学术投稿

P53和P63蛋白在人骨肉瘤组织及恶性转化细胞株中的表达变化及意义

李懿;孟刚;郭乔楠

关键词:骨肉瘤, P53蛋白, p63蛋白, 免疫组织化学
摘要:目的探讨人骨肉瘤组织及经硫酸镍恶性转化的永生化骨肉瘤样细胞系HOS中P53、P63蛋白的表达及意义.方法采用免疫组织化学S-P法和图像分析技术检测35例骨肉瘤标本、经硫酸镍恶性转化前后的永生化骨肉瘤样细胞系HOS和永生化的人胚成骨细胞系hFOB中P53、P63蛋白的表达.结果 P53、P63在35例骨肉瘤标本中的阳性表达率分别为42.9%、25.7%,不同组织学类型的骨肉瘤标本中阳性表达率无明显差异(P>0.05),P53蛋白和P63蛋白阳性患者与其阴性患者间总生存率比较在统计学上差异无显著性(P>0.05);在正常对照的人胚成骨细胞系hFOB中P53蛋白未见明显表达,P63蛋白表达呈弱阳性,未转化的HOS细胞株中可见P53、P63表达,而经硫酸镍恶性转化的HOS细胞株中P53、P63表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 P63蛋白及突变型P53蛋白的过表达在硫酸镍诱导的HOS细胞株恶性转化过程中起重要作用,是骨肉瘤发生早期的重要分子事件.
第三军医大学学报杂志相关文献
  • 大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织的二维凝胶电泳分析

    目的应用二维凝胶电泳对SD大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织的蛋白进行初步分析.方法分离大鼠青光眼慢性高眼压视网膜组织,以对侧眼视网膜组织为对照,经样本初处理后,进行二维凝胶电泳和凝胶银染色,然后分析电泳图谱,观察蛋白的分离效果,对比、分析其表达蛋白质点的差异,寻找SD大鼠视网膜中与慢性高眼压相关的蛋白质.结果用化学裂解法结合超声波粉碎,可以裂解视网膜神经组织,使其大部分蛋白质得到溶解,成功建立对大鼠青光眼慢性高眼压眼及对照眼视网膜组织进行样本处理、二维凝胶电泳的基本方法和条件,得到两组视网膜组织的二维凝胶电泳图谱.各组织蛋白在小胶上均能显示120~290个左右的斑点.两组视网膜组织的凝胶图谱呈现出9个斑点的差异.结论二维凝胶电泳可以有效分离、显示视网膜特异表达蛋白质.通过双向电泳,我们发现SD大鼠视网膜蛋白质表达与对照眼相比有质和量的差异.

    作者:崔馨;贺翔鸽;许建涛;马建洲;熊仁平 刊期: 2006年第08期

  • 胃肠道肿瘤患者围手术期不同营养支持方法的研究

    目的探讨不同营养支持途径在胃肠道肿瘤患者围手术期营养状况及恢复中的作用.方法将51例胃肠道肿瘤且伴有营养不良的患者,行根治性手术后随机分为3组,对照组为术后常规补液5~7 d,肠内营养(EN)组术后早期给予肠内营养支持5~7 d,完全胃肠外营养支持(TPN)组术后采用TPN治疗3~5 d,.并检测术前、术后营养状况指标及患者恢复情况.结果血清总蛋白、白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白水平各项指标中,EN组、TPN组较术前降低,但差异无显著性,对照组术后较术前显著下降(P<0.05).EN组、TPN组患者术后并发症及住院天数均少于对照组.结论术后肠内、外营养支持能够改善胃肠道肿瘤患者营养状况,减少术后并发症的发生、缩短住院天数.术后早期施行EN是安全、可行和有效的.

    作者:张军;王严庆;王致天;王子卫 刊期: 2006年第08期

  • 结核病发病的空间分析

    自20世纪80年代后期,由于贫困、流动人口和耐药等因素,结核病的发病率和死亡率在全球范围内出现回升,再次成为各国关注的公共卫生问题.我国结核感染率为44.5%,患病率为346/10万,死亡率为9.8/10万,每年大约有13万人死于结核病,结核病已成为我国农村因病致贫、因病返贫的主要疾病之一[1].本研究将利用地理信息系统(geographic information system, GIS)技术,采用空间自相关、空间关联等空间统计分析技术探索重庆市黔江区的结核病发病的空间分布规律,为结核病的预防、医疗保健和卫生决策提供理论依据.

    作者:王红光;王文昌;彭斌;张彦琦;王润华;易东 刊期: 2006年第08期

  • 14例胸内Castleman病临床病理学特征分析

    目的探讨胸内Castleman病(CD)的临床病理学特征.方法回顾分析经病理检查确诊的14例胸内Castleman病的组织病理切片与临床资料.结果临床分型,局限型11例,表现为局部淋巴结肿大,多中心型3例,表现为多部位淋巴结肿大.组织病理学分型,透明血管型(HV)9例、浆细胞型(PC)2例,混合型(Mix)3例.所有病例术后均生存,其中11例局限型和2例多中心型CD术后无复发.1例多中心Mix型患者于术后第4年、第9年各复发1次,均再次手术治疗.结论 CD临床诊断很困难,后诊断依赖组织病理学检查.胸内局限型CD和部分多中心型CD经彻底手术可获治愈;部分胸内多中心型CD手术治疗效果不佳,应辅助其他综合治疗.

    作者:王波;周乃康;张竞;梁朝阳;柳曦;田晓东;刘颖 刊期: 2006年第08期

  • 牛磺酸抗细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡与抗凋亡蛋白A20的变化

    目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)和γ-干扰素(IFN-γ)引起的原代培养胰岛细胞凋亡与A20蛋白表达变化以及牛磺酸对其影响.方法用体外单层培养的方法,培养Wistar大鼠胰岛细胞,采用流式细胞仪、DNA电泳、放射免疫法及其RT-PCR等分别观察IL-1β、TNF和 IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中胰岛素分泌以及A20蛋白表达的影响,并进一步观察牛磺酸的作用.结果流式细胞仪分析显示IL-1β、TNF和 IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率增加(从3.5%增加到30.2%),DNA明显片段化,同时胰岛素分泌明显降低(P<0.01), 而A20蛋白无表达;牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用(P<0.01).结论牛磺酸能够改善细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡,其机制可能与促进A20蛋白表达有关.

    作者:余华荣;周琴;董毅龙;张能;周岐新 刊期: 2006年第08期

  • 约氏疟原虫卵囊与唾液腺子孢子不同时相点的CSP与MAEBL基因表达研究

    目的为研究约氏疟原虫在蚊体内发育过程中,卵囊子孢子与唾液腺子孢子不同时相点的环子孢子蛋白(circumsporozoite protein, CSP)与红细胞结合蛋白(erythrocyte binding protein, MAEBL)基因表达水平的变化.方法分别在约氏疟原虫感染斯氏按蚊后5、7、10 d取蚊腹部、12、15、18 d取蚊头胸部分离疟原虫总RNA,以rRNA 28S为对照,通过RT-PCR法半定量分析CSP与MAEBL mRNA表达量.结果蚊期疟原虫子孢子CSP与MAEBL转录显著上调(P<0.01),在侵入唾液腺后达到峰值.结论疟原虫唾液腺子孢子CSP和MAEBL mRNA高水平表达,提示CSP和MAEBL可能与侵入脊椎动物宿主密切相关.

    作者:陈继德;张锡林;段建华;宋蓓 刊期: 2006年第08期

  • 严重烧伤对SRC-3基因敲除小鼠肝脏NF-κB表达及核转位的影响

    目的研究烧伤对SRC-3基因敲除小鼠转录因子NF-κB表达及核转位的影响.方法以SRC-3基因敲除小鼠为实验组,以野生型小鼠为对照组,以小鼠15%~20%TBSAⅢ度烧伤为实验模型,观察两组在严重烧伤前、烧伤后1、6、12 h肝脏总蛋白NF-κB、IκB-α表达及核蛋白NF-κB转位情况.结果野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中NF-κB各时相点除伤后6 h有所下降外(P<0.05),其余相差不显著,而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中NF-κB有增加的趋势;野生型小鼠致伤后肝脏NF-κB核转位明显增加(P<0.01),6 h达到峰值,而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏NF-κB核转位亦有所增加,但明显低于野生型小鼠(P<0.01);野生型小鼠致伤后肝脏总蛋白中IκB-α表达变化不明显(P>0.05),而SRC-3基因敲除小鼠致伤后肝脏总蛋白中IκB-α表达伤后1 h明显下降(P<0.01),之后均高于正常(P<0.01).结论严重创伤后SRC-3基因敲除小鼠NF-κB的表达及核转位与野生型小鼠有明显的差异,SRC-3的缺失可能部分抑制了NF-κB对创伤应激的调控作用.

    作者:杜智勇;粟永萍;徐建明;廖岚;冉新泽;李军;王峰超 刊期: 2006年第08期

  • P物质对增生性瘢痕中肥大细胞组胺释放的影响

    目的定量分析P物质(substance P, SP)作用时间对人增生性瘢痕(hypertrophic scar, HS)中肥大细胞(mast cell, MC)组织胺释放的影响,探讨HS中二者的相互作用及作用的时间条件.方法人HS活体组织块切下后立即处理,修剪成0.5~1 mm3大小,测定在相同浓度的SP、不同的SP作用时间下,MC的脱颗粒情况.荧光法测定作用后上清液中组胺含量,计算组胺释放率.结果在HS中,SP以时间依赖方式刺激MC组胺的释放,且HS中SP对MC作用强于正常皮肤.结论 HS中的SP与MC的关系非常密切, 存在作用时间依赖性,有利于研究SP作用与HS的相互作用及作用条件.

    作者:陈亮;李世荣;丛林 刊期: 2006年第08期

  • 硬膜外芬太尼罗哌卡因合剂用于乳腺癌根治术中的临床效果

    乳腺手术选择胸段硬膜外麻醉(thoracic epidural anesthesin, TEA)仍是基层医院常用的麻醉方法,本研究旨在观察乳腺手术应用0.375%罗哌卡因+芬太尼0.1 mg行TEA的效果.

    作者:李剑 刊期: 2006年第08期

  • 产前诊断Dandy-Walker综合征1例

    1 临床资料患者,30岁,2005年10月15日因孕35周,B超提示胎儿Dandy-Walker 综合征,要求引产入院.孕8产3,自然流产4次,均在孕3个月内流产.足月产3次,新生儿均在出生后12 h内死亡.2005-10-08日孕34周在我院行彩色B超检查:双顶径83 mm,头围 288 mm,腹围 256 mm,小脑横径50 mm,侧脑室后角6 mm.胎儿脑部:颅骨呈圆形光环,脑中线居中,双侧脑室对称.两侧丘脑室可见.小脑蚓部未见显示,后颅窝池增宽,间距3.3 mm.胎儿腹部内脏:肝、胃、右肾、膀胱可见.左肾肾窦分离,间距11 mm.脐动脉2条.右手小鱼际旁可见范围17 mm×9 mm的赘生指.胎儿核磁共振(MRI):胎儿大脑实质未见异常信号,脑沟裂增宽,双侧侧脑室体部、颞部、三角区扩大,发育不良,后颅窝扩大,见囊状水样信号,四脑室轻度扩大,与后颅窝囊性信号相通,大幕上抬,小脑蚓部缺如,脑干未见明显异常,中线结构无移位.诊断意见:考虑Dandy-Walker综合征.羊水及脐血染色体检查未发现异常.于2005-10-17日行息隐加米索前列醇引产术,10月19日分娩一男死胎,双手及双足均有6指,共24指,面部外观无畸形.病理检查:① Dandy-Walker 综合征.②多指、趾畸形.

    作者:王琳;常青;江露 刊期: 2006年第08期

  • 结缔组织生长因子体外促进人增生性瘢痕成纤维细胞转分化的研究

    目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在人增生性瘢痕成纤维细胞转分化中的作用.方法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别给予不同剂量CTGF刺激(10 ng/ml),以及CTGF ASODN转染,48 h后用Western blot方法比较各组间α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化.结果刺激48 h后,对照组表达少量α-SMA蛋白;小剂量CTGF刺激组和大剂量CTGF 刺激组作用48 h后,α-SMA表达量均显著增多,且成浓度依赖性变化(P<0.01);而CTGF ASODN转染组α-SMA蛋白表达与对照组比较明显减少(P<0.05).结论 CTGF在体外能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast ,MyoF)的转分化,阻断或者抑制其表达可能将更有效的治疗瘢痕挛缩.

    作者:李喆;李世荣;刘剑毅;戴霞;陈康;陶灵 刊期: 2006年第08期

  • IGF-1、bFGF对人牙髓干细胞的体外诱导分化的影响

    目的研究IGF-1、bFGF对人牙髓干细胞分化的影响.方法酶消化法获得人牙髓干细胞,形态学观察,计算细胞克隆形成率;第3代牙髓干细胞,以IGF-1、bFGF细胞因子诱导,免疫组化染色和RT-PCR方法检测牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein, DSP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1, DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein, DSPP)的mRNA的表达.结果人牙髓干细胞呈集落状生长,在体外具有一定的克隆形成能力,经细胞因子刺激后细胞表达DSP、DMP-1蛋白和DSPP的mRNA.结论人牙髓组织中有呈克隆样生长的成体干细胞,IGF-1、bFGF可诱导人牙髓干细胞定向分化.

    作者:胡静;谭颖徽;何飞;张萍 刊期: 2006年第08期

  • TAT修饰的小鼠IFNγ的制备

    目的制备小鼠IFNγ-TAT, 为TAT影响IFN体内分布等研究作准备.方法采用RT-PCR扩增编码mIFNγ的cDNA序列, 经3轮PCR扩增编码mIFNγ-TAT片段,克隆到质粒pUC19, 测序鉴定正确后构建到pQE80L表达质粒载体中,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后1.2% 琼脂糖凝胶电泳鉴定;利用SDS-PAGE和Western blot检测表达的目的蛋白.结果 PCR扩增得到编码mIFNγ-TAT的cDNA片段,测序结果正确, SDS-PAGE和Western blot分析显示重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达.结论成功制备了TAT修饰的小鼠IFNγ,为进一步实验室研究奠定了基础.

    作者:胡大强;何凤田;郑英如;李蓉芬;高会广;龚薇;黄刚 刊期: 2006年第08期

  • 急性尿潴留大鼠膀胱功能损害与组织结构改变的关系

    目的研究急性尿潴留对大鼠膀胱功能和组织结构损害及其二者的关系.方法健康雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组(C组)及实验组.以2倍于正常膀胱容量生理盐水过度充盈2 h建立急性尿潴留模型.实验组按充盈2 h(E0组,n=5)、排空后1 h(E1组,n=5)、排空后2 h(E2组,n=5)、排空后3 h(E3组,n=5)、排空后4 h(E4组,n=5)分为5个时相点.测定膀胱容量及大膀胱收缩压;观察膀胱形态学变化和组织细胞凋亡(TUNEL法).结果急性尿潴留后膀胱容量及大膀胱收缩压均降低.E0组膀胱组织表现为轻度炎症反应,细胞凋亡率轻度增加;膀胱排空后(E1-E4组)组织炎症反应明显,以黏膜及黏膜下组织渗出更明显,细胞凋亡率明显增加,明显高于C组和E0组(P<0.01),E1-E4各组无显著差异(P>0.05).结论急性尿潴留后组织炎症渗出及细胞凋亡是膀胱功能改变的结构基础.

    作者:李文刚;方强;李为兵;杨景;宋波;文前军 刊期: 2006年第08期

  • 两例疑为X连锁型视网膜色素变性家系的单倍型分析研究

    目的应用遗传连锁分析方法对X连锁型视网膜色素变性家系进行分析,定位其致病基因的所在位点.方法选取已知X连锁视网膜色素变性候选基因附近的短串联重复序列多态性标记(short tandem repeat polymorphism, STRP),即在RP2、RP3、RP6、RP23和RP24处分别选取具有高信息量的微卫星位标,对2例疑似为X连锁型视网膜色素变性家系进行遗传连锁分析;通过对家系成员的单倍型分析,并进行两点法连锁分析,确定其致病基因所在染色体的大致位置.结果 2例家系在DXS 993处得到的大LOD值分别为:1.18和1.03;在DXS 1068处得到的大 LOD值分别为:0.58和-2.69;在DXS 1214处得到的大LOD值分别为:-2.33和-2.45;在DXS 8051处得到的大LOD值分别为:-2.34和-2.51;在DXS 8043处得到的大LOD值分别为:-2.23和-2.62.结论 ZCF家系的致病基因,可能不在RP3、RP6、RP23或RP24位点;而对于FYJ家系,我们则怀疑致病基因位于RP2位点,但也不排除与RP3连锁;用遗传连锁分析方法对确定致病基因所在染色体的范围起到重要的作用.

    作者:陈翠敏;张晓莉;阴正勤;府伟灵;孟晓红 刊期: 2006年第08期

  • esp1基因上调表达对A549细胞凋亡影响的研究

    目的观察A549细胞转染esp1基因后细胞凋亡情况.方法将含esp1 基因的IRE-EGFP 质粒用FuGENE 6 脂质体转染到肺腺癌细胞A549,经G418 筛选获得转染阳性的细胞系,检测转染细胞染色体数目及利用Annexin-V和TUNNEL 试剂盒检测细胞凋亡的变化.结果 A549细胞转入esp1基因后染色体异常分裂象减少,转染后细胞增殖减少,而去血清培养诱导的凋亡增加.结论 esp1的上调表达不仅对于肿瘤的异常染色体分裂象以及肿瘤细胞的异常增殖有一定的抑制作用,且对A549 细胞的凋亡有促进作用.

    作者:刘丽莎;刘昕 刊期: 2006年第08期

  • 多药耐药相关蛋白1在梗阻性黄疸大鼠肝组织中的表达及意义

    目的探讨多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1, Mrp1)在梗阻性黄疸大鼠胆红素代谢中的作用.方法将80只Wistar大鼠完全随机分为假手术组(sham operation, SHAM)、胆总管结扎组(common bile duct ligation, CBDL)、胆流复通组(bile reflow, REF),测定各时相点血清前白蛋白(prealbumin, PA)、总胆红素(DBIL)以及尿样直接胆红素(DBIL),采用RT-PCR和间接法免疫荧光染色分别在基因转录、蛋白表达及细胞膜定位上检测mrp1在大鼠肝组织中的表达情况.结果 CBDL术后PA迅速下降(P<0.01);TBIL在CBDL术后急剧升高(P<0.01),峰值出现在术后7 d,然后水平有所回落,尿中DBIL在梗阻期间一直上升(P<0.05);复通术后上述指标逐步好转,至术后7 d接近或已达到正常水平;mrp1 mRNA水平随着梗阻时间的延长明显升高,在梗阻解除后仍处于较高水平,免疫荧光结果显示Mrp1定位表达于肝细胞膜上,变化规律与mRNA一致(P<0.05).结论在梗阻性黄疸以及梗阻解除早期,Mrp1介导了胆红素的排泄.

    作者:祝建勇;陈应果;别平 刊期: 2006年第08期

  • T管拔除后胆汁性腹膜炎的处理体会

    在外科手术治疗胆道疾病时,经常在胆道中放置T管引流,拔T管后胆汁性腹膜炎时有发生,若处理不当,后果严重.我们于1995年7月至2005年7月拔T管引起胆汁性腹膜炎9例,现报告如下.

    作者:高峰;李海民;呼延清;刘晓岗 刊期: 2006年第08期

  • 针对老年腹腔镜胆囊切除术并存疾病患者的围手术期护理

    腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy, LC),是目前治疗单纯胆囊疾病的主要手术方式之一.随着人口老龄化的进一步加重,老年胆道疾病患者的比例逐渐增加.由于老年患者有其独特的生理特点,常伴有其他生理系统的疾病,围手术期护理不当,可发生严重并发症.因此,针对老年腹腔镜胆囊切除术并存其他疾病围手术期的护理值得进一步研究.现总结388例60岁以上并存疾病的老年LC患者护理经验,报告如下.

    作者:谭平;段敏 刊期: 2006年第08期

  • 全反式维甲酸脂质体制备及稳定性研究

    目的通过制备不同配方全反式维甲酸脂质体,对处方进行优化.方法采用逆相蒸发法制备全反式维甲酸脂质体,高效液相色谱法检测活性药物含量及包封率,并进行加速试验检测其初步稳定性.结果 3组全反式维甲酸脂质体包封率分别为33.98%、42.11%、70.34%,各配方稳定性好,冻干前后及0 ℃、25 ℃、40 ℃放置后活性药物含量无显著改变.结论全反式维甲酸脂质体制备工艺可行,质量控制方法简单、准确.

    作者:张敬如;黄复生;王昆 刊期: 2006年第08期

第三军医大学学报杂志

第三军医大学学报杂志

主管:第三军医大学

主办:第三军医大学