陆雄；刘平
一、资料与方法采集广州中山医科大学第三附属医院等3所综合性大医院血液净化中心74例血液透析患者血清，并提取外周血单个核细胞（PBMC），抽检部分末次洗涤液TTV DNA均阴性。所有患者均诊断为慢性肾功能衰竭，男44例，女30例，平均年龄（53+-12）岁，平均透析次数（226+-344）次。
作者：林潮双；凌小强；邓洪；张晓红；崇雨田；高志良 刊期： 2001年第01期
我们旨在观察外源性心钠素（ANP）对肝硬化患者血浆肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）的影响，以探讨治疗肝硬化腹水的新途径。一、资料与方法
作者：洪阳；韦举卿；周力 刊期： 2001年第01期
患者，男，22岁，因发热5d，体温高时达39℃，血WBC 3.5×109/L，初诊为“沙门氏菌属感染”而收入院。给予妥布霉素，益保世林治疗，3d后体温降至正常。但肝功能出现明显异常，ALT＞1000U/L，AST＞750U/L，TB 58μmol/L。即停用妥布霉素及益保世林改用护肝治疗。入院第8天出现消化道症状，恶心，呕吐，黄疸明显加深，尿如浓茶，TB达247μmol/L，肝于右肋下1.5cm处触及，质中而触痛。更正诊断为急性病毒性肝炎，但肝炎病原学检查除抗-HBs阳性外，甲、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒抗体均阴性，进一步作TTV抗体测定，连续二次结果均阳性。后诊断为病毒性肝炎（TTV感染）急性黄疸型。治疗上先后用激素、联苯双脂及中药、护肝胶囊等，入院半月后黄疸逐渐消退，住院１月肝功能基本正常出院。出院后随访２月，肝功能正常，精神体力恢复。讨论：本例TTV感染为贵阳地区首次发现。类似本例早期高热和高峰期严重瘀胆现象少见。这是否有可能在TTV感染的同时合并其它感染，或与使用退热药、妥布霉素、益保世林等加重了肝损害有关。国内流行病学的研究资料表明，TTV感染不一定致病，且致病特点与其不同亚型有关，限于条件，本病例未能测定其亚型，有待进一步随访观察。
作者：张世萍；贺远；黄致模 刊期： 2001年第01期
根据我们的研究积累和临床实践，对乙型肝炎病毒基因检测技术方面存在的几个问题提出一些个人看法，希望引起重视。一、要合理选择基因检测方法 常用的基因检测方法是杂交法和多聚酶链反应(PCR)法，两种方法各有优势，但各又有不尽人意之处。比较肯定的是：杂交法的特异性优于PCR法，PCR法的敏感度胜过杂交法。 膜斑点杂交技术正逐步被微孔板杂交技术取代。微孔板杂交技术(如bDNA)不仅操作简便，而且由于采用了信号放大探针，提高了灵敏度；更由于检测系统中的夹心探针系化学合成的寡核苷酸，特异性进一步提高。由于成本过高，目前国内主要将bDNA技术用于HBV、HCV基因的定量分析。PCR技术不仅是一种研究手段，更是一类多功能的检验技术。在用于临床实验室诊断方面，PCR有其独特的优势。相对而言，近几年来基因定量PCR发展速度更快，其中竞争PCR和荧光PCR似成为当前的焦点话题。
作者：缪晓辉；孔宪涛 刊期： 2001年第01期
我们采用流式细胞术（flow cyto-metry）对慢性HBV感染者外周血CD4+NK-T、CD8+NK-T细胞的分布情况进行分析，并对细胞样品进行51Cr细胞毒性试验，以鉴定其细胞毒性。一、资料与方法1. 对象：病例为第一军医大学南方医院感染内科1999年5月至9月门诊及住院病人。选择慢性HBV携带者（AsC）18例、经肝组织活检证实的慢性乙型病毒性肝炎（中度）（CHB）18例，正常对照组12例取自门诊健康体检者。48例受检者中女14例，男34例，年龄17～42岁（平均32.4岁）；36例慢性HBV感染者均为HBsAg阳性（ELISA），27例HBeAg阳性，9例抗-HBe阳性；正常对照组除5例抗-HBs阳性外，其余对照者HBV血清标志物全部阴性。2. 方法：流式细胞检测（FACS）分析CD4+ NK-T、CD8+NK-T细胞的分布情况新鲜抗凝全血4ml，常规分离PBMC，在RPMI 1640培养液中、37℃培养2h，移去贴壁的单核细胞。2×106/ml非贴壁细胞继续以20U/ml rhuIL-12及100U/ml rhuIL-2刺激培养14d，加入FITC标记鼠抗人CD4单克隆抗体（mAb）或CD8 mAb、PE标记CD56-mAb 45min，作FACS，获得CD4+ NK-T和CD8+ NK-T细胞的百分率。所有病例均同步设一鼠抗人IgG（PE、FITC）细胞样品作为对照。
作者：姜荣龙；骆抗先；富宁 刊期： 2001年第01期
肝窦属不连续毛细血管，窦壁主要由一层内皮细胞组成。肝窦内皮细胞的特点是细胞扁而薄，其窦腔面可见少量微绒毛，扁薄的部分有发达的窗孔，细胞呈筛状形态，内皮窗孔无隔膜。肝窦内皮外无基底膜，仅见少量网状纤维。肝窦是通透性大的血窦之一，是保证血液和肝细胞间正常物质交换的组织学基础。1963年Schaffner发现随着肝硬化的发生，肝窦内皮窗孔数逐渐减少或消失，内皮下基底膜逐渐形成，形似连续毛细血管，称这一过程为肝窦毛细血管化（sinusoid capil-larization）。研究肝窦毛细血管化的形成机理以及和肝纤维化、肝硬化的发生关系已成为世界肝病研究领域的一个热点。一、肝窦毛细血管化的评判各种原因所致的肝纤维化过程中一个显著的病理变化即为纤维间隔近旁肝窦毛细血管化。肝窦内皮细胞的失窗孔和内皮下连续性基底膜的形成是肝窦毛细血管化的两个主要特征[1]。肝窦内皮细胞的失窗孔意味着肝窦内皮细胞的表型（Phenotype）发生了改变，而连续性基膜的形成可能是构成基膜的一些细胞外基质在Disse间隙沉积的结果[2]。1. 正常肝窦内皮细胞表型的标志：肝窦内皮细胞有很强的物质摄取和代谢能力，它可吞噬多种外源性和内源性颗粒和大分子物质[1]。例如，肝窦内皮细胞表达低亲和力的FCγⅡ受体（CD32、OKM5），内吞和降解免疫球蛋白IgG复合体。
作者：陆雄；刘平 刊期： 2001年第01期
目的 探讨联合经肝动脉插管化疗栓塞术（TACE）及无水酒精瘤内注射术（PEI）治疗复发性肝癌周围静脉血液循环性肝癌细胞的变化及其意义。方法应用巢式RT-PCR检测19例复发性肝癌患者血液循环性肝癌细胞，并经TACE及PEI联合治疗观察其血液循环性肝癌细胞的变化。结果血液循环性肝癌细胞表达阳性的7例复发性肝癌患者（36.8%），经TACE及PEI联合治疗后其血液循环性肝癌细胞均转为阴性（100%，P＜0.01）。结论联合TACE及PEI治疗复发性肝癌可有效地杀灭血液中播散的循环性肝癌细胞，可预防肝癌再复发和转移的发生。
作者：刘扬；张柏和；吴孟超；钱光相；陈汉；傅继梁；黄长辉 刊期： 2001年第01期
目的 研究正常肝细胞和肝癌细胞流变特性与细胞骨架结构的相关性。方法 以微管吸吮技术测定两种细胞的粘弹性系数和细胞在2μg/mlⅣ型胶原/1.25μg/ml层粘连蛋白（laminin，LN）复合裱衬表面上的粘附力，以秋水仙素（colchicine，Col）和细胞松弛素D（cytodchlasin，CD）处理细胞研究其对细胞粘弹性系数和粘附力的影响。结果 在质量浓度为1～60mg/L的Col作用下，肝细胞弹性系数及粘附力总体上明显增高或趋于增高，而肝癌细胞粘弹性系数及粘附力明显降低；在质量浓度为0.25～5.00mg/L的CD作用下，两种细胞粘弹性系数及粘附力均明显降低，肝癌细胞弹性系数K1、K2值及粘附力的下降幅度明显大于肝细胞相应值的下降幅度。细胞在Ⅳ型胶原/LN复合裱衬表面的粘附力与细胞粘弹性系数呈相同的变化趋势，肝癌细胞粘附力变化与细胞弹性系数K1、K2的变化呈高度正相关（P＜0.01)。结论 在CD和Col作用下肝细胞和肝癌细胞的流变特性呈不同的效应方式或强度，反映了肝细胞和肝癌细胞细胞骨架结构和机能状态的差异。
作者：吴泽志；张钢；邵开峰；龙勉；王红兵；宋关斌；王伯初；蔡绍皙 刊期： 2001年第01期
目的 通过对丁型肝炎病毒（HDV）感染的乙型肝炎患者临床特点分析，了解HDV感染特征和HDV致病机理。方法对合并HDV感染的507例乙型肝炎患者各临床类型肝炎的发生、预后、临床表现、生物化学指标、肝炎病毒标志物等作统计分析，以213例单纯HBV感染的乙型肝炎患者作对照。结果 HDV感染后重型肝炎、肝硬化的发生率和病死率、及发生出血、腹水、并发症和ALT反复增高及增高幅度均较HDV阴性者高（Ｐ＜0.01或Ｐ＜0.05），重度慢性肝炎和重型肝炎患者的生物化学指标异常也较对照组明显（Ｐ＜0.01）。血清HBeAg检出率降低（Ｐ＜0.01）。急性肝炎、重型肝炎和肝硬化HDAg（+）、HBeAg（-）表达高于HDAg。HBeAg均阳性者（Ｐ＜0.01或Ｐ＜0.05）。结论 HDV感染后重度慢性肝炎、重型肝炎和肝硬化的发生率高，预后差；HDV感染可抑制HBV复制或HBeAg表达；HDV的直接细胞毒性作用在急性肝炎中可能起主要致病作用，在合并有HDV感染的乙型肝炎患者病情加重、病死率增高和慢性化过程中，HDV可能起主要促进作用。
作者：顾小红；李奇芬；王宇明 刊期： 2001年第01期
生物型人工肝是目前治疗暴发性肝衰竭一种有效的方法[1]，它要求所用肝细胞能提供足够的肝功能支持，且当应用异种肝细胞时还应避免排斥反应的发生，肝细胞的微囊化可解决这些问题[2]。我们在以往研究的基础上[3]，制备微囊化乳猪肝细胞并进行体外培养。1. 材料与方法: (1)采用改进的Seglen原位胶原酶（Ⅳ型）灌注法，经门静脉、腹主动脉双重灌洗分离新生雄性乳猪肝细胞。(2)采用静电液滴法制备海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠（alginate-polyly sine-alginate，APA）微囊肝细胞。(3)取自同一供体猪相同数量（3.5×107)APA微囊肝细胞和游离肝细胞分别以Williams’E培养液（含胰岛素、表皮生长因子、胰高糖素等）于CO2培养箱（37℃，5% CO2）同期培养。(4)APA微囊乳猪肝细胞（1.4×108）置入自制灌流罐以Williams’E培养液100ml循环灌流24h，流速10ml/min（37℃，5%CO2）。(5)统计学处理采用Studen t’s t检验，方差分析，q检验。
作者：张金卷；李涛；杜智；舒桂明；付丽；宋继昌 刊期： 2001年第01期
目的 探讨HBeAg阴性的慢性重型乙型肝炎患者HBV前C区变异及前C区T1862突变体对e抗原合成和分泌影响。方法选取9例重型乙型病毒性肝炎患者，用PCR方法扩增血清中HBV前C/C基因区，并克隆后测序和序列分析；构建HBV前C区T1862位点突变体表达质粒pGEMT，经体外翻译比较野毒株和变异株的表达产物。结果 HBV前C区有3个位点变异使氨基酸序列改变, A1896、A1899和T1862；A1899并不单独出现。前C区T1862突变并不阻止HBVe前体蛋白体外合成。同时，有2例并未检测到前C区的变异。结论部分重型肝炎HBeAg阴性原因除了T1896变异外，还存在T1862变异。前C1862突变对HBVe抗原前体蛋白合成并无影响，可能e抗原前体在分泌过程中受阻。
作者：郭亚兵；侯金林；骆抗先；冯筱榕 刊期： 2001年第01期
近年来兴起的核酸疫苗对某些病毒感染同时具有预防和治疗作用。我们构建了一系列能表达乙型肝炎病毒大、中、小蛋白的疫苗质粒，并研究了其在SP2/0细胞中的表达情况。一、材料与方法1. S、MS、LS蛋白编码基因片段的获取：以含有adr亚型HBV全基因组pBHB4质粒为模板，用3对人工合成的引物SF/SR、S2F/SR、S1F/SR分别扩增编码小蛋白S（nt28-708）、中蛋白MS（nt3077-708）和大蛋白LS（nt2719-708）的DNA片段。引物SF、S2F和S1F分别互补于S、前S2和前S1基因起始区域，SR则互补于S基因相应的终止区。2. S1S重组基因片段的获取：采用重叠扩增PCR法对S1S2S基因进行剪切和重组，即获得不含S2的S1S重组基因片段。3. 重组质粒的构建及鉴定：将上述获得的S、S1S、S2S及S1S2S基因片段分别插入质粒pSG5UTPL/Flag载体的SV40启动子下游和质粒pRc/CMV载体的CMV启动子下游。将以上8个重组质粒转化大肠杆菌XL Blue 1，经菌落PCR鉴定技术筛选含相应插入片段的阳性克隆，然后抽提、扩增、纯化并酶切鉴定，以373A型核酸自动分析仪测定所插入片段的核酸序列。4. 重组质粒在SP2/0细胞中的表达：将纯化的质粒转染SP2/0细胞并筛选、建立长期转染细胞株。分别收集部分转染细胞，超声破碎后收集上清液，以Western-Blot检测相应蛋白质在SP2/0细胞中的表达情况。
作者：秦山；唐红；赵连三；林勇 刊期： 2001年第01期
一、资料与方法1. 病例选择和治疗：活动性慢性丙型肝炎患者21例，抗HCV和HCV RNA均阳性，ALT异常（＞80U/L)，病程持续6个月以上。HBV标记均阴性，并排除其他因素，如酒精、遗传和自身免疫等因素引起的肝病。根据临床和肝组织学，除2例为伴早期肝硬化外，其余均为活动性慢性肝炎。所有患者均接受IFN-α2a治疗，每天300万单位，连续15d，后每周3次，每次300万单位，共16周。2. 患者PBMC的分离和检测：分别抽取新鲜肝素抗凝全血3～5ml，用淋巴细胞分离液分离PBMC。用作逆转录聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测的PBMC，以蛋白酶和RNA酶分别处理，以排除血清中HCV对PBMC的污染可能。所有患者分离的PBMC均以SP免疫组织化学、RT-PCR和常规透射电镜方法分别检测HCVAg、HCV RNA和细胞内HCV颗粒。SP免疫组织化学通用型试剂盒为美国Zymed公司产品，购自北京中山生物技术公司。检测HCV RNA的RT-PCR试剂盒，购自北京京师生物技术公司。HCVAg和HCV RNA检测按试剂盒说明书步骤进行。常规透射电镜标本按常规方法制备，1μm切片定位后超薄切片，铀铅双染色后JEM-1200EX透射电镜观察和照相。3. 疗效分析：主要根据治疗前后患者血清ALT和HCV RNA变化，PBMC内HCV RNA和HCVAg改变情况，并参考临床表现，将IFN治疗后患者归为三组，完全应答组:血清ALT降至正常值,HCV RNA转阴，PBMC内HCVAg阳性强度明显减弱，临床症状消失或明显改善；部分应答组：血清ALT复常或明显降低，但血清和PBMC内HCV RNA基本无变化，PBMC内HCVAg阳性强度变弱或无变化，临床症状改善或无变化；无应答组：血清ALT和HCV RNA，PBMC中HCV RNA和HCVAg基本无变化，临床症状基本无改变。二、结果完全应答者7例（33.33%），部分应答者5例（23.81%），无应答者9例（42.85%）。检查结果显示，完全应答组患者，血清ALT降至正常，血清HCV RNA转阴，PBMC内HCV RNA无改变，原5例阳性者仍为阳性，HCVAg２例转阴，其余5例阳性强度减弱，电镜观察该组患者PBMC，治疗前5例均可见到过去我们以电镜和免疫电镜证实的HCV颗粒，治疗后可见者仅2例，光镜下PBMC-HCVAg呈“++”以上阳性者，一般电镜下易见HCV颗粒,该组患者临床症状消失或显著改善。部分应答患者5例，治疗后1例血清ALT复常，4例明显下降，血清HCV RNA 1例转阴，其余4例无改变，PBMC HCV RNA治疗前后无变化，HCVAg治疗前３例阳性者，治疗后阳性强度稍有减弱或无变化，治疗前2例HCVAg原阴性者，治疗后无变化，临床症状改善或无变化。无应答患者9例，治疗前后血清ALT和HCV RNA，PBMC内HCV RNA基本无变化。PBMC内HCVAg阳性程度稍有减弱或无改变。电镜观察治疗前8例可见HCV颗粒，治疗后可见者4例。该组患者临床症状无改善或稍有加重。三、讨论结果表明，IFN对活动性慢性丙型肝炎患者血清和PBMC内HCV表达有直接作用，这一作用与其治疗应答有关。IFN治疗完全应答者、部分应答者或无应答者的PBMC内HCVAg表达均受到不同程度抑制，特别是完全应答组患者更为明显，但PBMC内HCV RNA治疗前后均无变化，表明IFN对慢性丙型肝炎患者PBMC内HCV抗原合成有一定抑制作用，但不能清除PBMC内HCV RNA。因此，在IFN治疗慢性丙型肝炎时，设法清除患者PBMC内HCV RNA比清除血清和肝细胞内HCV RNA可能更为重要和更有价值。
作者：陈良标；田惠英；陈佩兰；刘超英；李琳 刊期： 2001年第01期
我们对32例临床确诊肝癌并腹水的标本进行K-ras基因外显子1、2和p53基因外显子5、6、7、8测序分析。1. 材料与方法：(1)标本：32例腹水患者均经确诊为肝癌，男19例，年龄31～68岁，女13例，年龄33～59岁。非癌性腹水27例，男16例，年龄23～67岁，女11例，年龄27～65岁。两组患者均无癌家族史及长期汹酒史。(2)材料：310型测序仪、2400型PCR仪由美国PE公司产，引物由上海生工生物工程公司合成，测序试剂盒、序列胶等由美国PE公司产。(3)方法：引物序列：5′GTACTGGTGGAGT ATTTGATAGTG3′，5′AAGAATGGT CCTGCACCAGTAATA3′，5′AGGTG CACTGTAATAATCCAGACTGTG3′，5′GCACTATAATTACTCCTTAATGT CAGC3′，5′GCAGTTCCTCTTCCTGCA GTACTC3′，5′AACCAGACCTCAGGC GGCTCATAG3′，5′TGTTGTCTCCT AGGTTGGCTCTGACTA3′，5′GTCC TGCTTGCTTACCTCGCTTAGTGC3′。腹穿留新鲜腹水10ml，离心收集细胞沉淀，用蛋白酶K消化，苯酚－氯仿抽提法提取基因组DNA，取基因组1μg的DNA分别扩增K-ras外显子1、2和p53基因外显子5、6、7、8，用双链产物为模板直接测序。2. 结果：32例肝癌腹水中见K-ras基因突变2例，p53基因突变9例，阳性率分别为6.25％和28.13％，其中有2例先在腹水中发现p53基因突变，后发现肝癌，见表1。
作者：顾其华；叶爱慧；李玲芝；杨志毅；舒畅 刊期： 2001年第01期
1. 资料与方法：病例为44例慢性重型肝炎早、中期患者，年龄26～63（41.8±9.28）岁，诊断符合1995年北京传染病与寄生虫病学术会议修订标准。随机分为治疗组20例（治疗中死亡６例，存活14例中10例HBV标志物（HBVM）阳性，HBV DNA阳性；４例HBVM阳性，其中２例HBV DNA阳性和对照组24例（治疗中死亡14例，存活10例中５例HBVM阳性，HBV DNA阳性；５例HBVM阳性，其中２例HBV DNA阳性）。方法：治疗组用Tα1 1.6mg（10支/人）辅以常规综合治疗，对照组用常规综合治疗。治疗前及治疗４周后分别测定：(1)HBV DNA定量（4孔Q-PCR，设置内对照和酶标板模式通用捕集法）；(2)外周血Ｔ细胞亚群（链菌素亲生物素过氧化酶连接法）；(3)IL-2和IL-6活性（MTT比色法）。观察指标：(1)治疗前、治疗后４周二组HBV DNA含量变化、外周血Ｔ细胞亚群变化及IL-2、IL-6活性情况。(2)治疗结束后３个月以上存活率。(3)低于推荐剂量的Tα1疗效情况。资料处理用SPSS软件进行统计学分析。2. 结果见表1和表2。3. 讨论：Tα1是人工合成由28个氨基酸组成的高活性小分子多肽。胸腺肽第５组份（TF5）中主要有效成份具有双向免疫调控和直接抑制病毒复制作用，且这种作用呈现出后效应现象。实验结果示（1)Tα1能明显提高外周血CD4+水平，提示其能活化Ts细胞（抑制性Ｔ细胞），有助于HBV清除和炎症恢复。(2)Tα1能显著提高外周血IL-2活性和降低IL-6活性，提示其有重建Th1活性，增强有效细胞免疫功能，是一种良好的抗炎因子。(3)用低于推荐剂量的Tα1治疗后，病毒载量（virus load）均数下降1.35个对数级（log），且３个月存活率为70%，对照组存活率为41.7%，提示低于推荐剂量的Tα1治疗慢性重型肝炎早、中期患者有效。至于Tα1是否确能降低血清HBV DNA含量，提高慢性重型肝炎存活率，尚需大量循证医学研究。
作者：江南；吴佳玉；杨兴祥；邱火亨功 刊期： 2001年第01期
因特网（Internet）是世界上复盖面广、规模大、内容丰富的信息资源库，为全世界提供了大量的肝病信息。为了节约用户的上网时间、使从事肝病专业的有关人员和肝病患者更好地利用因特网上的信息资源，我们将因特网上重要的国外肝病信息资源、网址及查找方法介绍如下。一、有关肝脏疾病的信息资源库1. HepNet（http://www.hepnet.com）：肝病信息网络分为５个部分：(1)有关肝炎的临床和科研以及预防流行病学的新信息。(2)各类会议的情况简介。(3)问题解答：解答有关肝炎领域的各种问题。(4)医生库：专为临床医生设置的各种信息数据库，解答临床医生在医疗实践中碰到的各种问题。(5)患者需要咨询的数据库：专为患者设立的解答患者问题的数据库。此外，交互式学习肝炎知识也是肝炎信息网络的一个重要部分。它包括4个部分：(1)肝脏与疾病：可以了解到肝脏本身有关知识以及肝炎受累的有关情况。(2)8类不同的幻灯系列片：可提供读者要求的有关肝炎的一切知识。(3)6种在线测验：可考核你对肝炎知识了解的程度，其中包括危险因子和新进展等。(4)Hepnet’s webcasts是由世界著名的肝病学家提供的声像资料，你可在休闲时阅览，增加对肝病的了解。
作者：孟昭鹏；李秀英；韩俊英 刊期： 2001年第01期
一、资料与方法1. 样本收集：肝癌组织及非癌肝组织取自20例1998年3月～7月在东方肝胆外科医院经手术切除的新鲜原发性肝癌标本，经病理检查证实为肝细胞癌。男19例，女1例，年龄34～60岁，平均44.5岁，20例全伴肝硬化。肝癌分化程度按Edmondson法分级，正常肝组织来源于同期手术切除的5例肝海绵状血管瘤周围正常肝组织。男2例，女3例，年龄34～57岁，平均44.6岁。取肝癌组织、非癌肝组织及正常肝组织各200mg，标本必须自肿瘤离体后30min内置液氮速冻，再转-80℃冰箱冻存备检。2. AFP mRNA定量检测：取-80℃冻存肝癌组织、非癌肝组织及正常肝组织各100mg，加1mlTRIzol（Gibco BRL）试剂于DEPC处理匀浆器内电动匀浆，一步法抽提组织总RNA。PCR辅助转录滴定系统（Patty）法定量检测1μg总RNA中AFP mRNA含量，具体步骤参见文献[1]。3. 统计分析：两组间均数比较用t检验，非参数资料相关性大小用Spearman等级相关分析。二、结果1. AFP mRNA定量检测结果：肝癌组织AFP mRNA水平为106～1010拷贝/μg，平均为3.2×107±20.8拷贝/μg；非癌肝组织为104～107拷贝/μg，平均为6.3×105±5.9拷贝/μg；正常肝组织为104～105拷贝/μg，平均为6.8×104±2.8拷贝/μg。与非癌肝组织相比，60%（12/20）肝癌组织AFP mRNA高出102～106倍，20%（4/20)高出10倍，两组间差异有显著意义（Ｐ＜0.001）。在6例血清AFP阴性（＜30μg/L）肝癌患者中，66.7%（4/6）的肝癌组织AFP mRNA高于非癌肝组织。2. 肝癌组织AFP mRNA水平与肝癌各病理特征的关系：如表1所示，肝癌组织中AFP mRNA水平与肿瘤大小、分化程度及门静脉是否有癌栓无关（Ｐ＞0.20）。
作者：杨业发；吴孟超；陈汉；杨广顺；郁庆明 刊期： 2001年第01期
为了探讨TTV是否能在新西兰长耳兔（以下简称兔）复制,我们进行了TTV对兔传代感染试验，证明它能感染也能传代。一、材料与方法１. 实验动物：由湖南省卫生防疫站提供成年新西兰兔。2. 第一代感染实验：收集六份非甲至非庚型肝炎TTV阳性血清，每只兔由耳静脉注射阳性血清１ml，定期采血（感染前采血，感染后每周采血一次），分离血清，当天检测生化指标，血清标本于－20℃保存备用。第二、第三代感染试验，用四只兔进行接种，其中２只兔感染成功继续接种，方法与第一代实验相同。将第二代感染成功兔血清1ml接种于第三代兔体内。3. 感染指标及测定方法：(1)标本中TTV DNA的检测，用nest－PCR方法检测血清中TTV DNA。(2)生物化学指标检测：对感染兔进行系列采样，定期测定ALT和直接、间接胆红素等各项指标的变化。(3)感染兔体内TTV DNA基因的克隆及序列测定：从感染TTV的血清标本中克隆TTV的部分基因进行序列测定，操作按常规进行,对测定序列采用Golbenkey Clustail及Blast程序软件进行序列比较。
作者：王长奇；陈燕萍；伍淑云；袁绍云；周宪明 刊期： 2001年第01期
乙型肝炎病毒（HBV）感染机体后临床表现及转归差别很大，感染者在发生肝硬化和原发性肝癌（HCC）之前的任何阶段感染都可自行消失，而抗病毒药物如干扰素（INF）、核苷类物也可抑制病毒而影响感染的自然过程。弄清其自然史及其影响因素，有助于乙型肝炎的预后判断、药物疗效的分析及药品经济学评估，为其防治提供佐证。那么，HBV感染后的长期过程究竟是怎样的一种状况呢？现就有关研究作一简要综述。HBV可以感染任何年龄的人，不同的感染方式和年龄有不同的自然过程。HBV感染后的慢性携带率与感染的年龄密切相关，年龄越小，慢性化的可能越大。新生儿感染HBV后慢性携带率高达71%～90%，学龄前儿童感染后25%呈慢性携带，青少年和成人在3%以下。因此，母婴传播所造成的慢性携带率较高，中国HBV慢性携带者中40%～50%是通过母婴传播的。有报道在225名HBsAg阳性母亲的新生儿中145人在出生后一年内HBsAg阳转（占64.4%）。至于宫内感染，刘崇柏等[1]用原位杂交检测了HBsAg阳性母亲的引产儿肝片，计算出宫内感染率约５%，与新生儿免疫接种的预防效果相符。而田庚善等[2]也采用分子杂交对HBsAg阳性母亲的引产儿肝脏进行了检测，却发现胎儿感染率高达26.7%，与新生儿免疫预防效果不相符的原因认为与胎儿肝脏中HBV DNA为非复制型或整合型不表达HBsAg有关。
作者：巫贵成；周卫平 刊期： 2001年第01期
编者按 2000年6月3日在日本福冈举行的亚太肝病学会－国际肝病学会的联合学术大会上，由5个工作小组向大会提交了作为亚太地区“共识”的5个报告。其中关于慢性乙型肝炎治疗的报告及建议已登载于我刊第8卷第4期。现将其中关于慢性丙型肝炎治疗的报告及建议摘要的译文发表，供大家参考。报告组成员：Garrell GC（悉尼）、Omata M(东京)副主席、Sarin SK(新德里)、Shiratori Y (东京)、Chutaputti A(曼谷)、陆志檬（上海）、 Lai M-Y(台北)、Chow W-C（新加坡）、Farrell GC执笔一、背景1. 肝纤维化分期的重要性：研究慢性丙型肝炎的自然病程以及肝脏疾病并发症的危险性要求从组织学上明确肝纤维化的分期。虽然已有数个对慢性肝炎肝脏组织学进行半定量的分期的系统，但将纤维化（F）严重程度分为0～4期的分级法在本地区仍为常用，本报告也将采用这一分期方法。这与日本、Metavir和Scheuer等系统相对应，不同观察者之间的分期结果高度一致。2. 治疗应答：想要达到的治疗应答指标是清除病毒，用敏感的实验方法检测血清HCV-RNA为阴性。治疗结束时HCV-RNA阴性为治疗终末病毒应答（ETVR），持续病毒应答（SVR）的定义为在治疗完成后6个月时HCV-RNA仍为阴性。3. 持续病毒应答：获得持续病毒应答与肝纤维化好转、防止发生HCC及改善其他临床预后有好的相关性。相反，作为肝炎的生物化学指标，丙氨酸氨基转移酶（ALT）存在以下局限性：(1)用ALT定义应答（ETR或SR），有约15%的出错率。(2)用ALT定义无应答，有10%～50%的出错率，取决于其他情况（如存在肝硬化，使用更大剂量的干扰素或药效更强的干扰素，如pegylated（PEG）-IFN）。
作者：崔焱；王宇；贾继东；王宝恩 刊期： 2001年第01期
中华肝脏病杂志
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