学术投稿

幽门螺杆菌omp22基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及活性鉴定

黄学勇;段广才;范清堂;郗园林

关键词:幽门螺杆菌, 基因工程, 高效表达, 纯化
摘要:[目的]优化幽门螺杆菌omp22基因工程菌(pMAL-c2X-omp22-TB1)的表达条件,并对目的蛋白进行纯化和免疫活性鉴定. [方法]在不同诱导时机、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间下诱导pMAL-c2X-omp22-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量.在优化条件下诱导工程菌表达,采用SDS-PAGE方法对表达产物分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性OMP22蛋白进行分离、纯化,对纯化蛋白做Westem blot分析. [结果]工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0.3mmol/L)诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的25%以上;经纯化得到了较高纯度(>90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性. [结论]建立了从TB1(pMAL-c2X-omp22)可溶性表达产物中纯化较高纯度OMP22融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌高效表达生产工艺的研究打下了基础.
现代预防医学杂志相关文献
  • 时间序列分析在结核病发病预测应用中的初步探讨

    [目的]初步探讨季节差分ARIMA模型在结核发病率预测中的应用,为结核病防治提供参考依据. [方法]对四川省2004年1月~2007年6月的逐月肺结核发病率进行ARIMA建模拟合,采用2007年剩余各月的实际月发病率验证模型的预测效果. [结果]ARIMA(1,0,0)×(1,1,0)12模型较好地拟合了既往时间段上的发病率序列,其对2007年7~12月发病率的预测值基本符合实际发病率的变动趋势. [结论]季节差分ARIMA模型能较好地模拟短期内肺结核发病率在时问序列上的变动趋势,若用于长期预测,应根据长期监测数据不断调整模型参数.

    作者:李娜;殷菲;李晓松 刊期: 2010年第08期

  • 幽门螺杆菌omp22基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及活性鉴定

    [目的]优化幽门螺杆菌omp22基因工程菌(pMAL-c2X-omp22-TB1)的表达条件,并对目的蛋白进行纯化和免疫活性鉴定. [方法]在不同诱导时机、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间下诱导pMAL-c2X-omp22-TB1的表达,测定目的蛋白的表达量.在优化条件下诱导工程菌表达,采用SDS-PAGE方法对表达产物分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性OMP22蛋白进行分离、纯化,对纯化蛋白做Westem blot分析. [结果]工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0.3mmol/L)诱导4 h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的25%以上;经纯化得到了较高纯度(>90%)的目的蛋白,并具有良好的免疫原性. [结论]建立了从TB1(pMAL-c2X-omp22)可溶性表达产物中纯化较高纯度OMP22融合蛋白的方法,为进一步的动物实验和诊断性抗原的研制以及工程菌高效表达生产工艺的研究打下了基础.

    作者:黄学勇;段广才;范清堂;郗园林 刊期: 2010年第08期

  • UCP2基因与神经管畸形关系的研究

    [目的]探讨母体线粒体膜转运蛋白UCP2基因与子代发生神经管畸形(NTIDs)之间的关系以及基因间是否存在着交互作用. [方法]采用PCR方法检测调查对象UCP2基因的多态性,SPSS 11.0软件进行统计学分析.[结果]①UCP2基因第8外显子3'非编码区45 bp碱基的缺失或插入有3种基因型,即D/D、D/1和I/I,其基因频率在病例组与对照组的分布差异有统计学意义,而且基因型中随着D等位基因的增加,母亲生育NTDs患儿的可能性也增加.②UCP2基因55位点有2种基因型.即野生型AA,杂合突变型AV,在病例组和对照组的分布的差异无统计学意义.其等位基因(A、V)在两组的分布差异也无统计学意义.③UCP2基因3'非编码区中D易感等位基因和55位点突变基因间无明显交互作用. [结论]①UCP2基因3'非编码区45 bp碱基的缺失或插入是NTDs发生的一个独立危险因素,并且UCP2基因3'非编码区的D易感等位基因在人群中的高分布是山西省NTDs高发的一个重要的遗传原因.②UCP2基因55位点突变可能不是NTDs发生的危险因素.

    作者:温变珍;张涛;李佩珍 刊期: 2010年第08期

  • 工作场所空气中二苯胺的气相色谱测定法

    [目的]建立气相色谱法测定工作场所空气中二苯胺的方法.[方法]样品用硅胶管采样,经无水乙醇超声解吸10 min后,利用气相色谱法检测. [结果]方法测定范围为0.07-66.67 mg/m3(以采集7.5 L空气计),平均采样效率99%,平均解吸效率为97%,穿透容量大于1.0 mg.样品于室温或4℃冷藏至少可保存8 d. [结论]该方法简便实用、灵敏度高,适用于工作场所空气中二苯胺的测定.

    作者:李光;查河霞;刘祥萍 刊期: 2010年第08期

  • 我国甲乙类传染病分布特征、时序规律及评价研究

    [目的]研究我国甲乙类传染病发病程度、地理分布特征和时序变化规律,对各省区传染病发病程度和病死程度进行综合评价分析. [方法]根据与全国平均发病率对比倍数指标,辅助序列曲线、散点图,采用SPSS和Excel进行排序分析;分别建立总发病率与病死程度指标和评价模型进行综合比较. [结果]病种呈现地理分布特征和时序规律多样性.分别根据总发病率和病死严重程度综合评价省区差异. [结论]对病种的地理分布、时序规律及总发病和病死程度角度综合评价分析有助于疫情研究与决策.

    作者:张利平;李望晨;安洪庆;唐云峰 刊期: 2010年第08期

  • 郑州市综合性医疗机构预防保健人员亚健康现状分析

    [目的]了解预防保健人员亚健康现状,为预防保健人员的健康促进工作提供科学依据. [方法]采用分层整群抽样的方法,对综合性医疗机构的预防保健人员采用问卷调查,调查表采用症状自评量表(SCL-90). [结果]本次共调查21家医院,医护人员96名,具有亚健康的医务人员占21.88%,省级医院保健人员的亚健康水平低于市、县级.省级医院40岁组保健人员抑郁因子高于一般人群. [结论]郑州市预防综合性医院预防保健人员亚健康状况较好,但省级医院40岁组的抑郁状况得关注.

    作者:王方;梁士杰 刊期: 2010年第08期

  • 原发性肝癌患者HBV血清标志物、前S1抗原与HBV-DNA的关系分析

    [目的]了解原发性肝癌(PHC)患者中乙肝病毒(HBV)的感染状况,探讨HBV血清标志物(HBVM)、前S1抗原与HBV-DNA之间的关系. [方法]采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清中FIBVM、前S1抗原和荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量. [结果]357例PHC患者中,HBV感染率94.96%(339/357),HBsAg阳性率83.75%(299/357);感染模式以HBsAg、抗HBe和抗HBc 3项阳性为多见,占52.94%(189/357);前S1抗原、HBV-DNA阳性率分别为50.14%(179/357)、70.59%(252/357);以HBsAg、HBeAg和抗HBc 3项阳性模式中前S1抗原、HBV-DNA阳性率高,分别为73.3%、93.3%.HBV-DNA的阳性率高于前S1抗原(X2=31.19,P<0.001),随着血清HBV-DNA载量增加,前S1抗原阳性率增加. [结论]HBV感染与原发性肝癌关系密切,以HBsAg、抗HBe和抗HBc 3项阳性多见:HBV-DNA阳性率高于前S1抗原,检测肝癌患者血清中前S1抗原、HBV-DNA可更全面反映患者体内HBV的活动性复制程度,弥补HBV血清标志物在肝癌检测中的不足.

    作者:陈漫霞;陈思东;姚振江;王漫云 刊期: 2010年第08期

  • 当代大学生健康意识行为调查

    [目的]了解大学生在校期闻体育与健康意识、体育锻炼的实践、生活方式等情况. [方法]对鲁东大学非体育专业不同年级的男女大学生共1246人进行问卷调查,内容包括对体育的认识及参与程度、对健康的理解等.[结果]体育意识与行为与体育锻炼的时闻,大学生参加课外体育锻炼的时间普遍较少,周均小于1 h者占13.40%,周均1-3 h者占77.52%,周均大于3 h者占9.07%;体育意识与体育锻炼内容、体育锻炼的主要困难有关,其中男生进行篮球运动比较多占60.68%;女生进行羽毛球运动比较多占52.07%;体育锻炼的主要困难是缺乏场地器材占55.13%、缺乏技术指导占53.69%;健康意识行为与对健康的理解、影响健康的主要因素、每天睡眠的时间、每天工作学习的时同、有无压力感及对目前生活的满意度有关. [结论]应加强大学生体育意识与行为的培养,创建良好的校园环境,保证大学生体育锻炼正常进行,传播健康知识,落实措施,转变行为,促进大学生良好健康行为的形成

    作者:丛明滋 刊期: 2010年第08期

  • 急性心肌梗塞患者临床路径的应用与研究

    [目的]探讨临床路径在急性心肌梗塞患者护理中的应用价值. [方法]我院于2006年4月~2009年10月对临床护理路径在心肌梗塞患者中的应用与常规护理进行了比较研究. [结果]与对照组相比,观察组住院天数减少了4.3 d,卧床时间减少了18 h,费用降低了384.1元.表明临床护理路径缩短了患者的卧床时问和住院天数,降低了住院费用.另外,临床护理路径可以有效地降低患者的并发症发生率(p<0.05),提高患者对护理工作的满意度(P<0.05).[结论]在急性心肌梗塞患者中应用临床路径的这一新的护理模武,可以有效地缩短患者的卧床时间、住院时间,控制医疗费用,提高患者满意度,取得良好的经济效益和社会效益.

    作者:赵淑珍 刊期: 2010年第08期

  • 微泵联合用药治疗癌痛及其他痛苦症状的临床研究

    [目的]本课题研究注射器驱动泵(微泵,syringe driver/micro-pump)联合用药连续皮下输注(Continuous subcutaneous infusion,CSCI),以缓解晚期癌症患者的疼痛、控制其他难治性痛苦症状,为建立我国姑息医学模式及治疗指南提供科学的依据. [方法]选择40例疼痛评分≥7分、预期生存期≥30 d、伴有其他难治性痛苦症状的晚期癌症患者,随机分为2组,每组20例;采用交叉设计的方差分析方法.分别先后给予口服盐酸吗啡缓释片和使用微泵联合用药,采用SPSS13.0统计软件分析. [结果]比较微泵皮下给予吗啡与口服吗啡的疼痛减轻分值和不良反应发生率,P<0.05,差异有统计学意义.微泵联合用药控制疼痛及其他痛苦症状的缓解率优干口服联合用药. [结论]微泵联合用药的镇痛治疗效果优于口服吗啡缓释片,不良反应较少,能较好的控制晚期癌症患者的疼痛和其他痛苦症状.

    作者:张川;陈慧平;李金祥;邱芳;董华琼;张宗艳 刊期: 2010年第08期

  • 36例肺挫伤患者的早期诊断分析

    [目的]探讨X线在早期诊断肺挫伤中的临床应用价值. [方法]我院于2006年5月~2009年6月运用X线影像检查方法对肺挫伤患者进行临床检查、诊断. [结果]肺问质改变19例,占52.8%(19/36),主要表现为肺纹理增多增租.粗细不均,边缘模糊.肺实质改变11例,占30.6%(11/36),主要表现: (1)斑点、斑片、絮状阴影,沿肺纹理分布,密度较淡,边缘模糊. (2)大片状阴影,表现为肺一段或一叶或跨叶段的大片状不规则阴影,边界模糊,密度不均,多见于中下肺野.磨砂玻璃样改变7例,占19.4%(7/36),主要表现为一侧或两侧肺野透光度一致性降低呈雾状或似蒙上一层漳纱.继发感染5例,占13.9%(5/36),主要表现为肺实质性改变强化征,迁延不吸收和临床感染症状,全部发生于肺实质受累者. [结论]X线诊断是肺挫伤的主要传统诊断手段,且经济、方便,对于肺挫伤的早期诊断有着重要的临床应用价值.

    作者:孙永康 刊期: 2010年第08期

  • 78例生长痛患儿检验结果分析

    [目的]分析儿童期生长痛患儿X线片及血钙、磷含量,为预防和治疗提供理论依据. [方法]对78例生长痛患儿进行X线片及血钙、磷含量测定,并与相同数量正常体检儿童比较. [结果]两组儿童X线片无差异征象,患儿组血钙低于对照组,低血钙发生率高干对照组,血磷两组之间无统计学差异. [结论]儿童生长痛的发生与缺钙关系密切,积极补钙是预防生长痛的有效方法.

    作者:鲍呈元;李佩章 刊期: 2010年第08期

  • 海南某电信690名职工体检结果分析

    [目的]了解公司职工身体健康状况. [方法]对公司职工健康体检指标中的血压、血脂、血糖、心电图、脂肪肝等进行统计分析,比较不同性别和年龄段之间的差异. [结果]690名职工中检出较高前4位疾病为心电图异常、脂肪肝、胆固醇偏高、高脂血症,检出率分别为55.07%、24.93%、23.48%、16.67%;脂肪肝、高脂血症、胆固醇偏高、甘油三酯偏高、高血压、糖尿病的检出率男性明显高于女性(P<0.05);女性中糖尿病检出率为零;高脂血症、高血压随着年龄的增长逐渐增加. [结论]职工的健康状况令人担忧,应加强健康教育及行为干预,定期体检,有利于提高生活质量.

    作者:祝朝勇;王丽萍;林尤斌;陈媛;李丹娜;聂冬莉;刘彩虹 刊期: 2010年第08期

  • 基于历史数据基线的WSARE方法在传染病早期预警中的应用研究

    [目的]探讨基于历史数据基发的WSARE方法在传染病早期预警中的应用价值. [方法]采用WSARE方法对2007年深圳市麻疹发病模拟实时监测预警. [结果]基于历史数据基线的WSARE方法探测到深圳市2007年7月~12月半年麻疹病例异常情况10次,其中双特征变量联合异常情况3次,预警高峰期为7月和8月. [结论]基于历史数据基线的WSARE方法能够及时有效地探测到传染病在局部区域特定属性人群中的异常变化,在传染病监测和早期预警中具有一定的应用价值.

    作者:刘华;冯子健;张子武;李晓松 刊期: 2010年第08期

  • 社会技能训练对慢性精神分裂症病人的疗效观察

    [目的]探讨社会技能训练对慢性精神分裂症患者的疗效. [方法]将90例慢性精神分裂症患者随机分为训练组45例,对照组45例,对照组给予常规抗精神病药物治疗和护理,训练组在此基础上按照我院编写的院内康复训练程序进行训练,疗程为6月.在训练前及训练6月末分别采用阳性和阴性症状量表(PANSS)、护士用住院病人观察量表(NOSIE)和住院精神病人康复疗效评定量表(IPROS)进行临床疗效评定. [结果]训练组的PANSS、NOSIE和IPROS各因子分及总分评分治疗前后差异均有统计学意义(P<0.001),对照组的PANSS和IPROS各因子分及总分评分治疗前后差异均无统计学意义(P>0.05).训练6月末,训练组PANSS和IPROS各因子分及总分均较对照组显著性降低,差异有统计学意义(P<0.001);NOSIE评分比较,训练组较对照组总消极因子分显著性降低,总积极因子分和病情总估计因子分显著性增加,差异有统计学意义(P<0.001). [结论]社会技能训练能够改善慢性精神分裂症患者阳性症状、阴性症状和社会功能,是院内精神康复中减缓患者精神衰退,修复社会功能必不可少的治疗方法.

    作者:康建华;张帆 刊期: 2010年第08期

  • 柳江河鱼类感染肝吸虫囊蚴的调查

    [目的]了解柳江河鱼类感染肝吸虫囊蚴情况,为预防肝吸虫病提供科学依据. [方法]采集柳江河道内常见鱼种,用直接压片法检查肝吸虫囊蚴,用消化法检查感染度. [结果]采集到35种鱼,其中32种不同程度感染肝吸虫囊蚴,感染率为10.47%,感染度为4.6个/g.麦穗鱼的感染率(21.47%)和感染度(9.9个/g)高.各河段感染率不同,象州县河段感染率较高,三江县和柳州市区河段感染率较低.夏秋两季鱼的感染率较高,春冬两季较低.中、上水层鱼类的感染率较高,下水层鱼类较低.杂食性和草食性鱼类的感染率较高,肉食性鱼类较低. [结论]柳江河多数鱼种不同程度感染肝吸虫囊蚴,鱼类感染肝吸虫囊蚴与水层、季节、食性等因素有关.

    作者:申海光;周振座;何曲波;莫海英;陶静;黄水群 刊期: 2010年第08期

  • 巴西人参3种提取液对耐缺氧、抗疲劳及抗肿瘤作用的影响

    [目的]通过对国产巴西人参水提取浓缩、水提取乙醇沉淀浓缩、75%乙醇提取浓缩3种提取液的耐缺氧、抗疲劳和抗肿瘤试验,初步确定国产巴西人参是否具备耐缺氧、抗疲劳和抗肿瘤作用和这些作用的有效部位.[方法]将小白鼠随机分为8组:正常对照组、人参对照组、3种提取液的高、低剂量组.测定常压下小鼠耐缺氧、游泳耐力和抗肿瘤的程度. [结果]巴西人参水提取乙醇沉淀浓缩液高剂量组能明显提高小鼠的常温耐缺氧的能力;巴西人参75%乙醇提取浓缩高、低剂量组均能明显提高小鼠的低温耐缺氧的能力;巴西人参水提取浓缩高、低剂量组,巴西人参水提取乙醇沉淀浓缩高、低剂量组,巴西人参75%乙醇提取浓缩高剂量组均能明显提高小鼠游泳的时间;巴西人参3种提取液各剂量组均可显著提高抗肿瘤能力. [结论]巴西人参对小鼠耐缺氧、抗疲劳及抗肿瘤能力具有明显的增强作用.

    作者:王硕;罗崇念;袁经权;凌征柱;蓝鸣生 刊期: 2010年第08期

  • 2型糖尿病住院患者的慢性并发症与生存质量分析

    [目的]了解2型糖尿病住院患者的生存质量、并发症现状,并分析其生存质量及各种慢性并发症的影响因素. [方法]采用糖尿病患者生存质量特异性量表(DSQL)及自编糖尿病流行病学调查表,对178例2型糖尿病住院患者避行调查. [结果]178例2型糖尿病患者中有慢性并发症者170例(95.5%),患者的生存质量普遍受到影响,其中心理维度受损程度大,社会维度受损程度小.慢性并发症的影响因素有病程、性别、BMI、甘油三酯和收缩压.饮酒情况、睡眠情况、病程和并发症分别从不同维度影响患者的生存质量. [结论]2型糖尿病幔性并发症严重影响患者的生存质量,加强有针对性的干预,有助干减少并发症、提高患者的生存质量.

    作者:伍佳玲;苏虹;何莉;赵科佚;徐志伟;常微微;孙智路;黄源迟;叶冬青 刊期: 2010年第08期

  • 浅议卫生行政自由裁量权的内部控制

    卫生行政自由裁量权是法律法规赋予卫生部门的权力,在日常工作中既要敢于大胆使用行政自由裁量权,又要慎重使用行政自由裁量权,并控制在合理适度的范围内.本文对卫生行政自由裁量权滥用的表现、危害进行分析,并对如何加强卫生行政自由裁量权的内部拉制进行讨论.

    作者:王栋 刊期: 2010年第08期

  • 卫生检验质量控制规范管理探讨

    卫生检验质量控制是保证实验数据准确性、可靠性和科学性的重要手段.笔者结合工作实际阐述了实验室人员、环境条件、仪器设备、检测方法、样品、实验操作、报告与记录、管理制度规范管理要件.提出了一套比较切实可行的实验室质量控制方法和要求.

    作者:燕小琳 刊期: 2010年第08期

现代预防医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 四川大学华西公共卫生学院