王咏;肖颖彬
目的探讨多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1, Mrp1)在梗阻性黄疸大鼠胆红素代谢中的作用.方法将80只Wistar大鼠完全随机分为假手术组(sham operation, SHAM)、胆总管结扎组(common bile duct ligation, CBDL)、胆流复通组(bile reflow, REF),测定各时相点血清前白蛋白(prealbumin, PA)、总胆红素(DBIL)以及尿样直接胆红素(DBIL),采用RT-PCR和间接法免疫荧光染色分别在基因转录、蛋白表达及细胞膜定位上检测mrp1在大鼠肝组织中的表达情况.结果 CBDL术后PA迅速下降(P<0.01);TBIL在CBDL术后急剧升高(P<0.01),峰值出现在术后7 d,然后水平有所回落,尿中DBIL在梗阻期间一直上升(P<0.05);复通术后上述指标逐步好转,至术后7 d接近或已达到正常水平;mrp1 mRNA水平随着梗阻时间的延长明显升高,在梗阻解除后仍处于较高水平,免疫荧光结果显示Mrp1定位表达于肝细胞膜上,变化规律与mRNA一致(P<0.05).结论在梗阻性黄疸以及梗阻解除早期,Mrp1介导了胆红素的排泄.
作者:祝建勇;陈应果;别平 刊期: 2006年第08期
目的研究丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑超微结构的影响.方法大鼠分为缺氧缺血组及丰富环境干预组,干预组予早期抚触和丰富环境刺激共28 d,利用透射电镜观察两组大鼠海马神经元超微结构、神经丝及突触情况.结果缺氧缺血组海马神经细胞固缩改变,线粒体肿胀,神经丝数量减少,排列稀疏,突触数量减少,突触间隙增宽,突触囊泡减少,突触后致密物变薄.干预组海马神经元和突触无明显异常.结论早期抚触及丰富环境刺激可以促进缺血缺氧的脑组织超微结构恢复,脑组织神经网络重建及脑的可塑性增加是其可能的机制之一.
作者:于若谷;赵聪敏;王丽雁;张雨平;温恩懿 刊期: 2006年第08期
自20世纪80年代后期,由于贫困、流动人口和耐药等因素,结核病的发病率和死亡率在全球范围内出现回升,再次成为各国关注的公共卫生问题.我国结核感染率为44.5%,患病率为346/10万,死亡率为9.8/10万,每年大约有13万人死于结核病,结核病已成为我国农村因病致贫、因病返贫的主要疾病之一[1].本研究将利用地理信息系统(geographic information system, GIS)技术,采用空间自相关、空间关联等空间统计分析技术探索重庆市黔江区的结核病发病的空间分布规律,为结核病的预防、医疗保健和卫生决策提供理论依据.
作者:王红光;王文昌;彭斌;张彦琦;王润华;易东 刊期: 2006年第08期
目的研究IGF-1、bFGF对人牙髓干细胞分化的影响.方法酶消化法获得人牙髓干细胞,形态学观察,计算细胞克隆形成率;第3代牙髓干细胞,以IGF-1、bFGF细胞因子诱导,免疫组化染色和RT-PCR方法检测牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein, DSP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1, DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein, DSPP)的mRNA的表达.结果人牙髓干细胞呈集落状生长,在体外具有一定的克隆形成能力,经细胞因子刺激后细胞表达DSP、DMP-1蛋白和DSPP的mRNA.结论人牙髓组织中有呈克隆样生长的成体干细胞,IGF-1、bFGF可诱导人牙髓干细胞定向分化.
作者:胡静;谭颖徽;何飞;张萍 刊期: 2006年第08期
目的研究野生型INK4a基因转染对人肺腺癌A549细胞放疗敏感性的调控.方法利用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将含有人全长野生型INK4a cDNA的真核表达重组质粒pcDNA3.1-p16导入该基因位点缺失的人肺腺癌A549细胞系中,确定其编码蛋白p16稳定表达;在设立空白组和空质粒转染组的情况下,检测分析放射线对A549细胞的克隆形成率和杀伤效率的影响.结果转染INK4a基因后的细胞与未转染及空质粒转染的细胞相比:肿瘤细胞S期和G2/M期的比例下降,G0/G1期的比例增加,生长减慢,凋亡指数增加,放射线处理后克隆形成率减少,50%抑制剂量(ID50)略有降低.结论 INK4a基因转染增强了肺腺癌A549细胞对放射线的敏感性,为将来肺癌患者基因治疗提供了一定的实验依据.
作者:陈忠华 刊期: 2006年第08期
目的应用二维凝胶电泳对SD大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织的蛋白进行初步分析.方法分离大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织,以对侧眼视网膜组织为对照,经样本初处理后,进行二维凝胶电泳和凝胶银染色,然后分析电泳图谱,观察蛋白的分离效果,对比、分析其表达蛋白质点的差异,寻找SD大鼠视网膜中与慢性高眼压相关的蛋白质.结果用化学裂解法结合超声波粉碎,可以裂解视网膜神经组织,使其大部分蛋白质得到溶解,成功建立对大鼠青光眼慢性高眼压眼及对照眼视网膜组织进行样本处理、二维凝胶电泳的基本方法和条件,得到两组视网膜组织的二维凝胶电泳图谱.各组织蛋白在小胶上均能显示120~290个左右的斑点.两组视网膜组织的凝胶图谱呈现出9个斑点的差异.结论二维凝胶电泳可以有效分离、显示视网膜特异表达蛋白质.通过双向电泳,我们发现SD大鼠视网膜蛋白质表达与对照眼相比有质和量的差异.
作者:崔馨;贺翔鸽;许建涛;马建洲;熊仁平 刊期: 2006年第08期
随着现代道路交通的发展,头颈部外伤有增多趋势,而且患者往往是多发伤,通过急诊程序要先处理颅脑外伤,或者要处理明显的脊椎和四肢伤,往往忽略了颌面部创伤的一期处理[1].而颌面创伤中以下颌骨骨折多见,因而陈旧性下颌骨骨折成为颌面外科的常见病.尽快地恢复患者的各项功能与骨折的复位有赖于术前对骨折的准确影像学诊断.近年来,随着各种影像设备的引进,常规X线平片、二维CT和三维CT在颌骨骨折的检查中已较为广泛地应用.现将我科近年来就诊的下颌陈旧性骨折影像学检查作一分析.
作者:杨光玉;张纲 刊期: 2006年第08期
目的考察卡铂经微囊化后的小鼠体内组织分布情况.方法小鼠单剂量静脉注射32.5 mg/kg卡铂-乳酸/羟基乙酸共聚物微囊混悬液或卡铂原料药溶液后,等离子体原子发射光谱法测定0.083~48 h心、肝、脾、肺和肾脏的卡铂浓度.结果与卡铂原料药相比,卡铂微囊化后在肺脏的药物峰浓度增加为1.76倍,药物分布百分率保持较高水平(32.97%~45.59%);而心脏和肾脏中的药物峰浓度降低、药-时曲线下面积减小.结论小鼠静脉注射微囊化卡铂后,肺脏的药物浓度和分布百分率均较高,呈明显的肺靶向和缓释双重效应.
作者:应懿;周世文;汤建林;黄永平;徐颖 刊期: 2006年第08期
乳腺手术选择胸段硬膜外麻醉(thoracic epidural anesthesin, TEA)仍是基层医院常用的麻醉方法,本研究旨在观察乳腺手术应用0.375%罗哌卡因+芬太尼0.1 mg行TEA的效果.
作者:李剑 刊期: 2006年第08期
腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy, LC),是目前治疗单纯胆囊疾病的主要手术方式之一.随着人口老龄化的进一步加重,老年胆道疾病患者的比例逐渐增加.由于老年患者有其独特的生理特点,常伴有其他生理系统的疾病,围手术期护理不当,可发生严重并发症.因此,针对老年腹腔镜胆囊切除术并存其他疾病围手术期的护理值得进一步研究.现总结388例60岁以上并存疾病的老年LC患者护理经验,报告如下.
作者:谭平;段敏 刊期: 2006年第08期
目的观察基质金属蛋白酶-2 在兔颈动脉内膜损伤后动脉粥样硬化斑块中的表达.方法高脂喂养加气体干燥术建立兔颈动脉内膜损伤模型,将实验动物分为正常饲料组;高脂饲料组;高脂饲料加气体干燥术后1个月组,2个月组,3个月组.用免疫组织化学法检测各组的金属蛋白酶-2 表达情况.结果 MMP-2 在普通饲料组兔颈动脉组织中低水平表达;在高脂喂养组和高脂喂养加气体干燥术组兔颈动脉组织中表达水平升高,两组有非常显著的差异(P<0.01),且高脂加气体干燥组1个月组与2个月组,1个月组与3个月组有非常显著的差异(P<0.01),2个月组与3个月组有显著差异(P<0.05).高脂组1个月组与3个月组有显著差异(P<0.05).结论 MMP-2 随着兔颈动脉内膜损伤后时间的延长,动脉粥样硬化斑块的生长表达增多.
作者:赵瑾;迟路湘;陈德英 刊期: 2006年第08期
目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)和γ-干扰素(IFN-γ)引起的原代培养胰岛细胞凋亡与A20蛋白表达变化以及牛磺酸对其影响.方法用体外单层培养的方法,培养Wistar大鼠胰岛细胞,采用流式细胞仪、DNA电泳、放射免疫法及其RT-PCR等分别观察IL-1β、TNF和 IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中胰岛素分泌以及A20蛋白表达的影响,并进一步观察牛磺酸的作用.结果流式细胞仪分析显示IL-1β、TNF和 IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率增加(从3.5%增加到30.2%),DNA明显片段化,同时胰岛素分泌明显降低(P<0.01), 而A20蛋白无表达;牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用(P<0.01).结论牛磺酸能够改善细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡,其机制可能与促进A20蛋白表达有关.
作者:余华荣;周琴;董毅龙;张能;周岐新 刊期: 2006年第08期
目的建立大鼠急性乙醇中毒昏迷模型,观察orexin-A对昏迷动物的促醒作用.方法取成年雌性SD大鼠74只,分别通过腹腔注射乙醇的方法建立大鼠急性乙醇中毒昏迷实验模型.通过翻正反射判断大鼠意识状态的改变;通过脑电图判断脑电活动变化.结果给予腹腔注射32%乙醇(14 ml/kg)后,大鼠行为状态和脑电图变化符合昏迷诊断标准.同对照组比较,高剂量orexin-A治疗组(7.70 nmol/kg)大鼠翻正反射消失持续时间明显缩短,行为觉醒改变较为显著,而低剂量治疗组(3.85 nmol/kg)行为变化不明显.此外,给予高剂量orexin-A可引起大鼠脑电活动改变,同给药前比较,δ波显著减少.结论侧脑室使用orexin-A对昏迷大鼠具有促醒治疗作用.
作者:贾晓军;王艳芳;赵红梅;谌小维;张春青;胡志安 刊期: 2006年第08期
人类微小病毒B19(human parvovirus B19,HPVB19)能引起骨髓衰竭,主要抑制红细胞系统克隆形成,导致红细胞发育不良,并可引起再障危象和各种溶血性贫血[1].HPVB19在急性造血停滞和再障患者的检测先后有报道,但在儿童白血病的检测少见报道.本研究对本院99例急性白血病(acute leukemia,AL)患儿进行了HPVB19 IgM检测,并分析了阳性患者的一般临床特征及心肌酶谱特点,报告如下.
作者:苏庸春;于洁;徐酉华;张渝美;陈启雄 刊期: 2006年第08期
目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在人增生性瘢痕成纤维细胞转分化中的作用.方法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别给予不同剂量CTGF刺激(10 ng/ml),以及CTGF ASODN转染,48 h后用Western blot方法比较各组间α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化.结果刺激48 h后,对照组表达少量α-SMA蛋白;小剂量CTGF刺激组和大剂量CTGF 刺激组作用48 h后,α-SMA表达量均显著增多,且成浓度依赖性变化(P<0.01);而CTGF ASODN转染组α-SMA蛋白表达与对照组比较明显减少(P<0.05).结论 CTGF在体外能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast ,MyoF)的转分化,阻断或者抑制其表达可能将更有效的治疗瘢痕挛缩.
作者:李喆;李世荣;刘剑毅;戴霞;陈康;陶灵 刊期: 2006年第08期
目的制备小鼠IFNγ-TAT, 为TAT影响IFN体内分布等研究作准备.方法采用RT-PCR扩增编码mIFNγ的cDNA序列, 经3轮PCR扩增编码mIFNγ-TAT片段,克隆到质粒pUC19, 测序鉴定正确后构建到pQE80L表达质粒载体中,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后1.2% 琼脂糖凝胶电泳鉴定;利用SDS-PAGE和Western blot检测表达的目的蛋白.结果 PCR扩增得到编码mIFNγ-TAT的cDNA片段,测序结果正确, SDS-PAGE和Western blot分析显示重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达.结论成功制备了TAT修饰的小鼠IFNγ,为进一步实验室研究奠定了基础.
作者:胡大强;何凤田;郑英如;李蓉芬;高会广;龚薇;黄刚 刊期: 2006年第08期
对牙髓及根尖周病,根管治疗(root canal therapy, RCT)被认为是佳的治疗方法,但在我国由于RCT的开展与普及较晚,干髓术和塑化治疗长期用于后牙的髓病治疗.近年来,干髓治疗失败病例越来越多见.为此,本研究对临床上干髓治疗失败、需再治疗的病例进行分析,探讨干髓治疗失败的原因,及采用RCT再治疗中根管扩通问题.
作者:宁放;杜越英 刊期: 2006年第08期
目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础.方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高效原核表达载体pQE-80L;以IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白;后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性.结果经一步反向PCR扩增后均得到459 bp的DNA片段,经测序分析表明分别为sBAFF 第146位半胱氨酸残基点突变为甘氨酸和丝氨酸的序列,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达.活性检测证实其能明显刺激B淋巴细胞系Raji细胞增殖,与正常sBAFF相比,置换为丝氨酸后活性升高,置换为甘氨酸后活性无明显改变.结论在原核表达时,通过置换146位半胱氨酸为丝氨酸可明显提高sBAFF的活性,为进一步探讨sBAFF的功能机制奠定了基础.
作者:黄刚;何凤田;李蓉芬;高会广;陈麟凤;张立;胡大强 刊期: 2006年第08期
1 临床资料病例1,男性,23岁.因发现左肾积水行左肾导管置入术后半年就诊,无癫痫发作史.查体:智力正常,双侧颊部及颏部散在红褐色丘疹,呈蝶形分布.超声检查:双肾形态不规则,左肾实质区可见数个偏强回声团,其中一个大小为1.0 cm × 1.0 cm;右肾实质区可见多个偏低回声团,形态欠规则,内部回声杂乱并可见散在分布的团状强回声,大一个大小为3.4 cm × 3.1 cm,异常区内血流较丰富;双肾实质内另可见数个无回声区.左肾肾盂肾盏可见少量液性暗区及大小为0.6 cm × 0.4 cm强回声团,后方伴声影,右肾肾盂肾盏区未见明显异常回声.膀胱壁增厚不光滑,其内可见一个大小为1.9 cm × 1.2 cm强回声团,后方伴声影.左肾肾盂、左输尿管及膀胱内可见管道样强回声.超声诊断:双肾多发性血管平滑肌脂肪瘤并囊肿(结节性硬化症),左肾结石并积水,膀胱结石.
作者:白新艳;张民 刊期: 2006年第08期
目的探讨压力负荷性心肌肥厚过程中过氧化体增殖物激活型受体-γ(PPAR-γ)配体-罗格列酮钠对肥厚心肌中炎性反应的影响.方法采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷大鼠心肌肥厚模型. 分组:对照组(C组)、假手术-生理盐水组(S-组)、假手术-罗格列酮组(S+组)、心肌肥厚-生理盐水组(H-组)、心肌肥厚-罗格列酮组(H+组).罗格列酮组:于术后4周用罗格列酮钠生理盐水溶液(4 ml·kg-1·d-1)腹腔注射1周;生理盐水组:于术后4周用生理盐水腹腔注射1周(1 ml*kg-1*d-1).术后5周测定心肌肥厚指数及血液动力学指标;放免法检测左心室肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板活化因子(PAF),以及髓过氧化物酶(MPD)含量;逆转录聚合酶链反应法检测心肌中过氧化体增殖物激活型受体(PPAR-γ)mRNA的表达;EMSA法检测核因子-κB(NF-κB)活性.结果术后5周手术组左心室心肌明显肥厚;心肌中TNF-α、PAF、MPD含量增高(P<0.01);罗格列酮干预能显著降低肥厚心肌中TNF-α、PAF、MPD的含量(P<0.01) ,但仍高于对照组水平(P<0.01).罗格列酮组PPAR-γmRNA的表达明显增高(P<0.01).心肌肥厚组NF-κB活性明显增强(P<0.01),罗格列酮能减轻NF-κB的激活(P<0.01). 结论压力负荷增加引起心肌肥厚,肥厚心肌组织中NF-κB激活明显增强,TNF-α、PAF、MPD表达升高,这一明显增强的炎症反应能被PPAR-γ人工合成配体罗格列酮钠所抑制.
作者:王咏;肖颖彬 刊期: 2006年第08期