吴波;杨柳
目的制备小鼠IFNγ-TAT, 为TAT影响IFN体内分布等研究作准备.方法采用RT-PCR扩增编码mIFNγ的cDNA序列, 经3轮PCR扩增编码mIFNγ-TAT片段,克隆到质粒pUC19, 测序鉴定正确后构建到pQE80L表达质粒载体中,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后1.2% 琼脂糖凝胶电泳鉴定;利用SDS-PAGE和Western blot检测表达的目的蛋白.结果 PCR扩增得到编码mIFNγ-TAT的cDNA片段,测序结果正确, SDS-PAGE和Western blot分析显示重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达.结论成功制备了TAT修饰的小鼠IFNγ,为进一步实验室研究奠定了基础.
作者:胡大强;何凤田;郑英如;李蓉芬;高会广;龚薇;黄刚 刊期: 2006年第08期
目的建立双侧颈总动脉重度狭窄的血管性认知障碍大鼠模型,观察舒降之对其认知功能的改变及对血清中IL-6,CRP影响.方法用正常SD大鼠制作重度颈动脉狭窄模型后,分为舒降之治疗和生理盐水对照,2周后各组进行听觉事件相关电位(P300),血清IL-6,CRP测定.结果舒降之治疗组大鼠 P300潜伏期明显小于对照组(P<0.01)、治疗组血浆IL-6,CRP水平低于对照组(P<0.01).结论舒降之可改善血管性认知障碍大鼠的认知功能,其作用机制可能与其抑制IL-6,CRP合成有关.
作者:冉鸿;陈康宁;黄河清;段炜;柳春雨 刊期: 2006年第08期
目的探讨大鼠梗阻性黄疸时肾脏损伤机制及凋亡相关蛋白表达变化.方法 36只Wistar大鼠分为正常对照组6只和实验组30只,观察梗阻性黄疸(胆总管结扎法)发生后1、3、6、10、14 d肾脏病理变化(HE染色)、细胞凋亡率(TUNEL法)、survivin和bax表达(SABC法)、血浆内毒素含量(鲎法)、SOD活性(黄嘌呤氧化酶法)、MDA含量(硫代巴比妥法)变化.结果实验组肾小管上皮细胞坏死、脱落和细胞聚集现象明显,大鼠肾脏细胞凋亡率显著升高,术后14 d高(25.2±2.8)%;survivin表达显著下降、bax表达显著上升.正常对照组血浆SOD活性和MDA含量分别为(193.6±23.5)U/L和(10.7±1.2)nmol/L,实验组分别呈显著下降和上升趋势.正常对照组血浆内毒素含量为(0.12±0.02)U/ml,实验组显著上升.结论细胞凋亡是梗阻性黄疸时肾功能损伤发生机制之一,保护性凋亡相关蛋白表达下降及促凋亡蛋白表达增高可能是细胞凋亡发生的直接生物学因素,自由基和内毒素水平的增加是肾脏损伤发生的重要血源性因素.
作者:刘祥德;何振平 刊期: 2006年第08期
目的观察A549细胞转染esp1基因后细胞凋亡情况.方法将含esp1 基因的IRE-EGFP 质粒用FuGENE 6 脂质体转染到肺腺癌细胞A549,经G418 筛选获得转染阳性的细胞系,检测转染细胞染色体数目及利用Annexin-V和TUNNEL 试剂盒检测细胞凋亡的变化.结果 A549细胞转入esp1基因后染色体异常分裂象减少,转染后细胞增殖减少,而去血清培养诱导的凋亡增加.结论 esp1的上调表达不仅对于肿瘤的异常染色体分裂象以及肿瘤细胞的异常增殖有一定的抑制作用,且对A549 细胞的凋亡有促进作用.
作者:刘丽莎;刘昕 刊期: 2006年第08期
1 临床资料患者,30岁,2005年10月15日因孕35周,B超提示胎儿Dandy-Walker 综合征,要求引产入院.孕8产3,自然流产4次,均在孕3个月内流产.足月产3次,新生儿均在出生后12 h内死亡.2005-10-08日孕34周在我院行彩色B超检查:双顶径83 mm,头围 288 mm,腹围 256 mm,小脑横径50 mm,侧脑室后角6 mm.胎儿脑部:颅骨呈圆形光环,脑中线居中,双侧脑室对称.两侧丘脑室可见.小脑蚓部未见显示,后颅窝池增宽,间距3.3 mm.胎儿腹部内脏:肝、胃、右肾、膀胱可见.左肾肾窦分离,间距11 mm.脐动脉2条.右手小鱼际旁可见范围17 mm×9 mm的赘生指.胎儿核磁共振(MRI):胎儿大脑实质未见异常信号,脑沟裂增宽,双侧侧脑室体部、颞部、三角区扩大,发育不良,后颅窝扩大,见囊状水样信号,四脑室轻度扩大,与后颅窝囊性信号相通,大幕上抬,小脑蚓部缺如,脑干未见明显异常,中线结构无移位.诊断意见:考虑Dandy-Walker综合征.羊水及脐血染色体检查未发现异常.于2005-10-17日行息隐加米索前列醇引产术,10月19日分娩一男死胎,双手及双足均有6指,共24指,面部外观无畸形.病理检查:① Dandy-Walker 综合征.②多指、趾畸形.
作者:王琳;常青;江露 刊期: 2006年第08期
目的研究野生型INK4a基因转染对人肺腺癌A549细胞放疗敏感性的调控.方法利用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将含有人全长野生型INK4a cDNA的真核表达重组质粒pcDNA3.1-p16导入该基因位点缺失的人肺腺癌A549细胞系中,确定其编码蛋白p16稳定表达;在设立空白组和空质粒转染组的情况下,检测分析放射线对A549细胞的克隆形成率和杀伤效率的影响.结果转染INK4a基因后的细胞与未转染及空质粒转染的细胞相比:肿瘤细胞S期和G2/M期的比例下降,G0/G1期的比例增加,生长减慢,凋亡指数增加,放射线处理后克隆形成率减少,50%抑制剂量(ID50)略有降低.结论 INK4a基因转染增强了肺腺癌A549细胞对放射线的敏感性,为将来肺癌患者基因治疗提供了一定的实验依据.
作者:陈忠华 刊期: 2006年第08期
目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础.方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高效原核表达载体pQE-80L;以IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白;后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性.结果经一步反向PCR扩增后均得到459 bp的DNA片段,经测序分析表明分别为sBAFF 第146位半胱氨酸残基点突变为甘氨酸和丝氨酸的序列,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达.活性检测证实其能明显刺激B淋巴细胞系Raji细胞增殖,与正常sBAFF相比,置换为丝氨酸后活性升高,置换为甘氨酸后活性无明显改变.结论在原核表达时,通过置换146位半胱氨酸为丝氨酸可明显提高sBAFF的活性,为进一步探讨sBAFF的功能机制奠定了基础.
作者:黄刚;何凤田;李蓉芬;高会广;陈麟凤;张立;胡大强 刊期: 2006年第08期
乳腺手术选择胸段硬膜外麻醉(thoracic epidural anesthesin, TEA)仍是基层医院常用的麻醉方法,本研究旨在观察乳腺手术应用0.375%罗哌卡因+芬太尼0.1 mg行TEA的效果.
作者:李剑 刊期: 2006年第08期
目的定量分析P物质(substance P, SP)作用时间对人增生性瘢痕(hypertrophic scar, HS)中肥大细胞(mast cell, MC)组织胺释放的影响,探讨HS中二者的相互作用及作用的时间条件.方法人HS活体组织块切下后立即处理,修剪成0.5~1 mm3大小,测定在相同浓度的SP、不同的SP作用时间下,MC的脱颗粒情况.荧光法测定作用后上清液中组胺含量,计算组胺释放率.结果在HS中,SP以时间依赖方式刺激MC组胺的释放,且HS中SP对MC作用强于正常皮肤.结论 HS中的SP与MC的关系非常密切, 存在作用时间依赖性,有利于研究SP作用与HS的相互作用及作用条件.
作者:陈亮;李世荣;丛林 刊期: 2006年第08期
目的制备可用于外科软组织填充的羟基磷灰石/硅橡胶复合材料,并对其机械性能进行测定与分析,寻求适当的材料配比,以进行下一步生物学检测.方法按共混法制备不同比例的羟基磷灰石/硅橡胶复合物,按国家标准要求对其进行扯断强度、扯断伸长率、永久变形率(3 min)、撕裂强度、硬度(邵氏A)测定,对其机械性能加以评价,并进行统计学分析.结果随着硅橡胶内羟基磷灰石含量的增加,硅橡胶的硬度逐渐提高,各项机械性能逐渐下降.结论当羟基磷灰石比例为30~50份时,机械性能与纯硅橡胶相当,而70份以上则性能下降,不能用于填充.
作者:王科;樊东力;张一鸣 刊期: 2006年第08期
乳头状肺细胞瘤(papillary pneumocytoma) [1],又称肺硬化性血管瘤(sclerosing hemangioma of the lung, SHL)是一种较少见的肺部良性肿瘤,绝大多数发生于女性,由Liebow等于1956年首先报道,后陆续有作者报道,但在组织学起源及肿瘤实质等方面仍存在较大争议.
作者:李杰;张哉根 刊期: 2006年第08期
目的观测犬心的Marshall韧带及冠状窦的结构特点,为研究局灶性房颤提供形态学依据.方法用大体解剖方法观测40例甲醛固定后的犬心Marshall韧带与冠状窦肌桥.结果犬心Marshall韧带起始于冠状窦左端,向上移行于左心耳后缘,经左下肺静脉至心包内面.Marshall韧带长度为(2.61±0.95)cm,宽度为(0.18±0.04)cm,与冠状窦夹角为116°±14°,距左心耳短的距离为(0.58±0.52)cm;冠状窦的长度为(2.84±0.85)cm,宽度为(0.28±0.07)cm,其表面有大量的肌丝,分为环形(47.5%)、纵形(37.5%)和斜形(15%)3种类型,并移行于Marshall韧带表面或左心房.结论 Marshall韧带和冠状窦表面的存在有肌纤维,是左右心房的异常通道之一,犬具备制作局灶性房颤动物模型的解剖学基础.
作者:江丽;党波;李晓燕;申彪;郭志坤;马建军 刊期: 2006年第08期
目的探讨不同营养支持途径在胃肠道肿瘤患者围手术期营养状况及恢复中的作用.方法将51例胃肠道肿瘤且伴有营养不良的患者,行根治性手术后随机分为3组,对照组为术后常规补液5~7 d,肠内营养(EN)组术后早期给予肠内营养支持5~7 d,完全胃肠外营养支持(TPN)组术后采用TPN治疗3~5 d,.并检测术前、术后营养状况指标及患者恢复情况.结果血清总蛋白、白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白水平各项指标中,EN组、TPN组较术前降低,但差异无显著性,对照组术后较术前显著下降(P<0.05).EN组、TPN组患者术后并发症及住院天数均少于对照组.结论术后肠内、外营养支持能够改善胃肠道肿瘤患者营养状况,减少术后并发症的发生、缩短住院天数.术后早期施行EN是安全、可行和有效的.
作者:张军;王严庆;王致天;王子卫 刊期: 2006年第08期
多烯紫杉醇是一种新型抗癌药物,具有广泛的抗癌活性.临床研究表明紫杉醇是治疗晚期卵巢癌、乳腺癌、肺癌和晚期胃癌的有效药物[1,2].我科应用以多烯紫杉醇为主的联合方案化疗治疗晚期胃癌患者31例,取得了满意的效果.现报告如下.
作者:李卫;温海燕;蒋又新 刊期: 2006年第08期
目的考察卡铂经微囊化后的小鼠体内组织分布情况.方法小鼠单剂量静脉注射32.5 mg/kg卡铂-乳酸/羟基乙酸共聚物微囊混悬液或卡铂原料药溶液后,等离子体原子发射光谱法测定0.083~48 h心、肝、脾、肺和肾脏的卡铂浓度.结果与卡铂原料药相比,卡铂微囊化后在肺脏的药物峰浓度增加为1.76倍,药物分布百分率保持较高水平(32.97%~45.59%);而心脏和肾脏中的药物峰浓度降低、药-时曲线下面积减小.结论小鼠静脉注射微囊化卡铂后,肺脏的药物浓度和分布百分率均较高,呈明显的肺靶向和缓释双重效应.
作者:应懿;周世文;汤建林;黄永平;徐颖 刊期: 2006年第08期
目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在人增生性瘢痕成纤维细胞转分化中的作用.方法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别给予不同剂量CTGF刺激(10 ng/ml),以及CTGF ASODN转染,48 h后用Western blot方法比较各组间α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化.结果刺激48 h后,对照组表达少量α-SMA蛋白;小剂量CTGF刺激组和大剂量CTGF 刺激组作用48 h后,α-SMA表达量均显著增多,且成浓度依赖性变化(P<0.01);而CTGF ASODN转染组α-SMA蛋白表达与对照组比较明显减少(P<0.05).结论 CTGF在体外能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast ,MyoF)的转分化,阻断或者抑制其表达可能将更有效的治疗瘢痕挛缩.
作者:李喆;李世荣;刘剑毅;戴霞;陈康;陶灵 刊期: 2006年第08期
目的探讨伽玛刀治疗后脑水肿发生的临床特征和影响因素.方法回顾有随访资料经伽玛刀治疗患者365例.通过描述性研究,先确定伽玛刀治疗后脑水肿一些临床特征.然后采用χ2检验和Logistic回归分析从以下变量中确定脑水肿发生的影响因素:年龄、性别、KPS、靶周水肿情况、90%靶病灶容积的边缘剂量、靶病灶部位、靶病灶的平均直径、靶病灶与正常脑组织的关系.结果伽玛刀治疗后1年内脑水肿总的发生率为22.2%,以胶质瘤、动静脉畸形、海绵状血管瘤和脑膜瘤较为多见,多在治疗后2~4个月发生,近半数有症状.有症状者大多使用20%甘露醇加糖皮质激素比单纯使用甘露醇有更好的治疗反应.与脑水肿发生显著相关的因素为病变部位、病灶平均直径和病灶与正常脑组织的关系.结论脑水肿是伽玛刀治疗后的重要并发症,有其特有的规律,病灶本身的特点是其发生的关键.
作者:沈光建;唐文渊;许民辉;邹咏文;耿明英;李飞鹏 刊期: 2006年第08期
目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoite protein, CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocyte binding protein, MAEBL)基因表达水平的变化.方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊后5、7、10 d取蚊腹部、12、15、18 d取蚊头胸部分离疟原虫总RNA,以rRNA 28S为对照,通过RT-PCR法半定量分析CSP与MAEBL mRNA表达量.结果蚊期疟原虫子孢子CSP与MAEBL转录显著上调(P<0.01),在侵入唾液腺后达到峰值.结论疟原虫唾液腺子孢子CSP和MAEBL mRNA高水平表达,提示CSP和MAEBL可能与侵入脊椎动物宿主密切相关.
作者:陈继德;张锡林;段建华;宋蓓 刊期: 2006年第08期
腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy, LC),是目前治疗单纯胆囊疾病的主要手术方式之一.随着人口老龄化的进一步加重,老年胆道疾病患者的比例逐渐增加.由于老年患者有其独特的生理特点,常伴有其他生理系统的疾病,围手术期护理不当,可发生严重并发症.因此,针对老年腹腔镜胆囊切除术并存其他疾病围手术期的护理值得进一步研究.现总结388例60岁以上并存疾病的老年LC患者护理经验,报告如下.
作者:谭平;段敏 刊期: 2006年第08期
目的探讨多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1, Mrp1)在梗阻性黄疸大鼠胆红素代谢中的作用.方法将80只Wistar大鼠完全随机分为假手术组(sham operation, SHAM)、胆总管结扎组(common bile duct ligation, CBDL)、胆流复通组(bile reflow, REF),测定各时相点血清前白蛋白(prealbumin, PA)、总胆红素(DBIL)以及尿样直接胆红素(DBIL),采用RT-PCR和间接法免疫荧光染色分别在基因转录、蛋白表达及细胞膜定位上检测mrp1在大鼠肝组织中的表达情况.结果 CBDL术后PA迅速下降(P<0.01);TBIL在CBDL术后急剧升高(P<0.01),峰值出现在术后7 d,然后水平有所回落,尿中DBIL在梗阻期间一直上升(P<0.05);复通术后上述指标逐步好转,至术后7 d接近或已达到正常水平;mrp1 mRNA水平随着梗阻时间的延长明显升高,在梗阻解除后仍处于较高水平,免疫荧光结果显示Mrp1定位表达于肝细胞膜上,变化规律与mRNA一致(P<0.05).结论在梗阻性黄疸以及梗阻解除早期,Mrp1介导了胆红素的排泄.
作者:祝建勇;陈应果;别平 刊期: 2006年第08期