刘瑜;袁瑞
目的:探讨C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)在髂动脉球囊成形术后再狭窄发生中的作用.方法:构建兔髂动脉粥样硬化模型,将动物分为球囊成形术(Percutaneous transluminal angioplasty,PTA)组和假手术组,观察PTA术后CNP表达变化;将CNP基因转染髂动脉,观察CNP基因过表达对PTA术后再狭窄的影响.结果:PTA术后2、4周RT-PCR、荧光定量RT-PCR、免疫组化、Western blot检测显示CNP表达明显降低;PTA术后8周CNP表达无明显差异.CNP基因过表达组内膜增生程度、内膜/中膜比及血管狭窄率明显降低.结论:CNP表达减少可能是PTA术后再狭窄发生原因之一,增加CNP表达可一定程度预防再狭窄发生.
作者:肖乐;龚昆梅;王昆华;欧阳一鸣;凌平;李临海;龙亚新 刊期: 2011年第10期
目的:评价低糖高脂肪营养支持治疗慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)并发呼吸衰竭患者的临床疗效.方法:将60例COPD并发呼吸衰竭患者随机分成2组:研究组30例,对照组30例.2组均予抗感染、吸氧、解痉平喘、化痰、纠正酸碱失衡及电解质紊乱等治疗.研究组予低糖高脂肪营养支持,对照组予传统营养支持,疗程10 d.在研究前1d、研究后10 d分别对2组患者进行血气分析指标、呼吸功能状况测定.结果:研究组在血气分析指标、呼吸功能状况方面改善情况均较对照组有显著性差异(P<0.05).结论:低糖高脂肪营养支持治疗可明显改善COPD并发呼吸衰竭患者的症状和体征,明显改善人体血气分析和肺功能,对纠正呼吸衰竭有良好疗效.
作者:夏艳;王宏星;邵少英 刊期: 2011年第10期
目的:探讨不同稀释容积芬太尼鞘内注射对分娩镇痛术中瘙痒的影响.方法:100例分娩镇痛产妇随机分成4组,每组25例,均采用腰硬联合麻醉鞘内注入芬太尼20 μg.4组稀释容积分别为1.5、2、2.5、3 ml.分别评估各组产妇瘙痒率、瘙痒程度以及疼痛视觉模拟评分(Visual analogue scale,VAS),并记录产妇感觉减退平面以及呼吸抑制、胎心减慢、恶心呕吐、低血压等不良反应.结果:3 ml组产妇瘙痒率和瘙痒程度低于1.5、2ml2组(P<0.05),较2.5 ml组有减轻趋势.4组产妇VAS评分及不良反应率差异无显著性(P>0.05).结论:增加鞘内注射芬太尼的稀释容积可减轻分娩镇痛术中瘙痒.
作者:陈伟业;王爱群;张立贤 刊期: 2011年第10期
目的:研究CXCR4-siRNA重组腺病毒载体对人卵巢癌细胞株SKOV3的CXCR4基因表达的影响.方法:Pac Ⅰ酶切CXCR4-siRNA重组腺病毒载体使其线性化,应用HEK293细胞大量包装扩增病毒,收集病毒液,转染人卵巢癌细胞株SKOV3.细胞分为3组:siRNA组,转染空病毒载体的阴性对照组,细胞不做任何处理的空白对照组.通过PCR、Western blot、免疫组化检测CXCR4基因沉默效果.结果:包装扩增后病毒滴度为6×108 PFU/ml,荧光显微镜下可观察到SKOV3细胞中绿色荧光蛋白的大量表达,重组腺病毒能够有效抑制SKOV3细胞中CXCR4的表达.结论:CXCR4-siRNA重组腺病毒载体可高效转染靶细胞和沉默CXCR4基因的表达,为RNA干扰技术应用于卵巢癌的临床基因治疗奠定基础.
作者:刘瑜;袁瑞 刊期: 2011年第10期
目的:研究共刺激分子程序性死亡配体1 (Programmed death ligand 1,PD-L1)、程序性死亡配体2(Programmed death ligand 2,PD-L2)和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学PV -6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN(CINⅡ~Ⅲ级)和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性.结果:正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2;CINⅡ~Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70%(47/67)、51%(34/67)和46%(31/67).统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关(P<0.01),与年龄、组织学类型无关;PD -L2的表达与肿瘤的淋巴结转移(P<0.05)有关;B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移(P<o.05)和局部血管内瘤栓形成(P<0.05)相关.结论:人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关.PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点.
作者:耿卫朴;徐曼;王渝琦;徐光旭;陈瑜;王婷婷;黄文炼;赵涌 刊期: 2011年第10期
目的:构建人细胞色素P450 2A13(CYP2A13)基因与绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)共表达的慢病毒载体,并转染肺腺癌A549细胞使之持续高表达CYP2A13基因.方法:采用基因重组技术,将CYP2A13基因与GFP连接,构建慢病毒载体.转染293T细胞,包装后产生病毒液,测定其滴度.包装后的病毒感染A549细胞.激光共聚焦显微镜检测GFPCYP2A13融合蛋白在A549细胞中的定位;Real-time PCR和Western blot检测A549细胞中CYP2A13表达情况.结果:成功构建人细胞色素CYP2A13基因与GFP共表达的慢病毒载体,转染293T细胞后,荧光显微镜下可见有大量的绿色荧光.激光共聚焦显微镜观察,感染后的A549细胞的胞核和胞浆中有绿色荧光iReal-time PCR和Western blot检测到A549细胞中CYP2A13的高表达.结论:成功构建了CYP2A13与GFP基因共表达的慢病毒表达载体,为研究CYP2A13基因与呼吸系统肿瘤的关系,提供了稳定的感染细胞的载体.
作者:范晓丽;谭宁;孙莉 刊期: 2011年第10期
目的:评价在腮腺肿瘤切除术中两种保留面部表浅肌肉腱膜系统(Superficial musculoaponeurotic system,SMAS)术式对味觉出汗综合征的预防效果和对腮腺肿瘤术后复发的影响.方法:125例良性腮腺肿瘤患者随机分为3组.Ⅰ组(游离保留SMAS法)39例,Ⅱ组(非游离保留SMAS法)46例,Ⅲ组(按传统手术方法未保留SMAS)40例.术后6~12个月,所有患者均通过调查问卷形式和碘-淀粉试验对味觉出汗综合征分别进行主观评价和客观评价.所有患者均完成了术后2~3年对肿瘤复发情况的随访.结果:Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组味觉出汗综合征的主观评价发生率分别为5.1%(2/39)、26.1%(12/46)和55.0%(22/40) (P<0.05);客观评价发生率分别为10.3%(4/39)、37.0%(17/46)和72.5%(29/40)(P<0.05).术后经2~3年的随访,3组患者共125例均无复发病例.结论:保留SMAS是预防腮腺肿瘤术后发生味觉出汗综合征的有效方法,但游离保留SMAS法疗效更佳.保留SMAS不会增加良性腮腺肿瘤的复发.
作者:喻秀丽;杨凯;张福军;吕晓强 刊期: 2011年第10期
目的:研究探讨维吾尔民族非小细胞肺癌组织中DNA切除修复交叉互补基因1(Excision repair cross-complementing 1,ERCC1)、乳腺癌易感基因1(Brest cancer susceptibility gene 1,BRCA1)的表达与患者预后及生存的关系.方法:收集2004年1月-2008年12月间的80例维吾尔族NSCLC病灶活检的福尔马林固定标本,采用免疫组化方法检测ERCC1、BRCA1的表达情况,将患者的疗效和生存资料与该指标的表达进行比较.结果:80例患者中,ERCC1染色阳性率为38.6%(31/80),与患者的年龄、性别、病理类型、TNM分期无相关性,与吸烟史及PS评分有关.BRCA1染色阳性率为88.8%(71/80),表达与患者年龄、性别、吸烟史、TNM分期、病理类型均无关,与PS评分有关.ERCC1、BRCA1表达对中位生存用Kaplan-Meier进行单因素生存分析,其差异无统计学意义(P>0.05).ERCC1阴性患者生存期长于阳性,1年生存率有统计学意义(P=0.035),但总生存无差异.结论:ERCC1阴性表达有助于预测维吾尔族患者预后及生存,BRCA1表达暂无统计学意义.本研究可为临床上维吾尔民族非小细胞肺癌患者个体化治疗及判断预后提供参考.
作者:穆清爽;韩利梅 刊期: 2011年第10期
目的:通过比较三维适形放疗(3-dimension conformal radiotherapy,3D-CRT)计划不同处方剂量的剂量学特点,探讨直肠癌术前放疗处方剂量对危及器官的影响.方法:应用PINNACLE3治疗计划系统分别对25例拟行术前放疗的直肠癌患者进行3D-CRT计划设计,比较处方剂量46、50 Gy的靶区剂量学特点以及小肠、膀胱、双侧股骨头等正常组织的受照射剂量及体积.结果:(1)处方剂量46、50 Gy均能很好满足95%等剂量曲线对100%计划靶区(Planning target volume,PTV)体积的完全覆盖,而两者CI、HIGTV、HICTV和HIPTV没有差别.(2)3D-CRT处方剂量50 Gy中小肠和膀胱的V50明显高于46 Gy中的V50;而其他指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:直肠癌术前放疗不同处方剂量对小肠、膀胱接受较高剂量照射的体积影响较大.
作者:叶序卷;姚兰;贾钰铭;雷开键;胡明宗;肖伟;黄强 刊期: 2011年第10期
目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(Receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)在胆管癌侵袭和转移中的作用.方法:收集临床上行胆管癌手术的患者的组织标本及正常胆管组织标本,根据分化程度将胆管腺癌组织标本分为高、中、低分化3组;按TNM分期标准将所有组织标本分为对照组、胆管癌组以及胆管癌伴转移组.免疫组织化学(SP)法测定RHAMM平均光密度值.RT-PCR及Western blot法检测RHAMM mRNA和蛋白的表达水平.结果:免疫组织化学检测在不同分化程度的胆管腺癌中RHAMM均有不同程度的表达(P>0.05);RHAMM在胆管癌伴转移组阳性率高,在对照组表达阳性率低.RT-PCR和Western blot检测RHAMM mRNA和蛋白表达水平在对照组和胆管癌组差异无统计学意义(P>0.05).在胆管癌伴转移组明显高于对照组和胆管癌组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:RHAMM的表达程度与胆管腺癌的分化程度无关,但在胆管癌伴转移组中的高表达可能与胆管癌的侵袭相关,并终促进了胆管癌的转移.
作者:陈波;赖星;罗玉政;廖汪洋;刘长安 刊期: 2011年第10期
目的:观测不同葡萄糖耐量的非肥胖人群血浆网膜素-1 (Omentin-1)水平,研究吡格列酮和短期持续皮下胰岛素输注,又称胰岛素泵(Continuous subcutaneous insulin infusion,CSII)强化治疗对2型糖尿病患者血浆omentin-1水平的影响.方法:59例非肥胖的初发2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者据血糖水平分别接受吡格列酮治疗12周(P组,27例)和CSII强化治疗2周(CSII组,32例);用酶免法测定血浆omentin-l水平及相关代谢指标.结果:非肥胖T2DM患者空腹血浆omentin-1水平降低,以CSII组降低更为显著[(26.13±6.20)vs(22.01±7.51) vs( 17.58±8.81) μg/L,P<0.05].吡格列酮和CSII强化治疗均能使血浆omentin-1水平升高(22.01±7.51 vs 24.45±7.31) μg/L,(17.58±8.81 vs 22.32±8.69) μg/L,均P<0.05.结论:吡格列酮和CSII强化治疗均能升高血浆omentin-1水平,且血浆omentin-1水平可能与T2DM严重程度(表现为HbA1c)和胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)(表现为HOMA-IR)有关.
作者:阳皓;罗涌;刘维娟;郭莲;徐伟 刊期: 2011年第10期
目的:构建转录因子ZNF191腺病毒表达载体,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,并将ZNF191亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,酶切及DNA测序鉴定后,将含ZNF191基因的重组穿梭质粒pAdTrack-ZNF 191经PmeⅠ线性化后转化pAdEasy-1感受态细菌.pAdEasy-ZNF191质粒经Pme Ⅰ线性化后转染293T细胞,包装重组腺病毒Ad-ZNF191,并进行PCR鉴定、Western blot检测受感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白的表达.结果:证实pAdTrack-CMV-ZNF191及pAdEasy-ZNF191质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-ZNF191包装成功,腺病毒感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白表达明显提高.结论:成功构建了ZNF191基因重组腺病毒表达载体Ad-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.
作者:王晓鹏;李梦文;厉建中 刊期: 2011年第10期
目的:测定谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferases,GST)动力学参数变化,建立表征其抑制剂的方法.方法:从猪肝经阴离子交换层析和亲和层析制备GST酸性同工酶,用还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和1-氯-2,4-二硝基苯(1,-chloro-2,4-dinitrobenzene,CDNB)合成S-(2,4-二硝基苯基)-谷胱甘肽(GS-DNB)为候选抑制剂,以GSH与CDNB为底物测定GST在GS-DNB作用下的米氏常数(Km)和大反应速度(Vm),从而确定GS-DNB对GST的抑制常数(Ki).结果:此GST被纯化146倍以上,活性总收率近30%.该GST对GSH和CDNB的Km分别为42 μmol/L和0.86 mmol/L,属于随机双底物动力学模型.GS-DNB对CDNB竞争性Ki为(21±1)μmol/L (n=2);对GSH竞争性Ki为(17±1)μmol/L (n=2).结论:产物GS-DNB是GST的高亲和力竞争性抑制剂;测定GST动力学参数随抑制剂浓度的变化可筛选其抑制剂.
作者:张灵;杨晓兰;白婧;廖娟;刘红博;廖飞 刊期: 2011年第10期
目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价.方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体;正交设计优选制备处方;考察脂质体的粒径分布、zeta电位;用超滤离心法测定脂质体的包封率;离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性.结果:所得优化处方为磷脂与药物比为100∶1,油水比为4∶1,磷脂与胆固醇之比为1.5∶1,旋转蒸发温度为37℃;以优化处方制得的脂质体平均粒径为123.4 nm,zeta电位为(-8.42±0.88)mV,平均包封率达77.9%.结论:选用逆相蒸发法优化pshRNA-survivin脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好.
作者:李耀威;孙江川;常淑芳;张勇;陈佳;王志刚 刊期: 2011年第10期
目的:探讨外源性硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)对肿瘤坏死因子alpha(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)诱导的角质形成细胞分泌炎症因子白细胞介素6 (Interleukin 6,IL-6)、白细胞介素8(Interleukin 8,IL-8)以及一氧化氮(Nitric oxide,NO)的影响,并探讨核转录因子kappa B(Nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路途径是否参与此过程.方法:应用TNF-α诱导HaCat细胞分泌炎症因子,以硫氢化钠(Sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体,设置不同浓度的量效组.采用ELISA法测定HaCat细胞分泌IL-6和IL-8的水平,RT-PCR法检测HaCat细胞IL-6和IL-8的mRNA水平,Griess法检测HaCat细胞分泌NO水平,Western blot检测HaCat细胞胞内诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、磷酸化I-kappa B-alpha(Phosphorylation of I-kappa B-alpha,p-IKB-α)和胞核内NF-κB P65水平.结果:10 ng/ml的TNF-α能显著诱导HaCat细胞内IL-6和IL-8因子的转录和分泌,培养上清NO产量和胞内iNOS含量明显增高,胞内p-IKB-α和胞核P65水平明显提高.在TNF-α诱导HaCat细胞前1h,给与20~400 μmol/L的NaHS做预处理,结果显示NaHS呈剂量依赖性地抑制HaCat细胞分泌IL-6、IL-8和NO,并能部分抑制NF-κB信号通路的活化.结论:H2S通过抑制NF-κB信号通路的活化来抑制TNF-α诱导角质形成细胞的炎症反应.
作者:Ammar K H Ashorafa;郭庆;曾凡钦;陈敏春;谭国珍;唐增奇;尹若菲 刊期: 2011年第10期
目的:观察高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)对恶性实体肿瘤患儿体液免疫的影响.方法:采用HIFU治疗系统治疗儿童恶性实体肿瘤20例.分别在治疗前和后1周、1月抽取患儿外周血,用速率散射比浊法检测IgG、IgA、IgM、C3及C4表达量的变化.结果:IgG与C3的表达量在HIFU治疗前和后1周、1月分别依次为(9.08±1.49、9.02±1.54、10.38±1.72) g/L与(1.15±0.27、1.12±0.22、1.33±0.23) g/L.与治疗前比较,HIFU后1月恶性实体肿瘤患儿外周血IgG和C3表达量显著增加(P=0.015和P=0.027);HIFU后1周、1月患儿IgA、IgM和C4表达量均无统计学意义(P>0.05).结论:HIFU治疗可能对儿童恶性实体肿瘤患儿体液免疫有增强作用.
作者:敖玉;王珊;朱辉;王智彪;孔祥如;章均 刊期: 2011年第10期
目的:探讨甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(Methylguanine-dna methyltransferase,MGMT)在脑胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞(Brain glioma stem cells,BGSC)中的表达情况.方法:由手术切除的多形性胶质母细胞瘤中分离培养胶质瘤细胞和BGSC;应用免疫细胞化学染色和流式细胞术(Flow cytometry,FCW)鉴定BGSC;应用RT-PCR法测定MGMT mRNA在胶质瘤细胞、BGSC和正常脑组织中的表达.结果:本研究中获得的BGSC具有典型的BGSCs细胞生物学特征和免疫学标记;RT-PCR检测结果表明MGMT mRNA在BGSC中的相对表达量明显高于胶质瘤细胞(0.562±0.021 vs 0.112±0.023,P<0.01),而胶质瘤细胞MGMTmRNA的相对表达量明显高于正常脑组织(0.112+0.023 vs 0.005±0.001,P<0.01).结论:多药耐药基因MGMT主要在BGSC而非胶质瘤细胞中表达,其可能是BGSC产生多药耐药性的主要分子机制之一.
作者:徐忠烨;陈松;程远;王志刚 刊期: 2011年第10期
分化抑制因子-1(Inhibitor of differentiation-1,Id1),属于螺旋-环-螺旋(Helix-loop-helix,HLH)蛋白,初研究发现在正常细胞发育过程中Id1能抑制细胞的分化,近年来发现Id1还参与到细胞周期的调控过程中,促进细胞增殖.Id1不仅影响正常细胞的发育生长,在许多肿瘤中也出现高表达.Id1能影响细胞外基质的降解及肿瘤血管的生成,与肿瘤的侵袭密切相关.本文主要探讨Id1在肿瘤侵袭中的作用及其可能的分子机制.
作者:谯波;罗小辑;蒋电明 刊期: 2011年第10期
目的:探讨应用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉,在青少年特发性脊柱侧弯(Adolescent idiopathic scoliosis,AIS)矫形手术中的实用性和安全性.方法:采用21例AIS,在手术矫形过程中,胸椎椎弓根螺钉的置入均采用“漏斗技术”,记录置入操作和术后并发症;对术中确信度不高的胸椎椎弓根置钉行三维C臂(3D-C-arm)断层扫描,观察螺钉在椎弓根的位置,记录穿出骨皮质螺钉的数目及距离;术后早期均行X线摄片判断置入螺钉位置.结果:采用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉268枚,术中三维C臂断层扫描确信度不高的39枚螺钉,无1枚穿透椎弓根内、外侧壁;3枚螺钉(7.69%)穿透椎体前壁,穿透距离<3mm.所有病例术后行X线摄片,观察发现椎弓根钉位置良好;术中及术后未出现血管、神经、脑脊液漏等并发症.结论:在AIS矫正术中,应用“漏斗技术”置入胸椎椎弓根螺钉的方法是实用的、安全的.
作者:刘显宏;欧云生;权正学;蒋电明;唐可;罗小辑 刊期: 2011年第10期
目的:构建一条绿色、环保且能适合工业化生产抗血吸虫药物吡喹酮的新合成路线.方法:以苯乙胺为原料,用氯乙酰氯酰化,再用邻苯二甲酰亚胺钾氨基化反应,在P2O5作用下经Bischler-Napieralski环合反应制得N-[(1-亚甲基)-3,4-二氢异喹啉]邻苯二甲酰亚胺,经肼解和还原得到1-氨甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐,经环己烷甲酰化、氯乙酰氯酰化和环合得目标化合物.结果:该合成路线的总收率可达32.8%,为原总收率的2.13倍.结论:该合成工艺路线操作简便,原料廉价易得,条件温和,绿色环保,收率较高,具有一定的工业化生产前景.
作者:程训官;郑小红;夏铸;张昕宇;王宇;余瑜 刊期: 2011年第10期