陈波；赖星；罗玉政；廖汪洋；刘长安
目的:研究中药紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药(Multidrug resistance,MDR)机理.方法:应用MTT法检测紫龙金的细胞杀伤作用,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax基因mRNA水平表达.结果:BIU-87/ADM细胞生存率为(98.00±1.48)％,加入紫龙金后(浓度分别为200、500 μg/ml),其细胞生存率分别为(68.14±5.62)％、(52.36±1.87)％,差异显著(P＜0.01)；流式细胞仪检测发现:经200、500 μg/nl的紫龙金处理后,BIU -87/ADM细胞凋亡率[(17.32±2.35)％、(22.76±3.65)％]明显高于对照组(5.86±1.37)％,差异显著(P＜0.01)；RT-PCR结果显示,紫龙金可以下调Bcl-2基因的表达,可使Bax基因表达增强.结论:紫龙金可通过下调Bcl-2基因的表达,增强Bax基因表达诱导人膀胱癌多药耐药细胞凋亡.
作者：王祥卫；张远宁；李杰；方针强；易善红；叶钢 刊期： 2011年第10期
目的:提高大鼠胰十二指肠移植模型(Pancreaticoduodenal transplantation,PDT)的制作效率,为胰腺移植的临床和基础研究奠定模型基础.方法:以SD大鼠作为供体,Wistar大鼠作为受体,共行40例大鼠胰腺移植.采用自制套管吻合供体门静脉和受体左肾静脉、供体腹主动脉和受体左肾动脉,术中不需阻断下腔静脉和腹主动脉.结果:40例手术中,供体平均手术时间为(68±4)min,受体平均手术时间(55±4)min,静脉袖套吻合时间(6±1)min,动脉套管吻合时间(5±1)min,术后24h移植物恢复功能,有轻度组织病理学改变,移植成功率达90％.结论:该方法简化了血管吻合的步骤,减少了术后大出血的并发症,大大提高了造模效率.
作者：赵雪云；张力；刘胜春 刊期： 2011年第10期
目的:评价心脏再同步化治疗(伴或不伴除颤功能)在降低心力衰竭患者的死亡率方面的作用.方法:查阅已公开发表的有关心脏再同步化治疗心力衰竭的临床随机对照试验文献,以死亡率为主要评价指标,用Cochrane协作网的软件RevMan5.1进行Meta分析.结果:本次分析终纳入文献12篇(n=7 539).与单纯药物治疗组相比,心脏再同步化治疗(Cardiac resynchronization therapy,CRT)加药物治疗组的死亡率明显降低(RR 0.73,95％CI 0.62-0.85)；而与埋藏式除颤器(Implantable cardioverter defibrillator,ICD)治疗组相比,带除颤功能的心脏再同步化治疗组(CRT-D)死亡率亦显著降低(RR 0.83,95％CI 0.72-0.96).在心功能Ⅰ、Ⅱ级(NYHA)的心力衰竭患者中,上述结果十分明显(RR 0.81,95％CI 0.67-0.97)；但在心功能Ⅲ、Ⅳ级的患者中则不然(RR 0.86,95％CI 0.69-1.07).结论:药物加心脏再同步化治疗及具备除颤功能的心脏再同步化治疗能显著降低心力衰竭患者的死亡率.
作者：卢庭义；考国营；苏立 刊期： 2011年第10期
目的:构建转录因子ZNF191腺病毒表达载体,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,并将ZNF191亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,酶切及DNA测序鉴定后,将含ZNF191基因的重组穿梭质粒pAdTrack-ZNF 191经PmeⅠ线性化后转化pAdEasy-1感受态细菌.pAdEasy-ZNF191质粒经Pme Ⅰ线性化后转染293T细胞,包装重组腺病毒Ad-ZNF191,并进行PCR鉴定、Western blot检测受感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白的表达.结果:证实pAdTrack-CMV-ZNF191及pAdEasy-ZNF191质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-ZNF191包装成功,腺病毒感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白表达明显提高.结论:成功构建了ZNF191基因重组腺病毒表达载体Ad-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.
作者：王晓鹏；李梦文；厉建中 刊期： 2011年第10期
目的:探讨骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、热化疗单独和联合应用对人结肠癌细胞SW480株增殖凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:BMP-2(25、50、100、200、400μg/L)作用于SW480细胞株,MTT法检测其细胞活力.BMP-2、五氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)单独与联合作用于SW480细胞株,流式细胞(Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率,Western blot检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PTEN mRNA表达.结果:BMP-2可以抑制SW480细胞的增殖.与单独作用比较,BMP-2联合热化疗作用于SW480细胞株时,其凋亡率明显增高(P＜0.05).BMP-2能够提高PTEN蛋白的表达水平,但是不能提高PTEN mRNA的表达水平.结论:BMP-2可以提高热化疗的敏感性.BMP-2与热化疗联合作用有协同诱导SW480细胞株凋亡的作用,其机制可能与上调PTEN蛋白表达及阻止PTEN蛋白降解有关.
作者：龙腾；王亚旭；晏佳；刘小虎；刘娜娜 刊期： 2011年第10期
目的:探讨应用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉,在青少年特发性脊柱侧弯(Adolescent idiopathic scoliosis,AIS)矫形手术中的实用性和安全性.方法:采用21例AIS,在手术矫形过程中,胸椎椎弓根螺钉的置入均采用“漏斗技术”,记录置入操作和术后并发症;对术中确信度不高的胸椎椎弓根置钉行三维C臂(3D-C-arm)断层扫描,观察螺钉在椎弓根的位置,记录穿出骨皮质螺钉的数目及距离;术后早期均行X线摄片判断置入螺钉位置.结果:采用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉268枚,术中三维C臂断层扫描确信度不高的39枚螺钉,无1枚穿透椎弓根内、外侧壁;3枚螺钉(7.69％)穿透椎体前壁,穿透距离＜3mm.所有病例术后行X线摄片,观察发现椎弓根钉位置良好；术中及术后未出现血管、神经、脑脊液漏等并发症.结论:在AIS矫正术中,应用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉的方法是实用的、安全的.
作者：刘显宏；欧云生；权正学；蒋电明；唐可；罗小辑 刊期： 2011年第10期
目的:对利用抑制消减杂交技术获得的舌鳞癌干细胞相关表达序列标签(Expressed squence tag,EST)进行电子克隆及序列分析.方法:利用互联网上的公共数据库及生物信息学分析软件对获得的舌鳞癌干细胞相关差异表达序列标签进行核酸序列和蛋白质序列分析,探索克隆差异表达基因的研究方法和策略.结果:通过电子延伸得到1个1 705 bp的cDNA序列；核酸序列分析显示,该cDNA定位在1号染色体,含有1个编码146个氨基酸的完整开放阅读框；对氨基酸序列进行结构域预测显示其存在1个与Translin超家族同源的区域；BLAST比对显示该氨基酸序列与Translin相关蛋白X(Translin associated protein X,TRAX)具有较高的同源性.结论:利用生物信息学技术获得了舌鳞癌相关表达序列标签的基本信息,为深入研究该表达序列标签的功能奠定基础.
作者：邹波；季平；孙守娟；漆小娟 刊期： 2011年第10期
1 临床资料患者男性,37岁,因“发热17d,咳嗽、咯痰伴呼吸困难9d”入院.入院前17d患者因受凉后出现畏寒、发热,测体温37.8℃～38.8℃,无咳嗽、气促、咯血,院外予头孢曲松钠抗炎治疗无效.入院前9d开始出现咳嗽,咳大量黄绿色脓痰,伴呼吸困难,作胸片示“肺炎”,予氨苄西林钠、左氧氟沙星抗感染5d无效,换为头孢哌酮/舒巴坦及甲基强的松龙等治疗3天,症状仍无好转,呼吸困难逐渐加重,作胸部CT提示双侧肺内病灶明显增多,呈蜂窝样改变,故来我院.患病以来,精神、食欲明显下降,体重下降约10 kg.入院查体:T 37.6℃,P133次/min,R 32次/min,BP 100/70 mmHg,神清神萎,半卧位,可见吸气性三凹征,口唇紫绀;双肺闻及大量湿罗音和散在哮鸣音;心界不大,心率133次/min,律齐,无杂音;腹部无阳性体征;双下肢不肿.
作者：余纪会；郭述良；王璞 刊期： 2011年第10期
目的:构建人细胞色素P450 2A13(CYP2A13)基因与绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)共表达的慢病毒载体,并转染肺腺癌A549细胞使之持续高表达CYP2A13基因.方法:采用基因重组技术,将CYP2A13基因与GFP连接,构建慢病毒载体.转染293T细胞,包装后产生病毒液,测定其滴度.包装后的病毒感染A549细胞.激光共聚焦显微镜检测GFPCYP2A13融合蛋白在A549细胞中的定位；Real-time PCR和Western blot检测A549细胞中CYP2A13表达情况.结果:成功构建人细胞色素CYP2A13基因与GFP共表达的慢病毒载体,转染293T细胞后,荧光显微镜下可见有大量的绿色荧光.激光共聚焦显微镜观察,感染后的A549细胞的胞核和胞浆中有绿色荧光iReal-time PCR和Western blot检测到A549细胞中CYP2A13的高表达.结论:成功构建了CYP2A13与GFP基因共表达的慢病毒表达载体,为研究CYP2A13基因与呼吸系统肿瘤的关系,提供了稳定的感染细胞的载体.
作者：范晓丽；谭宁；孙莉 刊期： 2011年第10期
内窥镜逆行胆胰管造影(Endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)分为诊断性ERCP和治疗性ERCP.诊断性ERCP的并发症主要为急性胰腺炎(0.66％),其次为化脓性胆管炎(0.33％)[1].治疗性ERCP并发症主要为出血、穿孔和化脓性胆管炎[1].本例为诊断性ERCP,同时发生肺动脉血栓栓塞、胆管穿孔和急性出血坏死性胰腺炎,快速引起呼吸循环衰竭死亡,实为罕见,现报告如下.
作者：陈圣开；何世举 刊期： 2011年第10期
目的:观察采用肺复张策略(Lung recruitment maneuver,LRM)联合小潮气量机械通气治疗新生儿急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的临床有效性及安全性,探索在ALI新生儿中建立合理的机械通气模式的方法.方法:前瞻性观察我院新生儿重症监护室(Neonatal intensive care unit,NICU)收治的22例ALI患儿,诊断标准参照1994年欧美联席会议所制定,给予小潮气量联合复张策略(Recruitment maneuver,RM)的通气方式.实施RM时采用持续肺膨胀(Cst)法,每8h进行1次,共3d.分别在患儿第1次LRM之前和LRM之后的12、24、48、72 h记录RM后的血气指标、呼吸机参数及血流动力学指标,以及使用RM3～5 d后复查胸片,随访患儿的上机时间及预后.结果:治疗后12、24、48、72 h,RM组PaO2、PaO2/FiO2和Cst呈明显上升趋势,且均显著高于治疗前基础组以及同时间点非RM组值；同时,二氧化碳分压(Arterial carbon dioxide tension,PaCO2)和吸气峰压(Peak inspiratory pressure,PIP)则明显下降,均显著低于治疗前基础组以及同时间点非RM组值.RM组复张后各时间点的心率和血压同复张前无明显差异(P＞0.05).结论:LRM联合小潮气量机械通气可以改善ALI患儿的氧合功能并提高其肺顺应性.患儿的耐受性良好,具有临床可行性.
作者：高淑强 刊期： 2011年第10期
目的:探讨外源性硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)对肿瘤坏死因子alpha(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)诱导的角质形成细胞分泌炎症因子白细胞介素6 (Interleukin 6,IL-6)、白细胞介素8(Interleukin 8,IL-8)以及一氧化氮(Nitric oxide,NO)的影响,并探讨核转录因子kappa B(Nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路途径是否参与此过程.方法:应用TNF-α诱导HaCat细胞分泌炎症因子,以硫氢化钠(Sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体,设置不同浓度的量效组.采用ELISA法测定HaCat细胞分泌IL-6和IL-8的水平,RT-PCR法检测HaCat细胞IL-6和IL-8的mRNA水平,Griess法检测HaCat细胞分泌NO水平,Western blot检测HaCat细胞胞内诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、磷酸化I-kappa B-alpha(Phosphorylation of I-kappa B-alpha,p-IKB-α)和胞核内NF-κB P65水平.结果:10 ng/ml的TNF-α能显著诱导HaCat细胞内IL-6和IL-8因子的转录和分泌,培养上清NO产量和胞内iNOS含量明显增高,胞内p-IKB-α和胞核P65水平明显提高.在TNF-α诱导HaCat细胞前1h,给与20～400 μmol/L的NaHS做预处理,结果显示NaHS呈剂量依赖性地抑制HaCat细胞分泌IL-6、IL-8和NO,并能部分抑制NF-κB信号通路的活化.结论:H2S通过抑制NF-κB信号通路的活化来抑制TNF-α诱导角质形成细胞的炎症反应.
作者：Ammar K H Ashorafa；郭庆；曾凡钦；陈敏春；谭国珍；唐增奇；尹若菲 刊期： 2011年第10期
目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价.方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体；正交设计优选制备处方；考察脂质体的粒径分布、zeta电位；用超滤离心法测定脂质体的包封率；离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性.结果:所得优化处方为磷脂与药物比为100∶1,油水比为4∶1,磷脂与胆固醇之比为1.5∶1,旋转蒸发温度为37℃;以优化处方制得的脂质体平均粒径为123.4 nm,zeta电位为(-8.42±0.88)mV,平均包封率达77.9％.结论:选用逆相蒸发法优化pshRNA-survivin脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好.
作者：李耀威；孙江川；常淑芳；张勇；陈佳；王志刚 刊期： 2011年第10期
目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(Receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)在胆管癌侵袭和转移中的作用.方法:收集临床上行胆管癌手术的患者的组织标本及正常胆管组织标本,根据分化程度将胆管腺癌组织标本分为高、中、低分化3组;按TNM分期标准将所有组织标本分为对照组、胆管癌组以及胆管癌伴转移组.免疫组织化学(SP)法测定RHAMM平均光密度值.RT-PCR及Western blot法检测RHAMM mRNA和蛋白的表达水平.结果:免疫组织化学检测在不同分化程度的胆管腺癌中RHAMM均有不同程度的表达(P＞0.05)；RHAMM在胆管癌伴转移组阳性率高,在对照组表达阳性率低.RT-PCR和Western blot检测RHAMM mRNA和蛋白表达水平在对照组和胆管癌组差异无统计学意义(P＞0.05).在胆管癌伴转移组明显高于对照组和胆管癌组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:RHAMM的表达程度与胆管腺癌的分化程度无关,但在胆管癌伴转移组中的高表达可能与胆管癌的侵袭相关,并终促进了胆管癌的转移.
作者：陈波；赖星；罗玉政；廖汪洋；刘长安 刊期： 2011年第10期
目的:研究5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dc)对涎腺腺样囊性癌(Adenoid cystic carcinoma,ACC)细胞中抑癌基因第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)的影响及可能的机制.方法:利用RT-PCR检测ACC细胞经甲基转移酶抑制剂5-Aza-dc作用后,PTEN基因mRNA的表达水平；Western blot检测5-Aza-dc干预对PTEN蛋白表达的影响.结果:在一定时间内,经5-Aza-dc作用后,ACC细胞中PTEN基因mRNA及蛋白表达水平逐渐增加,且差异有统计学意义(P＜0.05),PTEN mRNA表达水平改变与PTEN蛋白的表达基本一致.结论:ACC细胞系中PTEN的低表达可能与PTEN基因启动子区甲基化状态有关.
作者：张华昌；向学熔；范小平；杨明聪；吴静 刊期： 2011年第10期
目的:测定谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferases,GST)动力学参数变化,建立表征其抑制剂的方法.方法:从猪肝经阴离子交换层析和亲和层析制备GST酸性同工酶,用还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和1-氯-2,4-二硝基苯(1,-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)合成S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)为候选抑制剂,以GSH与CDNB为底物测定GST在GS-DNB作用下的米氏常数(Km)和大反应速度(Vm),从而确定GS-DNB对GST的抑制常数(Ki).结果:此GST被纯化146倍以上,活性总收率近30％.该GST对GSH和CDNB的Km分别为42 μmol/L和0.86 mmol/L,属于随机双底物动力学模型.GS-DNB对CDNB竞争性Ki为(21±1)μmol/L (n=2)；对GSH竞争性Ki为(17±1)μmol/L (n=2).结论:产物GS-DNB是GST的高亲和力竞争性抑制剂；测定GST动力学参数随抑制剂浓度的变化可筛选其抑制剂.
作者：张灵；杨晓兰；白婧；廖娟；刘红博；廖飞 刊期： 2011年第10期
目的:研究共刺激分子程序性死亡配体1 (Programmed death ligand 1,PD-L1)、程序性死亡配体2(Programmed death ligand 2,PD-L2)和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学PV -6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN(CINⅡ～Ⅲ级)和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性.结果:正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2；CINⅡ～Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70％(47/67)、51％(34/67)和46％(31/67).统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关(P＜0.01),与年龄、组织学类型无关；PD -L2的表达与肿瘤的淋巴结转移(P＜0.05)有关；B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移(P＜o.05)和局部血管内瘤栓形成(P＜0.05)相关.结论:人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关.PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点.
作者：耿卫朴；徐曼；王渝琦；徐光旭；陈瑜；王婷婷；黄文炼；赵涌 刊期： 2011年第10期
目的:评价在腮腺肿瘤切除术中两种保留面部表浅肌肉腱膜系统(Superficial musculoaponeurotic system,SMAS)术式对味觉出汗综合征的预防效果和对腮腺肿瘤术后复发的影响.方法:125例良性腮腺肿瘤患者随机分为3组.Ⅰ组(游离保留SMAS法)39例,Ⅱ组(非游离保留SMAS法)46例,Ⅲ组(按传统手术方法未保留SMAS)40例.术后6～12个月,所有患者均通过调查问卷形式和碘-淀粉试验对味觉出汗综合征分别进行主观评价和客观评价.所有患者均完成了术后2～3年对肿瘤复发情况的随访.结果:Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组味觉出汗综合征的主观评价发生率分别为5.1％(2/39)、26.1％(12/46)和55.0％(22/40) (P＜0.05)；客观评价发生率分别为10.3％(4/39)、37.0％(17/46)和72.5％(29/40)(P＜0.05).术后经2～3年的随访,3组患者共125例均无复发病例.结论:保留SMAS是预防腮腺肿瘤术后发生味觉出汗综合征的有效方法,但游离保留SMAS法疗效更佳.保留SMAS不会增加良性腮腺肿瘤的复发.
作者：喻秀丽；杨凯；张福军；吕晓强 刊期： 2011年第10期
目的:筛选艾滋病暴露前用药(Preexposure prophylaxis,PrEP)扩大规模临床试验的适宜高危人群.方法:采用Topsis 法对高危人群的9个指标基于PrEP必要性和可行性两个层面进行评估.结果:男性性行为者为佳目标人群,艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染者配偶次之,女性性工作者为较不适宜人群.结论:评价结果符合实际情况,选择的评价指标代表性较好,结果可靠.
作者：贾元元；钟晓妮；张燕；彭斌；黄文祥；梁浩；邹云锋；戴江红；罗锦昆；彭鸿斌；刘倩萍；宋本莉；黄爱龙 刊期： 2011年第10期
目的:观察高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)对恶性实体肿瘤患儿体液免疫的影响.方法:采用HIFU治疗系统治疗儿童恶性实体肿瘤20例.分别在治疗前和后1周、1月抽取患儿外周血,用速率散射比浊法检测IgG、IgA、IgM、C3及C4表达量的变化.结果:IgG与C3的表达量在HIFU治疗前和后1周、1月分别依次为(9.08±1.49、9.02±1.54、10.38±1.72) g/L与(1.15±0.27、1.12±0.22、1.33±0.23) g/L.与治疗前比较,HIFU后1月恶性实体肿瘤患儿外周血IgG和C3表达量显著增加(P=0.015和P=0.027)；HIFU后1周、1月患儿IgA、IgM和C4表达量均无统计学意义(P＞0.05).结论:HIFU治疗可能对儿童恶性实体肿瘤患儿体液免疫有增强作用.
作者：敖玉；王珊；朱辉；王智彪；孔祥如；章均 刊期： 2011年第10期
重庆医科大学学报杂志
主管:重庆市教育委员会
主办：重庆医科大学
