姜小华；仲人前；方晓云；安峰；胡寅；汪修平；孔宪涛
可回复性永生化的基本原理是:先将永生化基因SV40T(猿猴病毒40大T抗原)导入原代细胞以获得永生化细胞株,使其获得体外增殖能力,然后再以特异性位点重组技术切除SV40T基因,使细胞株回复到永生化前的状态,这一技术已被用于多种哺乳动物细胞的永生化[1,2].本研究在以往研究的基础上,构建了包括雌激素受体(ER)与重组酶Cre的融合基因Cre-ER、永生化基因SV40T、加强型绿色荧光蛋白(EGFP)与胸苷激酶(TK)的融合基因EGFp-TK以及重组位点loxP序列的可回复性永生化逆转录病毒载体,旨在为肝细胞或其他细胞的可回复永生化奠定基础.
作者：陈耀凯；李俊刚；王宇明 刊期： 2006年第03期
血清中存在自身抗体是丙型肝炎患者肝外自身免疫现象主要表现之一.此外还可伴有混合性冷球蛋白血症、肾小球肾炎、迟发性皮肤卟啉症、干燥综合征(sjogren's综合征)、自身免疫性甲状腺炎、扁平苔癣、特发性血小板减少症等自身免疫性疾病[1].丙型肝炎病毒(HCV)相关的自身免疫性疾病易发生于老年、女性、HCV持续感染及伴有肝硬化的患者,但其发病机制至今尚未阐明,治疗策略也是我们将要面对的问题.
作者：陈智；潘修成 刊期： 2006年第03期
目的基于药物干预前后的肝组织病理动态变化情况,探讨肝功能、肝纤维化血清学指标在慢性乙型肝炎肝纤维化诊断和预后判断中的价值. 方法根据扶正化瘀胶囊抗慢性乙型肝炎肝纤维化多中心、随机、双盲、对照临床试验中9 3例(包括试验组和对照组)治疗6个月前后2次肝活体组织病理学检查的资料,并依据肝组织纤维化程度减轻和未减轻(或继续加重)的情况将病例分为两组(减轻组36例,未减轻组57例),分析该两组肝组织炎症、肝功能、肝纤维化血清学指标及相应的血常规变化规律.结果纤维化减轻组伴有肝组织炎症程度的显著减轻.药物干预后,纤维化减轻组的血清透明质酸和Ⅲ型前胶原肽含量明显下降(t=3.34与t=3.17,P值均＜0.01),并显著低于未减轻组;但层黏连蛋白和Ⅳ型胶原含量差异均无统计学意义.纤维化减轻组伴有血清白蛋白升高(t=3.24,P＜0.01)及Y-谷氨酰转肽酶、天冬氨酸氨基转移酶活性和凝血酶原时间的下降,而未减轻组无类似变化.结论慢性乙型肝炎肝纤维化患者血清Y-谷氨酰转肽酶、天冬氨酸氨基转移酶活性,凝血酶原时间,白蛋白、血清透明质酸和Ⅲ型前胶原肽含量的变化有助于肝纤维化减轻与否的判断和药物疗效评价,而血清层黏连蛋白和Ⅳ型胶原含量在肝纤维化诊断中的价值有待商榷.
作者：胡义扬；刘平；刘成；刘成海；徐列明 刊期： 2006年第03期
结缔组织生长因子(CTGF)是一种新发现的促成纤维细胞分裂和胶原沉积的生长因子,在肝纤维化形成中的作用逐渐受到关注[1].RNA干扰技术是目前有效的基因沉默技术,能特异性抑制靶基因的转录,进而下调相应蛋白水平及功能[2].本研究将能在体内自主合成短发夹状RNA(shRNA)的pEGFP-CTGF表达质粒转入大鼠肝星状细胞(HS C-T6),观察其对CTGFmRNA及蛋白表达的影响.
作者：主余华；任万华；张春清；马艳丽；石军；赵幼安 刊期： 2006年第03期
目的建立由临床及血清指标组成的综合诊断模型,以无创性的评估慢性乙型肝炎肝纤维化.方法慢性乙型肝炎患者270例,随机分成模型组(195例)和验证组(75例),均行肝活组织检查及病理分期,并按纤维化程度设定不同判别终点(≥S2,≥S3,S4),同时检测、记录26项临床和实验室常用指标,包括年龄、性别、血常规、生化、凝血酶原时间、病毒载量及血清纤维化四项标志物等参数.在模型组,对指标依次行单因素分析和多因素L o gi sti c回归分析,筛选出与研究终点相关的独立预测因子,在此基础上构建诊断肝纤维化的指数模型,后在独立的验证组中检验模型的诊断效率.结果在模型组,建立了一个由年龄、血小板计数、Y谷氨酰转肽酶和透明质酸四项指标构成的判别肝纤维化程度的指数模型(FibroIndex).受试者工作特征曲线(ROC)分析显示,FibroIndex判别≥S3的ROC曲线下面积(AUC)为0.889,以积分3.0为界值,诊断的敏感性90.2%,特异性76.1%,准确性82.0%,且其积分与肝纤维化分期呈良好的正向线性相关(r=0.731,P＜0.01);该指数判别≥S2和S4的界值分别为2.2、5.4,诊断的AUC分别为0.873、0.872,敏感性、特异性分别为79%、82%和8 3%、75%.将FibroIndex以同样标准应用于验证组,其与模型组AUC比较差异无统计学意义,两组的诊断效率总体上相近.结论运用无创诊断模型评价慢性肝炎肝纤维化严重程度具有敏感、准确和可重复性,并有望在一定程度上替代肝活组织检查来监测慢性乙型肝炎肝纤维化的动态变化.
作者：张文胜；王宝恩；王泰龄；欧晓娟；陈煜；李琴；王小明；钱林学；马红；贾继东 刊期： 2006年第03期
目的观察三种混合型生物人工肝支持系统(HBLSS)治疗中、晚期慢性重型肝炎的临床效果.方法构建猪肝细胞中空纤维管型生物人工肝系统(BAL),构建三种组合方式的HBLSS:BAL与分子吸附再循环系统(MARS)组合;BAL与缓慢血浆置换(SPE)和持续血液透析滤过(CHDF)组合;BAL与缓慢血浆置换(SPE)和血液灌流(HP)组合.120例中、晚期慢性重型肝炎患者被随机均分为6组,治疗组分别接受BAL+MARS(H1)、BAL+SPE+CHDF(H2)和BAL+SPE+HP(H3)治疗;对照组分别接受MARS(C1)、SPE+CHDF(C2)和SPE+HP(C3)治疗.观察各组患者在治疗前、治疗结束时、治疗结束后7 2 h的临床症状、肝性脑病、血清总胆红素、凝血酶原活动度、血清内毒素、血氨、肌酐和甲胎蛋白等的变化.观察各组的治愈好转率、不良反应的发生情况. 结果治疗组与对照组均能改善患者临床症状、降低总胆红素、血清内毒素、血氨水平,提高凝血酶原活动度和甲胎蛋白水平,但以H1、H2、H3组作用明显.与H3组比较,H1、H2组能显著降低肌酐、血氨.H1、H2、H 3、C1、C2、C3的治愈好转率分别为65%(13/20)、60%(12/20)、45%(9/20)、45%(9/20)、40%(8/20)、20%(4/20).H1、H2、H3治疗中均未发生严重不良反应.结论 H1、H2、H3组治疗中、晚期慢性重型肝炎的效果优于C1、C2、C3组,其中H1组和H 2组能明显改善肝肾功能,阻断多器官功能衰竭,疗效优于H3组.
作者：罗红涛；刘全妹；谭家驹；叶一农；张沛华；罗钻弟；龙辉 刊期： 2006年第03期
急性肝功能衰竭(ALF)脑水肿常是导致死亡的直接原因和预后决定因素.ALF脑水肿是以星形胶质细胞肿胀为特征性的细胞性水肿[1].水通道蛋白-4(AQP-4)特异表达在星形胶质细胞膜,感受细胞内外渗透压的变化,调节水的跨细胞膜流动是细胞肿胀的分子基础[2].磁共振扩散加权成像(DWI)对细胞内、外水分子的扩散运动较敏感,能发现活体组织中水分布变化[3].通过建立大鼠ALF模型检测MR信号、血氨水平和AQP-4表达,探讨AQP-4在ALF脑水肿中的生化和分子机制.
作者：杨晋辉；宋正己；廖承德；尤丽英；胥莹；杨婧；杨黎宏 刊期： 2006年第03期
川芎嗪(TMP)是从活血化瘀类中药川芎的根茎提取的有效成分,化学结构为四甲基吡嗪.大黄酸(RH)是从利湿退黄类中药大黄中提取的蒽醌衍生物.两药均被实验证实有抗肝纤维化的作用[1,2].将两个单体联用,其抗肝纤维化的作用更明显[3],但对其抗肝纤维化的作用机制不太清楚.通过观察两药联用对转化生长因子β1(TGF β1)和甘油三酯(TG)引起的L-02肝细胞增殖和凋亡的影响,探讨其保护肝细胞及抗肝纤维化的可能机制.
作者：刘梁英；李孝生；万晓强 刊期： 2006年第03期
目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态与中国人肝细胞癌(HCC)遗传易感性的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测508例H C C与543例对照的MTHFR C677T基因型分布及其差异.结果H C C和对照两组人群的MTHFR C677T基因型分布差异无统计学意义.但与C等位基因携带者(C/C和C/T基因型)相比,T/T基因型携带者患HCC的风险增加0.66倍(95%可信区间为1.08～2.54,P＜0.05).性别因素分层分析结果显示:T/T基因型女性携带者其HCC的风险是C等位基因女性携带者的2.64倍(9 5%可信区间为1.19～5.88,P＜0.05);而男性T/T基因型与C等位基因携带者其HCC的风险差异无统计学意义.结论 MTHFR基因C677T多态可能是中国女性患HCC的一个遗传易感因素,而男性HCC发病风险与该多态无明显关系.
作者：朱忠政；丛文铭；刘淑芳；冼志红；吴伟清；吴孟超 刊期： 2006年第03期
慢性乙型肝炎(CHB)发生的重要原因之一是患者的机体不能对乙型肝炎病毒(HBV)形成充分有效的免疫应答以清除病毒.树突状细胞(DC)是目前发现的功能强的抗原呈递细胞,在激活T细胞介导的免疫中具有重要的作用.近期文献报道及我们的研究结果提示CHB患者DC不仅数量较少而且发育障碍、功能低下[1-3].所以促进CHB患者DC发育并改善其功能,对提高CHB患者的免疫功能以清除体内的HBV有重要意义.本文通过研究肝素在体外对CHB患者DC功能的调节作用,为寻找能促进DC成熟的经济有效的诱导因子提供实验依据.
作者：汤伟；孙伟红；汪晓莺；孙晓雷 刊期： 2006年第03期
目的研究四氯化碳诱导的实验性大鼠肝纤维化不同阶段体内晚期糖基化终末产物的变化情况,以及晚期糖基化终末产物抑制剂氨基胍对肝纤维化的干预作用. 方法 SD大鼠分为3组:对照组、模型组、氨基胍干预组.检测四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化及氨基胍干预后不同阶段血清及肝组织匀浆晚期糖基化终末产物含量,血清透明质酸水平,并对照观察肝脏的组织病理学改变进行肝纤维化程度评分.结果血清及肝组织匀浆晚期糖基化终末产物含量、透明质酸水平以及肝纤维化评分,肝纤维化12周组高于对照组(t值分别为3.26、3.49、4.70和25.4,P值均＜0.01),氨基胍干预组低于肝纤维化组(t值分别为2.11、2.11、2.93和2.47,P值均＜0.05).血清及肝组织匀浆晚期糖基化终末产物含量与血清透明质酸水平呈线性相关.结论肝纤维化晚期血清及肝组织匀浆晚期糖基化终末产物含量是增高的.一定程度上,体内晚期糖基化终末产物水平可以反映肝纤维化情况.氨基胍对四氯化碳诱导的实验性大鼠肝纤维化有一定的干预作用.
作者：高福生；刘宾；展玉涛；史小林；张京秀；王凝；丁燕；谢新纪 刊期： 2006年第03期
目的用抗线粒体抗体M2抗原免疫C57BL/6小鼠,建立原发性胆汁性肝硬化实验动物模型.方法将纯化的抗线粒体抗体M2抗原与完全弗氏佐剂,每只小鼠腹腔1次注射200μl.对照组免疫原用牛血清白蛋白与完全弗氏佐剂.免疫后第66周,检测小鼠血清M2抗体、碱性磷酸酶、丙氨酸氨基转移酶和总胆红素,并对小鼠肝脏、肾脏、胃和肌肉组织进行病理学检查. 结果 M2抗原免疫小鼠诱导出M2抗体.模型组小鼠碱性磷酸酶显著升高,而丙氨酸氨基转移酶与总胆红素无显著变化.模型组小鼠汇管区有明显单个核细胞浸润,小叶间胆管损伤或增生.在其他组织器官如肾脏、胃和肌肉中未见明显病理变化.结论 M2抗原诱导C57BL/6小鼠,建立原发性胆汁性肝硬化模型,其生化和病理特征与人类原发性胆汁性肝硬化早期相似.
作者：姜小华；仲人前；方晓云；安峰；胡寅；汪修平；孔宪涛 刊期： 2006年第03期
牛磺酸能减轻肝脏脂质过氧化损伤,对酒精性脂肪肝有良好的防治作用[1].非酒精性脂肪肝(NAFL)的病理改变与酒精性脂肪肝有颇多相似之处,本实验观察牛磺酸对NAFL的影响,旨在为临床应用提供依据.
作者：陈思文；陈岳祥；张兴荣；曾欣；刘苏；谢渭芬 刊期： 2006年第03期
在各种诱因引起的肝纤维化中,氧自由基是促使肝纤维化形成的主要原因之一,脂质过氧化反应的醛类产物不仅引起肝星状细胞(HSC)的增殖与活化,而且激活库普弗细胞释放导致肝纤维化形成的细胞因子[1].中药复方汉丹肝乐具有良好的抗肝纤维化作用,但其药理作用可能是多方面的[2].本实验旨在通过观察不同干预措施下肝内氧化及抗氧化体系的变化情况,了解汉丹肝乐是否可通过改善体内氧化及抗氧化体系发挥作用,为临床用药提供依据.
作者：程明亮；付荣泉 刊期： 2006年第03期
酒精性肝病是由于长期大量饮酒所致的肝脏疾病.初期通常表现为脂肪肝,进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化;严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚或肝功能衰竭;该病是我国常见的肝脏疾病之一,严重危害人民健康.为进一步规范酒精性肝病的诊断和治疗,中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组组织国内有关专家,在参考国内外新研究成果的基础上,按照循证医学的原则,制订了本<指南>.其中推荐的意见所依据的证据等级共分为3个级别5个等次[1],见表1,文中以括号内斜体罗马数字表示.
作者：中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组 刊期： 2006年第03期
影像学检查是无创诊断肝纤维化的重要手段之一.但由于肝纤维化各期、乃至早期肝硬化往往缺乏特异性影像表现,因此用传统的方法常难以明确诊断和鉴别.近年来,随着现代医学设备和技术的不断发展,各种成像技术对肝纤维化的诊断能力已有很大提高.
作者：张文胜；王宝恩 刊期： 2006年第03期
肝纤维化是各种慢性肝损伤发展为肝硬化的共同病理过程,对其早期诊断可为药物治疗、预防和预后判断等提供重要的参考.长期以来,肝纤维化的确诊离不开肝活组织检查,这种损伤性检查具有明显不足.因此临床上迫切需要寻找简单且易推广的非创伤性诊断指标诊断肝纤维化.目前仅依靠某种或某几类指标诊断肝纤维化显然是不够全面的,而且这些诊断指标必需经过系列的大样本进行验证以便进一步证实其诊断肝纤维化的准确性.近来在肝纤维化非创伤性诊断方面有不少有价值的临床研究,这些结果对临床医生有很重要的参考价值.
作者：陆伦根；曾民德 刊期： 2006年第03期
近几年来,对肝纤维化发生、发展机制的研究又有不少令人鼓舞的新进展,包括对肝内不同部位纤维生成细胞的特点、对疾病特异性肝纤维化调节机制的阐述,以及对肝纤维化自然史和可逆性的全面评价等等方面,也为诊断和治疗肝纤维化开拓了新思路和新方法,其中一些问题更是肝病学者关注的热点.
作者：王宝恩 刊期： 2006年第03期
以肝组织中细胞外基质(ECM)成分异常过度沉积为特征的肝纤维化是临床多种急、慢性肝病的常见病理转归.由于早期肝纤维化具有可逆转性,因此在这一阶段的诊断对整个疾病的进程和疗效至关重要.但目前肝纤维早期诊断仍是临床一大难题.
作者：高春芳 刊期： 2006年第03期
目的了解输血后慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者的临床特点及自然病程.方法采用回顾性调查与前瞻性研究相结合的方法,进行定群随访观察.结果 (1)在99例H CV感染病例中,输血时间主要集中于1989-1994年,其中1990-1992年为多见.(2)99例随访患者中,90例临床诊断为慢性丙型肝炎,9例诊断为丙型肝炎肝硬化(代偿期).(3)99例患者自输血距首次诊断丙型肝炎的时间为(7.4±6.6)年,其中9例患者首次诊断丙型肝炎肝硬化距输血时间为(12.7±5.8)年.(4)在63例男性患者中,慢性丙型肝炎59例,丙型肝炎肝硬化4例,36例女性患者中,慢性丙型肝炎31例,丙型肝炎肝硬化5例;按男女分组比较丙型肝炎与肝硬化的构成比,差异无统计学意义(P＞0.05).(5)丙型肝炎肝硬化组患者病程中均有反复肝功能异常,并且丙氨酸氨基转移酶异常时波动的幅度较大.(6)本组病例在观察期间未发现肝癌的发生.结论 (1)在广州地区,目前经输血感染HCV的可能性较199 5年前大幅度降低.(2)9.1%(9/99)的慢性丙型肝炎感染者在HCV感染13(12.7±5.8)年左右已进展为肝硬化(代偿期).(3)对于反复出现肝功能异常的慢性丙型肝炎患者,应尽可能采用干扰素联合利巴韦林进行抗病毒治疗.
作者：崇雨田；林潮双；赵志新；林国莉；李建国；高志良 刊期： 2006年第03期
中华肝脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
