谯波;罗小辑;蒋电明
目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(Receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)在胆管癌侵袭和转移中的作用.方法:收集临床上行胆管癌手术的患者的组织标本及正常胆管组织标本,根据分化程度将胆管腺癌组织标本分为高、中、低分化3组;按TNM分期标准将所有组织标本分为对照组、胆管癌组以及胆管癌伴转移组.免疫组织化学(SP)法测定RHAMM平均光密度值.RT-PCR及Western blot法检测RHAMM mRNA和蛋白的表达水平.结果:免疫组织化学检测在不同分化程度的胆管腺癌中RHAMM均有不同程度的表达(P>0.05);RHAMM在胆管癌伴转移组阳性率高,在对照组表达阳性率低.RT-PCR和Western blot检测RHAMM mRNA和蛋白表达水平在对照组和胆管癌组差异无统计学意义(P>0.05).在胆管癌伴转移组明显高于对照组和胆管癌组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:RHAMM的表达程度与胆管腺癌的分化程度无关,但在胆管癌伴转移组中的高表达可能与胆管癌的侵袭相关,并终促进了胆管癌的转移.
作者:陈波;赖星;罗玉政;廖汪洋;刘长安 刊期: 2011年第10期
目的:提高大鼠胰十二指肠移植模型(Pancreaticoduodenal transplantation,PDT)的制作效率,为胰腺移植的临床和基础研究奠定模型基础.方法:以SD大鼠作为供体,Wistar大鼠作为受体,共行40例大鼠胰腺移植.采用自制套管吻合供体门静脉和受体左肾静脉、供体腹主动脉和受体左肾动脉,术中不需阻断下腔静脉和腹主动脉.结果:40例手术中,供体平均手术时间为(68±4)min,受体平均手术时间(55±4)min,静脉袖套吻合时间(6±1)min,动脉套管吻合时间(5±1)min,术后24h移植物恢复功能,有轻度组织病理学改变,移植成功率达90%.结论:该方法简化了血管吻合的步骤,减少了术后大出血的并发症,大大提高了造模效率.
作者:赵雪云;张力;刘胜春 刊期: 2011年第10期
目的:探讨间歇充气加压泵(Intermittent pneumatic compression,IPC)及序贯加压袜(Graded compression elastic stocking,GCS)对开胸术后深静脉血栓(Deep vein thrombosis,DVT)形成的预防作用.方法:选取有DVT高危险因素的患者120名,分为对照组+3个干预组,分别采用GCS、IPC+GCS、IPC 3种方法进行干预,采用临床观察、彩色多普勒超声以及血栓分子标志物水平D-二聚体(D-D)检测对各组进行研究.结果:3个干预组DVT阳性率均低于对照组,D-二聚体对照组高于联合或者单独应用GCS组和IPC组.结论:IPC及GCS对开胸术后DVT形成有一定预防作用,对降低患者术后死亡率、减少患者住院时间、促进开胸及大手术后患者早日康复有一定的作用.
作者:唐文凤;王显平;魏小妹;叶琳 刊期: 2011年第10期
目的:探讨C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)在髂动脉球囊成形术后再狭窄发生中的作用.方法:构建兔髂动脉粥样硬化模型,将动物分为球囊成形术(Percutaneous transluminal angioplasty,PTA)组和假手术组,观察PTA术后CNP表达变化;将CNP基因转染髂动脉,观察CNP基因过表达对PTA术后再狭窄的影响.结果:PTA术后2、4周RT-PCR、荧光定量RT-PCR、免疫组化、Western blot检测显示CNP表达明显降低;PTA术后8周CNP表达无明显差异.CNP基因过表达组内膜增生程度、内膜/中膜比及血管狭窄率明显降低.结论:CNP表达减少可能是PTA术后再狭窄发生原因之一,增加CNP表达可一定程度预防再狭窄发生.
作者:肖乐;龚昆梅;王昆华;欧阳一鸣;凌平;李临海;龙亚新 刊期: 2011年第10期
目的:了解宁夏城市中老年人群牙体健康状况,为制定防治方案提供基线资料.方法:采用世界卫生组织口腔健康调查方法并参考全国口腔流行病学调查方案,对宁夏地区2 160名城市中老年人的牙体健康状况进行检查,检查项目包括龋病,楔状缺损,残根和磨损情况.应用SPSS12.0统计软件对结果进行分析.结果:(1)宁夏城市35~44岁中年人患龋率为29.17%,龋均为0.49,女性较男性患龋严重,龋齿充填率为57.17%;楔状缺损患病率为45.19%;残根滞留率与重度磨耗率分别为12.87%和46.20%;(2)宁夏城市65~74岁以上老年人患龋率为38.98%,龋均为1.57,龋齿充填率为54.08%;楔状缺损患病率为55.09%,残根滞留率与重度磨耗率分别为40.83%和60.65%,其中女性较男性残根滞留率高.结论:宁夏城市中老年人患龋率较低,楔状缺损,残根滞留和重度磨耗患病率较高,口腔自我保健意识有待于进一步提高,需要加强口腔预防与保健宣传教育.
作者:段志斌;马敏;董文亮;王兵;黄永清;朱琳虹;韩春华 刊期: 2011年第10期
目的:构建人细胞色素P450 2A13(CYP2A13)基因与绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)共表达的慢病毒载体,并转染肺腺癌A549细胞使之持续高表达CYP2A13基因.方法:采用基因重组技术,将CYP2A13基因与GFP连接,构建慢病毒载体.转染293T细胞,包装后产生病毒液,测定其滴度.包装后的病毒感染A549细胞.激光共聚焦显微镜检测GFPCYP2A13融合蛋白在A549细胞中的定位;Real-time PCR和Western blot检测A549细胞中CYP2A13表达情况.结果:成功构建人细胞色素CYP2A13基因与GFP共表达的慢病毒载体,转染293T细胞后,荧光显微镜下可见有大量的绿色荧光.激光共聚焦显微镜观察,感染后的A549细胞的胞核和胞浆中有绿色荧光iReal-time PCR和Western blot检测到A549细胞中CYP2A13的高表达.结论:成功构建了CYP2A13与GFP基因共表达的慢病毒表达载体,为研究CYP2A13基因与呼吸系统肿瘤的关系,提供了稳定的感染细胞的载体.
作者:范晓丽;谭宁;孙莉 刊期: 2011年第10期
目的:对利用抑制消减杂交技术获得的舌鳞癌干细胞相关表达序列标签(Expressed squence tag,EST)进行电子克隆及序列分析.方法:利用互联网上的公共数据库及生物信息学分析软件对获得的舌鳞癌干细胞相关差异表达序列标签进行核酸序列和蛋白质序列分析,探索克隆差异表达基因的研究方法和策略.结果:通过电子延伸得到1个1 705 bp的cDNA序列;核酸序列分析显示,该cDNA定位在1号染色体,含有1个编码146个氨基酸的完整开放阅读框;对氨基酸序列进行结构域预测显示其存在1个与Translin超家族同源的区域;BLAST比对显示该氨基酸序列与Translin相关蛋白X(Translin associated protein X,TRAX)具有较高的同源性.结论:利用生物信息学技术获得了舌鳞癌相关表达序列标签的基本信息,为深入研究该表达序列标签的功能奠定基础.
作者:邹波;季平;孙守娟;漆小娟 刊期: 2011年第10期
目的:探讨大鼠硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1在巯基部分氧化的状态下对某些羟基多氯联苯(Hydroxylated polychlorinated biphenyls,OH-PCBs)的特异性及酶促动力学的影响.方法:大鼠肝胞液作为大鼠SULT的天然来源,大鼠SULT1A1则从重组表达的大肠杆菌分离纯化;硫酸基结合速率以辅酶转化产物3’,5’-二磷酸腺苷的形成来测定;酶蛋白巯基氧化还原状态以氧化型/还原型谷胱甘肽(Oxidized/reduced glutathione,GSSG/GSH)对酶预处理来获得.结果:6’-OH PCB 35、4’-OH PCB 9及4’-OH PCB 12均可在大鼠肝胞液作用下形成硫酸基结合产物;4’-OH PCB 9和2-萘酚在用GSSG预处理的大鼠SULT1A1作用下的硫酸基结合速率降低而底物抑制消除;4’-OH PCB 6在该酶经GSSG预处理后由抑制剂转变为底物,且反应速率随预处理时GSH/GSSG中GSSG的比例增高而增高;4-OH PCB 14则仅在该酶经GSSG预处理后由抑制剂变为底物.结论:大鼠SULT1A1在巯基氧化后可降低OH-PCBs等底物的大反应速度(Maximal velocity,Vmax),同时消除底物抑制;酶的巯基氧化状态使某些作为抑制剂的OH-PCBs转变为底物,其反应速率与GSSG/GSH相对量有关.
作者:刘云岗;姜浩 刊期: 2011年第10期
分化抑制因子-1(Inhibitor of differentiation-1,Id1),属于螺旋-环-螺旋(Helix-loop-helix,HLH)蛋白,初研究发现在正常细胞发育过程中Id1能抑制细胞的分化,近年来发现Id1还参与到细胞周期的调控过程中,促进细胞增殖.Id1不仅影响正常细胞的发育生长,在许多肿瘤中也出现高表达.Id1能影响细胞外基质的降解及肿瘤血管的生成,与肿瘤的侵袭密切相关.本文主要探讨Id1在肿瘤侵袭中的作用及其可能的分子机制.
作者:谯波;罗小辑;蒋电明 刊期: 2011年第10期
目的:评价低糖高脂肪营养支持治疗慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)并发呼吸衰竭患者的临床疗效.方法:将60例COPD并发呼吸衰竭患者随机分成2组:研究组30例,对照组30例.2组均予抗感染、吸氧、解痉平喘、化痰、纠正酸碱失衡及电解质紊乱等治疗.研究组予低糖高脂肪营养支持,对照组予传统营养支持,疗程10 d.在研究前1d、研究后10 d分别对2组患者进行血气分析指标、呼吸功能状况测定.结果:研究组在血气分析指标、呼吸功能状况方面改善情况均较对照组有显著性差异(P<0.05).结论:低糖高脂肪营养支持治疗可明显改善COPD并发呼吸衰竭患者的症状和体征,明显改善人体血气分析和肺功能,对纠正呼吸衰竭有良好疗效.
作者:夏艳;王宏星;邵少英 刊期: 2011年第10期
目的:评价心脏再同步化治疗(伴或不伴除颤功能)在降低心力衰竭患者的死亡率方面的作用.方法:查阅已公开发表的有关心脏再同步化治疗心力衰竭的临床随机对照试验文献,以死亡率为主要评价指标,用Cochrane协作网的软件RevMan5.1进行Meta分析.结果:本次分析终纳入文献12篇(n=7 539).与单纯药物治疗组相比,心脏再同步化治疗(Cardiac resynchronization therapy,CRT)加药物治疗组的死亡率明显降低(RR 0.73,95%CI 0.62-0.85);而与埋藏式除颤器(Implantable cardioverter defibrillator,ICD)治疗组相比,带除颤功能的心脏再同步化治疗组(CRT-D)死亡率亦显著降低(RR 0.83,95%CI 0.72-0.96).在心功能Ⅰ、Ⅱ级(NYHA)的心力衰竭患者中,上述结果十分明显(RR 0.81,95%CI 0.67-0.97);但在心功能Ⅲ、Ⅳ级的患者中则不然(RR 0.86,95%CI 0.69-1.07).结论:药物加心脏再同步化治疗及具备除颤功能的心脏再同步化治疗能显著降低心力衰竭患者的死亡率.
作者:卢庭义;考国营;苏立 刊期: 2011年第10期
目的:研究CXCR4-siRNA重组腺病毒载体对人卵巢癌细胞株SKOV3的CXCR4基因表达的影响.方法:Pac Ⅰ酶切CXCR4-siRNA重组腺病毒载体使其线性化,应用HEK293细胞大量包装扩增病毒,收集病毒液,转染人卵巢癌细胞株SKOV3.细胞分为3组:siRNA组,转染空病毒载体的阴性对照组,细胞不做任何处理的空白对照组.通过PCR、Western blot、免疫组化检测CXCR4基因沉默效果.结果:包装扩增后病毒滴度为6×108 PFU/ml,荧光显微镜下可观察到SKOV3细胞中绿色荧光蛋白的大量表达,重组腺病毒能够有效抑制SKOV3细胞中CXCR4的表达.结论:CXCR4-siRNA重组腺病毒载体可高效转染靶细胞和沉默CXCR4基因的表达,为RNA干扰技术应用于卵巢癌的临床基因治疗奠定基础.
作者:刘瑜;袁瑞 刊期: 2011年第10期
目的:构建转录因子ZNF191腺病毒表达载体,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,并将ZNF191亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,酶切及DNA测序鉴定后,将含ZNF191基因的重组穿梭质粒pAdTrack-ZNF 191经PmeⅠ线性化后转化pAdEasy-1感受态细菌.pAdEasy-ZNF191质粒经Pme Ⅰ线性化后转染293T细胞,包装重组腺病毒Ad-ZNF191,并进行PCR鉴定、Western blot检测受感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白的表达.结果:证实pAdTrack-CMV-ZNF191及pAdEasy-ZNF191质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-ZNF191包装成功,腺病毒感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白表达明显提高.结论:成功构建了ZNF191基因重组腺病毒表达载体Ad-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.
作者:王晓鹏;李梦文;厉建中 刊期: 2011年第10期
目的:研究探讨维吾尔民族非小细胞肺癌组织中DNA切除修复交叉互补基因1(Excision repair cross-complementing 1,ERCC1)、乳腺癌易感基因1(Brest cancer susceptibility gene 1,BRCA1)的表达与患者预后及生存的关系.方法:收集2004年1月-2008年12月间的80例维吾尔族NSCLC病灶活检的福尔马林固定标本,采用免疫组化方法检测ERCC1、BRCA1的表达情况,将患者的疗效和生存资料与该指标的表达进行比较.结果:80例患者中,ERCC1染色阳性率为38.6%(31/80),与患者的年龄、性别、病理类型、TNM分期无相关性,与吸烟史及PS评分有关.BRCA1染色阳性率为88.8%(71/80),表达与患者年龄、性别、吸烟史、TNM分期、病理类型均无关,与PS评分有关.ERCC1、BRCA1表达对中位生存用Kaplan-Meier进行单因素生存分析,其差异无统计学意义(P>0.05).ERCC1阴性患者生存期长于阳性,1年生存率有统计学意义(P=0.035),但总生存无差异.结论:ERCC1阴性表达有助于预测维吾尔族患者预后及生存,BRCA1表达暂无统计学意义.本研究可为临床上维吾尔民族非小细胞肺癌患者个体化治疗及判断预后提供参考.
作者:穆清爽;韩利梅 刊期: 2011年第10期
目的:通过比较三维适形放疗(3-dimension conformal radiotherapy,3D-CRT)计划不同处方剂量的剂量学特点,探讨直肠癌术前放疗处方剂量对危及器官的影响.方法:应用PINNACLE3治疗计划系统分别对25例拟行术前放疗的直肠癌患者进行3D-CRT计划设计,比较处方剂量46、50 Gy的靶区剂量学特点以及小肠、膀胱、双侧股骨头等正常组织的受照射剂量及体积.结果:(1)处方剂量46、50 Gy均能很好满足95%等剂量曲线对100%计划靶区(Planning target volume,PTV)体积的完全覆盖,而两者CI、HIGTV、HICTV和HIPTV没有差别.(2)3D-CRT处方剂量50 Gy中小肠和膀胱的V50明显高于46 Gy中的V50;而其他指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:直肠癌术前放疗不同处方剂量对小肠、膀胱接受较高剂量照射的体积影响较大.
作者:叶序卷;姚兰;贾钰铭;雷开键;胡明宗;肖伟;黄强 刊期: 2011年第10期
目的:观察高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)对恶性实体肿瘤患儿体液免疫的影响.方法:采用HIFU治疗系统治疗儿童恶性实体肿瘤20例.分别在治疗前和后1周、1月抽取患儿外周血,用速率散射比浊法检测IgG、IgA、IgM、C3及C4表达量的变化.结果:IgG与C3的表达量在HIFU治疗前和后1周、1月分别依次为(9.08±1.49、9.02±1.54、10.38±1.72) g/L与(1.15±0.27、1.12±0.22、1.33±0.23) g/L.与治疗前比较,HIFU后1月恶性实体肿瘤患儿外周血IgG和C3表达量显著增加(P=0.015和P=0.027);HIFU后1周、1月患儿IgA、IgM和C4表达量均无统计学意义(P>0.05).结论:HIFU治疗可能对儿童恶性实体肿瘤患儿体液免疫有增强作用.
作者:敖玉;王珊;朱辉;王智彪;孔祥如;章均 刊期: 2011年第10期
目的:探讨应用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉,在青少年特发性脊柱侧弯(Adolescent idiopathic scoliosis,AIS)矫形手术中的实用性和安全性.方法:采用21例AIS,在手术矫形过程中,胸椎椎弓根螺钉的置入均采用“漏斗技术”,记录置入操作和术后并发症;对术中确信度不高的胸椎椎弓根置钉行三维C臂(3D-C-arm)断层扫描,观察螺钉在椎弓根的位置,记录穿出骨皮质螺钉的数目及距离;术后早期均行X线摄片判断置入螺钉位置.结果:采用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉268枚,术中三维C臂断层扫描确信度不高的39枚螺钉,无1枚穿透椎弓根内、外侧壁;3枚螺钉(7.69%)穿透椎体前壁,穿透距离<3mm.所有病例术后行X线摄片,观察发现椎弓根钉位置良好;术中及术后未出现血管、神经、脑脊液漏等并发症.结论:在AIS矫正术中,应用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉的方法是实用的、安全的.
作者:刘显宏;欧云生;权正学;蒋电明;唐可;罗小辑 刊期: 2011年第10期
目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价.方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体;正交设计优选制备处方;考察脂质体的粒径分布、zeta电位;用超滤离心法测定脂质体的包封率;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性.结果:所得优化处方为磷脂与药物比为100∶1,油水比为4∶1,磷脂与胆固醇之比为1.5∶1,旋转蒸发温度为37℃;以优化处方制得的脂质体平均粒径为123.4 nm,zeta电位为(-8.42±0.88)mV,平均包封率达77.9%.结论:选用逆相蒸发法优化pshRNA-survivin脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好.
作者:李耀威;孙江川;常淑芳;张勇;陈佳;王志刚 刊期: 2011年第10期
目的:研究多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者与正常对照组血液和卵巢组织中血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其可溶性受体1(Soluble vascular endothelial growth factor receptor 1,sFlt-1)表达水平,探讨其对PCOS发生和发展的影响.方法:应用酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定46例PCOS患者及25例对照者血清中VEGF、sFlt-1浓度.应用免疫组化SP法检测9例PCOS患者及7例对照患者卵巢组织VEGF、sFlt-1的表达.结果:(1)在血清中,PCOS组的VEGF、sFlt-1浓度中位数分别49.18 pg/ml、49.25 ng/L,对照组分别为34.45 pg/ml、389.37 ng/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).(2)在卵巢组织中,PCOS组的VEGF、sFlt-1灰度值表达分别为0.24±0.03、0.17±0.04,对照组为0.18±0.02、0.26±0.05,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).(3)在血清和卵巢组织中,VEGF生物利用度(VEGF/sFlt-1)均高于对照组,差异有统计学意义.(4)在血清中研究VEGF与sFlt-1相关性,两者为负性相关关系(rs=-0.435,P<0.05).结论:血清和卵巢组织中sFlt-1表达下降,可能引起了VEGF表达的增加,共同参与PCOS卵巢血管的形成,从而促进PCOS的发生和发展.
作者:张家佳;赵纯全 刊期: 2011年第10期
目的:研究共刺激分子程序性死亡配体1 (Programmed death ligand 1,PD-L1)、程序性死亡配体2(Programmed death ligand 2,PD-L2)和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学PV -6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN(CINⅡ~Ⅲ级)和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性.结果:正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2;CINⅡ~Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70%(47/67)、51%(34/67)和46%(31/67).统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关(P<0.01),与年龄、组织学类型无关;PD -L2的表达与肿瘤的淋巴结转移(P<0.05)有关;B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移(P<o.05)和局部血管内瘤栓形成(P<0.05)相关.结论:人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关.PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点.
作者:耿卫朴;徐曼;王渝琦;徐光旭;陈瑜;王婷婷;黄文炼;赵涌 刊期: 2011年第10期