学术投稿

重组多价人精子表位肽的原核表达及其条件优化

谢琦;林军;白玲;石青峰;叶元;杨冰;刘永明

关键词:重组多价人精子表位肽, GST融合蛋白, 大肠杆菌, 表达条件
摘要:目的 构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,优化其在大肠杆菌中的表达条件.方法 用化学合成法合成多价人精子表位肽基因.该基因经PCR扩增,BamHI和XhoI双酶切后,克隆至GST融合表达载体PGEX-4T-1获得重组质粒.将该重组质粒转化E.coli BL21 (DE3),经IPTG诱导表达.利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统,观察在摇瓶发酵条件下改变培养基组成、诱导温度、诱导时机、诱导剂浓度和诱导时间等条件对GST-多价人精子表位肽融合蛋白表达量的影响.结果 构建了重组多价人精子表位肽原核表达载体.在摇瓶实验中,优化的表达条件为:TB培养基,诱导温度37℃,在菌体对数生长的中后期进行诱导,IPTG诱导终浓度0.05 mmol/L,诱导时间5h.优化后GST-多价人精子表位肽融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30.2%,且主要以可溶形式表达.结论 成功构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,重组表达载体在E.coli BL21 (DE3)内主要表达可溶形式的GST-多价人精子表位肽融合蛋白,在优化条件下可获得较高的表达量.
现代预防医学杂志相关文献
  • 大学生应对方式与父母养育方式、社会支持研究综述

    目的 了解国内外学者对大学生应对方式及其影响因素关系研究情况,为大学生心理健康及心理干预提供理论依据.方法 查阅相关文献,对国内外学者对大学生应对方式、父母养育方式、社会支持等相关研究进行综述.结果 国内外学者对大学生应对方式研究比较成熟,概念明确,测量工具比较权威,对大学生父母养育方式、大学生社会支持也有一定的研究,但是对三者相关性研究开展的非常少.结论 可以对大学生应对方式及父母养育方式、社会支持相关性做进一步研究.

    作者:潘芳芳;俞爱月 刊期: 2012年第11期

  • 激光联合卡介苗素和干扰素治疗86例尖锐湿疣综合疗效研究

    目的 探讨激光联合卡介苗素和干扰素治疗尖锐湿疣的综合疗效.方法 选取某院2006年8月~2008年10月门诊治疗的172例尖锐湿疣患者为研究对象,分成联合治疗组和对照组,每组86例患者,对治疗后的相关疗效进行了比较.结果 联合治疗组中治愈73例,治愈率为84.88%,对照组中治愈46例,治愈率为53.49%,P<0.05,差异有统计学意义;联合治疗组中复发12例,复发率为13.95%,对照组中复发40例,复发率为46.51%,P<0.05,差异有统计学意义;联合治疗组总不良反应1例,总不良反应比例为1.16%;对照组总不良反应4例,总不良反应比例为4.65%,P<0.05,差异有统计学意义.结论 激光联合卡介苗素和干扰素治疗尖锐湿疣是一种安全有效的方法.

    作者:贾华魁 刊期: 2012年第11期

  • 冠状动脉介入术后患者卧位及卧床时间的研究

    目的 探讨经发冠状动脉内介入治疗(PCI)患者术后的卧位类型、及卧床时间对患者舒适度及并发症的影响.方法 将2009年5月~2010年9月的140例PCI术后患者随机分为对照组(A组)60例,实验组(B组)80例.A组术后采用传统方法护理,穿刺点用弹性绷带包扎并且用1 kg沙袋压迫12 h,保持术侧肢体制动、平卧12 h,卧床24h后下床活动.B组术后穿刺点用弹性绷带包扎并用1 kg沙袋压迫4h,术侧肢体伸直,可水平移动,对无血管并发症者可根据患者需要取术侧卧位、仰卧位或半卧位(床头抬高30~45度)交替,4h后床上自主体位,12h后可床旁活动.结果 2组患者术后并发症的发生率差异无统计学意义,B组的舒适程度显著优于A组.结论 B组的护理方法可提高患者的舒适度,减轻心理压力.

    作者:张一敏 刊期: 2012年第11期

  • 围生期双酚A暴露对大鼠子代行为发育的影响

    目的 研究围生期暴露于双酚A对SD大鼠子代的行为发育的影响.方法 120只孕鼠随机分为6组,每组20只.从孕期d6至仔鼠出生d 21断乳每天分别灌胃给予0、0.05、0.5、5、50、500mg/kg的双酚A.于仔鼠出生后d3检测前、后肢定位反射;出生后4d检测仔鼠的平面翻正、悬崖回避反射;出生后d5检测负向地性;出生后d11检测空中翻正反射.结果 0.05、0.5mg/kg剂量组的所有的神经反射均与对照组无明显差异,5 mg/kg剂量组的平面翻正反射、负向地性反射、空中翻正反射达标天数与对照组相比显著延迟;50mkg剂量组,在前、后肢定位反射、空中翻正反射达标天数与对照组相比显著延迟;500mg/kg剂量组,在前、后肢定位反射、负向地性反射、空中翻正反射以及悬崖回避反射的达标天数与对照组相比显著延迟.结论 大鼠围生期暴露于双酚A,可影响子代大鼠的神经行为发育.

    作者:范杰;蒋建军;尚兰琴;彭茨克;王宛怡;邓陶陶;刘然;符君;任泽明;邢丽娜;吴双;郝卫东 刊期: 2012年第11期

  • 婴儿期缺铁性贫血发生率及预防措施分析

    目的 分析某院儿童保健门诊中婴儿期缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)喂养方式及辅食添加的早晚与婴儿期缺铁性贫血的关系,有效的降低其患病率.方法 采用整群随机抽样的方法选取该院儿童保健门诊中2009年5月~2010年5月0~1岁婴儿815例,排除疾病因素,通过体格检查,家长问卷,调查其喂养方式及辅食添加的早晚将患儿分为实验组(n=396),是指无论采取何种喂养(母乳或人工或混合)均于4~6个月添加辅食;对照组(n=419),是指无论采取何种喂养(母乳或人工或混合)均于4~6个月未添加辅食.两组统一采用BASIC血细胞全自动分析仪测血常规.结果 实验组贫血发生率是19.2%,对照组贫血的发生率是37.5%.差异有统计学意义(P<0.01).结论 无论采取何种喂养(母乳或人工或混合)均于4~6个月添加辅食其贫血的发生率低于对照组,因此正确的儿童喂养行为可以有效的预防和减少婴儿期IDA患病率.

    作者:吴英杰;高新;李慧 刊期: 2012年第11期

  • 食管癌高发区食管癌预防的非医疗措施探讨

    当前在食管癌高发区食管癌预防中,存在只注重诊疗而忽略预防和术后康复的问题.通过对若干病例病前生活习惯及术后手术恢复情况进行观案及食管癌高发区具有代表性农村居民的生活状况调查,分析了导致食管癌的各种因素之间的联系.提出了加强食管癌高发区“安全饮水”工程等基础设施建设;在食管癌高发区建立预防及术后康复的医疗保障体系;加强宣传和食管癌知识普及,引导高发区居民改善生活条件和改良生活习惯;加强调查研究等非医疗措施.探讨在食管癌高发区建立预防、治疗和术后康复一体的食管癌预防体系.

    作者:吕小可;王玉川 刊期: 2012年第11期

  • 30例房间隔膨胀瘤彩色多普勒超声心动图分析

    目的 评价彩色多普勒超声心动图诊断房间隔膨胀瘤的价值及房间隔膨胀瘤的彩色多普勒超声心动图表现.方法 回顾性分析30例房间隔膨胀瘤患者的彩色多普勒超声心动图表现.结果 30例患者彩超均作出正确诊断,14例房间隔膨胀瘤合并风湿性心脏病,7例合并扩张型心肌病,4例合并缺血性心肌病,5例合并先天性心脏病.房间隔瘤均突向右房,大突出度为(17.0±1.8) mm,基底宽(21.0±4.2) mm.结论 经彩色多普勒超声对房间隔膨胀瘤诊断有较好的临床应用价值.

    作者:彭莉 刊期: 2012年第11期

  • 德阳市小学生六龄牙患龋情况调查分析

    目的 了解德阳市城市小学生六龄牙患龋状况、影响因素及口腔保健知识知晓情况,为制定预防措施提供理论依据.方法 随机选取市内4所城市小学6285名7~12岁学生进行常规体检和六龄牙患龋情况调查;对某些影响因素、口腔保健知识等做问卷调查.结果 被检者六龄牙的患龋率11.58%,龋均0.22,充填率33.80%.患龋率及龋均随年龄增长而增高,有性别差异,女生高于男生,下颌高于上颌,差异有统计学意义.并结合对问卷调查进行统计分析得出六龄牙患龋的影响因素依次为刷牙次数、年龄、性别、牙位、全身营养状况等.结论 通过本次调查,了解本地小学生六龄牙的患龋现状及相关情况,对实施六龄牙患龋预防治疗措施和口腔健康教育工作具有很好的指导意义.

    作者:韩鸣;房波;王海青 刊期: 2012年第11期

  • 天津市院内死亡病例漏报及报告质量评价

    目的 评价天津市2009年院内死亡病例信息报告质量,为进一步完善死因监测工作提供依据.方法 分析天津市2009年死因监测网络直报数据及2008年现场漏报调查数据.结果 2009年院内死亡病例前5位死因分别为恶性肿瘤、心脏病、脑血管疾病、呼吸系统疾病、损伤和中毒,与户籍人口中的前5位死因构成顺序有所不同.根本死因编码错误率为0.41%,76.9%的死亡病例其根本死因诊断依据科学、可靠,77.7%的患者死亡后7d内能够通过网络直报进行报告,99.7%的报告卡能够在网络直报后7d内得到审核.院内死亡病例存在漏报,漏报率为4.5%,门、急诊漏报率高于住院.结论 天津市住院死亡病例死因报告准确、有效,可以正确评估我市住院死亡人群的死因模式;但也存在不足,院内死亡病例的报告和管理仍是今后死因监测工作的重点.

    作者:张辉;宋桂德;张颖;王德征;江国虹 刊期: 2012年第11期

  • K-ras基因状况预测转移性结直肠癌药物治疗后生存期

    目的 旨在通过前瞻性检测转移性结直肠癌的K-ras基因表达状况,观察比较化疗单用或联合靶向治疗的长期疗效,为临床医生提供可靠预测指标.方法 初治的转移性结直肠癌62例,一线化疗前全部检测了癌组织K-ras基因,62例癌组织K-ras基因进行检测,突变率为30.6% (19/62),其中G12占89.5% (17/19),G13占10.5% (2/19);43例K-ras野生型者分两组进行姑息化疗,包括单纯化疗组及化疗联合靶向治疗组,治疗期间密切随访,统计疗效及毒性并进行统计学分析.结果 K-ras突变者中位PFS和OS分别为4.7月和14.5月,野生型者中位PFS和OS分别为8.5月和24.0月,差异均有统计学意义(Log-rank检验P<0.05);10名K-ras野生型者在化疗基础上加用靶向治疗(西妥昔单抗),其中位生存期36.5月,显著高于未用靶向治疗患者的18.0月(Log-rank检验P< 0.01).结论 癌组织K-ras基因突变者生存期明显短于K-ras基因野生型者,表明K-ras基因突变可作为本组转移性结直肠癌的有效预后预测指标;化疗联合靶向治疗转移性结直肠癌,可有效改善K-ras基因野生型者的PFS和OS,值得推广应用.

    作者:王巍;焦勇;林奔;林秀强;招丽蓉;徐绮华;冯芬;胡斌 刊期: 2012年第11期

  • 咸宁地区幽门螺杆菌临床分离株耐药性分析

    目的 为了解咸宁地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的耐药性状况.方法 从慢性胃炎(chronic gastritis,CG)和慢性消化性溃疡(chronic peptic ulcer,CPU)患者的胃黏膜活检组织中分离培养出156株Hp,用KirbyBaner药敏纸片法检测Hp对甲硝唑、替硝唑、克拉霉素、阿莫西林、四环素、呋喃唑酮、利福平的耐药率,比较不同性别、区域、胃疾病之间的耐药性.结果 咸宁地区Hp对甲硝唑、替硝唑、克拉霉素、阿莫西林、四环素、呋喃唑酮、利福平的耐药率分别为65.4%、41.7%、12.2%、14.1%、0、7.0%、9.7%.不同性别、区域、胃疾病之间耐药率差异无统计学意义(P>0.05).结论 咸宁地区Hp对甲硝唑、替硝唑的耐药性严重;对克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮、利福平的耐药率较低;未发现对四环素耐药.克拉霉素和阿莫西林为本地区根除Hp感染的首选抗菌药物.

    作者:孙剑刚;邓毛子;朱薿;包永芬;梅武轩 刊期: 2012年第11期

  • 3种暗示治疗对癔症疗效的观察

    目的 探讨语言-针灸、语言-按摩和语言-药物治疗对癔症患者的临床效果.方法 将90例癔症患者随机分为语言-针灸治疗组(30例)、语言-按摩治疗组(30例)和语言-药物治疗组(30例),对3种方法的治疗效果进行比较研究.结果 语言-针灸治疗组治愈率达100.00%,语言-按摩治疗组为83.33%,语言-药物治疗组为33.33%.语言-药物治疗组分别与语言-针灸暗示治疗组比较和语言-按摩暗示治疗组比较,P均小于0.01,差异有统计学意义.结论 语言-针灸治疗组疗效和语言-按摩治疗组疗效均强于语言-药物治疗组.

    作者:史志春;朱慧芳 刊期: 2012年第11期

  • 西湖区2004~2010年麻疹流行病学特征分析

    目的 分析西湖区2004~2010年麻疹流行病学特征,为预防控制麻疹提供策略依据.方法 对2004~2010年西湖区麻疹个案调查数据进行描述性统计分析.结果 2004~2010年西湖区共报告481例麻疹病例,年平均发病率12.14/10万,2005年和2008年分别高达21.48/10万和37.10/10万.每年的3~6月份为发病高峰,高发地区分布在三墩镇、蒋村文新街道;小于1周岁、20~30岁、30~40岁年龄组所占比例相对较高,分别为28.0%、26.4%和20.2%;8月龄~1周岁常住儿童无麻疹免疫史的占58.62%,流动儿童无免疫史的占61.54%.结论 西湖区麻疹年发病起伏较大,每年呈周期性分布,城乡结合部、1周岁以下、20岁以上人群高发,需加强儿童常规及时按种及成人强化接种管理,进行有针对性的防控.

    作者:张丛笑;钱晨颖;郑琳;宋凯;张寒芸 刊期: 2012年第11期

  • 急性酒精性肝损伤与肝细胞凋亡的研究

    目的 研究急性酒精性肝损伤肝细胞凋亡,探讨其发病机制.方法 将30只大鼠随机分成酒精组(20只),对照组(10只).给酒精组大鼠按体重15 g/kg 47.5%酒精一次性灌胃,给对照组大鼠按体重15 g/kg生理盐水一次性灌胃.灌胃后48 h处死大鼠,用光镜、TUNEL、电镜检查肝组织.结果 酒精组肝损伤、肝细胞凋亡检出率均为100%,凋亡肝细胞核数占肝细胞核总数的46.8%.生理盐水组未发现肝损伤痛变,仅3例个别视野近肝小叶中央静脉处见单个凋亡细胞.结论 肝细胞凋亡与急性酒精性肝损伤有一定的关系.

    作者:刘红云;覃彩芹;张福云 刊期: 2012年第11期

  • 月经间期放置IUD后育龄妇女生活质量的变化情况

    目的 了解育龄妇女使用3种宫内节育器(IUD)后生活质量状况的变化情况.方法 2007.7~2008.8在我国6个省共11所县级计划生育服务站(研究中心),开展多中心随机比较观察性研究.在每所服务站对符合标准的育龄妇女随机放置IUD,采用健康状况问卷测量妇女使用IUD前、使用后3个月和10~12个月时的生活质量状况.本文使用其中7个中心的数据进行分析.结果 311例元宫铜300对象、309例TCu80A对象和321例活性165对象进入分析.3组对象放置IUD后健康状况总分和除一般健康状况外的其他7个维度得分均较基线时得分增加,仅一般健康状况维度两次随访得分与基线比较差异均无统计学意义.三组对象总得分及各维度得分较基线的变化情况相似,仅TCu380a使用者情感职能维度得分在10~12个月随访时的改变值略高于其他两组对象.结论 IUD的使用可以提高育龄妇女的生活质量,且三种IUD对生活质量的改善情况相似.

    作者:梁红;李丽;陈兴宝;吴尚纯;袁伟 刊期: 2012年第11期

  • 术前应用乌斯他丁对失血性休克患者肾损伤的保护作用

    目的 观察乌司他丁对失血性休克患者肾损伤的保护作用.方法 60位急诊失血性休克患者,随机分为2组,对照组(C)和乌斯他丁组(U),U组在麻醉诱导后静脉输注乌斯他丁1万u/kg,溶于0.9% 氯化钠注射疫100ml,30min内输完;C组给予0.9%氯化钠注射液100 ml.分别于切皮前(H1)、切皮后2 h(H2)、4 h(H4)、术后24h(D1)、术后48 h(D2)采静脉血测定血尿素氮、肌酐;相同时点采集尿液,检测尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖酐酶(NAG).结果 ①组内比较,BUN、SCr在D1、D2显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);②组间比较,BUN在D1、D2差异有统计学意义(P< 0.05); SCr在D1、D2差异有统计学意义(P< 0.01).③NAG在各时点均增高,C组明显高于·U组,差异有统计学意义(P< 0.05或P< 0.01).结论 失血性休克患者术前应用乌司他丁对改善肾脏组织灌注、减轻缺血再灌注导致的肾损伤有确切的保护作用.

    作者:张希;马耘;杜平 刊期: 2012年第11期

  • 老年骨质疏松性骨折患者的危险因素与干预措施

    目的 探讨老年骨质疏松症并发骨折发生的危险因素,提出针对性的干预措施.方法 选择2008年1月~2010年5月在某院住院治疗的271例老年骨质疏松症患者为研究对象,将其分为老年骨质疏松症并发骨折组和老年骨质疏松症未并发骨折组,采用自编问卷分析2组患者的临床资料.结果 单因素Logistic回归分析结果表明,体重指教及骨密度是骨质疏松症并发骨折的保护因素,面年龄、低钙饮食、皮质激素、跌倒、脆性骨折史及骨折家族史是发生老年骨质疏松性骨折的危险因素;多因素Logistic回归分析结果表明,骨密度是骨质疏松症并发骨折的保护因素,而年龄、低钙饮食、跌倒及脆性骨折史是发生老年骨质疏松性骨折的危险因素.结论 老年骨质疏松症并发骨折受多种因素影响,可从饮食、体育锻炼及药物等多方面进行干预.

    作者:杨涛涛;吕晓红;任凤华;张春婷 刊期: 2012年第11期

  • 内镜黏膜下剥离术对120例食管胃黏膜下病变的诊疗价值

    目的 探讨内镜下黏膜下切除治疗食管胃黏膜下隆起性病变的诊断、治疗价值.方法 比较120食管胃黏膜下隆起性病变的内镜和病理诊断结果符合率.采取由镜黏膜下剥离术治疗食管胃黏膜下隆起性病变,观察治疗效果.结果 食管黏膜下隆起性病变以平滑肌瘤多见,而胃底、胃体部间质瘤多见,胃窦病变性质较为多样化.患者超声内镜检查结果与病理活检结果相比较,食管部病变的诊断符合率较高,但胃窦部隆起病变的诊断符合率较低.表明内镜黏膜下剥离术对食管胃黏膜下隆起性病变有较好的诊断和治疗作用.结论 内镜黏膜下剥离术不仅能为食管胃黏膜下隆起性病变患者提供有效的病理诊断,而且还能较好地切除病变组织,对食管胃黏膜下病变有较高的诊疗价值.

    作者:常廷民;李贞娟;张利利;李秀敏 刊期: 2012年第11期

  • 芬戈莫德对EAE大鼠的防治作用及对BAX在脑组织中表达的影响

    目的 用不同剂量的芬戈莫德与泼尼松干预Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)模型,从而比较其各组间的疗效、病理变化、脑组织内BAX、表达水平的变化.方法 建立雌性Wistar大鼠EAE模型.干预治疗选择芬戈莫德和泼尼松.d0定为免疫抗原注射日,从抗原免疫后d1开始按分组的药物和剂量予以每天喂食1次,直到处死.在EAE组发病高峰期即d 18时处死所有大鼠终止实验.对各组大鼠的发病情况、神经功能评分等进行观察.制作大鼠脑组织切片进行炎性病灶计数及中枢神经系统BAX的表达检测.结果 ①各干预组临床症状改善.②各干预组与EAE组相比,炎性病灶数明显减少、BAX表达水平明显增加(P<0.05);中剂量组、较高剂量组与泼尼松组三者之间差异无统计学意义(P>0.05);高剂量组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 FTY720对EAE具有防治作用,可上调CNS内BAX的表达.

    作者:刘春苗;谭利明 刊期: 2012年第11期

  • Auto-CPAP干预对脑梗死急性期合并OSAHS患者糖代谢的影响

    目的 了解全自动持续正压呼吸机(Auto-CPAP)干预对脑梗死急性期合并OSAHS患者糖代谢的影响.方法 选择既往无糖尿病史急性脑梗死合并OSAHS患者,随机分为Auto-CPAP治疗组和非治疗组,比较治疗2周后空腹血糖及餐后2h血糖情况.结果 两组病人在性别、年龄以及体重指数等方面,差异均无统计学意义(P>0.05).治疗组经呼吸机治疗后空腹血糖及餐后2h血糖较治疗前明显好转,优于对照组(P<0.05).结论 Auto-CPAP干预可明显降低脑梗死急性期合并OSAHS患者糖代谢.

    作者:马丽娜;李兴;崔晓红;吴和弟;蒙绪标 刊期: 2012年第11期

现代预防医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 四川大学华西公共卫生学院