学术投稿

测定谷胱甘肽-S-转硫酶动力学参数的变化表征其抑制剂

张灵;杨晓兰;白婧;廖娟;刘红博;廖飞

关键词:谷胱甘肽-S-转移酶, 抑制剂, 还原型谷胱甘肽
摘要:目的:测定谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferases,GST)动力学参数变化,建立表征其抑制剂的方法.方法:从猪肝经阴离子交换层析和亲和层析制备GST酸性同工酶,用还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和1-氯-2,4-二硝基苯(1,-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)合成S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)为候选抑制剂,以GSH与CDNB为底物测定GST在GS-DNB作用下的米氏常数(Km)和大反应速度(Vm),从而确定GS-DNB对GST的抑制常数(Ki).结果:此GST被纯化146倍以上,活性总收率近30%.该GST对GSH和CDNB的Km分别为42 μmol/L和0.86 mmol/L,属于随机双底物动力学模型.GS-DNB对CDNB竞争性Ki为(21±1)μmol/L (n=2);对GSH竞争性Ki为(17±1)μmol/L (n=2).结论:产物GS-DNB是GST的高亲和力竞争性抑制剂;测定GST动力学参数随抑制剂浓度的变化可筛选其抑制剂.
重庆医科大学学报杂志相关文献
  • 紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药研究

    目的:研究中药紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药(Multidrug resistance,MDR)机理.方法:应用MTT法检测紫龙金的细胞杀伤作用,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax基因mRNA水平表达.结果:BIU-87/ADM细胞生存率为(98.00±1.48)%,加入紫龙金后(浓度分别为200、500 μg/ml),其细胞生存率分别为(68.14±5.62)%、(52.36±1.87)%,差异显著(P<0.01);流式细胞仪检测发现:经200、500 μg/nl的紫龙金处理后,BIU -87/ADM细胞凋亡率[(17.32±2.35)%、(22.76±3.65)%]明显高于对照组(5.86±1.37)%,差异显著(P<0.01);RT-PCR结果显示,紫龙金可以下调Bcl-2基因的表达,可使Bax基因表达增强.结论:紫龙金可通过下调Bcl-2基因的表达,增强Bax基因表达诱导人膀胱癌多药耐药细胞凋亡.

    作者:王祥卫;张远宁;李杰;方针强;易善红;叶钢 刊期: 2011年第10期

  • 抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线

    目的:构建一条绿色、环保且能适合工业化生产抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线.方法:以苯乙胺为原料,用氯乙酰氯酰化,再用邻苯二甲酰亚胺钾氨基化反应,在P2O5作用下经Bischler-Napieralski环合反应制得N-[(1-亚甲基)-3,4-二氢异喹啉]邻苯二甲酰亚胺,经肼解和还原得到1-氨甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐,经环己烷甲酰化、氯乙酰氯酰化和环合得目标化合物.结果:该合成路线的总收率可达32.8%,为原总收率的2.13倍.结论:该合成工艺路线操作简便,原料廉价易得,条件温和,绿色环保,收率较高,具有一定的工业化生产前景.

    作者:程训官;郑小红;夏铸;张昕宇;王宇;余瑜 刊期: 2011年第10期

  • 血管内皮生长因子及其可溶性受体1在多囊卵巢综合征患者血清和卵巢组织的表达

    目的:研究多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者与正常对照组血液和卵巢组织中血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其可溶性受体1(Soluble vascular endothelial growth factor receptor 1,sFlt-1)表达水平,探讨其对PCOS发生和发展的影响.方法:应用酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定46例PCOS患者及25例对照者血清中VEGF、sFlt-1浓度.应用免疫组化SP法检测9例PCOS患者及7例对照患者卵巢组织VEGF、sFlt-1的表达.结果:(1)在血清中,PCOS组的VEGF、sFlt-1浓度中位数分别49.18 pg/ml、49.25 ng/L,对照组分别为34.45 pg/ml、389.37 ng/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).(2)在卵巢组织中,PCOS组的VEGF、sFlt-1灰度值表达分别为0.24±0.03、0.17±0.04,对照组为0.18±0.02、0.26±0.05,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).(3)在血清和卵巢组织中,VEGF生物利用度(VEGF/sFlt-1)均高于对照组,差异有统计学意义.(4)在血清中研究VEGF与sFlt-1相关性,两者为负性相关关系(rs=-0.435,P<0.05).结论:血清和卵巢组织中sFlt-1表达下降,可能引起了VEGF表达的增加,共同参与PCOS卵巢血管的形成,从而促进PCOS的发生和发展.

    作者:张家佳;赵纯全 刊期: 2011年第10期

  • 改进大鼠胰十二指肠移植模型的建立

    目的:提高大鼠胰十二指肠移植模型(Pancreaticoduodenal transplantation,PDT)的制作效率,为胰腺移植的临床和基础研究奠定模型基础.方法:以SD大鼠作为供体,Wistar大鼠作为受体,共行40例大鼠胰腺移植.采用自制套管吻合供体门静脉和受体左肾静脉、供体腹主动脉和受体左肾动脉,术中不需阻断下腔静脉和腹主动脉.结果:40例手术中,供体平均手术时间为(68±4)min,受体平均手术时间(55±4)min,静脉袖套吻合时间(6±1)min,动脉套管吻合时间(5±1)min,术后24h移植物恢复功能,有轻度组织病理学改变,移植成功率达90%.结论:该方法简化了血管吻合的步骤,减少了术后大出血的并发症,大大提高了造模效率.

    作者:赵雪云;张力;刘胜春 刊期: 2011年第10期

  • 不同降糖治疗对非肥胖2型糖尿病患者血浆网膜素-1水平的影响

    目的:观测不同葡萄糖耐量的非肥胖人群血浆网膜素-1 (Omentin-1)水平,研究吡格列酮和短期持续皮下胰岛素输注,又称胰岛素泵(Continuous subcutaneous insulin infusion,CSII)强化治疗对2型糖尿病患者血浆omentin-1水平的影响.方法:59例非肥胖的初发2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者据血糖水平分别接受吡格列酮治疗12周(P组,27例)和CSII强化治疗2周(CSII组,32例);用酶免法测定血浆omentin-l水平及相关代谢指标.结果:非肥胖T2DM患者空腹血浆omentin-1水平降低,以CSII组降低更为显著[(26.13±6.20)vs(22.01±7.51) vs( 17.58±8.81) μg/L,P<0.05].吡格列酮和CSII强化治疗均能使血浆omentin-1水平升高(22.01±7.51 vs 24.45±7.31) μg/L,(17.58±8.81 vs 22.32±8.69) μg/L,均P<0.05.结论:吡格列酮和CSII强化治疗均能升高血浆omentin-1水平,且血浆omentin-1水平可能与T2DM严重程度(表现为HbA1c)和胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)(表现为HOMA-IR)有关.

    作者:阳皓;罗涌;刘维娟;郭莲;徐伟 刊期: 2011年第10期

  • 两种保留SMAS术式对腮腺肿瘤术后复发和预防Frey综合征的对比研究

    目的:评价在腮腺肿瘤切除术中两种保留面部表浅肌肉腱膜系统(Superficial musculoaponeurotic system,SMAS)术式对味觉出汗综合征的预防效果和对腮腺肿瘤术后复发的影响.方法:125例良性腮腺肿瘤患者随机分为3组.Ⅰ组(游离保留SMAS法)39例,Ⅱ组(非游离保留SMAS法)46例,Ⅲ组(按传统手术方法未保留SMAS)40例.术后6~12个月,所有患者均通过调查问卷形式和碘-淀粉试验对味觉出汗综合征分别进行主观评价和客观评价.所有患者均完成了术后2~3年对肿瘤复发情况的随访.结果:Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组味觉出汗综合征的主观评价发生率分别为5.1%(2/39)、26.1%(12/46)和55.0%(22/40) (P<0.05);客观评价发生率分别为10.3%(4/39)、37.0%(17/46)和72.5%(29/40)(P<0.05).术后经2~3年的随访,3组患者共125例均无复发病例.结论:保留SMAS是预防腮腺肿瘤术后发生味觉出汗综合征的有效方法,但游离保留SMAS法疗效更佳.保留SMAS不会增加良性腮腺肿瘤的复发.

    作者:喻秀丽;杨凯;张福军;吕晓强 刊期: 2011年第10期

  • 诊断性内窥镜逆行胆胰管造影罕见并发症死亡1例报告

    内窥镜逆行胆胰管造影(Endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)分为诊断性ERCP和治疗性ERCP.诊断性ERCP的并发症主要为急性胰腺炎(0.66%),其次为化脓性胆管炎(0.33%)[1].治疗性ERCP并发症主要为出血、穿孔和化脓性胆管炎[1].本例为诊断性ERCP,同时发生肺动脉血栓栓塞、胆管穿孔和急性出血坏死性胰腺炎,快速引起呼吸循环衰竭死亡,实为罕见,现报告如下.

    作者:陈圣开;何世举 刊期: 2011年第10期

  • 新生儿肺复张策略联合小潮气量通气治疗急性肺损伤22例报告

    目的:观察采用肺复张策略(Lung recruitment maneuver,LRM)联合小潮气量机械通气治疗新生儿急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的临床有效性及安全性,探索在ALI新生儿中建立合理的机械通气模式的方法.方法:前瞻性观察我院新生儿重症监护室(Neonatal intensive care unit,NICU)收治的22例ALI患儿,诊断标准参照1994年欧美联席会议所制定,给予小潮气量联合复张策略(Recruitment maneuver,RM)的通气方式.实施RM时采用持续肺膨胀(Cst)法,每8h进行1次,共3d.分别在患儿第1次LRM之前和LRM之后的12、24、48、72 h记录RM后的血气指标、呼吸机参数及血流动力学指标,以及使用RM3~5 d后复查胸片,随访患儿的上机时间及预后.结果:治疗后12、24、48、72 h,RM组PaO2、PaO2/FiO2和Cst呈明显上升趋势,且均显著高于治疗前基础组以及同时间点非RM组值;同时,二氧化碳分压(Arterial carbon dioxide tension,PaCO2)和吸气峰压(Peak inspiratory pressure,PIP)则明显下降,均显著低于治疗前基础组以及同时间点非RM组值.RM组复张后各时间点的心率和血压同复张前无明显差异(P>0.05).结论:LRM联合小潮气量机械通气可以改善ALI患儿的氧合功能并提高其肺顺应性.患儿的耐受性良好,具有临床可行性.

    作者:高淑强 刊期: 2011年第10期

  • 维吾尔民族非小细胞肺癌组织中的ERCC1、BRCA1的表达及预后关系的研究

    目的:研究探讨维吾尔民族非小细胞肺癌组织中DNA切除修复交叉互补基因1(Excision repair cross-complementing 1,ERCC1)、乳腺癌易感基因1(Brest cancer susceptibility gene 1,BRCA1)的表达与患者预后及生存的关系.方法:收集2004年1月-2008年12月间的80例维吾尔族NSCLC病灶活检的福尔马林固定标本,采用免疫组化方法检测ERCC1、BRCA1的表达情况,将患者的疗效和生存资料与该指标的表达进行比较.结果:80例患者中,ERCC1染色阳性率为38.6%(31/80),与患者的年龄、性别、病理类型、TNM分期无相关性,与吸烟史及PS评分有关.BRCA1染色阳性率为88.8%(71/80),表达与患者年龄、性别、吸烟史、TNM分期、病理类型均无关,与PS评分有关.ERCC1、BRCA1表达对中位生存用Kaplan-Meier进行单因素生存分析,其差异无统计学意义(P>0.05).ERCC1阴性患者生存期长于阳性,1年生存率有统计学意义(P=0.035),但总生存无差异.结论:ERCC1阴性表达有助于预测维吾尔族患者预后及生存,BRCA1表达暂无统计学意义.本研究可为临床上维吾尔民族非小细胞肺癌患者个体化治疗及判断预后提供参考.

    作者:穆清爽;韩利梅 刊期: 2011年第10期

  • 转录因子ZNF191腺病毒表达载体的构建及鉴定

    目的:构建转录因子ZNF191腺病毒表达载体,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,并将ZNF191亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,酶切及DNA测序鉴定后,将含ZNF191基因的重组穿梭质粒pAdTrack-ZNF 191经PmeⅠ线性化后转化pAdEasy-1感受态细菌.pAdEasy-ZNF191质粒经Pme Ⅰ线性化后转染293T细胞,包装重组腺病毒Ad-ZNF191,并进行PCR鉴定、Western blot检测受感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白的表达.结果:证实pAdTrack-CMV-ZNF191及pAdEasy-ZNF191质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-ZNF191包装成功,腺病毒感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白表达明显提高.结论:成功构建了ZNF191基因重组腺病毒表达载体Ad-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.

    作者:王晓鹏;李梦文;厉建中 刊期: 2011年第10期

  • 不同稀释容积芬太尼鞘内注射对分娩镇痛术中瘙痒的影响

    目的:探讨不同稀释容积芬太尼鞘内注射对分娩镇痛术中瘙痒的影响.方法:100例分娩镇痛产妇随机分成4组,每组25例,均采用腰硬联合麻醉鞘内注入芬太尼20 μg.4组稀释容积分别为1.5、2、2.5、3 ml.分别评估各组产妇瘙痒率、瘙痒程度以及疼痛视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS),并记录产妇感觉减退平面以及呼吸抑制、胎心减慢、恶心呕吐、低血压等不良反应.结果:3 ml组产妇瘙痒率和瘙痒程度低于1.5、2ml2组(P<0.05),较2.5 ml组有减轻趋势.4组产妇VAS评分及不良反应率差异无显著性(P>0.05).结论:增加鞘内注射芬太尼的稀释容积可减轻分娩镇痛术中瘙痒.

    作者:陈伟业;王爱群;张立贤 刊期: 2011年第10期

  • 直肠癌术前三维适形放疗不同剂量的比较研究

    目的:通过比较三维适形放疗(3-dimension conformal radiotherapy,3D-CRT)计划不同处方剂量的剂量学特点,探讨直肠癌术前放疗处方剂量对危及器官的影响.方法:应用PINNACLE3治疗计划系统分别对25例拟行术前放疗的直肠癌患者进行3D-CRT计划设计,比较处方剂量46、50 Gy的靶区剂量学特点以及小肠、膀胱、双侧股骨头等正常组织的受照射剂量及体积.结果:(1)处方剂量46、50 Gy均能很好满足95%等剂量曲线对100%计划靶区(Planning target volume,PTV)体积的完全覆盖,而两者CI、HIGTV、HICTV和HIPTV没有差别.(2)3D-CRT处方剂量50 Gy中小肠和膀胱的V50明显高于46 Gy中的V50;而其他指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:直肠癌术前放疗不同处方剂量对小肠、膀胱接受较高剂量照射的体积影响较大.

    作者:叶序卷;姚兰;贾钰铭;雷开键;胡明宗;肖伟;黄强 刊期: 2011年第10期

  • pshRNA-survivin脂质体的制备及初步稳定性考察

    目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价.方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体;正交设计优选制备处方;考察脂质体的粒径分布、zeta电位;用超滤离心法测定脂质体的包封率;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性.结果:所得优化处方为磷脂与药物比为100∶1,油水比为4∶1,磷脂与胆固醇之比为1.5∶1,旋转蒸发温度为37℃;以优化处方制得的脂质体平均粒径为123.4 nm,zeta电位为(-8.42±0.88)mV,平均包封率达77.9%.结论:选用逆相蒸发法优化pshRNA-survivin脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好.

    作者:李耀威;孙江川;常淑芳;张勇;陈佳;王志刚 刊期: 2011年第10期

  • 不同剂量小檗碱对大鼠梗死后心肌组织的保护作用

    目的:对心肌梗死后大鼠灌胃不同剂量小檗碱,探讨小檗碱对大鼠梗死后心肌组织的保护作用和对梗死后心功能的影响.方法:开胸结扎冠脉方法制作大鼠心梗模型,模型建立成功后持续灌胃5d,每天灌胃1次,末次灌胃后测量相关心功能参数,随后处死大鼠做心肌形态学和血清酶学分析.结果:小檗碱可以改善梗死后心脏的心功能,减小心肌缺血范围和梗死范围,减少心肌乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)的释放.不同剂量小檗碱的心肌保护作用有所差异.结论:小檗碱对大鼠梗死后心肌组织有明显保护作用,能明显改善心功能,且其这种作用随剂量的不同有统计学差异.

    作者:丁世豪;李真真;王石雄;卢俊阳;高秉仁 刊期: 2011年第10期

  • Id1与肿瘤侵袭

    分化抑制因子-1(Inhibitor of differentiation-1,Id1),属于螺旋-环-螺旋(Helix-loop-helix,HLH)蛋白,初研究发现在正常细胞发育过程中Id1能抑制细胞的分化,近年来发现Id1还参与到细胞周期的调控过程中,促进细胞增殖.Id1不仅影响正常细胞的发育生长,在许多肿瘤中也出现高表达.Id1能影响细胞外基质的降解及肿瘤血管的生成,与肿瘤的侵袭密切相关.本文主要探讨Id1在肿瘤侵袭中的作用及其可能的分子机制.

    作者:谯波;罗小辑;蒋电明 刊期: 2011年第10期

  • 骨形态发生蛋白2联合热化疗对人结肠癌细胞SW480的增殖抑制作用及机制

    目的:探讨骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、热化疗单独和联合应用对人结肠癌细胞SW480株增殖凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:BMP-2(25、50、100、200、400μg/L)作用于SW480细胞株,MTT法检测其细胞活力.BMP-2、五氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)单独与联合作用于SW480细胞株,流式细胞(Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率,Western blot检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PTEN mRNA表达.结果:BMP-2可以抑制SW480细胞的增殖.与单独作用比较,BMP-2联合热化疗作用于SW480细胞株时,其凋亡率明显增高(P<0.05).BMP-2能够提高PTEN蛋白的表达水平,但是不能提高PTEN mRNA的表达水平.结论:BMP-2可以提高热化疗的敏感性.BMP-2与热化疗联合作用有协同诱导SW480细胞株凋亡的作用,其机制可能与上调PTEN蛋白表达及阻止PTEN蛋白降解有关.

    作者:龙腾;王亚旭;晏佳;刘小虎;刘娜娜 刊期: 2011年第10期

  • 艾滋病暴露前用药优先干预人群筛选研究

    目的:筛选艾滋病暴露前用药(Preexposure prophylaxis,PrEP)扩大规模临床试验的适宜高危人群.方法:采用Topsis 法对高危人群的9个指标基于PrEP必要性和可行性两个层面进行评估.结果:男性性行为者为佳目标人群,艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染者配偶次之,女性性工作者为较不适宜人群.结论:评价结果符合实际情况,选择的评价指标代表性较好,结果可靠.

    作者:贾元元;钟晓妮;张燕;彭斌;黄文祥;梁浩;邹云锋;戴江红;罗锦昆;彭鸿斌;刘倩萍;宋本莉;黄爱龙 刊期: 2011年第10期

  • 透明质酸介导的细胞游走受体在胆管癌侵袭和转移中的作用

    目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(Receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)在胆管癌侵袭和转移中的作用.方法:收集临床上行胆管癌手术的患者的组织标本及正常胆管组织标本,根据分化程度将胆管腺癌组织标本分为高、中、低分化3组;按TNM分期标准将所有组织标本分为对照组、胆管癌组以及胆管癌伴转移组.免疫组织化学(SP)法测定RHAMM平均光密度值.RT-PCR及Western blot法检测RHAMM mRNA和蛋白的表达水平.结果:免疫组织化学检测在不同分化程度的胆管腺癌中RHAMM均有不同程度的表达(P>0.05);RHAMM在胆管癌伴转移组阳性率高,在对照组表达阳性率低.RT-PCR和Western blot检测RHAMM mRNA和蛋白表达水平在对照组和胆管癌组差异无统计学意义(P>0.05).在胆管癌伴转移组明显高于对照组和胆管癌组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:RHAMM的表达程度与胆管腺癌的分化程度无关,但在胆管癌伴转移组中的高表达可能与胆管癌的侵袭相关,并终促进了胆管癌的转移.

    作者:陈波;赖星;罗玉政;廖汪洋;刘长安 刊期: 2011年第10期

  • 高强度聚焦超声对20例恶性实体肿瘤患儿体液免疫的影响

    目的:观察高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)对恶性实体肿瘤患儿体液免疫的影响.方法:采用HIFU治疗系统治疗儿童恶性实体肿瘤20例.分别在治疗前和后1周、1月抽取患儿外周血,用速率散射比浊法检测IgG、IgA、IgM、C3及C4表达量的变化.结果:IgG与C3的表达量在HIFU治疗前和后1周、1月分别依次为(9.08±1.49、9.02±1.54、10.38±1.72) g/L与(1.15±0.27、1.12±0.22、1.33±0.23) g/L.与治疗前比较,HIFU后1月恶性实体肿瘤患儿外周血IgG和C3表达量显著增加(P=0.015和P=0.027);HIFU后1周、1月患儿IgA、IgM和C4表达量均无统计学意义(P>0.05).结论:HIFU治疗可能对儿童恶性实体肿瘤患儿体液免疫有增强作用.

    作者:敖玉;王珊;朱辉;王智彪;孔祥如;章均 刊期: 2011年第10期

  • 前列腺电切术中防治电切综合征的临床体会(附318例病例报告)

    目的:探讨前列腺电切术(Transurethral resection of prostate,TURP)中术后前列腺电切综合征(Transurethral resection syndrome,TURS)的防治.方法:对318例前列腺增生患者TURP手术时间、术中是否发生包膜穿孔、是否使用利尿剂和诊治情况进行回顾性分析.结果:19例发生包膜穿孔的患者中有14例发生TURS(73.7%);16例手术时间超过90 min的患者中有9例发生TURS(56.3%);对36例手术时间超过60 min的患者,23例预防性使用利尿剂后TURS发生率为23.1%; 13例未预防性使用利尿剂TURS发生率为38.4%.包膜穿孔和手术时间过长可显著提高TURS的发生率(P<0.05);对超过60 min的患者预防性应用利尿剂可以显著降低TURS发生率(P<0.05).结论:尽量避免包膜穿孔和手术时间过长是预防TURS的有效手段,对于手术时间过长(超过60min)的患者预防性使用利尿剂可以有效降低TURS的发生率.

    作者:廖肇州;郑剑;袁野;杨凡 刊期: 2011年第10期

重庆医科大学学报杂志

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