闫润民；卢亦成；于明琨；楼美清；张光霁；朱诚
目的 探讨MUC2反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)抑制人胃癌细胞株SGC7901黏蛋白MUC2的表达及其对癌细胞蛋白水解酶表达的影响.方法 采用脂质体作为载体,将载体与MUC2基因的串联重复区互补,经硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸(ASODN)导入MUC2蛋白高表达的胃癌细胞株SGC7901,采用RT-PCR、流式细胞仪、免疫组织化学等方法检测MUC2 ASODN对胃癌细胞凋亡和蛋白水解酶的表达.结果 RT-PCR结果显示,SGC7901细胞转染MUC2 ASODN 48 h后,MUC2的mRNA表达与对照组相比明显降低(P＜0.01).流式细胞仪分析MUC2 ASODN处理SGC7901细胞48 h后,G0/G1期细胞百分比下降,S期细胞百分比明显增加,且能诱导细胞凋亡,凋亡细胞占4.38%,与对照组比较(P＜0.01).免疫组化S-P法检测转染MUC2 ASODN胃癌细胞、组织蛋白酶D、MMP-2表达显著下降(P＜0.05).结论 MUC2可促进癌细胞产生蛋白水解酶,使用人工合成MUC2 ASODN在体外能有效抑制胃癌细胞株SGC7901蛋白水解酶的表达,并能诱导凋亡.
作者：罗文军；易永芬；张晓艳；林晓 刊期： 2007年第06期
目的 利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白.方法 ①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO.②pDBLeu-Smac/DIABLO诱饵质粒转化酵母MaV203,Western blot检测融合蛋白在酵母中的正确表达,自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度.③对成人肝cDNA文库的筛选.选择能同时激活His、Ura、LacZ 3个报告基因的克隆为阳性,利用回转实验和GST-pull down对阳性克隆进行鉴定.结果 成功构建pDBLeu-Smac/DIABLO载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性,无自激活作用,3AT浓度为25 mmol/L.经回转实验和GST-pull down证实了线粒体促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1之间具有相互作用.结论 Smac/DIABLO可能通过与核受体NR4A1的相互作用来影响核受体NR4A1对细胞生存或者凋亡的调控.
作者：张翠莉；杨晓明；成海恩；刘涛；王应雄 刊期： 2007年第06期
自发性食管破裂(spontaneous rupture of esophagus,SRE)是指由于非外伤性所致的食管全层裂开,常是由于食管内压突然并且迅速增高造成的,又称为Boerhaave综合征.该病发病率低,仅1/6 000[1],但一旦发病,病情进展快,误诊率、病死率均较高,是胸外科临床少见而严重的急症之一.为减少该病误诊率及病死率,提高对自发性食管破裂诊治水平,现总结本院和河南省南阳医学高等专科学校附属医院1990-2004年收治的食管破裂患者的治疗经验,现报告如下.
作者：王会恩；杨军；柳立军；王志康；周绍辉；张华 刊期： 2007年第06期
通过植入性鞘内药物输注系统(implanted intrathecal drug delivery system,IDDS)进行鞘内给予阿片类药物来治疗顽固性疼痛,是其他镇痛方法无效之后的一种治疗手段[1,2].我科与麻醉科合作,对1例顽固性疼痛患者实施了该治疗,现报告如下.
作者：刘海鹏；杨辉；杨天德；黄其林 刊期： 2007年第06期
目的 利用RNA干扰技术,以COX-2为靶基因,构建靶向COX-2基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达质粒并进行鉴定分析.方法 设计、合成1对COX-2编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,经退火形成互补双链,通过定向克隆至质粒pGenesil-1,构建shRNA真核表达载体.转化JM109大肠杆菌,提取质粒进行酶切鉴定和测序分析;RT-PCR和Western blot检测重组表达质粒对COX-2 mRNA和蛋白表达的抑制效果.结果 酶切证实目的DNA定向克隆至载体上,测序分析结果与目的序列相同.RT-PCR和Western blot结果显示,与未转染组比较,pshRNA-COX-2重组表达质粒对β-actin基因无明显影响,而对COX-2有明显抑制作用.COX-2 mRNA和蛋白表达的抑制率分别为66.9%和50.3%.结论 成功构建的靶向干扰COX-2基因重组质粒能够显著抑制COX-2基因表达.
作者：杨义明；刘预；涂植光；张钰倩 刊期： 2007年第06期
尺骨鹰嘴骨折是一种波及肘关节面的常见骨折,如果复位及固定不当,将影响肘关节的活动功能.我院自1999年7月至2005年7月对35例尺骨鹰嘴骨折患者采用重建钢板内固定,并行早期功能锻炼,使骨折愈合和关节功能的恢复有明显效果.
作者：周续祥；李长军；丁培根；刘业 刊期： 2007年第06期
目的 探讨丰富环境刺激及水疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage,HIBD)的干预效应及可能机制.方法 新生7 d龄SD大鼠分为干预组、非干预组及假手术组,干预组又分为丰富环境组、水疗组、丰富环境+水疗组.干预组在HIBD第2天分别予相应干预治疗,持续28 d.以免疫组织化学法检测不同时相点海马CA1区NMDA受体NR1亚单位的表达,并于干预结束后利用Morris水迷宫测试各组学习记忆能力,透射电镜观察海马突触结构.结果 干预28 d,干预组海马CA1区NR1的蛋白表达及学习记忆能力明显高于非干预组,其中丰富环境组、丰富环境+水疗组与假手术组比较无显著性差异(P＞0.05),水疗组仍明显低于假手术组(P＜0.05).透射电镜下,干预组大鼠海马突触后膜致密物(postsynaptic density,PSD)较多,非干预组海马PSD少,结构疏松.结论 丰富环境刺激及水疗有助于新生大鼠HIBD的恢复,其中以丰富环境刺激、丰富环境刺激联合水疗干预效果显著,海马NMDA受体表达变化是其可能的影响机制之一.
作者：刘晓蓉；张雨平 刊期： 2007年第06期
目的 探讨高温与脂多糖(LPS)复合应激大鼠血浆TNF-α、IL-6以及氧自由基MDA含量、SOD活力等指标的变化规律.方法 将雄性SPF级Wistar大鼠分为:常温生理盐水组(C组)、高温生理盐水组(H组)、常温LPS组(L组)、高温LPS组(HL组).HL、L组动物经尾静脉注射LPS 10 mg/kg(浓度为1 mg/ml),H、C组动物经尾静脉注射0.9%NaCl 10 ml/kg.检测动物应激0、40、80、120 min时血浆TNF-α、IL-6、MDA含量及SOD活力的变化.结果 ①HL组于应激40 min时血浆TNF-α、IL-6水平即显著升高,TNF-α峰值(80 min)显著高于其他各组TNF-α水平,IL-6表达水平极度升高,显著高于同时相各组.②应激40 min时HL组动物血浆MDA水平显著升高,SOD活力水平显著下降,与同时相各组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高温与LPS复合应激可能促发、扩大全身炎症反应综合征.
作者：李志梁；赵廷宝；刘宏华 刊期： 2007年第06期
目的 采用RNA干扰抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤中人乳头瘤病毒(human papillomavirus-16,HPV16)E6基因的表达,观察对裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 将HPV16 E6特异性的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)真核表达载体转染到人宫颈癌细胞株CaSki细胞中,经G418筛选,RT-PCR检测E6基因的表达;将细胞接种到BALB/c裸鼠背部皮下,同时将该质粒注射到人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的裸鼠中,观察肿瘤出现时间及体积变化;观察肿瘤组织的病理改变.结果 成功筛选到持续表达E6 siRNA的CaSki细胞,经RT-PCR检测该细胞中HPV16 E6基因表达降低;裸鼠成瘤实验结果显示,处理后的CaSki细胞成瘤能力明显降低,抑瘤率为71.4%;注射质粒进行基因治疗后,裸鼠肿瘤生长受到抑制,肿瘤的体积与质量明显低于CaSki细胞组,差异具有显著性(P＜0.05).病理检查结果显示,经pGensil-CH2处理的肿瘤生长不佳,细胞分裂像少见,组织内有较多坏死区域.结论 沉默CaSki细胞中HPV16 E6基因的表达能明显降低宫癌细胞的成瘤作用.
作者：成海恩；张溢；张翠莉；潘巍巍；石华；易发平；郭风劲；宋方洲 刊期： 2007年第06期
目的 探索流感病毒在细胞中培养的适宜条件.方法 采用MEK细胞、FRhK-4细胞、MDCK细胞分别接种甲型流感病毒H1N1型、H3N2型和乙型流感病毒疫苗毒株,观察3种毒株在不同培养条件下的细胞病变、血凝滴度.结果 3株流感病毒接种细胞在33℃培养72 h后出现拉网、圆缩、脱落等现象;FRhK-4细胞和MDCK细胞对流感病毒较敏感.胞龄为48 h的细胞,在NaHCO3的终浓度为1.4%o,TPCK-胰酶浓度为1.0μg/ml的病毒维持液培养流感病毒为适条件.结论 寻找到了细胞流感病毒的适宜条件.
作者：范东瀛；陈俊英；张新文；李卫东；廖国阳 刊期： 2007年第06期
目的 探讨青年与老年结直肠癌的临床病理特征及其与预后的关系.方法 回顾性分析1993年7月至2003年7月收治的68例35岁以下青年结直肠癌患者与322例65岁以上老年患者的临床资料,比较分析其临床表现、病理特征、肿瘤分期、误诊比例和随访结果.结果 青年组患者以腹痛为主,占69.1%(47/68);而老年组则以便血或黏液血便为主,占53.7%(173/322).青年组的肿瘤低分化比例为48.5%,明显高于老年组的20.5%(P＜0.01).青年组的肿瘤中晚期(Dukes分期C期+D期)比例为80.9%,明显高于老年组的50.3%(P＜0.01).青年组和老年组的误诊率分别为64.7%和14.O%,差异非常显著(P＜0.01).青年组3年生存率33.9%,明显低于老年组的67.3%(P＜0.01);其中肿瘤低分化患者的3年生存率在青年组和老年组分别为15.6%和43.4%,组间差异显著(P＜0.05);中晚期患者的3年生存率在青年组和老年组分别为25.0%和51.2%,差异非常显著(P＜0.01).结论 与老年患者相比,青年结直肠癌分化更差,侵袭性更强,且易贻误诊断,预后不良.因此,应充分加强青年结直肠癌的早期诊断.
作者：赵菲；李世拥；于波；安平 刊期： 2007年第06期
目的 研究在毕赤酵母(Pichia Pastoris)系统中人TALL-1基因的分泌表达,获得具有生物活性的重组TALL-1.方法 将人TALL-1基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用Sac Ⅰ将重组质粒线性化,电转化Pichia Pastoris GS115感受态细胞,筛选阳性整合子并进行甲醇诱导表达,采用MTY对表达产物进行初步的生物活性检测.结果 经过诱导表达条件的优化,人TALL-1在酵母培养基BMMY中实现了分泌表达;免疫印迹和酶联免疫检测结果显示,重组产物可以结合其特异抗体;生物学活性检测证实其可抑制Hela细胞增殖.结论 在毕赤酵母系统中实现了人TALL-1的分泌表达,具有生物学活性的重组TALL-1分子可以用于进一步的结构与功能研究.
作者：王蒙；杨媛；杨峥嵘；李广阔；刘晓红；粟永萍；程天民 刊期： 2007年第06期
目的 探讨棘突椎板回植椎管成形在胸腰椎后路手术的应用价值.方法 将43例患者(椎管内肿瘤患者8例,脑性瘫痪选择性脊神经前后根切断术35例)的带蒂棘突椎板行棘突内面纵形开槽,两侧椎板横形掰开,回植椎管成形.结果 临床随访平均18个月,回植棘突椎板获得骨性融合,脊柱稳定性得到有效的保持,未发现椎管狭窄及椎管疤痕黏连压迫硬膜等手术后并发症.结论 棘突椎板回植椎管成形可满足手术显露的要求,又保持了椎管的完整性,可以有效预防胸腰椎后路手术后疤痕增生黏连对椎管内脊髓神经的压迫.
作者：章凯；吴增晖；尹庆水；夏虹；王智运；麦小红 刊期： 2007年第06期
目的 检测移植肝组织浸润淋巴细胞的免疫表型,分析不同表型淋巴细胞数量及其分布与并发症的关系.方法 应用CD8、CD4、CD3、CD20、CD45RO及CD45RA单抗对108例次移植肝活检组织进行免疫组化染色,对比形态学观察,分析不同区域浸润淋巴细胞的免疫表型.结果 排斥组62例次,非排斥组46例次.排斥组汇管区CD3+、CD8+、CD20+细胞浸润程度均显著高于非排斥组(P＜0.01),两组间各型淋巴细胞在小叶内浸润程度均无显著差异(P＞0.05).排斥反应组中,CD8+细胞浸润程度显著高于CD4+细胞(P＜0.05).排斥组CD3+、CD8+、CD45RO+细胞胆管或血管浸润率显著高于非排斥组(P＜0.01).排斥组中,汇管区CD8+和CD45RO+细胞浸润程度与排斥反应组织学分级显著相关(r值分别为7.481,9.103,P＜0.01).结论 移植肝活检组织中淋巴细胞免疫学分型对排斥反应的诊断和鉴别诊断具有一定的指导意义.
作者：程龙；阎晓初；杨占宇；章容；段光杰；杨智清；许森林 刊期： 2007年第06期
目的 观察不同水平呼气末正压通气(positive end-expiratory pressure,PEEP)对犬额叶脑内血肿颅内高压的影响.方法 18只犬随机分为正常颅压组(Ⅰ组,颅内压＜18 mmHg)、颅压中度增高组(Ⅱ组,颅内压25～40 mmHg)和颅压高度增高组(Ⅲ组,颅内压＞40 mmHg)3组(每组各6只),全麻,气管切开插管,应用肌松剂,机械通气,右额叶脑内注入自体血制成颅内高压模型,PEEP从0开始每次增加3 cmH2O,直到18 cmH2O,每个水平持续20 min,在对侧用光纤颅内压探头监测脑内颅内压(ICP)的变化,记录平均动脉压(MAP)和中心静脉压(CVP)并计算出脑灌注压(CPP).结果 随着PEEP的递增,Ⅰ组颅内压上升,脑灌注压下降;Ⅱ、Ⅲ组颅内压略有下降,但Ⅱ组MAP、CPP上升,而Ⅲ组MAP下降,CPP下降;3组CVP都随PEEP增加而升高,但Ⅲ组上升幅度明显大于另两组(P＜0.01).结论 应用PEEP通气时由于中心静脉压升高、脑静脉回流受阻和血流动力学改变,进而影响ICP和CPP.在正常颅内压状态下,PEEP使颅内压上升,在已有颅内高压存在时,PEEP对颅内压影响不明显,但在重度高颅压情况下,PEEP使CPP明显下降,提示在重度颅内高压需要应用PEEP通气时必须维持MAP,以保证足够的CPP.
作者：闫润民；卢亦成；于明琨；楼美清；张光霁；朱诚 刊期： 2007年第06期
目的 寻求一种简便高效的人子宫内膜上皮细胞和间质细胞分离、纯化与鉴定方法,建立稳定的子宫内膜细胞体外培养体系.方法 简化Ryan等的子宫内膜细胞原代培养方法的取材,分离和培养条件,分离出高纯度的子宫内膜上皮细胞和间质细胞进行体外培养和传代.结果 培养成功的子宫内膜上皮细胞与间质细胞均可稳定传代,体外生长10～50 d,纯度均达90%以上.结论 该方法简便高效,可建立稳定的人子宫内膜细胞体外培养体系.
作者：陈诚；常青；梁志清；艾国平；张丽龙 刊期： 2007年第06期
目的 观察雾化吸入全氟化碳(perfluorocarbon,PFC)及盐酸氨溴素(商品名沐舒坦)对兔急性肺损伤肺组织病理改变、气体交换、TNF-α mRNA及抗氧化方面的影响.方法 用油酸制备兔急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型后,将动物随机分为4组:常规机械通气(A)组、全氟化碳(B)组、沐舒坦(C)组,联合治疗(D)组.分别在ALI前、ALI及ALI后1、2、3、4 h共6个时点观察动脉血气指标的变化,实验结束后取6个不同部位的肺组织做病理切片,取2个不同部位的肺组织做TNF-α mRNA原位杂交,肺组织匀浆检测丙二醛(MDA).结果 D组PaO2及肺静态顺应性(static lung compliance,CLst)高于A组,与B组比较无差异(P＞0.05);D组病理改变轻于A组,原位杂交提示D组TNF-α mRNA原位表达低于A组和B组,自身比较结果显示:背侧肺叶TNF-α mRNA表达高于腹侧肺叶(P＞0.05).D组肺组织匀浆MDA低于A组和B组(P＜0.05).结论 PFC联合沐舒坦雾化吸入能明显改善实验兔ALI肺氧合能力,升高PaO2,改善肺静态顺应性,减少肺组织中的TNF-α mRNA表达及自由基的损害.
作者：黄志坚；李琦；宋鹏；王长征；钱桂生 刊期： 2007年第06期
无痛人工流产常由于子宫颈被牵拉、扩张、负压吸引、刮匙对宫壁的影响,及同时采用快速、短效静脉麻醉药丙泊酚与起效迅速、作用时间短、镇痛作用强的纯阿片受体激动药芬太尼合用,使受术者出现心动过缓、心律紊乱、血压下降,严重者可发生心跳骤停.本研究比较观察了阿托品对无痛人工流产期间心率改变的影响,现报告如下.
作者：王玲英；杨小霖 刊期： 2007年第06期
目的 采用肝血管瘤介入治疗的不同方法,探讨利多卡因在肝血管瘤介入治疗中的价值.方法 将36例肝血管瘤病例分为两组,A组(19例)在动脉栓塞前,先经动脉灌注利多卡因,再将利多卡因与平阳霉素、碘油混合后碘油和药物的乳化剂注人;B组(17例)为对照组,动脉栓塞过程中,不用利多卡因.观察治疗过程中患者的反应和病灶碘油和药物的乳化剂的填充情况.结果 两组中重度不良反应比例不同,利多卡因组为10.5%,对照组为41.2%.病灶碘油和药物的乳化剂的完全填充率利多卡因组为100%,对照组为79.2%.结论 肝血管瘤介入治疗过程中,应用利多卡因可以提高介入治疗的成功率,降低不良反应,取得较好疗效.
作者：陈晓良；周培华；张斌；余俭；龚水根；陈蓉 刊期： 2007年第06期
目的 观察大鼠肢体缺血再灌注后关节软骨中基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达变化,探讨其在关节软骨损伤中的作用.方法 采用Wistar大鼠左后肢缺血再灌注动物模型,动物分为假手术组、缺血8 h组、缺血再灌注后3、7、14、30、60 d组.用免疫组化S-P法测定关节软骨MMP-13和Ⅱ型胶原(COLⅡ)的表达和分布变化,并观察缺血再灌注后胫骨关节软骨光镜和电镜的病理学变化.结果 假手术组及缺血8 h组关节软骨基质较均匀、致密;缺血再灌注组关节软骨表面凹凸不平,软骨基质疏松,骨细胞排列紊乱,以30 d和60 d组为明显.软骨中的MMP-13在缺血再灌注3 d后显著高于假手术组和缺血8 h组(P＜0.01),以14 d为高;而COLⅡ却显著低于假手术组和缺血8 h组(P＜0.01),呈进行性降低.结论 肢体缺血再灌注后关节软骨内MMP-13表达增多,导致软骨基质中COLⅡ持续降解减少、关节软骨胶原网络结构破坏,可能是断肢再植后关节功能恢复不理想的重要原因之一.
作者：张伟旭；周继红；王成琪；周建伟 刊期： 2007年第06期
第三军医大学学报杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学
