBV DNA和60例经拉米夫定治疗半年的乙型肝炎患者血清HBVM、HBV DNA,并与HBV DNA作对比分析.结果 200例HBsAg阳性患者中,HBeAg与HBV-LP和HBV DNA的阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),HBV-LP与HBV DNA的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05);60例抗病毒治疗患者血清HBV-LP和HBV DNA阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05).结论 HBV-LP能准确反映乙肝病毒在人体内感染和复制情况,动态检测HBV-LP的变化有助于临床评估乙型肝炎的治疗效果.

    作者:高海彦;张会玲;杨杨;王文斌 刊期: 2010年第01期

  • 对CD-1800与Coulter Ac.T 5diff cp 2台血液分析仪的比对评价

    近年来,随着医学检验水平的提高,各地区、各医院检验结果之间的可比性也愈来愈受临床诊疗的重视,为了提高本院血液分析报告的准确性、一致性,特地对我科2台运用于门诊和住院的血液分析仪进行了比对分析评价.

    作者:刘晓燕 刊期: 2010年第01期

  • 葡萄糖-6-磷酸异构酶免疫复合物检测方法的建立及其在类风湿关节炎诊断中的应用

    目的 建立葡萄糖-6-磷酸异构酶(G6PI)免疫复合物测定方法,初步探讨其与类风湿关节炎(RA)发病机制的关系及其对RA辅助诊断、病情监测的作用.方法 建立Clq抗体捕获ELISA方法,并对311例m清标本(RA患者176例、其他免疫疾病患者35例和健康体榆者100例)和44例关节液标本(RA患者33例、非RA关节疾病患者11例)中的G6PI/G6PI抗体/Clq免疫复合物水平进行检测.结果 以波长450 nm吸光度值(A_(450nm))表示复合物含量,176例RA患者血清中G6PI免疫复合物为0.918±0.507,显著高于其他免疫疾病对照组(0.746±0.399)和健康对照组(0.696±0.362),P<0.01;而两对照组间差异无统计学意义.RA活动组为1.045±0.529,显著高于非活动组(0.764±0.436),P<0.01.以健康对照组A_(450 nm)值建立正常参考区间,结果G6PI免疫复合物对RA诊断的敏感性和特异性分别为60.2%和67.4%,活动期RA的阳性率为74%,显著高于非活动期(43.7%).33例RA患者、11例其他关节疾病患者关节液中G6PI免疫复合物A_(450nm)分别为0.835±0.497和0.596±0.132,RA患者组显著高于其他关节病组,P<0.05.结论 RA患者血清和关节液G6PI免疫复合物含量增高,且增高程度与RA病情活动相关;G6PI免疫复合物可能在RA发病中起重要作用,且与疾病的活动性密切相关.

    作者:宗明;范列英;杨蔺;杨达人;吕红根;叶勤 刊期: 2010年第01期

  • 儿科重症监护病房临床标本中微生物的分布常态分析

    目的 了解和分析儿童重症临护病房患者的病原菌分布情况,为指导临床第一线合理用药提供科学依据.方法 对重症监护病房儿童患者的标本(包括气管分泌物、创伤部位分泌物、尿液和血液)进行微生物培养.结果 从重症监护病房儿童患者的标本中分离出微生物共计101株,其中革兰阴性菌76株(75.2%),革兰阳性菌25株(24.8%).在76株的革兰阴性菌中,分离率依次为:克雷伯氏菌属、艾希氏菌属、非发酵菌和肠杆菌属;而25株革兰阳性菌的分离率则依次为:葡萄球菌属、链球菌属、酵母样真菌和肠球菌属.结论 革兰阴性菌是重症监护病房儿童患者的重要致病微生物,应引起临床第一线高度重视.

    作者:欧阳彬 刊期: 2010年第01期

  • 云南省血细胞分析二级标准检测系统的结果比对

    血细胞分析是临床常用的检测项目之一,其检测结果的准确性对疾病的诊断及治疗有重要影响.根据国际血液学标准化委员会(international council for standardization in haema-tology,ICSH)颁布文件的要求,血细胞分析的榆测结果只有溯源至参考方法,才能保证结果的准确性和可比性~([1,2]).

    作者:陈玲;牛华;苏敏;董云华;曹研;唐敏;陈影倩;平竹仙 刊期: 2010年第01期

  • 阴沟肠杆菌染色质ampD基因定点突变致AmpCβ-内酰胺酶由非持续高产型转变为持续高产型

    目的 了解ampD基因特异突变对阴沟肠杆菌AmpCβ-内酰胺酶由非持续高产型转变为持续高产型的影响因素.方法 筛选染色质介导的持续高产型AmpCβ-内酰胺酶的阴沟肠杆菌,扩增其ampD基因并测序,确定其有义突变位点.采用定点突变的方法对野生型阴沟肠杆菌进行上述特异位点的突变,用头孢西丁三维试验测定突变前后菌株产酶类型的改变.结果 121株阴沟肠杆菌中15株为染色质介导的持续高产型,共筛选出8个有义突变化点.形成7株定点突变菌株.Ecl MA(274位插入A)、Ecl MC(327位缺失C)和Ecl MF(27位插入G)由非持续高产型转变为持续高产型,而Ecl MB(371化插入T)、Ecl MD(515位缺失c)、Ecl ME(324C→A)、Ecl MG(两点同时的突变,238C→A,302T→A)的产酶类型未发生变化.结论 能够引起产酶类型发生改变的ampD基因特异突变均为可造成大片段氨基酸改变的框移突变,并且该改变至少从124位之前的氨基酸开始.但并不排除部分持续高产型AmpCβ-内酰胺酶的产生存在其他调控机制.

    作者:涂婉;赵虎 刊期: 2010年第01期

  • 肿瘤患者配合性血小板输注的临床研究

    目的 研究肿瘤患者配合性血小板输注的临床效果.方法 选择36例反复输注血小板的肿瘤患者,随机分为2组,包括交叉配合组及对照组.其中交叉配合组18例,应用单克隆抗体固相血小板抗体试验(MASPAT)进行血小板交叉配合试验,对照组18例采用血小板随机输注.并于输注前和输注后1 h和24 h进行血小板计数,并以血小板正计数增值(CCI)判断输注效果.结果 交叉配合组与对照组输注有效毕分别为83.3%、32.5%,交叉配合试验组其CCI显著高于随机输注组.结论 经MAsPAT进行肿瘤患者血小板配合输注,能显著提高血小板临床输注效果.

    作者:肖倩;辛荣传 刊期: 2010年第01期

  • 血小板活化对恶性肿瘤病情和预后影响的临床研究

    目的 研究血小板活化对恶性肿瘤病情和预后的影响.方法 采用放射免疫法和酶联免疫法测定223例恶性肿瘤和80例健康者血浆血栓烷B_2(TXB_2)、11-去氢-血栓烷B_2(DH-TXB_2)、凝血酶敏感蛋白(TSP)、β-血小板球蛋白(β-TG)、血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)、环磷酸乌苷(CGMP)和血清纤维结合蛋白(FN)含量.结果 1)与健康组比较:除肝癌组TSP、GMP-140、FN外,肺癌、肠癌、肝癌组TXB_2、DH-TXB_2、TSP、β-TG、GMP-140和CGMP升高,肠癌、肺癌FN下降.2)肿瘤组CGMP与TXb_2、DH-TXB_2、TSP、β-TG、GMP-140之间均呈正相关.3)肿瘤组合并感染TSP升高,FN下降;已转移TXB_2、DH-TXB_2、TSP、β-TG、GMP-140和CGMP升高,FN下降;手术后DH-TXB_2,TSP、β-TG、G-MP-140和CGMP下降,FN升高.结论 1)恶性肿瘤患者存在血小板活化,肺癌、肠癌活化较重,肝癌较轻.2)血小板活化影响恶性肿瘤的病情和预后.

    作者:张爱华;刘文励;魏文宁;孙达春;李小亮;唐德禄;田开荣 刊期: 2010年第01期

国际检验医学杂志

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主管:重庆市卫生局

主办:重庆市卫生信息中心