李民友；虞东方；张海涛；冯哲玲；李秀英；刘祖国；朱振宇
目的观察影响CTL体外杀伤效应的特异性和敏感性的主要因素.方法抗原OVA免疫小鼠C57BL/6,取免疫后小鼠脾细胞,先用ELISPOT法检测CTL的活化,然后抗原肽OVA257-264体外刺激免疫后的脾细胞5 d,51Cr释放法观察不同因素对CTL的体外杀伤效果的影响.结果 ELISPOT检测结果显示抗原免疫组产生了强CTL应答,而PBS免疫组没有应答.游离多肽的存在显著降低杀伤的效率,IL-2和Ficoll-Hypaque离心去除死细胞可提高体外杀伤的效率.ConA的存在可以使CTL体外非特异的杀伤靶细胞.结论 CTL体外杀伤实验中必需尽量去除游离多肽,以提高CTL杀伤的特异性和敏感性.
作者：郭波；郑萍；李华；谢佩蓉；杨菲；王磊；吴玉章；邹强 刊期： 2004年第03期
目的观察CD4+T细胞及其亚型TH1、TH2细胞的凋亡变化,从TH1、TH2凋亡的角度探讨脂多糖肺损伤时机体抗炎、致炎反应的分子机制.方法静脉注射脂多糖制作大鼠脂多糖肺损伤模型.分离、提纯外周血与BALF中 T淋巴细胞, 抗大鼠CD4-FITC标记、流式细胞仪分选后,通过流式细胞仪检测及荧光显微镜检查,观察外周血与BALF中CD4+T淋巴细胞凋亡变化; 应用免疫组织化学技术及TUNEL法双染动态观察外周血与BALF中TH1、TH2细胞凋亡的变化.结果①脂多糖(LPS)致伤后,外周血与BALF中CD4+T淋巴细胞进行性减少,与正常对照组比较差异非常显著,与该类细胞凋亡比例之间呈显著负相关关系,提示CD4+T细胞呈时间依赖性凋亡性减少.地塞米松(DEX)组与LPS组比较,CD4+T细胞比例及凋亡百分数无显著差异;② LPS致伤后,外周血与BALF中IFN-γ阳性细胞(TH1细胞)与IL-4阳性细胞(TH2细胞)数目均减少,与各自凋亡细胞的比例呈显著的负相关关系.DEX组IFN-γ阳性细胞、IL-4阳性细胞数目均减少, IFN-γ阳性细胞中凋亡细胞的百分数明显增加,与对照组比较差异非常显著(P<0.01).IL-4阳性细胞中凋亡细胞的百分数亦增加, 但幅度小于IFN-γ阳性细胞.LPS致伤后,大鼠肺组织水肿及炎性病变程度进行性加重,与TH1向TH2漂移程度之间有关,但不完全平行.结论① CD4+T细胞凋亡可能部分参与脂多糖肺损伤的发生,DEX的治疗作用与CD4+T细胞凋亡可能无关;②脂多糖肺损伤时,TH1、TH2细胞减少与凋亡有关, TH2细胞凋亡程度小于TH1细胞, 可能是导致TH1/TH2漂移的原因之一.TH1、TH2细胞凋亡及TH1/TH2漂移可能仅部分参与脂多糖肺损伤的发生.
作者：冯英凯；徐剑铖；杨庆华；钱桂生 刊期： 2004年第03期
目的检测视黄酸(Retinoic acid, RA)依赖反义cyclin D1表达载体转染HL-60细胞后启动的诱导分化效应,并探讨其分子机制.方法成功构建视黄酸依赖反义cyclin D1表达载体,以脂质体转染HL-60白血病细胞,经NBT还原实验、免疫荧光检测CD14表面抗原表达、RT-PCR以及Western blot等方法观测视黄酸处理后细胞分化效应的发生以及Rb基因的mRNA和蛋白表达水平的改变.结果反义cyclin D1转染和未转染的HL-60细胞经RA处理后,NBT还原能力明显增强、CD14表面抗原表达显著增加,Rb基因的mRNA和蛋白表达水平均有所降低,其中,以反义cyclin D1转染细胞经RA处理后变化更为明显.结论 RA及其诱导的反义cyclin D1可协同诱导HL-60细胞分化成熟,下调Rb基因表达可能是其分子机制之一.
作者：杨剑；糜漫天；杨志祥；韦娜；余小平 刊期： 2004年第03期
目的预测SARS冠状病毒M蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位.方法联合应用简单基序法和延展基序法.结果预测出4个九肽CTL表位.结论通过对SARS冠状病毒M蛋白抗原CTL表位进行预测,从而为SARS冠状病毒M蛋白CTL表位的实验探测和鉴定提供了线索,为认识CTL介导的细胞免疫机制以及基于CTL表位的疫苗研制提供了基础资料.
作者：王晴；吴玉章 刊期： 2004年第03期
目的在马铃薯细胞中表达轮状病毒结构蛋白.方法采用RT-PCR扩增截短VP4蛋白基因,克隆于植物表达载体pBI221,再双酶切pBI221,将带有CaMV35S启动子、外源基因及终止子的片段转入pSB11,通过三亲杂交方法,制备农杆菌转化载体pSB111-VP4,并对pSB111-VP4作点杂交检测,筛选鉴定重组子,对马铃薯组织细胞进行转化.结果转化细胞经Western 印迹检测其免疫活性, 具有良好的抗原性.结论为研制轮状病毒重组疫苗、亚单组疫苗、转基因植物口服疫苗做了前期准备.
作者：王明忠；朱进 刊期： 2004年第03期
目的获得布氏杆菌保护性抗原L7/L12重组蛋白及pCDNA3.1-L7/L12重组质粒,并比较其诱导特异性免疫应答的能力.方法 PCR扩增布氏杆菌核蛋白L7/L12基因分别构建至原核表达载体PET32a(+)和真核表达载体pCDNA3.1(+)中;pET32a-L7/L12重组质粒转化BL21(DE3),所表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析、纯化后免疫小鼠;pCDNA3.1-L7/L12重组质粒配以GM-CSF同时肌肉注射免疫小鼠,3次免疫后测定免疫功能进行免疫效果的评价.结果 ELISA、Western blot 检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生,蛋白苗所诱导的抗体效价远远高于DNA 疫苗;通过淋巴细胞增殖实验、细胞因子和CD分子测定表明 DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主.结论所构建的布氏杆菌DNA疫苗和蛋白苗均具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力, DNA疫苗诱导产生的细胞免疫反应强于蛋白苗,可作为潜在的布氏菌新型疫苗,有进一步研究的意义.
作者：曾政；王英；赵光宇；周华；于三科；韩岳；罗德炎；马丽娟；王希良 刊期： 2004年第03期
目的探讨原发性干燥综合征(pSS)肝脏损害的发生率、严重程度、临床分析及免疫学特点.方法对136例pSS住院病例中合并肝脏损害及不伴肝脏损害的临床资料进行回顾性分析.结果 136例pSS病例中32例合并肝脏损害,发生率为23.5%;其中7例(21.9%)无肝损害的临床症状.激素及免疫抑制剂对其有一定的疗效.7例(21.9%)发展为肝硬化.其性别、年龄、从发病到确诊时间及血清IgG、IgA、ANA、C3 、抗SSA、抗SSB、抗RNP、RF方面肝脏损害与无肝脏损害间的差异无显著性(P>0.05);在肝脏损害组中血清IgM和球蛋白增高(P<0.01,P<0.05).结论原发性干燥综合征本身所致肝脏损害并不少见,可能与自身免疫性肝炎(AIH),原发性胆汁性肝硬化(PBC ),自身免疫性胆管炎(AIC)相关.激素及免疫抑制剂治疗对其有一定疗效,但有复发倾向.
作者：刘钢；程小云；刘怡欣 刊期： 2004年第03期
海马作为边缘系统的结构之一, 既往的研究显示海马与记忆、情绪和行为变化等有关.近十年来, 海马对免疫功能的影响尤引人关注.海马调控免疫应答的大量实验工作表明:海马作为免疫调节的高级中枢之一, 广泛参与了包括神经内分泌免疫、心理免疫在内的各种免疫调节[1].IL-1β是海马中主要存在且被研究得较多的细胞因子之一,是中枢神经系统中可以激活下丘脑-垂体-肾上腺(Hypothalamic- pitui-tary-adrenal, HPA)轴的重要的多功能性调节因子[1,2].我室以往的研究表明,左右两侧大脑皮层IL-1β含量不同可能与左右两侧大脑皮层免疫调控异质性有关[3].在此工作基础之上我们建立了脑不对称Balb/c小鼠模型,进一步了解大脑皮层之下的重要结构海马在正常生理状态和细菌脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)刺激模拟临床革兰阴性菌感染状态下其中IL-1β的含量,并探讨了海马中IL-1β含量水平与脑不对称性的关系.现报道如下.
作者：罗燕玲；申延琴；李康生 刊期： 2004年第03期
目的评价毕赤酵母表达的HIV-1中国株CN54 Gag蛋白在Balb/c小鼠诱导体液和细胞免疫的能力.方法利用重组 Gag蛋白单独及与重组DNA或痘苗联合免疫Balb/c小鼠,检测小鼠产生的特异性结合抗体和IgG1/IgG2a,同时检测T淋巴细胞增殖反应和CTL反应.结果 3个蛋白单独免疫组均能诱导小鼠产生抗体和T淋巴细胞增殖反应,其中不加佐剂的免疫组诱导免疫反应低于其它两组.但3组的CTL杀伤活性均不明显.重组蛋白和重组DNA及痘苗联合免疫均诱导产生了较好的体液和细胞免疫反应,而且重组痘苗初始免疫-蛋白加强免疫组还诱导产生了较强的CTL反应. 结论酵母表达的HIV-1 Gag蛋白具有良好的免疫原性,在与重组DNA和痘苗疫苗联合使用时具有协同作用,能刺激动物产生更强的HIV-1特异性体液和细胞免疫反应.本研究为构建HIV-1蛋白疫苗和探讨各类疫苗的联合免疫方式提供了有价值的参考数据.
作者：郝彦玲；马民强；李海山；黄灿平；周克民；刘勇；洪坤学；邵一鸣 刊期： 2004年第03期
目的探讨下丘脑室旁核(PVH)是否通过直接的神经联系对淋巴结的功能进行调控.方法采用假狂犬病毒(PRV)跨神经元追踪方法研究肠系膜淋巴结注射PRV大鼠PVH内PRV感染神经元的分布,同时采用免疫组化方法研究腹腔注射细菌脂多糖(LPS)后大鼠PVH c-fos表达的变化.结果在注射PRV动物的PVH内出现被PRV标记的阳性神经元,既有大细胞神经元,也有小细胞神经元,它们主要分布在PVH尾侧帽部和内侧部.FOS阳性产物在PVH的神经元核中出现, 其阳性细胞的分布范围及阳性细胞的数目在LPS注射组均明显大于对照组.两批不同实验动物的相同冠状平面比较,可发现PVH中大多数PRV标记的阳性神经元出现在LPS注射后FOS阳性细胞数目增多的区域内.结论 PVH可能通过直接的神经环路与淋巴结相互联系,且通过此联系对淋巴结的免疫功能进行调控.
作者：王蕾；欧可群；陈文玉；朱家媛；马玉琼；韩秀引 刊期： 2004年第03期
目的研究大鼠IgE的Fc区CH2-3的生物学活性. 方法构建大鼠IgE的Fc区CH2-3的原核表达质粒pBAD/gⅢA/CH2-3,并转化入TOP10中,阿拉伯糖诱导表达、周质腔抽提、Ni-NTA金属鳌合柱纯化获得大鼠IgE的Fc区CH2-3,细胞及动物水平检测蛋白质生物学活性.结果原核系统表达出大鼠IgE的Fc区CH2-3,它能够阻断OVA激发的RBL-2H3的脱颗粒反应,阻断被动皮肤实验. 结论大鼠IgE的Fc区CH2-3能够封闭IgE高亲和力受体,阻断过敏反应.
作者：杨丹榕；修清玉；韩焕兴；陆慧琦；张玲珍；钱建美 刊期： 2004年第03期
目的优化设计一套引物,扩增全套人抗体Fd片段和L链基因,改善扩增效率,益于人源噬菌体抗体库的构建.方法根据V-BASE数据库提供的人抗体可变区胚系基因,在其家族分类基础上,根据FR1区5'端保守序列重新分组,设计特异性的5'端扩增引物.同时对设计引物的匹配情况进行分析,并应用PCR扩增和测序反应对其扩增效果进行鉴定. 结果 Fd链5'端扩增引物有5条,κ轻链有6条5'端扩增引物,而λ轻链5'和3'扩增引物有10条.分析表明,人抗体可变区胚系基因与5'引物有较好的匹配率,数目较少,匹配率较高.PCR结果显示,全部的重链及轻链引物对均能高效扩增出特异性较高的目的片段.测序结果表明PCR扩增产物具有较好的亚类和可变区家族分布.结论优化了一套扩增全套人抗体Fd片段和L基因的引物,为人源噬菌体抗体库的构建奠定了良好的基础.
作者：包国强；马庆久；邢金良；杨向民；陈志南 刊期： 2004年第03期
目的研究幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A (rHspA)与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)融合蛋白(rLTB-HspA)作为口服疫苗的免疫应答效果.方法采用rLTB-HspA口服免疫Balb/c小鼠,ELISA分析小鼠血清、胃肠黏液中IgG、IgA抗体水平,体外培养脾淋巴细胞在Hp刺激下的增殖情况及IL-4、IFN-γ的变化.结果 Balb/c小鼠口服rLTB-HspA能有效激发机体产生全身和局部特异性的体液免疫应答和细胞免疫应答.结论 Balb/c rLTB-HspA可作为预防和治疗Hp感染的候选疫苗之一.
作者：郭鹰；邹全明；朱永红；吴超；郭刚；毛旭虎；袁小澎 刊期： 2004年第03期
HBV感染类型多样,是我国引起终末期肝病的主要原因.慢性无症状携带者(Chronic asymptomatic HBV carrier,AsC)和慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B, CHB)是其中主要的人群.TH细胞在HBV相关免疫应答中起核心作用[1].白细胞介素12(Interleukin-12, IL-12)能特异性促进TH1细胞发育,通过其诱导产生IFN-γ而发挥一定的抗病毒作用.本研究通过检测HBV感染者血清IL-12水平,了解其在不同HBV感染中的可能存在的差异,并探讨其临床意义.
作者：何登明；毛青；王宇明 刊期： 2004年第03期
适量的体育运动可提高机体免疫功能,高强度的体能训练则会造成免疫功能抑制.我室在前期研究工作中发现人参二醇组皂苷(PDS)对多种病态条件下的细胞与脏器功能有明显的保护作用[1],故推测PDS对高负荷训练大鼠的免疫功能可能具有保护作用而设计本实验.
作者：李峰；郭丛慧；李扬；杨柯；赵雪俭；陈燕萍；马兴元 刊期： 2004年第03期
目的克隆人TALL-1基因全长及其胞外区片段,构建人TALL-1及其胞外区蛋白毕赤酵母分泌型表达载体.方法从人新鲜淋巴结组织中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增人TALL-1及其胞外区基因编码区序列,构建人TALL-1及其胞外区 cDNA毕赤酵母表达载体,并进行序列测定.结果克隆获得的858 bp和459 bp片段与文献报道的人TALL-1全长及其胞外区基因编码区cDNA序列一致,将目的基因插入酵母表达载体pPIC-9Kα因子分泌信号肽下游.结论本实验为大量获得人TALL-1蛋白及其可溶性功能蛋白,以及探讨其生物学性能和未来在临床上的应用奠定了实验基础.
作者：王蒙；粟永萍；杨媛；刘晓宏；杨峥嵘；李广阔；程天民 刊期： 2004年第03期
目的比较血清总前列腺特异抗原(tPSA)、游离PSA(fPSA)与tPSA的比值(f/t)、前列腺特异抗原密度(PSAD)鉴别前列腺增生(BPH)和前列腺癌(Pca)的价值.方法回顾性总结2000-01-2002-12在山西医科大学第二医院泌尿外科住院的176例BPH患者及56例Pca患者的血清tPSA、fPSA、经腹部B超前列腺的前后径、左右径、上下径、年龄,计算出f/t比值、前列腺体积(PV)及PSAD值.分别比较 tPSA、f/t及PSAD在诊断灰区、灰区外低值区、灰区外高值区中鉴别2种疾病的能力.结果在诊断灰区外高值区tPSA、f/t及PSAD在2组间的差别均有显著意义(P<0.001, P<0.05和P<0.01);在诊断灰区, 2组患者间tPSA差别无显著意义(P>0.5),而f/t、PSAD的差别则有显著意义(P<0.05);在灰区外低值区tPSA、f/t及PSAD在 2组间的差别均无显著意义(P>0.05).结论血清tPSA为前列腺癌的标志物.f/t及PSAD作为tPSA的辅助指标,在诊断灰区有重要的意义.
作者：潘建刚；刘俊生 刊期： 2004年第03期
目的确定兔抗NMDAr1亚基(N-甲基-D-天冬氨酸受体Nr1亚基)IgG分子特征性构象.方法应用原子力显微镜扫描生理状态下分布在云母表面的兔抗NMDAr1亚基蛋白IgG分子,并进行理论计算.结果 IgG分子为136.4?× 62.8?×26.1?椭球形三亚基复合物.结论原子力显微镜可以在生理状态下直观测定生物大分子纳米尺度介观结构.抗NMDAr1蛋白IgG 分子的特征性构象,可以做为神经细胞膜表面NMDA受体(N-甲基-D-天冬氨酸受体)原子力显微镜观测的原位标记物.
作者：郁毅刚；徐如祥；姜晓丹；柯以铨 刊期： 2004年第03期
目的研究非洲爪蟾转化生长因子-β5(aTGF-β5)基因免疫是否能增强肿瘤治疗性DNA疫苗诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞的能力. 方法构建编码小鼠肿瘤抗原酪氨酸酶相关蛋白2(mTRP-2)的真核表达质粒,与aTGF-β5真核表达质粒联合免疫C56BL/6小鼠,采用标准51Cr释放试验检测抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞的诱导.结果 aTGF-β5和mTRP-2联合免疫可在体外诱导H-2Kb限制的mTRP-2aa180-188特异性细胞毒性T淋巴细胞产生.结论 aTGF-β5免疫能有效提高肿瘤治疗性DNA疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞的能力.
作者：贾正才；吴玉章；邹丽云；倪兵；周伟 刊期： 2004年第03期
目的探索一种检测和纯化单链抗体的新方法.方法使用不同的酶标记物,观察ELISA法检测培养上清液中单链抗体的相对灵敏度.含单链抗体的培养上清液经超滤、 313 g/L饱和硫酸铵沉淀及蛋白质L-琼脂糖亲和层析纯化单链抗体.结果 HRP标记蛋白质L可检测到1∶16孔的阳性结果,而HRP 标记蛋白质A仅检测到1∶2孔的阳性结果.用9E10单抗检测培养上清液中的单链抗体时,除加入未经稀释培养上清液孔略有显色外,其他加入稀释后的培养上清液孔均不显色.蛋白质L亲和层析纯化的单链抗体经SDS-PAGE及ELISA鉴定,所得到的单链抗体纯度高、活性保持良好.结论蛋白质L是一种能灵敏检测和有效纯化单链抗体的结合物,本实验建立的方法是一种有效、简便实用的方法.
作者：李民友；虞东方；张海涛；冯哲玲；李秀英；刘祖国；朱振宇 刊期： 2004年第03期
免疫学杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学,中国免疫学会
