学术投稿

大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织的二维凝胶电泳分析

崔馨;贺翔鸽;许建涛;马建洲;熊仁平

关键词:二维凝胶电泳, 大鼠, 高眼压, 视网膜
摘要:目的应用二维凝胶电泳对SD大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织的蛋白进行初步分析.方法分离大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织,以对侧眼视网膜组织为对照,经样本初处理后,进行二维凝胶电泳和凝胶银染色,然后分析电泳图谱,观察蛋白的分离效果,对比、分析其表达蛋白质点的差异,寻找SD大鼠视网膜中与慢性高眼压相关的蛋白质.结果用化学裂解法结合超声波粉碎,可以裂解视网膜神经组织,使其大部分蛋白质得到溶解,成功建立对大鼠青光眼慢性高眼压眼及对照眼视网膜组织进行样本处理、二维凝胶电泳的基本方法和条件,得到两组视网膜组织的二维凝胶电泳图谱.各组织蛋白在小胶上均能显示120~290个左右的斑点.两组视网膜组织的凝胶图谱呈现出9个斑点的差异.结论二维凝胶电泳可以有效分离、显示视网膜特异表达蛋白质.通过双向电泳,我们发现SD大鼠视网膜蛋白质表达与对照眼相比有质和量的差异.
第三军医大学学报杂志相关文献
  • 超声诊断结节性硬化症伴肾血管平滑肌脂肪瘤2例

    1 临床资料病例1,男性,23岁.因发现左肾积水行左肾导管置入术后半年就诊,无癫痫发作史.查体:智力正常,双侧颊部及颏部散在红褐色丘疹,呈蝶形分布.超声检查:双肾形态不规则,左肾实质区可见数个偏强回声团,其中一个大小为1.0 cm × 1.0 cm;右肾实质区可见多个偏低回声团,形态欠规则,内部回声杂乱并可见散在分布的团状强回声,大一个大小为3.4 cm × 3.1 cm,异常区内血流较丰富;双肾实质内另可见数个无回声区.左肾肾盂肾盏可见少量液性暗区及大小为0.6 cm × 0.4 cm强回声团,后方伴声影,右肾肾盂肾盏区未见明显异常回声.膀胱壁增厚不光滑,其内可见一个大小为1.9 cm × 1.2 cm强回声团,后方伴声影.左肾肾盂、左输尿管及膀胱内可见管道样强回声.超声诊断:双肾多发性血管平滑肌脂肪瘤并囊肿(结节性硬化症),左肾结石并积水,膀胱结石.

    作者:白新艳;张民 刊期: 2006年第08期

  • 急性尿潴留大鼠膀胱功能损害与组织结构改变的关系

    目的研究急性尿潴留对大鼠膀胱功能和组织结构损害及其二者的关系.方法健康雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组(C组)及实验组.以2倍于正常膀胱容量生理盐水过度充盈2 h建立急性尿潴留模型.实验组按充盈2 h(E0组,n=5)、排空后1 h(E1组,n=5)、排空后2 h(E2组,n=5)、排空后3 h(E3组,n=5)、排空后4 h(E4组,n=5)分为5个时相点.测定膀胱容量及大膀胱收缩压;观察膀胱形态学变化和组织细胞凋亡(TUNEL法).结果急性尿潴留后膀胱容量及大膀胱收缩压均降低.E0组膀胱组织表现为轻度炎症反应,细胞凋亡率轻度增加;膀胱排空后(E1-E4组)组织炎症反应明显,以黏膜及黏膜下组织渗出更明显,细胞凋亡率明显增加,明显高于C组和E0组(P<0.01),E1-E4各组无显著差异(P>0.05).结论急性尿潴留后组织炎症渗出及细胞凋亡是膀胱功能改变的结构基础.

    作者:李文刚;方强;李为兵;杨景;宋波;文前军 刊期: 2006年第08期

  • 约氏疟原虫卵囊与唾液腺子孢子不同时相点的CSP与MAEBL基因表达研究

    目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoite protein, CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocyte binding protein, MAEBL)基因表达水平的变化.方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊后5、7、10 d取蚊腹部、12、15、18 d取蚊头胸部分离疟原虫总RNA,以rRNA 28S为对照,通过RT-PCR法半定量分析CSP与MAEBL mRNA表达量.结果蚊期疟原虫子孢子CSP与MAEBL转录显著上调(P<0.01),在侵入唾液腺后达到峰值.结论疟原虫唾液腺子孢子CSP和MAEBL mRNA高水平表达,提示CSP和MAEBL可能与侵入脊椎动物宿主密切相关.

    作者:陈继德;张锡林;段建华;宋蓓 刊期: 2006年第08期

  • 全反式维甲酸脂质体制备及稳定性研究

    目的通过制备不同配方全反式维甲酸脂质体,对处方进行优化.方法采用逆相蒸发法制备全反式维甲酸脂质体,高效液相色谱法检测活性药物含量及包封率,并进行加速试验检测其初步稳定性.结果 3组全反式维甲酸脂质体包封率分别为33.98%、42.11%、70.34%,各配方稳定性好,冻干前后及0 ℃、25 ℃、40 ℃放置后活性药物含量无显著改变.结论全反式维甲酸脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确.

    作者:张敬如;黄复生;王昆 刊期: 2006年第08期

  • esp1基因上调表达对A549细胞凋亡影响的研究

    目的观察A549细胞转染esp1基因后细胞凋亡情况.方法将含esp1 基因的IRE-EGFP 质粒用FuGENE 6 脂质体转染到肺腺癌细胞A549,经G418 筛选获得转染阳性的细胞系,检测转染细胞染色体数目及利用Annexin-V和TUNNEL 试剂盒检测细胞凋亡的变化.结果 A549细胞转入esp1基因后染色体异常分裂象减少,转染后细胞增殖减少,而去血清培养诱导的凋亡增加.结论 esp1的上调表达不仅对于肿瘤的异常染色体分裂象以及肿瘤细胞的异常增殖有一定的抑制作用,且对A549 细胞的凋亡有促进作用.

    作者:刘丽莎;刘昕 刊期: 2006年第08期

  • 干髓治疗失败再治疗中的根管扩通处理

    对牙髓及根尖周病,根管治疗(root canal therapy, RCT)被认为是佳的治疗方法,但在我国由于RCT的开展与普及较晚,干髓术和塑化治疗长期用于后牙的髓病治疗.近年来,干髓治疗失败病例越来越多见.为此,本研究对临床上干髓治疗失败、需再治疗的病例进行分析,探讨干髓治疗失败的原因,及采用RCT再治疗中根管扩通问题.

    作者:宁放;杜越英 刊期: 2006年第08期

  • 伽玛刀治疗后脑水肿的临床特征和影响因素

    目的探讨伽玛刀治疗后脑水肿发生的临床特征和影响因素.方法回顾有随访资料经伽玛刀治疗患者365例.通过描述性研究,先确定伽玛刀治疗后脑水肿一些临床特征.然后采用χ2检验和Logistic回归分析从以下变量中确定脑水肿发生的影响因素:年龄、性别、KPS、靶周水肿情况、90%靶病灶容积的边缘剂量、靶病灶部位、靶病灶的平均直径、靶病灶与正常脑组织的关系.结果伽玛刀治疗后1年内脑水肿总的发生率为22.2%,以胶质瘤、动静脉畸形、海绵状血管瘤和脑膜瘤较为多见,多在治疗后2~4个月发生,近半数有症状.有症状者大多使用20%甘露醇加糖皮质激素比单纯使用甘露醇有更好的治疗反应.与脑水肿发生显著相关的因素为病变部位、病灶平均直径和病灶与正常脑组织的关系.结论脑水肿是伽玛刀治疗后的重要并发症,有其特有的规律,病灶本身的特点是其发生的关键.

    作者:沈光建;唐文渊;许民辉;邹咏文;耿明英;李飞鹏 刊期: 2006年第08期

  • 陈旧性下颌骨骨折的影像学分析

    随着现代道路交通的发展,头颈部外伤有增多趋势,而且患者往往是多发伤,通过急诊程序要先处理颅脑外伤,或者要处理明显的脊椎和四肢伤,往往忽略了颌面部创伤的一期处理[1].而颌面创伤中以下颌骨骨折多见,因而陈旧性下颌骨骨折成为颌面外科的常见病.尽快地恢复患者的各项功能与骨折的复位有赖于术前对骨折的准确影像学诊断.近年来,随着各种影像设备的引进,常规X线平片、二维CT和三维CT在颌骨骨折的检查中已较为广泛地应用.现将我科近年来就诊的下颌陈旧性骨折影像学检查作一分析.

    作者:杨光玉;张纲 刊期: 2006年第08期

  • 以多烯紫杉醇为主方案治疗晚期胃癌31例的临床观察

    多烯紫杉醇是一种新型抗癌药物,具有广泛的抗癌活性.临床研究表明紫杉醇是治疗晚期卵巢癌、乳腺癌、肺癌和晚期胃癌的有效药物[1,2].我科应用以多烯紫杉醇为主的联合方案化疗治疗晚期胃癌患者31例,取得了满意的效果.现报告如下.

    作者:李卫;温海燕;蒋又新 刊期: 2006年第08期

  • 结核病发病的空间分析

    自20世纪80年代后期,由于贫困、流动人口和耐药等因素,结核病的发病率和死亡率在全球范围内出现回升,再次成为各国关注的公共卫生问题.我国结核感染率为44.5%,患病率为346/10万,死亡率为9.8/10万,每年大约有13万人死于结核病,结核病已成为我国农村因病致贫、因病返贫的主要疾病之一[1].本研究将利用地理信息系统(geographic information system, GIS)技术,采用空间自相关、空间关联等空间统计分析技术探索重庆市黔江区的结核病发病的空间分布规律,为结核病的预防、医疗保健和卫生决策提供理论依据.

    作者:王红光;王文昌;彭斌;张彦琦;王润华;易东 刊期: 2006年第08期

  • 严重烧伤对SRC-3基因敲除小鼠肝脏NF-κB表达及核转位的影响

    目的研究烧伤对SRC-3基因敲除小鼠转录因子NF-κB表达及核转位的影响.方法以SRC-3基因敲除小鼠为实验组,以野生型小鼠为对照组,以小鼠15%~20%TBSAⅢ度烧伤为实验模型,观察两组在严重烧伤前、烧伤后1、6、12 h肝脏总蛋白NF-κB、IκB-α表达及核蛋白NF-κB转位情况.结果野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中NF-κB各时相点除伤后6 h有所下降外(P<0.05),其余相差不显著,而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中NF-κB有增加的趋势;野生型小鼠致伤后肝脏NF-κB核转位明显增加(P<0.01),6 h达到峰值,而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏NF-κB核转位亦有所增加,但明显低于野生型小鼠(P<0.01);野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中IκB-α表达变化不明显(P>0.05),而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中IκB-α表达伤后1 h明显下降(P<0.01),之后均高于正常(P<0.01).结论严重创伤后SRC-3基因敲除小鼠NF-κB的表达及核转位与野生型小鼠有明显的差异,SRC-3的缺失可能部分抑制了NF-κB对创伤应激的调控作用.

    作者:杜智勇;粟永萍;徐建明;廖岚;冉新泽;李军;王峰超 刊期: 2006年第08期

  • P53和P63蛋白在人骨肉瘤组织及恶性转化细胞株中的表达变化及意义

    目的探讨人骨肉瘤组织及经硫酸镍恶性转化的永生化骨肉瘤样细胞系HOS中P53、P63蛋白的表达及意义.方法采用免疫组织化学S-P法和图像分析技术检测35例骨肉瘤标本、经硫酸镍恶性转化前后的永生化骨肉瘤样细胞系HOS和永生化的人胚成骨细胞系hFOB中P53、P63蛋白的表达.结果 P53、P63在35例骨肉瘤标本中的阳性表达率分别为42.9%、25.7%,不同组织学类型的骨肉瘤标本中阳性表达率无明显差异(P>0.05),P53蛋白和P63蛋白阳性患者与其阴性患者间总生存率比较在统计学上差异无显著性(P>0.05);在正常对照的人胚成骨细胞系hFOB中P53蛋白未见明显表达,P63蛋白表达呈弱阳性,未转化的HOS细胞株中可见P53、P63表达,而经硫酸镍恶性转化的HOS细胞株中P53、P63表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 P63蛋白及突变型P53蛋白的过表达在硫酸镍诱导的HOS细胞株恶性转化过程中起重要作用,是骨肉瘤发生早期的重要分子事件.

    作者:李懿;孟刚;郭乔楠 刊期: 2006年第08期

  • 结缔组织生长因子体外促进人增生性瘢痕成纤维细胞转分化的研究

    目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在人增生性瘢痕成纤维细胞转分化中的作用.方法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别给予不同剂量CTGF刺激(10 ng/ml),以及CTGF ASODN转染,48 h后用Western blot方法比较各组间α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化.结果刺激48 h后,对照组表达少量α-SMA蛋白;小剂量CTGF刺激组和大剂量CTGF 刺激组作用48 h后,α-SMA表达量均显著增多,且成浓度依赖性变化(P<0.01);而CTGF ASODN转染组α-SMA蛋白表达与对照组比较明显减少(P<0.05).结论 CTGF在体外能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast ,MyoF)的转分化,阻断或者抑制其表达可能将更有效的治疗瘢痕挛缩.

    作者:李喆;李世荣;刘剑毅;戴霞;陈康;陶灵 刊期: 2006年第08期

  • IGF-1、bFGF对人牙髓干细胞的体外诱导分化的影响

    目的研究IGF-1、bFGF对人牙髓干细胞分化的影响.方法酶消化法获得人牙髓干细胞,形态学观察,计算细胞克隆形成率;第3代牙髓干细胞,以IGF-1、bFGF细胞因子诱导,免疫组化染色和RT-PCR方法检测牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein, DSP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1, DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein, DSPP)的mRNA的表达.结果人牙髓干细胞呈集落状生长,在体外具有一定的克隆形成能力,经细胞因子刺激后细胞表达DSP、DMP-1蛋白和DSPP的mRNA.结论人牙髓组织中有呈克隆样生长的成体干细胞,IGF-1、bFGF可诱导人牙髓干细胞定向分化.

    作者:胡静;谭颖徽;何飞;张萍 刊期: 2006年第08期

  • 股骨峡部髓腔与全髋置换术中假体选择的关系

    目的探讨股骨峡部髓腔大小对全髋关节置换术股骨假体选择的影响及意义.方法测量分析初次全髋关节置换术患者影像学资料,采用实验-对照方法分析比较峡部髓腔预测股骨假体型号的一致性和准确性.结果峡部髓腔预测型号与实际型号之间存在较高符合率(80%)和良好相关性(r=0.77),两组数据之间无明显差异(P=0.083>0.05).实验组与对照组预测假体型号之间无明显差异(P=0.14>0.05).结论峡部髓腔大小与股骨假体选择之间存在密切联系.利用峡部髓腔预测股骨假体型号可以作为假体型号选择的重要参考.

    作者:吴波;杨柳 刊期: 2006年第08期

  • 甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响

    目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础.方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高效原核表达载体pQE-80L;以IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白;后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性.结果经一步反向PCR扩增后均得到459 bp的DNA片段,经测序分析表明分别为sBAFF 第146位半胱氨酸残基点突变为甘氨酸和丝氨酸的序列,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达.活性检测证实其能明显刺激B淋巴细胞系Raji细胞增殖,与正常sBAFF相比,置换为丝氨酸后活性升高,置换为甘氨酸后活性无明显改变.结论在原核表达时,通过置换146位半胱氨酸为丝氨酸可明显提高sBAFF的活性,为进一步探讨sBAFF的功能机制奠定了基础.

    作者:黄刚;何凤田;李蓉芬;高会广;陈麟凤;张立;胡大强 刊期: 2006年第08期

  • 整合素β1在人表皮细胞株HaCaT增殖中影响的研究

    目的探讨β1整合素对表皮细胞增殖的影响.方法将重组整合素β1小干扰RNA表达载体(siIntegrin β1)转染到HaCaT细胞株中,应用免疫印迹(Western blotting)方法检测靶基因的抑制情况,应用细胞计数法检测表皮细胞增殖情况.结果重组siIntegrinβ1 转染HaCaT细胞株能够抑制靶基因整合素β1 的表达,抑制细胞增殖.结论在人表皮细胞株HaCaT中抑制整合素β1表达可抑制HaCaT增殖,为进一步研究整合素在表皮细胞中的基因表达调控奠定了基础.

    作者:闫德雄;苏踊跃;唐红英;梁光萍;陈建;罗向东 刊期: 2006年第08期

  • 磁共振胆道成像诊断肝门及肝门周围胆管恶性梗阻的价值

    由于肝门部胆道的复杂结构,引起肝门区恶性胆道梗阻的病变常常难以通过外科手术方式切除,而经皮或经内窥镜进行胆道引流减轻黄疸常成为优选的方法.在许多情况下,采用何种方式进行引流,依赖于胆管狭窄部位的精确定位,并明确其与肝管汇合部的关系,否则难以达到对大部分肝脏充分引流的目的.超声波及螺旋CT(computer tomography)在这方面的作用有限,而经皮肝穿刺胆道造影(percutaneous transhepatic cholangiography, PTC)及ERCP(endoscopic retrograde cholangiopancreatography)是评价胆道解剖好的方法,但要对高度狭窄的胆道内注射造影剂或引流常可能引起严重的并发症.

    作者:吴巨海;俞志坚;商雪林;瞿炳刚 刊期: 2006年第08期

  • 基于小波特征提取的多导联心电图神经网络分类

    目的研究得到高效、快速、高准确率的心电图的分类方法.方法运用Mexican-hat小波检测多导联心电信号的特征点,然后运用径向基函数网络对特征进行分类.结果经过MIT-BIH心电数据库波形试验,并与别的实验比较证明,该方法具有较高准确率,对学习过的波形分类正确率达到100.0%,未学习过的86.6%.结论结合心电图的特点得到高准确率的分类方法.

    作者:冯俊;邱雅竹;莫智文 刊期: 2006年第08期

  • 丰富环境干预后HIBD大鼠脑超微结构改变

    目的研究丰富环境刺激对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑超微结构的影响.方法大鼠分为缺氧缺血组及丰富环境干预组,干预组予早期抚触和丰富环境刺激共28 d,利用透射电镜观察两组大鼠海马神经元超微结构、神经丝及突触情况.结果缺氧缺血组海马神经细胞固缩改变,线粒体肿胀,神经丝数量减少,排列稀疏,突触数量减少,突触间隙增宽,突触囊泡减少,突触后致密物变薄.干预组海马神经元和突触无明显异常.结论早期抚触及丰富环境刺激可以促进缺血缺氧的脑组织超微结构恢复,脑组织神经网络重建及脑的可塑性增加是其可能的机制之一.

    作者:于若谷;赵聪敏;王丽雁;张雨平;温恩懿 刊期: 2006年第08期

第三军医大学学报杂志

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主管:第三军医大学

主办:第三军医大学