蔡安季;戴勇;李武县;李紫微;涂植光
目的 探讨不同剂量的茶多酚(tea polyphenol,TP)对草甘膦(glyphosate,GLY)诱导小鼠睾丸支持细胞(sertoli 细胞)氧化损伤及凋亡的拮抗作用.方法 体外原代培养小鼠sertoli细胞,90 mg/L GLY培养液处理细胞形成sertoli细胞损伤模型,加入不同剂量TP(浓度分别为10、20、40、80 mg/L),形成4个拮抗组,另设由正常培养基形成的对照组;各组细胞培养24h后,倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法检测细胞毒性;TUNEL法检测细胞凋亡情况;检测细胞中超氧化物歧化酶(super oxidase dimutase,SOD)活性、谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量.结果 GLY处理组细胞出现收缩变小、脱落、甚至破碎,细胞的存活率明显低于对照组(P<0.05),为对照组的47.03%;细胞内LDH活性明显高于对照组;细胞凋亡指数为(37.0±4.0)%,明显高于对照组(P<0.05);细胞内SOD活性、GSH含量与对照组相比明显降低,而MDA含量明显升高(P<0.05).各拮抗组与GLY处理组相比,细胞形态有不同程度改善,尤其是拮抗组4(TP 80 mg/L)细胞生长状况明显好转,碎片明显减少;细胞的存活率、SOD活性及GSH含量明显升高(P <0.05,P<0.01);细胞凋亡指数、LDH活及MDA含量明显下降(P<0.05,P<0.01).结论 GLY对小鼠sertoli细胞具有诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖,降低细胞抗氧化能力的影响,TP对GLY造成的这些损伤有一定的保护作用.
作者:赵文红;俞慧;张建国;江城梅 刊期: 2013年第19期
目的 研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用.方法 运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达;运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表达恢复2个时相点检测HeLa细胞在细胞形态、细胞周期等方面的变化.结果 FNBP1在HeLa细胞中稳定表达;FNBP1表达沉默后,HeLa细胞形态发生纤维状转变;FNBP1表达恢复后,HeLa细胞形态恢复至上皮状;FNBP1表达沉默后,干扰组处于S期的细胞为30.36%,较正常组(25.45%)明显增多(P<0.05);而G2期干扰组细胞比例(9.28%)低于正常组(11.88%,P<0.05);HeLa细胞周期在S期出现阻滞.结论 FNBP1作为关键调控分子,为HeLa细胞的形态建成及维持所必需;FNBP1可能参与HeLa细胞周期调控相关过程.
作者:李鑫;温泉;周云飞;何玉霞;张军 刊期: 2013年第19期
目的 探讨髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,MyD88)参与调节卵巢癌细胞耐药性的具体机制.方法 在卵巢癌耐药细胞株A2780/Taxol中采用特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)抑制MyD88的表达,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况以及细胞在紫杉醇处理后的存活情况.Western blot检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)以及多药耐药蛋白(multidrug resistance 1,MDRl)的表达情况.进一步在A2780/Taxol细胞中通过LY294002抑制PKB/Akt信号通路,通过小干扰RNA抑制MDR1的表达,CCK-8试剂盒检测细胞在紫杉醇处理后的存活情况.结果 在A2780/Taxol细胞株中抑制MyD88的表达,细胞的增殖速度明显低于对照组(P<0.05).A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性也明显降低,半数抑制浓度(IC50)降低至对照组的50%(P<0.01),且p-Akt、XIAP和MDR1在药物刺激下的升高也被明显抑制.同时抑制p-Akt通路的活性或抑制MDR1的表达后A2780/Taxol细胞的耐药性也出现明显下降,IC50分别降低至对照组的80%和50%,且差异具有统计学意义(P<0.05).结论 MyD88蛋白通过调节PKB/Akt信号通路、XIAP抗凋亡蛋白以及MDR1的表达参与卵巢癌细胞对紫杉醇的耐药性.通过抑制MyD88可望改善卵巢癌治疗中的耐药现状.
作者:邹冬玲;王冬;徐发良;周琦 刊期: 2013年第19期
目的 了解体外受精-胚胎移植(in vitro fertilizati embryo transfer,IVF-ET)过程中多精受精对胚胎发育及妊娠结局的影响.方法 回顾性分析在本中心2010-2012年IVF-ET治疗周期的资料,根据多精受精率分为3组:正常受精组,多精受精率为0;低频多精受精组,0<多精受精率≤25%;高频多精受精组,多精受精率>25%.共分析了1 144个IVF-ET周期的资料,其中正常受精组有593个周期,低频多精受精组有449个周期,高频多精受精组102个周期.比较各组的平均年龄、平均获卵数、成熟卵率、正常受精率(2PN)、正常受精卵裂率(2PN)、正常受精优胚率及临床妊娠率.结果 除了正常受精卵裂率,3组的成熟卵率、正常受精率、正常受精优胚率、临床妊娠率均存在差异(P<0.05).结论 低水平多精受精率不影响临床妊娠率,高频多精受精不影响优胚率,但会降低临床妊娠率.
作者:曾兴光;李明舵;刘永刚;孟丹;李建红;李玉艳;龙玲;何畏 刊期: 2013年第19期
目的 建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染人肺癌上皮细胞A549的细胞模型.方法 优化类鼻疽伯克霍尔德杆菌感染A549细胞的感染条件(如MOI、感染时间),通过活细胞工作站动态观察、Giemsa染色、激光共聚焦、透射电镜确证胞内感染和宿主细胞的形态变化,通过炎症因子IL-8和TNF-α的检测,分析病原菌入胞率和宿主反应性,评价该模型中病原菌侵入A549导致多核巨细胞(muhinuclear giant cell,MNGC)形成的特点和病理损伤规律.结果 透射电镜结果显示类鼻疽伯克霍尔德氏菌侵入到胞内的时间早是4h.通过Giemsa染色形态观察,类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染后早8h可观察到典型MNGC的形成.随着感染时间的延长,MNGC形成率和炎症因子IL-8逐渐升高,而TNF-α在此模型中变化不明显.结论 成功构建类鼻疽伯克霍尔德氏菌感染A549细胞模型.
作者:毛婵;李倩;方瑶;潘静;顾江;唐彬;李娜;张卫军 刊期: 2013年第19期
随着社会的飞速发展,交通事故或其他外伤所致的肋骨骨折越来越常见,具有社会意义的不全性骨折常常漏诊,因此,对影像诊断提出了较高要求[1-2].多层螺旋CT是胸部创伤影像学检查的重要方法之一,在扫描速度、范围、图像分辨率及后处理功能等方面具有明显优势[3].本研究通过回顾性分析201 1年1月至2012年12月656例肋骨骨折病例,探讨16层螺旋CT不同层厚的联合应用对肋骨不全性骨折的诊断价值,以期为临床诊治及法医学鉴定提供可靠依据,避免医疗纠纷[4].
作者:刘历;杨艺;黄兴涛;李琦 刊期: 2013年第19期
目的 研究芳樟醇R-和S-对映异构单体的体外抗菌活性.方法 采用琼脂稀释法和微量稀释法检测R-和S-芳樟醇的抗菌活性指标,包括MIC、MBC、B/I、抑菌曲线、半数抑制量(IC50)、杀菌曲线.结果 R-和S-芳樟醇对金黄色葡萄球菌(ATCC29213、25923)、表皮葡萄球菌(ATCC12228、ATCC35984)、大肠杆菌(ATCC25922)均具有抗菌活性,敏感细菌的MIC值位于1.024~4.096 mg/mL,R-芳樟醇对部分细菌抗菌活性稍强于S-芳樟醇,两种构型芳樟醇B/I值均处于1~2范围内.而铜绿假单胞菌(ATCC27853)未检测出MIC值(MIC>8.192 mg/mL).R-芳樟醇对金黄色葡萄球菌(ATCC25923、ATCC29213)的IC5o小于S-芳樟醇(P<0.05).两者的抗菌效应曲线均具有明显的时效和量效关系.结论 R-和S-芳樟醇具有良好的抗菌活性,两者抗菌活性可能存在细微的差异.
作者:胡小刚;陈剑鸿;夏培元;黄明春;冯伟 刊期: 2013年第19期
目的 探讨采用PHILOS锁定钢板治疗肱骨近端粉碎性骨折的临床疗效.方法 收集2010年1月至2012年6月应用PHILOS锁定钢板治疗16例肱骨近端骨折患者,通过影像学资料、Constant-Murley评分(Constant-Murley score,CMS)及美国肩肘外科医师(American shoulder and elbow surgeons,ASES)评分对患者骨折愈合情况、肩关节功能及并发症等进行评估.结果 16例患者均获随访,平均随访时间17(6 ~25)个月.16例(100%)患者获得骨性愈合,14例患者基本获得解剖复位(87.5%),1例(6.2%)患者术后肩关节轻度疼痛,1例(6.2%)患者术后肩关节功能严重障碍.所有病例无钢板螺钉断裂、肱骨头缺血性坏死发生;平均ASES评分为80.5(40 ~96)分,平均Constant评分为72.4 (32~93)分;其中患肢肩关节功能优12例(75.0%)、良3例(18.8%)、差1例(6.2%).结论 采用PHILOS锁定钢板治疗肱骨近端粉碎型骨折,尤其对老年性骨质疏松患者,不仅可提供稳定的骨折固定,而且能进行早期功能锻炼,从而取得较好的疗效.
作者:黄伟弘;倪卫东;宋昭君 刊期: 2013年第19期
目的 探讨足月儿、早产儿患化脓性脑膜炎(purulent meningitis,PM)临床特点的异同.方法 对我院新生儿中心2007年2月至2013年2月98例确诊化脓性脑膜炎的患儿进行回顾性分析,按胎龄分为足月儿组、早产儿组,对两组的临床特征进行对比分析.结果 足月儿组以发热(x2=12.529,P<0.001)、抽搐(x2=5.286,P=0.022)为突出表现,而早产儿组则以肌张力降低为突出表现(x2=11.113,P=0.001).足月儿组治愈患儿的治疗时间为(22.92±7.69)d,早产儿组为(33.88±15.16)d.电话随访结果显示,足月儿组、早产儿组遗留后遗症的比例分别为25.00%、29.41%.结论 早产儿较足月儿缺乏发热、抽搐等颅内感染的典型表现,治愈所需时间较长,且遗留严重后遗症比例更高,故需加强重视早产儿化脑的早期诊疗.
作者:李小玉;邓春;苏云娟 刊期: 2013年第19期
目的 探讨外源性H2S对原代培养皮质神经元早老素1(presenilin 1,PS1)和β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)的影响及机制.方法 ①NaHS为外源性H2S的供体,不同浓度NaHS(0、5、10、20、30、40、50μmol/L)作用于原代培养的皮质神经元,TUNEL法检测细胞凋亡,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测Aβ1-42水平,Western blot检测PS1蛋白表达水平.②神经元分为对照组(0 μmol/L NaHS)、20 μmol/L NaHS组、A干预组(NaHS 20 μmol/L加PI3K通路阻断剂LY294002 20 μmol/L)和B干预组(NaHS 20 μmol/L加MAPK通路阻断剂PD98059 20 μmol/L),Western blot检测PSI蛋白表达.结果 ①5 ~ 20μmol/L浓度NaHS干预时,不引起明显神经元凋亡;30~50 μmol/L时,神经元凋亡明显增加(P <0.05);10、20 μmol/L浓度NaHS显著降低Aβ1-42水平和PS1蛋白表达水平(P<0.05).②与对照组相比,20 μmol/LNaHS组和B干预组PS1蛋白表达降低(P<0.05),而A干预组PS1蛋白表达无改变(P>0.05);而20 μmol/L NaHS组和B干预组间无差异(P>0.05);与A干预组相比,B干预组PS1蛋白表达显著降低(P<0.05).结论 低浓度外源性H2S(30 μmol/L浓度NaHS范围内)不引起神经元明显凋亡,降低Aβ1-42水平和PS1蛋白表达,并可能通过PI3K信号通路发挥降低PS1蛋白表达的作用.
作者:陈筱山;何选丽;朱丽娟;张华;冯飞;晏勇 刊期: 2013年第19期
作者:刘良明 刊期: 2013年第19期
目的 探讨在4℃条件下用含川芎嗪的UW液保存不同时间后大鼠异体神经再生的影响,阐明川芎嗪在短期内能促进异体神经再生.方法 取3月龄雄性清洁级成年健康Wistar大鼠56只(受体),体质量200~ 250 g,随机数字表法分为A、A'、B、B'、C、C'、D组,每组8只.取3月龄雄性清洁级成年SD大鼠24只(供体),体质量200~250 g,切取双侧坐骨神经干约15 mm,共取48条神经,经生理盐水冲洗后随机放入24根冻存管中(每根冻存管含2条供体神经),随机分为6组,于4℃条件下,任选3组分别经含川芎嗪的UW液分别保存4、6、12周后,作为实验A、B、C组神经修复供体,剩余3组用不含川芎嗪的UW液分别保存4、6、12周后,作为对照A'、B'、C'组神经修复供体.D组为新鲜自体神经移植组.术后4、8、12周行大体观察,术后12周行电生理检测,光镜、电镜观察神经再生情况.结果 术后12周检测腓肠肌湿质量、电生理情况,A、D两组优于其他组,但D组优于A组,组间有统计学差异(P<0.05).术后12周移植神经段行HE染色光镜观察结果显示,C组及C'组炎症反应重且空泡变性为明显,D组炎症反应轻,镜下见A、D两组神经纤维排列较规则.术后12周行透射电镜检测结果显示,A、D两组再生的有髓神经纤维较多,并可见少许无髓神经纤维,髓鞘完整,呈同心圆排列,细胞器丰富;B组镜下情况差于A组,C、C'组再生的有髓神经纤维较少,并见结缔组织结构.结论 在4周内保存异体神经,川芎嗪可改善其神经再生效果.
作者:钟建;阳明明;蒋电明 刊期: 2013年第19期
Fahr病是一种原因不明的神经系统退行性疾病,以基底节及基底节外区域特征性钙化为特征,伴随神经、精神及认知方面的损害[1].临床上主要表现为运动障碍、精神障碍、癫痫发作等.本病具有家族性或散发性(特发性)特点.家族性多为常染色体显性遗传,也有常染色体隐性遗传和性染色体遗传的报道.现将收治的4例Fahr病合并高同型半胱氨酸(hHcy)的患者资料报告如下.
作者:李凤;马勋泰;陈明;谭华;李小刚;袁平;何晓英 刊期: 2013年第19期
目的 检测强直性脊柱炎外周血单个核细胞中急性时相反应蛋白表达水平,探讨其与强直性脊柱炎发病的关系.方法 收集10例强直性脊柱炎患者和9例健康对照,提取外周血单个核细胞,采用相对和绝对定量的等量异位标签串联质谱技术检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞中的急性时相反应蛋白表达水平,并运用Western blot方法进行验证差异表达的触珠蛋白(Hp)和铜蓝蛋白(Cp).结果 基于质谱分析的蛋白组学显示,19种急性时相反应蛋白在强直性脊柱炎外周血单个核细胞中蛋白表达水平明显升高(P<0.05),主要包括补体C3、纤粘蛋白(FN1)、血浆酶原(PLG)、转铁蛋白(TF)、Hp和Cp;Western blot检测Hp和Cp的表达水平与相对和绝对定量的等量异位标签串联质谱技术检测结果具有相同的变化趋势.结论 急性时相反应蛋白差异表达可能参与了强直性脊柱炎的发生、发展,有望作为强直性脊柱炎的临床生物标记物.
作者:蔡安季;戴勇;李武县;李紫微;涂植光 刊期: 2013年第19期
目的 制备携Fe3O4靶向血栓的聚乳酸-羟基乙酸(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)微球,探讨其理化性质并在MR监测下观测其对体外血栓的靶向能力.方法 以PLGA为载体,通过双乳化溶剂挥发法及碳二亚胺法制备携带MR造影剂Fe3O4及表面修饰血栓亲和性短肽精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Arg-Gly-Asp-Ser,RGDS)的PLGA微球(RGDS-Fe3O4-PLGA微球),对其理化性质进行表征,通过体外靶向血栓实验探究其对血栓的靶向能力,并评价其MR显影效果.结果 成功制备了RGDS-Fe3O4-PLGA微球,激光粒径仪测得微球的粒径为(1 105 ±83)nm,其形态规则,大小均匀,呈球形,分散性好,火焰原子吸收光谱法测得Fe3O4携带率为43.6%,流式细胞仪检测RGDS的连接率为23.57%.在MR监测下,体外血栓寻靶实验证实该微球可有效靶向血栓并明显降低血栓周边T2信号.结论 本实验制得的RGDS-Fe3O4-PLGA微球对体外血栓有良好的亲和性,MR对比增强效果好.
作者:周君;张瑜;郭大静;熬梦;郑元义;王志刚 刊期: 2013年第19期
目的 探讨全血γ干扰素诱导蛋白-10(IP-10)对活动性结核病的辅助诊断价值.方法 检测66例活动性肺结核病患者、40例非结核呼吸疾病患者及40例健康对照者血浆中非特异性IP-10的水平;分别应用纯化的结核分枝杆菌特异性蛋白早期分泌性靶抗原石(EAST-6)和培养液蛋白10 (CFP10)体外刺激患者全血,检测活动性结核病组、非结核呼吸疾病组和健康对照组人群全血中IP-10的释放水平;绘制受试者工作特征曲线,比较非特异性IP-10和特异性IP-10对活动性肺结核的诊断效能.结果 活动性结核病组患者血浆中非特异性IP-10的水平为(139.6±124.2) pg/mL,明显高于健康对照组[(33.5±17.7) pg/mL,P<0.05];而与非结核呼吸疾病组[(88.1±73.3) pg/mL]无明显差别(P>0.05).经ESAT-6及CFP10诱导后,活动性结核病组患者全血IP-l0释放水平为(146.0±167.1) pg/mL,显著高于非结核呼吸疾病组[(26.6 ±9.7) pg/mL,P<0.01]与健康对照组[(24.2±9.7) pg/mL,P<0.01].经过ROC分析,结核特异性的IP-10诊断结核病的临界值为41.2 pg/mL,敏感度为68.2%,特异度为93.7%.特异性IP-10 ROC曲线下面积为0.905,高于非特异性IP-10(0.747,P<0.01).结论 IP-10可作为活动性结核病的辅助诊断方法.采用结核特异性IP-10较血浆非特异性IP-10能够提高活动性肺结核的诊断效能.
作者:罗效梅;熊玉霞;曹均;王燕妮;杨刚毅;李伶;廖涌 刊期: 2013年第19期
目前对于阵发性室上性心动过速的急诊治疗仍以药物为主[1].由于各医院条件及医师经验差异,药物治疗欠规范,导致复律成功率及不良反应发生率差异较大.本研究通过简单随机分组治疗,观察三磷酸腺苷(ATP)、维拉帕米及胺碘酮(分别为三类抗心律失常药物的代表)的疗效及不良反应,进一步探讨治疗的准入条件、药物的优先选择,从而提高治疗的成功率及安全性.
作者:李晓萍;蒲友敏 刊期: 2013年第19期
中枢神经系统室管膜瘤属于少见肿瘤,可分布于颅内及脊髓内.其中脑室管膜瘤好发于儿童及青少年,通常位于脑室系统中,多生长在后颅窝,尤以第四脑室底壁多见[1],也见于脑实质内;而脊髓室管膜瘤好发于成人,多起自颈髓,尤以颈延交界区多见[2].现将本院2013年3月收治的1例经病理检查证实的脊髓、颅内广泛浸润的透明细胞室管膜瘤报告如下.
作者:陈晓燕;刘娟 刊期: 2013年第19期
目的 考察新兵新训应激后成长与自我接纳和心理弹性的关系.方法 2013年某部队新兵新训1个月时,采用正性情绪量表(PAS)、Connor-Davidson心理弹性问卷(CD-PISC)、应激后成长问卷(PTGI)、自我接纳问卷(SAQ)和心理应激自评问卷(PSET)对651名新兵进行调查.结果 ①新兵新训应激后成长总分为(45.90±18.59),文化程度高的新兵在新训应激后成长得分相对较高(P<0.01).②应激后成长高分组在正性情绪、心理弹性总分、自我接纳总分上均显著高于应激后成长低分组(P<0.01),在心理应激总分上显著低于应激后成长低分组(P<0.01).③正性情绪在应激程度、自我接纳对应激后成长的影响中起到完全中介作用,在心理弹性对应激后成长的影响中起到部分中介作用.结论 新兵新训期间的正性情绪、心理弹性、自我接纳、应激程度与应激后成长密切相关,且正性情绪和心理弹性是新兵新训应激后成长的重要预测因素.
作者:谢钧润;于永菊;彭李;陈珑;李嘉雯;李静;李敏 刊期: 2013年第19期
目的 探讨低氧对大鼠骨髓间充质干细胞粘附能力的影响.方法 采用SD大鼠20只,年龄6~8周、雌雄不限、体质量100~120 g,获取骨髓间充质干细胞.流式细胞鉴定实验细胞CD54、CD29、CD90、CD45表达.根据细胞培养及冲涮实验时的细胞氧环境,实验分组为4组:A组(20% O2培养20%O2冲涮组);B组(1%O2培养1% O2冲涮组);C组(20%O2培养1%O2冲涮组)和D组(1% O2培养20%O2粘附冲涮组),比较不同组下剪切力冲涮细胞的残留率.研究不同氧浓度变化对骨髓间充质干细胞表达缺氧诱导因子-lα(hypoxia inducible factor,HIF-1 α)和血管细胞粘附分子(vascularcell adhesion molecule,VCAM-1)的影响.结果 骨髓间充质干细胞在1%O2环境下(B、C组)粘附能力增强,在20%O2环境下(A、D组)粘附能力减弱(P <0.05);HIF-1α表达水平在1%O2环境下(B、C组)增强(P<0.05).结论 骨髓间充质干细胞随着粘附时间越长,细胞粘附能力也逐渐增强,经过低氧处理细胞的粘附力提高时间快于常氧环境.
作者:文飞;王立维;黄文 刊期: 2013年第19期