惠玲；季朝能；蔡文琴；顾少华；应康；谢毅；毛裕民
作者： 刊期： 2005年第05期
目的构建携带反义锌指转录因子2(basic transcription element binding protein 2,BTEB2)基因的重组腺病毒载体并研究BTEB2反义RNA对平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响.方法从培养的大鼠VSMC中提取总RNA,通过RT-PCR制备BTEB2 cDNA,将其反向克隆至腺病毒载体,构建携带反义BTEB2基因的重组腺病毒Ad.ASBTEB2;用Ad.ASBTEB2转染VSMC,通过RT-PCR检测BTEB2反义RNA在VSMC中的表达;经免疫印迹法分析BTEB2反义RNA对BTEB2蛋白质表达的抑制作用;通过MTT比色法和流式细胞仪分别检测BTEB2反义RNA对VSMC增殖及细胞周期的影响.结果构建的重组腺病毒载体经鉴定正确,其滴度为5×10 9/ml;VSMC被重组腺病毒感染后,可检测到BTEB2反义RNA的表达;Ad.ASBTEB2转染可明显抑制VSMC的BTEB2蛋白表达及血清诱导的VSMC增殖,使VSMC出现明显的G0/G期阻滞.结论成功构建了携带反义BTEB2基因的重组腺病毒载体;重组腺病可在VSMC中表达BTEB2反义RNA;BTEB2反义RNA对VSMC增殖有明显的抑制作用.
作者：李德；何国祥；唐波；唐兵 刊期： 2005年第05期
目的利用MRI研究脑出血超早期血肿周围病变的性质并探讨其临床意义.方法对离体脑出血(n=4)和猪脑叶出血模型(n=15)30～60 min和3 h进行MR多序列成像,观察血肿周围组织信号的变化,并结合透射电镜和血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)对伊文思蓝的通透性观察BBB完整性.对2例经CT证实的脑出血患者在发病4、9 h时进行MR检查,分析血肿周围病变的信号特点.结果离体脑出血和猪脑叶出血1 h内其血肿周围在FLIAR和T2WI上均显示存在高信号,3 h时更为明显.猪脑叶出血1 h内和3 h血肿周围ADC值升高;电镜显示周围组织毛细血管基底膜完整,对伊文思蓝无通透性,即无BBB破坏.MRI显示2例脑出血患者血肿周围存在水样信号.结论脑出血超早期MRI所见血肿周围病变,其实质是血肿内血液凝固、血块收缩、血清析出和外渗的结果,而非真正的脑水肿.
作者：王苇；张新江；殷小平；李澄；常丽英；张苏明；姜亚平；方思羽 刊期： 2005年第05期
Cyclin D1基因是近年来提出的重要原癌基因,其基因表达产物在细胞周期关键限速点G1-S转换中起重要正调控作用[1].此外,细胞凋亡的发生及细胞增殖在肝癌的发生发展中也起重要作用[2,3].本研究通过检测cyclin D1表达、细胞凋亡发生和细胞DNA含量,探讨三者与肝癌临床分期之间的关系,为寻找对临床有价值的肿瘤标记物和预后判断提供帮助.
作者：张伟；杜成友；徐尔侃 刊期： 2005年第05期
目的明确肾移植患者术前CMV感染的发生率和术后活动性CMV感染的发生规律.方法检测27例健康成人、以及我院2002年3月至2003年6月138例尿毒症患者肾移植前血清抗CMV抗体(抗CMV-IgG、CMV-IgM);观察肾移植后CMV-pp65抗原血症的动态变化.结果27例健康成人血清抗CMV-IgM均为阴性、抗CMV-IgG的阳性率为70.4%、外周血CMV-pp65(+)白细胞数为0～4个/5×10 4 WBC;尿毒症患者术前CMV-IgG、CMV-IgM阳性率分别为93.5%、7.1%,肾移植后外周血CMV-pp65(+)白细胞数为0～2 280个/5×10 4 WBC(其中＞5者占87.0%)、其高峰期在术后第6～8周.结论肾移植受者术前CMV感染发生率明显高于健康人群,且至少有7.1%存在着活动性CMV感染;肾移植患者术后6个月内,活动性CMV感染发生率高达86.96%;术后第6～8周是活动性CMV感染严重的时期.
作者：王平贤；龚桂芝；张艮甫；黄赤兵；范明齐；冯嘉瑜；肖亚；方针强 刊期： 2005年第05期
目的探讨豚鼠空肠壁内ICCs再生及细胞网络重新形成过程.方法利用手术切断的方法,制造ICCs损伤丢失、网络断裂动物模型,冰冻切片和全层铺片免疫细胞化学染色观察.结果术后30～50 d,断端KIT阳性细胞开始增多;术后70 d左右,KIT阳性细胞在断端形成以正常肠壁为底面,顶端向吻合部位的三角形增生区域,在该区域中部KIT阳性细胞的数量较多,且排列不规则,呈团状,突起较短,胞浆丰富,细胞核较大;而靠近三角形底部的KIT阳性细胞逐渐与肌间神经丛周围和深肌丛附近的ICCs相延续.在术后6个月,近端和远端的肠壁已逐渐恢复延续性,肠壁各层结构基本正常,此时KIT阳性细胞亦趋于恢复正常细胞网络分布模式.结论当肠壁内ICCs及其网络损伤后,ICCs可通过再生恢复正常的细胞网络和分布模式.
作者：梅峰；于彬；马华；张红军；周德山 刊期： 2005年第05期
目的探讨吗啡依赖的SK-N-SH细胞表达神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)及fosB基因的调控机制.方法建立吗啡依赖及戒断细胞模型,体外合成含cAMP反应元件(cAMP response element,CRE)序列的寡核苷酸,经硫代磷酸化修饰,作为单链寡核苷酸(CRE-transcription factor decoy oligodeoxynucleotide,CRE-decoy ODN).分别采用电泳迁移率改变分析(electrophoresis mobility shift assay,EMSA)及RT-PCR技术,检测CRE-decoy ODN对吗啡依赖及纳络酮急性戒断诱导的CREB的DNA结合活性、nNOS及fosBmRNA表达的影响.结果吗啡依赖及纳络酮急性戒断使SK-N-SH细胞的CREB的DNA结合活性、nNOS及fosBmRNA明显升高,CRE-decoy ODN可特异抑制上述指标升高.结论CREB的激活介导了吗啡依赖SK-N-SH细胞的nNOS及fosB mRNA表达上调.
作者：苏彦君；丛斌；张国忠；张瑾；李淑瑾；姚玉霞；付丽红 刊期： 2005年第05期
HBsAg阳性患者手术后的器械上通常都粘有大量血液或组织液,是一种危险的感染源.为了解这些器械在清洗消毒后乙肝病毒(HBV)的残留情况,我科作了较详细的检测,现报告如下.
作者：魏静蓉；陈斌；向国春 刊期： 2005年第05期
目的探讨在腮腺切除手术的同时保留腮腺嚼肌筋膜或用残余的腮腺嚼肌筋膜和胸锁乳突肌瓣修复与重建腮腺嚼肌筋膜屏障,是否能有效预防味觉出汗综合征的发生.方法通过对52例在腮腺切除术中保留、重建腮腺嚼肌筋膜的患者进行术后随访,并采用咀嚼维生素C片诱导及碘-淀粉试验检测,观察术后味觉出汗综合征的发病率.结果在调查的52例患者中,仅有5例患者发现有潮红和出汗现象,较传统腮腺切除术的发病率明显降低.发生率仅为9.61%.结论切除腮腺时,用毗邻肌筋膜瓣预防Frey综合征不仅有显著效果,而且还能纠正面侧部的凹陷畸形.
作者：杨茂进；柴鉴深；陈渝斌 刊期： 2005年第05期
目的克隆人PD-L1的基因,纯化Flp-In CHO系统表达PD-L1蛋白.方法用RT-PCR方法制备PD-L1基因,以哺乳细胞高效表达质粒载体pSec/WG为载体构建重组PD-L1/pSec/WG质粒,重组体用载体上的通用引物为测序引物,鉴定克隆的正确性.再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化转染Flp-In CHO细胞收集上清,G蛋白亲和层析法纯化蛋白.用免疫印迹法鉴定转化细胞所分泌上清的PD-L1基因的表达.结果正确构建了PD-L1/pSec/WG重组质粒,并且在转化细胞所分泌的上清中检测出了PD-L1基因的表达.亲和层析法成功纯化出PD-L1蛋白,分子量为40×10 3.结论成功地构建了PD-L1/pSec/WG重组质粒,纯化出PD-L1蛋白,可进行下一步mAb制备,进一步研究其功能.
作者：毛丽伟；倪兵；姜曼；黎万玲；肖宇；吴玉章 刊期： 2005年第05期
目的观察hnRNP A2/B1在肺癌中的表达,探讨hnRNP A2/B1对肺癌的诊断价值及其与组织类型、临床分期、吸烟的关系.方法采用免疫组织化学染色方法检测41例肺癌、13例非肺癌组织中hnRNP A2/B1的表达情况.结果hnRNP A2/B1免疫组化肺癌组染色阳性率为85.4%(35/41),明显高于非肺癌组30.8%(4/13),两组间有非常显著性差异(P＜0.01).其在胞浆、胞核均有表达,主要在胞浆表达.4种类型肺癌组织均显示hnRNP A2/B1阳性染色,其中鳞癌细胞染色阳性率为86.9%(20/23),较腺癌细胞78.6%(11/14)高,两组间无显著性差异(P＞0.05).Ⅲ-Ⅳ期肺癌hnRNPA2/B1染色阳性率为88.9%(24/27),高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌76.9%(10/13),两组间差异不显著(P＞0.05).有吸烟史组hnRNP A2/B1染色阳性率为80.0%(32/40)明显高于无吸烟史组50.0%(7/14),两组间差异显著(P＜0.05).结论hnRNP A2/B1与肺癌组织类型、临床病理分期无关,但与吸烟密切相关.hnRNP A2/B1检查敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断.
作者：戴晓天；杨和平 刊期： 2005年第05期
目的利用酵母双杂交系统筛选人胎脑组织中能与多巴胺相关转录因子DAT1的LIM2相互作用的蛋白质,以初步了解DAT1的功能.方法构建酵母双杂交诱饵质粒pLexA-LIM2,筛选人胎脑cDNA文库,并用酵母交配试验初步验证.结果获得3个能与DAT1的第2个LIM结构域LIM2结合的相互作用蛋白,通过酵母结合试验证实了它们在酵母中的结合.结论DAT1的第2个LIM结构域LIM2可与唐氏综合征关键区基因2(Similar to Down syndrome critical region gene2,DSCR2)、钙-整合素结合蛋白(calcium and integrin binding protein,CIB)、和HSPC170(CD34+ hematopoietic stem/progenitor cells,HSPCs)结合.
作者：惠玲；季朝能；蔡文琴；顾少华；应康；谢毅；毛裕民 刊期： 2005年第05期
脂代谢紊乱是动脉粥样硬化性心血管疾病、2型糖尿病、中心性肥胖的独立危险因素.新近发现的血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like protein 3,ANGPTL3)可调节脂代谢,有望成为一个新的治疗靶点,以下就其研究进展作一综述.
作者：李丙蓉；郑宏庭；邓华聪 刊期： 2005年第05期
目的研究我校自行研制的LXR激动剂(MHEC)和进口LXR激动剂(T-0901317)在抑制动脉粥样硬化病变形成方面的作用及主要机制.方法以高脂饲养ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠为动脉粥样硬化模型,分为无药对照组、MHEC干预组和T-0901317干预组(10 mg·kg-1·d-1),每组6只,灌胃6周.检测血脂、分析主动脉壁中动脉粥样硬化病变的面积、用免疫组化SP法检测主动脉壁中ABCA1蛋白的表达.结果T-0901317组血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均显著高于对照组(P＜0.05,P＜0.01),MHEC组仅HDL-C显著高于对照组(P＜0.01);药物干预组的动脉粥样硬化病变面积均显著降低(P＜0.01),同时动脉壁中ABCA1的表达显著增强(P＜0.01).结论MHEC与T-0901317相比,有更好的血脂改善效果,二者均能显著抑制高脂饲养ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变的形成.这可能与它们能促进动脉壁中ABCA1蛋白的表达,增强胆固醇逆转运有关.
作者：颜伟；胡厚源；周林；周向东；何国祥 刊期： 2005年第05期
目的繁殖和鉴定SRC-3基因敲除小鼠.方法将所引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型,提取每只小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,一旦获得雄性纯合子,就将其与雌性杂合子交配,依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠.结果SRC-3杂合子小鼠的饲养和繁殖均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠.结论正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得SRC-3基因敲除纯合子小鼠的有效途径.
作者：杜智勇；粟永萍 刊期： 2005年第05期
目的探讨层粘蛋白(LN)和钙调素(CaM)的表达与非小细胞肺癌(NSCLG)转移与预后的关系.方法采用免疫组织化学技术检测64例NSGLG中LN和CaM的表达.结果LN和CaM的表达在NSCLC不同细胞分化程度、不同临床分期及是否有淋巴结转移中均有显著差异(P＜0.05).LN在腺癌和鳞癌中的阳性表达率分别为45.1%、69.7%(P＜0.05),CaM在腺癌和鳞癌中的阳性表达率分别为74.1%、57.6%(P＞0.05);LN在低分化的肿瘤标本和中高分化的肿瘤标本阳性表达率分别为36.6%、61.7%(P＜0.05),而CaM分别为73.3%、41.1%(P＜0.05);LN在Ⅲ～Ⅳ期和Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率分别为30.7%、56.0%(P＜0.05),而CaM分别为75.7%、48.3%(P＜0.05);LN在无或有淋巴结转移组的阳性表达率分别为58.1%、33.3%(P＜0.05),而CaM分别为32%、69.2%(P＜0.05).结论LN和CaM可能相互作用,共同促进肺癌的浸润转移,其表达的水平对判断NSCLC患者预后有参考价值.
作者：刘国祥；黄英；孙瑜 刊期： 2005年第05期
作者： 刊期： 2005年第05期
作者： 刊期： 2005年第05期
目的研究正常人睫状体是否有单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏.方法采用健康志愿者捐献的新鲜眼球15个,1/3眼球组织进行免疫组化染色,排除HSV-1急性感染.取出剩余的睫状体,1/3睫状体组织进行离心,取上清液与Vero细胞共培养,另外2/3睫状体组织提取DNA作PCR和凝胶电泳检测HSV-1的DNA和LAT.结果15个标本免疫组化染色皆阴性,Vero细胞与睫状体组织上清液共培养结果为阴性,未观察到细胞病理学改变,PCR检测的15个标本中4、5、7号标本的HSV-1 DNA阳性,HSV-1 LAT阴性,其他12个标本PCR检测HSV-1 DNA阴性,HSV-1 LAT阴性.结论正常人睫状体存在HSV-1 DNA.
作者：陈康；谢汉平 刊期： 2005年第05期
网球肘是一种常见病,主要表现为肱骨外上髁部及肱桡关节附近疼痛不适及上肢功能障碍,持物困难常迁延不愈,影响患者正常生活和工作.我们采用综合康复疗法对57例网球肘进行了治疗,取得了良好效果,现报告如下.
作者：田家林；蔡永丰 刊期： 2005年第05期
第三军医大学学报杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学
