张晴；谭丽；敖仇波；胡绍举；方芳
目的 了解体外受精-胚胎移植(in vitro fertilizati embryo transfer,IVF-ET)过程中多精受精对胚胎发育及妊娠结局的影响.方法 回顾性分析在本中心2010-2012年IVF-ET治疗周期的资料,根据多精受精率分为3组:正常受精组,多精受精率为0；低频多精受精组,0＜多精受精率≤25％；高频多精受精组,多精受精率＞25％.共分析了1 144个IVF-ET周期的资料,其中正常受精组有593个周期,低频多精受精组有449个周期,高频多精受精组102个周期.比较各组的平均年龄、平均获卵数、成熟卵率、正常受精率(2PN)、正常受精卵裂率(2PN)、正常受精优胚率及临床妊娠率.结果 除了正常受精卵裂率,3组的成熟卵率、正常受精率、正常受精优胚率、临床妊娠率均存在差异(P＜0.05).结论 低水平多精受精率不影响临床妊娠率,高频多精受精不影响优胚率,但会降低临床妊娠率.
作者：曾兴光；李明舵；刘永刚；孟丹；李建红；李玉艳；龙玲；何畏 刊期： 2013年第19期
目的 研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用.方法 运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达；运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表达恢复2个时相点检测HeLa细胞在细胞形态、细胞周期等方面的变化.结果 FNBP1在HeLa细胞中稳定表达；FNBP1表达沉默后,HeLa细胞形态发生纤维状转变；FNBP1表达恢复后,HeLa细胞形态恢复至上皮状；FNBP1表达沉默后,干扰组处于S期的细胞为30.36％,较正常组(25.45％)明显增多(P＜0.05)；而G2期干扰组细胞比例(9.28％)低于正常组(11.88％,P＜0.05)；HeLa细胞周期在S期出现阻滞.结论 FNBP1作为关键调控分子,为HeLa细胞的形态建成及维持所必需；FNBP1可能参与HeLa细胞周期调控相关过程.
作者：李鑫；温泉；周云飞；何玉霞；张军 刊期： 2013年第19期
目的 探讨在4℃条件下用含川芎嗪的UW液保存不同时间后大鼠异体神经再生的影响,阐明川芎嗪在短期内能促进异体神经再生.方法 取3月龄雄性清洁级成年健康Wistar大鼠56只(受体),体质量200～ 250 g,随机数字表法分为A、A'、B、B'、C、C'、D组,每组8只.取3月龄雄性清洁级成年SD大鼠24只(供体),体质量200～250 g,切取双侧坐骨神经干约15 mm,共取48条神经,经生理盐水冲洗后随机放入24根冻存管中(每根冻存管含2条供体神经),随机分为6组,于4℃条件下,任选3组分别经含川芎嗪的UW液分别保存4、6、12周后,作为实验A、B、C组神经修复供体,剩余3组用不含川芎嗪的UW液分别保存4、6、12周后,作为对照A'、B'、C'组神经修复供体.D组为新鲜自体神经移植组.术后4、8、12周行大体观察,术后12周行电生理检测,光镜、电镜观察神经再生情况.结果 术后12周检测腓肠肌湿质量、电生理情况,A、D两组优于其他组,但D组优于A组,组间有统计学差异(P＜0.05).术后12周移植神经段行HE染色光镜观察结果显示,C组及C'组炎症反应重且空泡变性为明显,D组炎症反应轻,镜下见A、D两组神经纤维排列较规则.术后12周行透射电镜检测结果显示,A、D两组再生的有髓神经纤维较多,并可见少许无髓神经纤维,髓鞘完整,呈同心圆排列,细胞器丰富；B组镜下情况差于A组,C、C'组再生的有髓神经纤维较少,并见结缔组织结构.结论 在4周内保存异体神经,川芎嗪可改善其神经再生效果.
作者：钟建；阳明明；蒋电明 刊期： 2013年第19期
随着社会的飞速发展,交通事故或其他外伤所致的肋骨骨折越来越常见,具有社会意义的不全性骨折常常漏诊,因此,对影像诊断提出了较高要求[1-2].多层螺旋CT是胸部创伤影像学检查的重要方法之一,在扫描速度、范围、图像分辨率及后处理功能等方面具有明显优势[3].本研究通过回顾性分析201 1年1月至2012年12月656例肋骨骨折病例,探讨16层螺旋CT不同层厚的联合应用对肋骨不全性骨折的诊断价值,以期为临床诊治及法医学鉴定提供可靠依据,避免医疗纠纷[4].
作者：刘历；杨艺；黄兴涛；李琦 刊期： 2013年第19期
目的 比较Triton X-100和十二烷基硫酸钠(SDS)试剂对人关节软骨脱细胞处理后细胞外基质成分的变化,指导筛选适宜的制备.方法 首先制备人关节软骨微粒,再采用两种不同试剂分别作用于软骨细胞微粒,清洗和消化步骤相同,脱细胞完成后分别进行DNA、总氨基酸及总胶原和葡萄糖胺聚糖(GAG)含量检测,分为Triton X-100组和SDS组,并与对照组(正常软骨组织)进行基质成分的比较分析.结果 Triton X-100组、SDS组和对照组经脱细胞处理后其GAG含量分别为(84.71 ±3.72)、(122.63±6.05)、(232.78 ± 75.33)μg/mg,羟脯氨酸含量分别为(24.92±1.74)、(24.23±1.68)、(24.54±2.99) μg/mg,DNA含量分别为(0.242±0.065)、(0.225 ±0.057)、(5.679±1.873)μg/mg.结论 Triton X-100和SDS两种试剂均能将软骨微粒中软骨细胞成分有效去除,胶原成分保留量在两组中无明显差异；但是应用SDS行脱细胞处理后能保留更多的GAG成分,更有利于维持软骨细胞功能,是较好的材料制备技术.
作者：谭洪波；段小军；杨柳；徐永清；丁晶；杨军 刊期： 2013年第19期
目的 考察新兵新训应激后成长与自我接纳和心理弹性的关系.方法 2013年某部队新兵新训1个月时,采用正性情绪量表(PAS)、Connor-Davidson心理弹性问卷(CD-PISC)、应激后成长问卷(PTGI)、自我接纳问卷(SAQ)和心理应激自评问卷(PSET)对651名新兵进行调查.结果 ①新兵新训应激后成长总分为(45.90±18.59),文化程度高的新兵在新训应激后成长得分相对较高(P＜0.01).②应激后成长高分组在正性情绪、心理弹性总分、自我接纳总分上均显著高于应激后成长低分组(P＜0.01),在心理应激总分上显著低于应激后成长低分组(P＜0.01).③正性情绪在应激程度、自我接纳对应激后成长的影响中起到完全中介作用,在心理弹性对应激后成长的影响中起到部分中介作用.结论 新兵新训期间的正性情绪、心理弹性、自我接纳、应激程度与应激后成长密切相关,且正性情绪和心理弹性是新兵新训应激后成长的重要预测因素.
作者：谢钧润；于永菊；彭李；陈珑；李嘉雯；李静；李敏 刊期： 2013年第19期
重症手足口病包括脑膜炎、脑炎、脊髓炎,神经源性肺水肿和循环衰竭,进入肺水肿和循环衰竭阶段和病死率高达83％[1].探讨重症、危重症手足病临床特征,早期判断重症病例,对手足口病的积极诊治和减少死亡具有重要的意义.现对我院2012年4-8月收治的76例重症、危重症手足口病病例进行分析和总结,现报告如下.
作者：张晴；谭丽；敖仇波；胡绍举；方芳 刊期： 2013年第19期
目的 探讨肺结核患儿与健康儿童外周血单核细胞中microRNA表达水平的差异及在儿童肺结核中的诊断价值.方法 提取肺结核及健康儿童外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中RNA,进行microRNA芯片检测,筛选出差异表达的microRNA,并用实时荧光定量PCR进行验证,运用t检验对结果进行分析,对目标microRNA进行生物信息学初步分析.结果 通过microRNA芯片检测到21个差异表达的microRNA,15个表达上调,6个表达下调,终选取6个microRNA(hsa-miR-193a-3p、hsa-miR-144、hsa-miR-342-5p、hsa-miR-31、hsa-miR-33a、hsa-miR-142-3p).经实时荧光定量PCR验证,与正常组相比,肺结核患儿PBMC中hsa-miR-193a-3p、hsa-miR-144表达上调(P＜0.05),hsamiR-342-5p、hsa-miR-31表达下调(P＜0.05).生物信息学初步分析提示4种microRNA在结核与宿主细胞相互作用的相关信号通路中可能有发挥一定的作用.结论 与成人肺结核中microRNA表达相比,儿童肺结核有其特异表达的microRNA,并可能参与结核病发生、发展的相关的一些信号通路,可作为儿童肺结核潜在的诊断价值.
作者：杨先涛；张祯祯；詹学；朱朝敏 刊期： 2013年第19期
目的 探讨髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,MyD88)参与调节卵巢癌细胞耐药性的具体机制.方法 在卵巢癌耐药细胞株A2780/Taxol中采用特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)抑制MyD88的表达,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况以及细胞在紫杉醇处理后的存活情况.Western blot检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)以及多药耐药蛋白(multidrug resistance 1,MDRl)的表达情况.进一步在A2780/Taxol细胞中通过LY294002抑制PKB/Akt信号通路,通过小干扰RNA抑制MDR1的表达,CCK-8试剂盒检测细胞在紫杉醇处理后的存活情况.结果 在A2780/Taxol细胞株中抑制MyD88的表达,细胞的增殖速度明显低于对照组(P＜0.05).A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性也明显降低,半数抑制浓度(IC50)降低至对照组的50％(P＜0.01),且p-Akt、XIAP和MDR1在药物刺激下的升高也被明显抑制.同时抑制p-Akt通路的活性或抑制MDR1的表达后A2780/Taxol细胞的耐药性也出现明显下降,IC50分别降低至对照组的80％和50％,且差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 MyD88蛋白通过调节PKB/Akt信号通路、XIAP抗凋亡蛋白以及MDR1的表达参与卵巢癌细胞对紫杉醇的耐药性.通过抑制MyD88可望改善卵巢癌治疗中的耐药现状.
作者：邹冬玲；王冬；徐发良；周琦 刊期： 2013年第19期
目的 建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染人肺癌上皮细胞A549的细胞模型.方法 优化类鼻疽伯克霍尔德杆菌感染A549细胞的感染条件(如MOI、感染时间),通过活细胞工作站动态观察、Giemsa染色、激光共聚焦、透射电镜确证胞内感染和宿主细胞的形态变化,通过炎症因子IL-8和TNF-α的检测,分析病原菌入胞率和宿主反应性,评价该模型中病原菌侵入A549导致多核巨细胞(muhinuclear giant cell,MNGC)形成的特点和病理损伤规律.结果 透射电镜结果显示类鼻疽伯克霍尔德氏菌侵入到胞内的时间早是4h.通过Giemsa染色形态观察,类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染后早8h可观察到典型MNGC的形成.随着感染时间的延长,MNGC形成率和炎症因子IL-8逐渐升高,而TNF-α在此模型中变化不明显.结论 成功构建类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染A549细胞模型.
作者：毛婵；李倩；方瑶；潘静；顾江；唐彬；李娜；张卫军 刊期： 2013年第19期
目的 研究芳樟醇R-和S-对映异构单体的体外抗菌活性.方法 采用琼脂稀释法和微量稀释法检测R-和S-芳樟醇的抗菌活性指标,包括MIC、MBC、B/I、抑菌曲线、半数抑制量(IC50)、杀菌曲线.结果 R-和S-芳樟醇对金黄色葡萄球菌(ATCC29213、25923)、表皮葡萄球菌(ATCC12228、ATCC35984)、大肠杆菌(ATCC25922)均具有抗菌活性,敏感细菌的MIC值位于1.024～4.096 mg/mL,R-芳樟醇对部分细菌抗菌活性稍强于S-芳樟醇,两种构型芳樟醇B/I值均处于1～2范围内.而铜绿假单胞菌(ATCC27853)未检测出MIC值(MIC＞8.192 mg/mL).R-芳樟醇对金黄色葡萄球菌(ATCC25923、ATCC29213)的IC5o小于S-芳樟醇(P＜0.05).两者的抗菌效应曲线均具有明显的时效和量效关系.结论 R-和S-芳樟醇具有良好的抗菌活性,两者抗菌活性可能存在细微的差异.
作者：胡小刚；陈剑鸿；夏培元；黄明春；冯伟 刊期： 2013年第19期
目的 探讨快速眼动期(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠海马齿状回神经元增殖与凋亡的影响.方法 45只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为3组:①普通鼠笼对照组(cc,n=15)；②睡眠剥夺组(SD,n=15)；③睡眠恢复组(RS,n=15).采用改良多平台睡眠剥夺法连续72 h剥夺大鼠REM睡眠后,利用BrdU标记增殖细胞,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马齿状回神经元增殖情况,并利用免疫荧光染色检测大鼠海马齿状回新生神经元标记物微管相关蛋白(doublecortin,DCX)和星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidicprotein,GFAP)的表达情况.采用TUNEL法观察大鼠海马神经元凋亡情况.结果 免疫组化结果显示SD组及RS组每张切片BrdU阳性细胞平均数均明显少于CC组(P＜0.01),但是RS组与SD组相比无显著性差异(P＞0.05).免疫荧光染色结果显示,DCX阳性细胞在BrdU阳性细胞中所占比例大,各组间BrdU/DCX、BrdU/GFAP双阳性细胞的百分比相差不显著(P＞0.05).CC组、SD组及RS组各组海马区均未见TUNEL阳性细胞.结论 REM睡眠剥夺抑制海马齿状回神经元增殖,短期睡眠恢复后无显著改善.REM睡眠剥夺对海马齿状回神经元的分化和凋亡无影响.
作者：梁小敏；陈甲；许志强 刊期： 2013年第19期
目的 探讨不同剂量的茶多酚(tea polyphenol,TP)对草甘膦(glyphosate,GLY)诱导小鼠睾丸支持细胞(sertoli 细胞)氧化损伤及凋亡的拮抗作用.方法 体外原代培养小鼠sertoli细胞,90 mg/L GLY培养液处理细胞形成sertoli细胞损伤模型,加入不同剂量TP(浓度分别为10、20、40、80 mg/L),形成4个拮抗组,另设由正常培养基形成的对照组；各组细胞培养24h后,倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态改变；四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率；乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测细胞毒性；TUNEL法检测细胞凋亡情况；检测细胞中超氧化物歧化酶(super oxidase dimutase,SOD)活性、谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量.结果 GLY处理组细胞出现收缩变小、脱落、甚至破碎,细胞的存活率明显低于对照组(P＜0.05),为对照组的47.03％；细胞内LDH活性明显高于对照组；细胞凋亡指数为(37.0±4.0)％,明显高于对照组(P＜0.05)；细胞内SOD活性、GSH含量与对照组相比明显降低,而MDA含量明显升高(P＜0.05).各拮抗组与GLY处理组相比,细胞形态有不同程度改善,尤其是拮抗组4(TP 80 mg/L)细胞生长状况明显好转,碎片明显减少；细胞的存活率、SOD活性及GSH含量明显升高(P ＜0.05,P＜0.01)；细胞凋亡指数、LDH活及MDA含量明显下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 GLY对小鼠sertoli细胞具有诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖,降低细胞抗氧化能力的影响,TP对GLY造成的这些损伤有一定的保护作用.
作者：赵文红；俞慧；张建国；江城梅 刊期： 2013年第19期
作者：刘良明 刊期： 2013年第19期
目的 探讨低氧对大鼠骨髓间充质干细胞粘附能力的影响.方法 采用SD大鼠20只,年龄6～8周、雌雄不限、体质量100～120 g,获取骨髓间充质干细胞.流式细胞鉴定实验细胞CD54、CD29、CD90、CD45表达.根据细胞培养及冲涮实验时的细胞氧环境,实验分组为4组:A组(20％ O2培养20％O2冲涮组)；B组(1％O2培养1％ O2冲涮组)；C组(20％O2培养1％O2冲涮组)和D组(1％ O2培养20％O2粘附冲涮组),比较不同组下剪切力冲涮细胞的残留率.研究不同氧浓度变化对骨髓间充质干细胞表达缺氧诱导因子-lα(hypoxia inducible factor,HIF-1 α)和血管细胞粘附分子(vascularcell adhesion molecule,VCAM-1)的影响.结果 骨髓间充质干细胞在1％O2环境下(B、C组)粘附能力增强,在20％O2环境下(A、D组)粘附能力减弱(P ＜0.05)；HIF-1α表达水平在1％O2环境下(B、C组)增强(P＜0.05).结论 骨髓间充质干细胞随着粘附时间越长,细胞粘附能力也逐渐增强,经过低氧处理细胞的粘附力提高时间快于常氧环境.
作者：文飞；王立维；黄文 刊期： 2013年第19期
目的 从人肺泡上皮细胞甲酰肽受体激动剂——膜联蛋白A1(Annexin A1,AnxA1)的表达变化,探讨植物雌激素影响缺氧肺部炎症浸润的机制.方法 人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)接种于60 mm培养皿中常规培养,待培养皿中细胞长满约70％,根据是否用药分为:对照组(溶剂DMSO对照)、染料木黄酮(genistein,Gen)组、大豆苷元(daidzein,DD)组,每组细胞再根据是否缺氧再分为常氧组(N)、缺氧组(H).Gen组、DD组于缺氧处理前分别加入Gen及DD,终浓度均为15 μmol/L.缺氧组细胞置于缺氧培养箱(1％O2)24h.取细胞培养上清及细胞裂解离心上清,结合甲酰肽受体特异性抑制剂tBoc2,通过趋化实验,检测其甲酰肽受体激动活性.用Western blot分析AnxA1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、核因子-κB (NF-κB)在蛋白水平的变化,用RT2-PCR法分析其mRNA水平的变化.结果 缺氧后的细胞冻融上清及培养上清趋化活性显著高于常氧组(P＜0.05),而植物雌激素处理后,两种上清的趋化活性均显著高于对照组(P＜0.05).Western blot与RT2-PCR检测结果显示,缺氧组AnxA1在蛋白水平和mRNA水平均高于常氧组(P＜0.05),两种植物雌激素不同程度地削弱了缺氧对AnxA1的上调效果,同时对HIF-1α、NF-κB的蛋白水平也产生同样的影响.结论 植物雌激素削弱了缺氧对AnxA1基因表达的上调效应,其机制与HIF-1 α、NF-κB信号途径有关.
作者：杨娟；李晓栩；陈建；官立彬；黄瑊；白志川 刊期： 2013年第19期
目的 筛选并优化了和厚朴酚自微乳化给药系统(honokiol-SMEDDS)的处方.方法 利用溶解度,辅料配伍实验及伪三元相图筛选空白处方,以粒径和体外释放评价为指标选取佳处方.结果 优化后的honokiol-SMEDDS处方油相为辛癸酸甘油酯(MCT),表面活性剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cremophor RH40),助表面活性剂为二乙二醇单乙基醚(Transcutol P),油相比例20％,表面活性剂与助表面活性剂的比值Km为2,载药量为10％,平均粒径为28 nm.结论 成功制备了honokiol-SMEDDS,显著提高了和厚朴酚的溶解度.
作者：甘露；田睿；郭锋；王春晖；左的于；张良珂 刊期： 2013年第19期
中枢神经系统室管膜瘤属于少见肿瘤,可分布于颅内及脊髓内.其中脑室管膜瘤好发于儿童及青少年,通常位于脑室系统中,多生长在后颅窝,尤以第四脑室底壁多见[1],也见于脑实质内;而脊髓室管膜瘤好发于成人,多起自颈髓,尤以颈延交界区多见[2].现将本院2013年3月收治的1例经病理检查证实的脊髓、颅内广泛浸润的透明细胞室管膜瘤报告如下.
作者：陈晓燕；刘娟 刊期： 2013年第19期
目的 探讨PI3K/mTOR抑制剂NVP-BEZ235增敏左旋棉酚[(-)-gossypol]杀伤肝癌细胞HepG2的作用及可能机制.方法 用NVP-BEZ235、左旋棉酚或二者联合处理HepG2细胞,CCK-8法检测不同处理对细胞增殖的影响,流式细胞术检测不同处理对细胞凋亡的影响,Western blot检测不同处理对细胞中mTOR磷酸化水平以及Mcl-1蛋白水平的影响.结果 联合使用NVP-BEZ235和左旋棉酚可显著抑制HepG2细胞增殖,并促进细胞凋亡,其中左旋棉酚可上调HepG2细胞中mTOR磷酸化水平及Mcl-1蛋白水平,导致抵抗发生,NVP-BEZ235能够剂量依赖性抑制mTOR磷酸化(P＜0.01),并抑制左旋棉酚对Mcl-1的上调作用.结论 NVP-BEZ235可通过抑制mTOR进而下调Mcl-1来增强左旋棉酚杀伤HepG2细胞的效果.
作者：王滨；倪振洪；丁雯；秦利燕；连继勤；何凤田 刊期： 2013年第19期
目前对于阵发性室上性心动过速的急诊治疗仍以药物为主[1].由于各医院条件及医师经验差异,药物治疗欠规范,导致复律成功率及不良反应发生率差异较大.本研究通过简单随机分组治疗,观察三磷酸腺苷(ATP)、维拉帕米及胺碘酮(分别为三类抗心律失常药物的代表)的疗效及不良反应,进一步探讨治疗的准入条件、药物的优先选择,从而提高治疗的成功率及安全性.
作者：李晓萍；蒲友敏 刊期： 2013年第19期
第三军医大学学报杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学
