耿卫朴；徐曼；王渝琦；徐光旭；陈瑜；王婷婷；黄文炼；赵涌
目的:探讨甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(Methylguanine-dna methyltransferase,MGMT)在脑胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞(Brain glioma stem cells,BGSC)中的表达情况.方法:由手术切除的多形性胶质母细胞瘤中分离培养胶质瘤细胞和BGSC;应用免疫细胞化学染色和流式细胞术(Flow cytometry,FCW)鉴定BGSC;应用RT-PCR法测定MGMT mRNA在胶质瘤细胞、BGSC和正常脑组织中的表达.结果:本研究中获得的BGSC具有典型的BGSCs细胞生物学特征和免疫学标记；RT-PCR检测结果表明MGMT mRNA在BGSC中的相对表达量明显高于胶质瘤细胞(0.562±0.021 vs 0.112±0.023,P＜0.01),而胶质瘤细胞MGMTmRNA的相对表达量明显高于正常脑组织(0.112+0.023 vs 0.005±0.001,P＜0.01).结论:多药耐药基因MGMT主要在BGSC而非胶质瘤细胞中表达,其可能是BGSC产生多药耐药性的主要分子机制之一.
作者：徐忠烨；陈松；程远；王志刚 刊期： 2011年第10期
目的:探讨外源性硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)对肿瘤坏死因子alpha(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)诱导的角质形成细胞分泌炎症因子白细胞介素6 (Interleukin 6,IL-6)、白细胞介素8(Interleukin 8,IL-8)以及一氧化氮(Nitric oxide,NO)的影响,并探讨核转录因子kappa B(Nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路途径是否参与此过程.方法:应用TNF-α诱导HaCat细胞分泌炎症因子,以硫氢化钠(Sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体,设置不同浓度的量效组.采用ELISA法测定HaCat细胞分泌IL-6和IL-8的水平,RT-PCR法检测HaCat细胞IL-6和IL-8的mRNA水平,Griess法检测HaCat细胞分泌NO水平,Western blot检测HaCat细胞胞内诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、磷酸化I-kappa B-alpha(Phosphorylation of I-kappa B-alpha,p-IKB-α)和胞核内NF-κB P65水平.结果:10 ng/ml的TNF-α能显著诱导HaCat细胞内IL-6和IL-8因子的转录和分泌,培养上清NO产量和胞内iNOS含量明显增高,胞内p-IKB-α和胞核P65水平明显提高.在TNF-α诱导HaCat细胞前1h,给与20～400 μmol/L的NaHS做预处理,结果显示NaHS呈剂量依赖性地抑制HaCat细胞分泌IL-6、IL-8和NO,并能部分抑制NF-κB信号通路的活化.结论:H2S通过抑制NF-κB信号通路的活化来抑制TNF-α诱导角质形成细胞的炎症反应.
作者：Ammar K H Ashorafa；郭庆；曾凡钦；陈敏春；谭国珍；唐增奇；尹若菲 刊期： 2011年第10期
目的:研究中药紫龙金逆转人膀胱癌细胞多药耐药(Multidrug resistance,MDR)机理.方法:应用MTT法检测紫龙金的细胞杀伤作用,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax基因mRNA水平表达.结果:BIU-87/ADM细胞生存率为(98.00±1.48)％,加入紫龙金后(浓度分别为200、500 μg/ml),其细胞生存率分别为(68.14±5.62)％、(52.36±1.87)％,差异显著(P＜0.01)；流式细胞仪检测发现:经200、500 μg/nl的紫龙金处理后,BIU -87/ADM细胞凋亡率[(17.32±2.35)％、(22.76±3.65)％]明显高于对照组(5.86±1.37)％,差异显著(P＜0.01)；RT-PCR结果显示,紫龙金可以下调Bcl-2基因的表达,可使Bax基因表达增强.结论:紫龙金可通过下调Bcl-2基因的表达,增强Bax基因表达诱导人膀胱癌多药耐药细胞凋亡.
作者：王祥卫；张远宁；李杰；方针强；易善红；叶钢 刊期： 2011年第10期
目的:探讨舌鳞癌微环境对小鼠髓源性树突状细胞生长分化的影响.方法:小鼠骨髓前体细胞,在含重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白介素-4培养体系中体外培养.实验组在上述培养液中再加入Tca8113培养上清液模拟肿瘤微环境(Tumor microenvironment,TME)；对照组不加Tca8113培养上清液；镜下观察DCs形态,台酚蓝染色法计活细胞数,流式细胞术检测DCs表型(CD86、CD11c、MHC-Ⅱ)表达.结果进行LSD-t统计学分析.结果:①Tca8113微环境下可诱导出具有典型形态及表型树突状细胞；②低剂量Tca8113培养上清液微环境刺激增强刺激DCs分化成熟,中等剂量Tca8113培养上清液微环境不影响成熟DC (Mature DC,mDCs)分化,但能促进骨髓前体细胞分化为未成熟DC (Immature DC,imDC)；高剂量Tca8113培养上清液微环境抑制DCs分化成熟.结论:Tca8113微环境下可成功诱导骨髓前体细胞分化为树突状细胞;舌鳞癌微环境对树突状细胞分化影响的多样性与环境中免疫因子浓度密切相关.
作者：童熹；李勇；李显；王启明；季平；王涛 刊期： 2011年第10期
目的:评价心脏再同步化治疗(伴或不伴除颤功能)在降低心力衰竭患者的死亡率方面的作用.方法:查阅已公开发表的有关心脏再同步化治疗心力衰竭的临床随机对照试验文献,以死亡率为主要评价指标,用Cochrane协作网的软件RevMan5.1进行Meta分析.结果:本次分析终纳入文献12篇(n=7 539).与单纯药物治疗组相比,心脏再同步化治疗(Cardiac resynchronization therapy,CRT)加药物治疗组的死亡率明显降低(RR 0.73,95％CI 0.62-0.85)；而与埋藏式除颤器(Implantable cardioverter defibrillator,ICD)治疗组相比,带除颤功能的心脏再同步化治疗组(CRT-D)死亡率亦显著降低(RR 0.83,95％CI 0.72-0.96).在心功能Ⅰ、Ⅱ级(NYHA)的心力衰竭患者中,上述结果十分明显(RR 0.81,95％CI 0.67-0.97)；但在心功能Ⅲ、Ⅳ级的患者中则不然(RR 0.86,95％CI 0.69-1.07).结论:药物加心脏再同步化治疗及具备除颤功能的心脏再同步化治疗能显著降低心力衰竭患者的死亡率.
作者：卢庭义；考国营；苏立 刊期： 2011年第10期
目的:探讨间歇充气加压泵(Intermittent pneumatic compression,IPC)及序贯加压袜(Graded compression elastic stocking,GCS)对开胸术后深静脉血栓(Deep vein thrombosis,DVT)形成的预防作用.方法:选取有DVT高危险因素的患者120名,分为对照组+3个干预组,分别采用GCS、IPC+GCS、IPC 3种方法进行干预,采用临床观察、彩色多普勒超声以及血栓分子标志物水平D-二聚体(D-D)检测对各组进行研究.结果:3个干预组DVT阳性率均低于对照组,D-二聚体对照组高于联合或者单独应用GCS组和IPC组.结论:IPC及GCS对开胸术后DVT形成有一定预防作用,对降低患者术后死亡率、减少患者住院时间、促进开胸及大手术后患者早日康复有一定的作用.
作者：唐文凤；王显平；魏小妹；叶琳 刊期： 2011年第10期
目的:研究共刺激分子程序性死亡配体1 (Programmed death ligand 1,PD-L1)、程序性死亡配体2(Programmed death ligand 2,PD-L2)和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学PV -6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN(CINⅡ～Ⅲ级)和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性.结果:正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2；CINⅡ～Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70％(47/67)、51％(34/67)和46％(31/67).统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关(P＜0.01),与年龄、组织学类型无关；PD -L2的表达与肿瘤的淋巴结转移(P＜0.05)有关；B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移(P＜o.05)和局部血管内瘤栓形成(P＜0.05)相关.结论:人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关.PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点.
作者：耿卫朴；徐曼；王渝琦；徐光旭；陈瑜；王婷婷；黄文炼；赵涌 刊期： 2011年第10期
目的:提高大鼠胰十二指肠移植模型(Pancreaticoduodenal transplantation,PDT)的制作效率,为胰腺移植的临床和基础研究奠定模型基础.方法:以SD大鼠作为供体,Wistar大鼠作为受体,共行40例大鼠胰腺移植.采用自制套管吻合供体门静脉和受体左肾静脉、供体腹主动脉和受体左肾动脉,术中不需阻断下腔静脉和腹主动脉.结果:40例手术中,供体平均手术时间为(68±4)min,受体平均手术时间(55±4)min,静脉袖套吻合时间(6±1)min,动脉套管吻合时间(5±1)min,术后24h移植物恢复功能,有轻度组织病理学改变,移植成功率达90％.结论:该方法简化了血管吻合的步骤,减少了术后大出血的并发症,大大提高了造模效率.
作者：赵雪云；张力；刘胜春 刊期： 2011年第10期
目的:探讨骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、热化疗单独和联合应用对人结肠癌细胞SW480株增殖凋亡的影响并探讨其可能机制.方法:BMP-2(25、50、100、200、400μg/L)作用于SW480细胞株,MTT法检测其细胞活力.BMP-2、五氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)单独与联合作用于SW480细胞株,流式细胞(Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率,Western blot检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)蛋白的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PTEN mRNA表达.结果:BMP-2可以抑制SW480细胞的增殖.与单独作用比较,BMP-2联合热化疗作用于SW480细胞株时,其凋亡率明显增高(P＜0.05).BMP-2能够提高PTEN蛋白的表达水平,但是不能提高PTEN mRNA的表达水平.结论:BMP-2可以提高热化疗的敏感性.BMP-2与热化疗联合作用有协同诱导SW480细胞株凋亡的作用,其机制可能与上调PTEN蛋白表达及阻止PTEN蛋白降解有关.
作者：龙腾；王亚旭；晏佳；刘小虎；刘娜娜 刊期： 2011年第10期
目的:构建转录因子ZNF191腺病毒表达载体,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,并将ZNF191亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV中,酶切及DNA测序鉴定后,将含ZNF191基因的重组穿梭质粒pAdTrack-ZNF 191经PmeⅠ线性化后转化pAdEasy-1感受态细菌.pAdEasy-ZNF191质粒经Pme Ⅰ线性化后转染293T细胞,包装重组腺病毒Ad-ZNF191,并进行PCR鉴定、Western blot检测受感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白的表达.结果:证实pAdTrack-CMV-ZNF191及pAdEasy-ZNF191质粒构建正确,收获病毒后PCR及DNA测序结果证明Ad-ZNF191包装成功,腺病毒感染MCF-7细胞内ZNF191蛋白表达明显提高.结论:成功构建了ZNF191基因重组腺病毒表达载体Ad-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能与肿瘤的基因治疗奠定基础.
作者：王晓鹏；李梦文；厉建中 刊期： 2011年第10期
目的:探讨大鼠硫酸基转移酶(Sulfotransferase,SULT)1A1在巯基部分氧化的状态下对某些羟基多氯联苯(Hydroxylated polychlorinated biphenyls,OH-PCBs)的特异性及酶促动力学的影响.方法:大鼠肝胞液作为大鼠SULT的天然来源,大鼠SULT1A1则从重组表达的大肠杆菌分离纯化;硫酸基结合速率以辅酶转化产物3’,5’-二磷酸腺苷的形成来测定；酶蛋白巯基氧化还原状态以氧化型/还原型谷胱甘肽(Oxidized/reduced glutathione,GSSG/GSH)对酶预处理来获得.结果:6’-OH PCB 35、4’-OH PCB 9及4’-OH PCB 12均可在大鼠肝胞液作用下形成硫酸基结合产物；4’-OH PCB 9和2-萘酚在用GSSG预处理的大鼠SULT1A1作用下的硫酸基结合速率降低而底物抑制消除;4’-OH PCB 6在该酶经GSSG预处理后由抑制剂转变为底物,且反应速率随预处理时GSH/GSSG中GSSG的比例增高而增高;4-OH PCB 14则仅在该酶经GSSG预处理后由抑制剂变为底物.结论:大鼠SULT1A1在巯基氧化后可降低OH-PCBs等底物的大反应速度(Maximal velocity,Vmax),同时消除底物抑制;酶的巯基氧化状态使某些作为抑制剂的OH-PCBs转变为底物,其反应速率与GSSG/GSH相对量有关.
作者：刘云岗；姜浩 刊期： 2011年第10期
目的:通过比较三维适形放疗(3-dimension conformal radiotherapy,3D-CRT)计划不同处方剂量的剂量学特点,探讨直肠癌术前放疗处方剂量对危及器官的影响.方法:应用PINNACLE3治疗计划系统分别对25例拟行术前放疗的直肠癌患者进行3D-CRT计划设计,比较处方剂量46、50 Gy的靶区剂量学特点以及小肠、膀胱、双侧股骨头等正常组织的受照射剂量及体积.结果:(1)处方剂量46、50 Gy均能很好满足95％等剂量曲线对100％计划靶区(Planning target volume,PTV)体积的完全覆盖,而两者CI、HIGTV、HICTV和HIPTV没有差别.(2)3D-CRT处方剂量50 Gy中小肠和膀胱的V50明显高于46 Gy中的V50；而其他指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论:直肠癌术前放疗不同处方剂量对小肠、膀胱接受较高剂量照射的体积影响较大.
作者：叶序卷；姚兰；贾钰铭；雷开键；胡明宗；肖伟；黄强 刊期： 2011年第10期
目的:筛选艾滋病暴露前用药(Preexposure prophylaxis,PrEP)扩大规模临床试验的适宜高危人群.方法:采用Topsis 法对高危人群的9个指标基于PrEP必要性和可行性两个层面进行评估.结果:男性性行为者为佳目标人群,艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)感染者配偶次之,女性性工作者为较不适宜人群.结论:评价结果符合实际情况,选择的评价指标代表性较好,结果可靠.
作者：贾元元；钟晓妮；张燕；彭斌；黄文祥；梁浩；邹云锋；戴江红；罗锦昆；彭鸿斌；刘倩萍；宋本莉；黄爱龙 刊期： 2011年第10期
1 病例资料患者陈某,男性,28岁,因“上腹部疼痛1周,复发加重15 h”于2010年11月26日3时急诊入院.入院前1周,患者无明显诱因出现上腹部持续性隐痛,伴恶心、呕吐,无畏寒、发热,无返酸、嗳气,无黄疸及厌食.社区医院按“急性胃炎”治疗后,患者腹痛有所缓解.15 h前,患者上腹部疼痛复发加重.体格检查:生命体征平稳.中上腹及右下腹压痛,无反跳痛及肌紧张,未扪及包块,Murphy's征(-),Rovsing征可疑阳性;叩诊鼓音,移动性浊音(-),肠鸣音约5次/min.
作者：黄镇；王子卫；张能；查郎 刊期： 2011年第10期
1 临床资料患者男性,37岁,因“发热17d,咳嗽、咯痰伴呼吸困难9d”入院.入院前17d患者因受凉后出现畏寒、发热,测体温37.8℃～38.8℃,无咳嗽、气促、咯血,院外予头孢曲松钠抗炎治疗无效.入院前9d开始出现咳嗽,咳大量黄绿色脓痰,伴呼吸困难,作胸片示“肺炎”,予氨苄西林钠、左氧氟沙星抗感染5d无效,换为头孢哌酮/舒巴坦及甲基强的松龙等治疗3天,症状仍无好转,呼吸困难逐渐加重,作胸部CT提示双侧肺内病灶明显增多,呈蜂窝样改变,故来我院.患病以来,精神、食欲明显下降,体重下降约10 kg.入院查体:T 37.6℃,P133次/min,R 32次/min,BP 100/70 mmHg,神清神萎,半卧位,可见吸气性三凹征,口唇紫绀;双肺闻及大量湿罗音和散在哮鸣音;心界不大,心率133次/min,律齐,无杂音;腹部无阳性体征;双下肢不肿.
作者：余纪会；郭述良；王璞 刊期： 2011年第10期
目的:研究CXCR4-siRNA重组腺病毒载体对人卵巢癌细胞株SKOV3的CXCR4基因表达的影响.方法:Pac Ⅰ酶切CXCR4-siRNA重组腺病毒载体使其线性化,应用HEK293细胞大量包装扩增病毒,收集病毒液,转染人卵巢癌细胞株SKOV3.细胞分为3组:siRNA组,转染空病毒载体的阴性对照组,细胞不做任何处理的空白对照组.通过PCR、Western blot、免疫组化检测CXCR4基因沉默效果.结果:包装扩增后病毒滴度为6×108 PFU/ml,荧光显微镜下可观察到SKOV3细胞中绿色荧光蛋白的大量表达,重组腺病毒能够有效抑制SKOV3细胞中CXCR4的表达.结论:CXCR4-siRNA重组腺病毒载体可高效转染靶细胞和沉默CXCR4基因的表达,为RNA干扰技术应用于卵巢癌的临床基因治疗奠定基础.
作者：刘瑜；袁瑞 刊期： 2011年第10期
目的:评价低糖高脂肪营养支持治疗慢性阻塞性肺病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)并发呼吸衰竭患者的临床疗效.方法:将60例COPD并发呼吸衰竭患者随机分成2组:研究组30例,对照组30例.2组均予抗感染、吸氧、解痉平喘、化痰、纠正酸碱失衡及电解质紊乱等治疗.研究组予低糖高脂肪营养支持,对照组予传统营养支持,疗程10 d.在研究前1d、研究后10 d分别对2组患者进行血气分析指标、呼吸功能状况测定.结果:研究组在血气分析指标、呼吸功能状况方面改善情况均较对照组有显著性差异(P＜0.05).结论:低糖高脂肪营养支持治疗可明显改善COPD并发呼吸衰竭患者的症状和体征,明显改善人体血气分析和肺功能,对纠正呼吸衰竭有良好疗效.
作者：夏艳；王宏星；邵少英 刊期： 2011年第10期
目的:制备包封率高、粒径均匀、稳定性好的pshRNA-survivin脂质体,并对其质量进行评价.方法:采用逆相蒸发法制备pshRNA-survivin脂质体；正交设计优选制备处方；考察脂质体的粒径分布、zeta电位；用超滤离心法测定脂质体的包封率；离心加速实验与渗漏率的测定考察脂质体的稳定性.结果:所得优化处方为磷脂与药物比为100∶1,油水比为4∶1,磷脂与胆固醇之比为1.5∶1,旋转蒸发温度为37℃;以优化处方制得的脂质体平均粒径为123.4 nm,zeta电位为(-8.42±0.88)mV,平均包封率达77.9％.结论:选用逆相蒸发法优化pshRNA-survivin脂质体处方合理,工艺简便可行,包封率高,稳定性好.
作者：李耀威；孙江川；常淑芳；张勇；陈佳；王志刚 刊期： 2011年第10期
目的:评价在腮腺肿瘤切除术中两种保留面部表浅肌肉腱膜系统(Superficial musculoaponeurotic system,SMAS)术式对味觉出汗综合征的预防效果和对腮腺肿瘤术后复发的影响.方法:125例良性腮腺肿瘤患者随机分为3组.Ⅰ组(游离保留SMAS法)39例,Ⅱ组(非游离保留SMAS法)46例,Ⅲ组(按传统手术方法未保留SMAS)40例.术后6～12个月,所有患者均通过调查问卷形式和碘-淀粉试验对味觉出汗综合征分别进行主观评价和客观评价.所有患者均完成了术后2～3年对肿瘤复发情况的随访.结果:Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组味觉出汗综合征的主观评价发生率分别为5.1％(2/39)、26.1％(12/46)和55.0％(22/40) (P＜0.05)；客观评价发生率分别为10.3％(4/39)、37.0％(17/46)和72.5％(29/40)(P＜0.05).术后经2～3年的随访,3组患者共125例均无复发病例.结论:保留SMAS是预防腮腺肿瘤术后发生味觉出汗综合征的有效方法,但游离保留SMAS法疗效更佳.保留SMAS不会增加良性腮腺肿瘤的复发.
作者：喻秀丽；杨凯；张福军；吕晓强 刊期： 2011年第10期
目的:探讨透明质酸介导的细胞游走受体(Receptor for hyaluronan-mediated motility,RHAMM)在胆管癌侵袭和转移中的作用.方法:收集临床上行胆管癌手术的患者的组织标本及正常胆管组织标本,根据分化程度将胆管腺癌组织标本分为高、中、低分化3组;按TNM分期标准将所有组织标本分为对照组、胆管癌组以及胆管癌伴转移组.免疫组织化学(SP)法测定RHAMM平均光密度值.RT-PCR及Western blot法检测RHAMM mRNA和蛋白的表达水平.结果:免疫组织化学检测在不同分化程度的胆管腺癌中RHAMM均有不同程度的表达(P＞0.05)；RHAMM在胆管癌伴转移组阳性率高,在对照组表达阳性率低.RT-PCR和Western blot检测RHAMM mRNA和蛋白表达水平在对照组和胆管癌组差异无统计学意义(P＞0.05).在胆管癌伴转移组明显高于对照组和胆管癌组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:RHAMM的表达程度与胆管腺癌的分化程度无关,但在胆管癌伴转移组中的高表达可能与胆管癌的侵袭相关,并终促进了胆管癌的转移.
作者：陈波；赖星；罗玉政；廖汪洋；刘长安 刊期： 2011年第10期
重庆医科大学学报杂志
主管:重庆市教育委员会
主办：重庆医科大学
