杨勇军;赵自星;杨艳;李钟艳;王崇树;何德才;李惠玲
目的 探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对小鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖迁移的影响及AMD3100对其的干预效应.方法 分别用不同浓度的SDF-1α刺激EPCs,观察SDF-1α的促增殖效应再用不同浓度的AMD3100干预5 ng/ml SDF-1α的促增殖效应及单用AMD3100与EPCs孵育,观察AMD3100对EPCs增殖的影响.MTT比色法检测EPCs的增殖情况.用1、10 ng/ml SDF-1α诱导EPCs迁移,或先用10ng/ml AMD3100与EPCs孵育,再做SDF-1α诱导的/无SDF-1α诱导的迁移实验.用改良的Boyden小室测定EPCs迁移能力.结果 SDF-1α剂量依赖性增强EPCs增殖能力,10 ng/ml AMD3100即完全阻断5 ng/ml SDF-1α的促进EPCs增殖效应,单用AMD3100孵育可抑制EPCs增殖,与阴性对照组比较差异显著(P<0.01);单用AMD3100孵育抑制EPCs迁移,与阴性对照组比较差异显著(P<0.01).结论 SDF-1α可增强EPCs增殖迁移能力,AMD3100可完全阻断其促增殖和诱导迁移效应,单用AMD3100抑制EPCs增殖迁移.
作者:尹扬光;黄岚;赵晓辉;于世勇;方玉强;赵景红 刊期: 2007年第06期
目的 观察cubilin siRNA真核表达载体对人近端肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cell line,HKC)cubilin基因的特异性抑制作用.方法 针对人cubilin基因设计并构建siRNA真核表达载体pSUPER EGFP-C1和pSUPER EGFP-C2,转染HKC,经荧光定量PCR(FQ-PCR)检测cubilin mRNA的表达、不同浓度的人血清白蛋白(HSA)刺激正常HKC及转染重组质粒的HKC 24 h后cubilin mRNA的表达,并通过激光共聚焦扫描荧光显微镜观察HKC对白蛋白摄取情况的变化.结果 FQ-PCR显示HSA刺激正常HKC后cubilin mRNA表达具有剂量依赖性.与正常对照组相比,两个重组质粒均可部分抑制HKC cubilin表达,抑制效率分别为66%和37%,HSA刺激转染pSUPER EGFP-C1、pSU-PER EGFP-C2的HKC后cubiin mRNA水平较正常对照组比较分别下降50%、34%,转染了重组质粒的HKC对白蛋白的摄取明显减少.结论 成功地构建了针对人cubilin基因的RNA干扰真核表达载体,表达型siRNA可抑制肾小管上皮细胞cubilin基因的表达及对白蛋白的摄取.
作者:林静;何娅妮;杨聚荣;李新伦;梁海君;吴劲松;李开龙;丁涵露;张建国 刊期: 2007年第06期
目的 采用RNA干扰抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤中人乳头瘤病毒(human papillomavirus-16,HPV16)E6基因的表达,观察对裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 将HPV16 E6特异性的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)真核表达载体转染到人宫颈癌细胞株CaSki细胞中,经G418筛选,RT-PCR检测E6基因的表达;将细胞接种到BALB/c裸鼠背部皮下,同时将该质粒注射到人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的裸鼠中,观察肿瘤出现时间及体积变化;观察肿瘤组织的病理改变.结果 成功筛选到持续表达E6 siRNA的CaSki细胞,经RT-PCR检测该细胞中HPV16 E6基因表达降低;裸鼠成瘤实验结果显示,处理后的CaSki细胞成瘤能力明显降低,抑瘤率为71.4%;注射质粒进行基因治疗后,裸鼠肿瘤生长受到抑制,肿瘤的体积与质量明显低于CaSki细胞组,差异具有显著性(P<0.05).病理检查结果显示,经pGensil-CH2处理的肿瘤生长不佳,细胞分裂像少见,组织内有较多坏死区域.结论 沉默CaSki细胞中HPV16 E6基因的表达能明显降低宫癌细胞的成瘤作用.
作者:成海恩;张溢;张翠莉;潘巍巍;石华;易发平;郭风劲;宋方洲 刊期: 2007年第06期
自发性食管破裂(spontaneous rupture of esophagus,SRE)是指由于非外伤性所致的食管全层裂开,常是由于食管内压突然并且迅速增高造成的,又称为Boerhaave综合征.该病发病率低,仅1/6 000[1],但一旦发病,病情进展快,误诊率、病死率均较高,是胸外科临床少见而严重的急症之一.为减少该病误诊率及病死率,提高对自发性食管破裂诊治水平,现总结本院和河南省南阳医学高等专科学校附属医院1990-2004年收治的食管破裂患者的治疗经验,现报告如下.
作者:王会恩;杨军;柳立军;王志康;周绍辉;张华 刊期: 2007年第06期
目的 对PPH加硬注术与外剥内扎硬注术治疗老年人混合痔手术进行对比研究.方法 将120例患者采用随机数字法分为试验组(PPH加硬注术治疗60例)和对照组(外剥内扎硬注术治疗60例),对临床资料进行对比分析.结果 试验组60例中痊愈11例,显效32例,有效14例,无效3例;手术时间(16.55±3.66)min;住院时间(5.07±1.25)d;疗程(10.85±2.55)d;术后疼痛(Ⅱ、Ⅲ度)24例、出血(>50 ml)3例、尿潴留24例、肛缘水肿2例.对照组60例中痊愈10例,显效27例,有效16例,无效7例;手术时间(45.25±7.97)min;住院时间(8.32±1.55)d;疗程(15.47±1.56)d;术后疼痛(Ⅱ、Ⅲ度)57例、出血(>50 ml)6例、尿潴留29例、肛缘水肿11例.两组近期无狭窄和严重感染,远期疗效有待观察.结论 PPH加硬注术治疗老年人混合痔是一种有效方法,手术简单、安全,近期疗效确切,手术和住院时间短、术后疼痛轻、出血少、缩短了疗程,有效地减少了诱发术后老年人的合并病,有应用推广价值.
作者:杨勇军;赵自星;杨艳;李钟艳;王崇树;何德才;李惠玲 刊期: 2007年第06期
目的 观察不同水平呼气末正压通气(positive end-expiratory pressure,PEEP)对犬额叶脑内血肿颅内高压的影响.方法 18只犬随机分为正常颅压组(Ⅰ组,颅内压<18 mmHg)、颅压中度增高组(Ⅱ组,颅内压25~40 mmHg)和颅压高度增高组(Ⅲ组,颅内压>40 mmHg)3组(每组各6只),全麻,气管切开插管,应用肌松剂,机械通气,右额叶脑内注入自体血制成颅内高压模型,PEEP从0开始每次增加3 cmH2O,直到18 cmH2O,每个水平持续20 min,在对侧用光纤颅内压探头监测脑内颅内压(ICP)的变化,记录平均动脉压(MAP)和中心静脉压(CVP)并计算出脑灌注压(CPP).结果 随着PEEP的递增,Ⅰ组颅内压上升,脑灌注压下降;Ⅱ、Ⅲ组颅内压略有下降,但Ⅱ组MAP、CPP上升,而Ⅲ组MAP下降,CPP下降;3组CVP都随PEEP增加而升高,但Ⅲ组上升幅度明显大于另两组(P<0.01).结论 应用PEEP通气时由于中心静脉压升高、脑静脉回流受阻和血流动力学改变,进而影响ICP和CPP.在正常颅内压状态下,PEEP使颅内压上升,在已有颅内高压存在时,PEEP对颅内压影响不明显,但在重度高颅压情况下,PEEP使CPP明显下降,提示在重度颅内高压需要应用PEEP通气时必须维持MAP,以保证足够的CPP.
作者:闫润民;卢亦成;于明琨;楼美清;张光霁;朱诚 刊期: 2007年第06期
目的 通过生物信息学分析人C5L2受体的配体结构域,并进一步利用生物分子相互作用测定技术(biomolecular interaction analysis,BIA)研究其与配体C5a分子间的相互作用.方法 以人C5L2蛋白的氨基酸序列为基础,利用网络分析软件以及Goldkey计算机分析软件对人C5L2蛋白二级结构及亲水性、抗原性、可及性、柔韧性、表位等参数进行综合分析,确定可能与rhC5a结合的区域肽段序列,Fmoc方法固相多肽合成候选的结合位多肽,采用IAsys Plus生物传感器系统,以rhC5a为固定相,分别以这些候选结合位多肽为流动相,测定与rhC5a的结合力.结果 合成多肽N2(第12~22位)、C3(第265~275位)可与C5a发生特异性结合,结合率分别为53%和23%.结论 人C5L2分子第3~22、179~183、190~195、265~275位等区域满足各项指标,可能是其配体C5a的结合域.
作者:宋蓉;李元朝;吕凤林;吴玉章;胡承香;陈月 刊期: 2007年第06期
目的 利用RNA干扰技术,以COX-2为靶基因,构建靶向COX-2基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达质粒并进行鉴定分析.方法 设计、合成1对COX-2编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,经退火形成互补双链,通过定向克隆至质粒pGenesil-1,构建shRNA真核表达载体.转化JM109大肠杆菌,提取质粒进行酶切鉴定和测序分析;RT-PCR和Western blot检测重组表达质粒对COX-2 mRNA和蛋白表达的抑制效果.结果 酶切证实目的DNA定向克隆至载体上,测序分析结果与目的序列相同.RT-PCR和Western blot结果显示,与未转染组比较,pshRNA-COX-2重组表达质粒对β-actin基因无明显影响,而对COX-2有明显抑制作用.COX-2 mRNA和蛋白表达的抑制率分别为66.9%和50.3%.结论 成功构建的靶向干扰COX-2基因重组质粒能够显著抑制COX-2基因表达.
作者:杨义明;刘预;涂植光;张钰倩 刊期: 2007年第06期
我们对本院变态反应性疾病诊疗中心1998年5月至2005年11月就诊的5 969例哮喘儿童行变应原皮内试验的结果进行了分析,主要探讨常见变应原对重庆市小儿哮喘的过敏状况,以期为今后该地区哮喘的防治工作提供指导依据.
作者:王模奎;黄英;刘恩梅;陈坤华;戴继宏;蒋永惠;李芙蓉 刊期: 2007年第06期
尺骨鹰嘴骨折是一种波及肘关节面的常见骨折,如果复位及固定不当,将影响肘关节的活动功能.我院自1999年7月至2005年7月对35例尺骨鹰嘴骨折患者采用重建钢板内固定,并行早期功能锻炼,使骨折愈合和关节功能的恢复有明显效果.
作者:周续祥;李长军;丁培根;刘业 刊期: 2007年第06期
目的 探讨棘突椎板回植椎管成形在胸腰椎后路手术的应用价值.方法 将43例患者(椎管内肿瘤患者8例,脑性瘫痪选择性脊神经前后根切断术35例)的带蒂棘突椎板行棘突内面纵形开槽,两侧椎板横形掰开,回植椎管成形.结果 临床随访平均18个月,回植棘突椎板获得骨性融合,脊柱稳定性得到有效的保持,未发现椎管狭窄及椎管疤痕黏连压迫硬膜等手术后并发症.结论 棘突椎板回植椎管成形可满足手术显露的要求,又保持了椎管的完整性,可以有效预防胸腰椎后路手术后疤痕增生黏连对椎管内脊髓神经的压迫.
作者:章凯;吴增晖;尹庆水;夏虹;王智运;麦小红 刊期: 2007年第06期
目的 观察大鼠肢体缺血再灌注后关节软骨中基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达变化,探讨其在关节软骨损伤中的作用.方法 采用Wistar大鼠左后肢缺血再灌注动物模型,动物分为假手术组、缺血8 h组、缺血再灌注后3、7、14、30、60 d组.用免疫组化S-P法测定关节软骨MMP-13和Ⅱ型胶原(COLⅡ)的表达和分布变化,并观察缺血再灌注后胫骨关节软骨光镜和电镜的病理学变化.结果 假手术组及缺血8 h组关节软骨基质较均匀、致密;缺血再灌注组关节软骨表面凹凸不平,软骨基质疏松,骨细胞排列紊乱,以30 d和60 d组为明显.软骨中的MMP-13在缺血再灌注3 d后显著高于假手术组和缺血8 h组(P<0.01),以14 d为高;而COLⅡ却显著低于假手术组和缺血8 h组(P<0.01),呈进行性降低.结论 肢体缺血再灌注后关节软骨内MMP-13表达增多,导致软骨基质中COLⅡ持续降解减少、关节软骨胶原网络结构破坏,可能是断肢再植后关节功能恢复不理想的重要原因之一.
作者:张伟旭;周继红;王成琪;周建伟 刊期: 2007年第06期
目的 研究不同分化程度喉鳞状细胞癌黏膜组织蛋白质组的差异表达.方法 用固相pH梯度双向凝胶电泳分离不同分化程度喉癌黏膜组织总蛋白质,行考马斯亮蓝染色,Image Master 2D软件分析所获得的双向凝胶电泳图谱,找出差异表达的蛋白质点.结果 获得分辨率和重复性均较好的双向凝胶电泳图谱,发现13种蛋白质与喉癌分化密切相关.其中有7种蛋白质在高分化喉癌组织中表达上调,6种蛋白质表达明显下调.结论 利用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离不同分化喉鳞状细胞癌黏膜组织总蛋白质,建立了重复性较强的不同分化喉鳞状细胞癌黏膜组织蛋白质组表达图谱,且两者蛋白质的表达明显不同,可能与喉癌不同分化程度的发病机制有关.
作者:周建荣;魏莲枝;李银平;傅仲学 刊期: 2007年第06期
目的 探讨电子束CT(electron beam computed tomography,EBCT)和超声心动图在先天性心脏病(简称先心病)诊断中的价值.方法 32例经临床及经胸超声心动图(transthoracic echocardiography,TTE)诊断为先心病的患者进行EBCT心血管造影检查,与导管法心血管造影检查和手术结果进行对照.结果 32例患者中,EBCT总体诊断符合率87.5%(28/32),TTE诊断符合率78.1%(25/32).EBCT对心外及大血管与房室连接诊断准确率为96.6%(57/59),明显优于TTE的66.1%(39/59).而TTE对心内畸形的诊断准确率为97.7%(43/44),高于EBCT的81.8%(36/44).EBCT与TTE两者结合,可将诊断准确率提高为96.9%(31/32).结论 EBCT对先天性心脏病有重要的诊断价值,尤其对心外及大血管与房室连接关系诊断准确率较高.将EBCT与TTE检查相结合,可大大提高对各种先心病的诊断准确率.
作者:李可;邹利光;孙清荣;文利;梁开运;廖翠薇 刊期: 2007年第06期
目的 探讨青年与老年结直肠癌的临床病理特征及其与预后的关系.方法 回顾性分析1993年7月至2003年7月收治的68例35岁以下青年结直肠癌患者与322例65岁以上老年患者的临床资料,比较分析其临床表现、病理特征、肿瘤分期、误诊比例和随访结果.结果 青年组患者以腹痛为主,占69.1%(47/68);而老年组则以便血或黏液血便为主,占53.7%(173/322).青年组的肿瘤低分化比例为48.5%,明显高于老年组的20.5%(P<0.01).青年组的肿瘤中晚期(Dukes分期C期+D期)比例为80.9%,明显高于老年组的50.3%(P<0.01).青年组和老年组的误诊率分别为64.7%和14.O%,差异非常显著(P<0.01).青年组3年生存率33.9%,明显低于老年组的67.3%(P<0.01);其中肿瘤低分化患者的3年生存率在青年组和老年组分别为15.6%和43.4%,组间差异显著(P<0.05);中晚期患者的3年生存率在青年组和老年组分别为25.0%和51.2%,差异非常显著(P<0.01).结论 与老年患者相比,青年结直肠癌分化更差,侵袭性更强,且易贻误诊断,预后不良.因此,应充分加强青年结直肠癌的早期诊断.
作者:赵菲;李世拥;于波;安平 刊期: 2007年第06期
目的 应用RNAi技术沉默血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)基因,探讨其对人结肠癌细胞系HCT116裸鼠移植瘤生长及其血管生成的影响.方法 将自行构建的以VEGF基因为靶向表达短发夹状RNA的重组质粒(pAVU6+27-VEGF-siRNA)转染到结肠癌HCT116细胞株中(C组),以空质粒(pAVU6+27)转染为阴性对照(B组),经G418筛选出阳性克隆细胞,未转染质粒的HCT116细胞株为空白对照(A组),建立裸小鼠皮下移植瘤模型.通过测量移植瘤的质量、体积观察移植瘤生长;免疫组化检测瘤组织中VEGF蛋白表达及组织内的微血管密度(microvessel density,MVD)改变.结果 C组肿瘤瘤块的体积(0.169±0.009)cm3和质量(0.192±0.022)g明显小于A、B组(P<0.05).A、B组荷瘤组织中VEGF均表达强阳性,表达位于肿瘤细胞的细胞质及细胞膜上,呈棕黄色.C组荷瘤组织中VEGF呈弱阳性表达,组间差异显著(P<0.05).C组荷瘤组织中MVD明显小于两对照组,组间差异显著(P<0.05).VEGF表达与MVD呈显著正相关(r=0.810,P<0.01).结论 应用RNAi技术沉默VEGF基因能明显抑制人结肠癌细胞系HCT116裸小鼠移植瘤的生长,其机制与其抑制移植瘤中VEGF的表达和瘤组织内血管生成有关.
作者:吕伟;牛婧;张超;刘涛;郝迎学;刘伟;余佩武 刊期: 2007年第06期
通过植入性鞘内药物输注系统(implanted intrathecal drug delivery system,IDDS)进行鞘内给予阿片类药物来治疗顽固性疼痛,是其他镇痛方法无效之后的一种治疗手段[1,2].我科与麻醉科合作,对1例顽固性疼痛患者实施了该治疗,现报告如下.
作者:刘海鹏;杨辉;杨天德;黄其林 刊期: 2007年第06期
目的 探索流感病毒在细胞中培养的适宜条件.方法 采用MEK细胞、FRhK-4细胞、MDCK细胞分别接种甲型流感病毒H1N1型、H3N2型和乙型流感病毒疫苗毒株,观察3种毒株在不同培养条件下的细胞病变、血凝滴度.结果 3株流感病毒接种细胞在33℃培养72 h后出现拉网、圆缩、脱落等现象;FRhK-4细胞和MDCK细胞对流感病毒较敏感.胞龄为48 h的细胞,在NaHCO3的终浓度为1.4%o,TPCK-胰酶浓度为1.0μg/ml的病毒维持液培养流感病毒为适条件.结论 寻找到了细胞流感病毒的适宜条件.
作者:范东瀛;陈俊英;张新文;李卫东;廖国阳 刊期: 2007年第06期
目的 检测移植肝组织浸润淋巴细胞的免疫表型,分析不同表型淋巴细胞数量及其分布与并发症的关系.方法 应用CD8、CD4、CD3、CD20、CD45RO及CD45RA单抗对108例次移植肝活检组织进行免疫组化染色,对比形态学观察,分析不同区域浸润淋巴细胞的免疫表型.结果 排斥组62例次,非排斥组46例次.排斥组汇管区CD3+、CD8+、CD20+细胞浸润程度均显著高于非排斥组(P<0.01),两组间各型淋巴细胞在小叶内浸润程度均无显著差异(P>0.05).排斥反应组中,CD8+细胞浸润程度显著高于CD4+细胞(P<0.05).排斥组CD3+、CD8+、CD45RO+细胞胆管或血管浸润率显著高于非排斥组(P<0.01).排斥组中,汇管区CD8+和CD45RO+细胞浸润程度与排斥反应组织学分级显著相关(r值分别为7.481,9.103,P<0.01).结论 移植肝活检组织中淋巴细胞免疫学分型对排斥反应的诊断和鉴别诊断具有一定的指导意义.
作者:程龙;阎晓初;杨占宇;章容;段光杰;杨智清;许森林 刊期: 2007年第06期
目的 观察pshRNA-survivin在体内是否能抑制卵巢癌移植瘤体的生长.方法 建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,瘤内注射pshRNA-survivin,观察肿瘤生长情况.半定量RT-PCR、免疫组织化学检测移植瘤的survivin表达情况,TUNEL检测移植瘤的细胞凋亡情况.结果 pshRNA-survivin能明显抑制肿瘤组织中survivin的表达,促进肿瘤细胞的凋亡,减缓肿瘤生长速度.结论 pshRNA-survivin明显抑制了卵巢癌裸鼠移植瘤的增殖.
作者:陈莹;钟玲;王勇;邓凯贤 刊期: 2007年第06期