甘起霓；陈英玉；宋泉声；张颖妹；马大龙
目的观察生物分子间相互作用动力学、亲和力及特异性,研究C5a与其反义肽的相互作用规律.方法应用生物分子相互作用实时分析系统IAsys Plus,以反义肽R4为固定相,L2和rhC5a为流动相,采用FASTplot软件对选择结果优化的反应模式,计算各动力学参数值.结果反义肽R4与配体rhC5a相互结合的KD=6.62×10-6mol,直线在Y轴上的截距(解离常数)Kdiss为0.0225 s-1;与L2的KD=4.508×10-6mol.结论生物传感器技术可以用于正义-反义肽之间相互作用的研究中,且反义肽R4可与其正义肽、与rhC5a发生特异性相互作用.
作者：胡承香；曾焕芬；巫振洪；吕凤林 刊期： 2003年第03期
目的构建乙型肝炎HBsAg和GM-CSF的融合表达质粒,借助GM-CSF的免疫佐剂作用,提高乙型肝炎DNA疫苗的免疫效果.方法用PCR方法及分子克隆技术构建融合表达质粒pcDNA3.1-S-GM-CSF和pcDNA3.1-GM-CSF-S,并以重组质粒转染真核细胞,研究重组质粒体外表达.结果经酶切鉴定及DNA序列证实重组质粒构建正确,细胞转染试验表明重组质粒能在COS-7及HepG-2内表达.结论乙型肝炎HBsAg和GM-CSF的融合表达质粒构建成功,重组质粒能在真核细胞内表达.
作者：卿玉玲；赵嘉将；任红 刊期： 2003年第03期
研究表明,高危型人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus type 16,HPV16)的感染与宫颈癌及人类许多肿瘤的发生密切相关.
作者：吴琦；黄利鸣；卫洪昌 刊期： 2003年第03期
作者： 刊期： 2003年第03期
目的研究食入过敏原后肝脏的变化.方法试验分为2组,实验组小鼠用卵蛋白(OVA)致敏,0VA(2g/L)经肠道攻击3 h后采血及肝脏,用酶素法测定血清中ALT(Alanine aminotransferase),并对肝样本进行H&E染色及免疫组织化学染色.结果实验小鼠血清ALT浓度与对照组比较增高,P值有显著差异(P＜0.01);实验组小鼠肝脏组织H&E染色可见大量炎性细胞浸润及巢状肝细胞坏死,免疫组织化学染色显示在0VA致小鼠的肝组织中,IL-4及IL-6阳性细胞数明显高于对照组.结论在食物过敏反应中,肝脏也是一个受损害的脏器.
作者：陈虹；陈奋华；纪经智；陈岩峰；王清文；饭仓洋治；上野幸三 刊期： 2003年第03期
目的探讨隐孢子虫病患者与机体细胞免疫功能的关系.方法采用生物素-链霉亲和素(Biotin-Streptavidin,BSA)法对卵囊阳性患者分别进行外周血T细胞亚群、膜白介素-2受体(mIL-2R)检测.结果隐孢子虫卵囊阳性者的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+阳性百分率分别为(55.87±7.23)%、(39.26±6.43)%、(30.04±5.67)%和(1.36±0.41)%,诱导期mlL-2R表达水平为(33.45±2.31)%,两者分别与卵囊阴性者及静息期mIL-2R相比,差异有显著性(P＜0.05～0.01).结论隐孢子虫病引起细胞免疫功能的变化,T细胞亚群、mIL-2R在抗隐孢子虫感染中起重要作用.
作者：许礼发；王克霞；王健；李朝品 刊期： 2003年第03期
目的获得小鼠C3d分子的cDNA.方法从小鼠肝细胞提取总RNA,通过RT-PCR扩增出C3d分子的cDNA,琼脂糖凝胶电泳鉴定后直接克隆到pMD18-T载体,构建C3d-pMD18-T重组质粒,转化大肠杆菌,酶切鉴定后进行序列测定.结果通过琼脂糖凝胶电泳证明有1.0kb左右的PCR扩增片段,序列测定表明为C3d分子的cDNA.结论通过RT-PCR法从小鼠肝细胞RNA中成功地扩增到小鼠C3d分子的cDNA,为进一步构建基于C3d分子内佐剂的疫苗奠定了基础.
作者：邹强；郑萍；杨桦；郭波；万瑛；孟祥贵 刊期： 2003年第03期
目的建立一种简易的抗体亲合力测定技术,对生物工程抗-HBsFab进行抗原特异亲合力测定.方法应用异种抗体竞争抑制法,在硝酸纤维素膜上进行不同抗原浓度、不同抗体抑制浓度的抗原、抗体反应.酶标记抗Fab抗体(Fabspecific)与相应底物显色,通过抑制效果估测靶抗体的亲合力.结果①抗-HBsFab组对不同浓度的抗原皆为阳性且能显示浓度差.②鼠腹水单克隆抗-HBs在10倍于人源抗-HBsFab范围内无抑制作用;多克隆羊抗-HBsAg在10倍于人源抗-HBsFab时显示抑制效应,而在同倍和1/10浓度时无抑制作用.结论本研究建立的是一种简易、实用的方法,能够达到直观、实际的抗体亲合力检测目的.
作者：韩焕兴；陆慧琦；安峰；叶伟民；范列英；朱烨；曾万杰；罗荣城 刊期： 2003年第03期
淋巴细胞的识别与激活是免疫应答的核心问题.自1960年代以来,已提出多种双信号理论,其共同点是认为除了抗原信号(信号1)外还需其它信号刺激(信号2)才能激活淋巴细胞,但所涉及的信号2不同,以致对淋巴细胞识别与激活机制迄今一知半解.未来的挑战是采用定量的研究方法,建立整合的信号理论,以彻底揭示这一奥秘.
作者：陈政良；朱锡华 刊期： 2003年第03期
目的建立用单克隆抗体技术检测细胞内IL-1ra的方法.方法制备异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗人IL-1ra单克隆抗体,使其进入U937细胞内与icIL-1ra结合,然后用流式细胞仪(FACS)检测荧光强度,并比较U937细胞在刺激前后荧光强度的变化情况是否与icIL-1ra表达的变化情况相一致.结果在一定剂量范围内,经PMA分化和LPS刺激的U937细胞的icIL-1ra表达量增加,其检测荧光强度相应增加.结论用单克隆抗体检测细胞内icIL-1ra是一种快速、准确的方法,本实验方法能够满足实际研究工作中对icIL-1ra定量检测的要求.
作者：甘起霓；陈英玉；宋泉声；张颖妹；马大龙 刊期： 2003年第03期
作者： 刊期： 2003年第03期
原位分子杂交是从组织细胞原位显示特定核酸序列存在的技术,它对一些异质性的细胞群体如血液,脑组织等,常不能准确阐明特定核酸序列表达于何种类型的细胞,或在某一细胞群体是否有特定基因的表达.
作者：李红丽；何家全；杨忠；蔡文琴 刊期： 2003年第03期
目的建立EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)转化的永生化B细胞(命名为LEBV)并研究其对肝癌细胞抗原的提呈作用.方法从人外周血中分离出外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用等体积的EBV上清混合培养4周以上建立永生化EBV转化R细胞(LEBV),用流式细胞计数仪(FACS)检测其细胞表面功能相关分子CD86、DD40、HLA-DR和HLA-ABC的表达情况.LEBV与自体淋巴细胞和肝癌细胞抗原共培养3 d,结束培养前12 h加入37 kBq/孔3H-标记的胸腺嘧啶(3H-TdR),收获细胞,用液体闪烁计数仪测定cpm.结果培养3周以上即培养出EBV转化的永生化B细胞,可连续培养1年以上.经FACS检测,细胞表面分子CD86、CD40、HLA-DR和HLA-ABC的表达率分别为74%、91%、83%和86.7%.该细胞接触肝癌细胞抗原后刺激自体淋巴细胞增殖的能力增强.结论EBV转化的永生化B细胞对肝癌细胞抗原具有提呈作用.
作者：李用国；梁增伟；兰英华；任红 刊期： 2003年第03期
目的研究人正常肠上皮细胞内毒素信号转导相关受体TLR4、TLR2、CD14和MD2mRNA的表达情况,以及内毒素刺激对其表达的影响.方法提取有、无内毒素刺激的培养人肠上皮细胞和阳性对照THP1细胞的总RNA,用RT-PCR方法检测TLR4、TLR2、CD14和MD2 mRNA的表达.结果和THP1细胞相比,人肠上皮细胞TLR4、TLR2、CD14和MD2mRNA的表达均较弱.内毒素刺激后,TLR4、CD14和MD2mRNA表达明显减弱,而TLR2的表达无显著变化.结论人正常肠上皮细胞组成性低表达TLR4、CD14和MD2 mRNA,且在受脂多糖(LPS)刺激后反应性下调其表达,这可能是肠上皮细胞(IEC)耐受LPS的关键机制之一,而TLR2在IEC耐受LPS的机制中可能不起主要作用.
作者：张道杰；蒋建新；陈永华；段朝霞；熊健琼 刊期： 2003年第03期
各种癌症患者经放疗或化疗后免疫能力明显降低,极易发生各种感染性疾病及癌症,因此开发能够有效地促进机体免疫功能恢复的药物在临床上有重要意义.
作者：翁玲；刘彦；刘学英；张颖；赵林爱；邓筱玲 刊期： 2003年第03期
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)在糖尿病肾病(DN)发生机理中的作用.方法采用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠模型,观察大鼠肾小球肥大、肾功能和24h尿蛋白改变以及用免疫组织化学和计算机图像分析技术定位、半定量检测VEGF和ICAM-1在DM大鼠肾小球的表达.结果VEGF和ICAM-1在糖尿病大鼠肾小球中均有不同程度表达,VEGF主要分布于肾小球脏层上皮细胞的胞浆之中,ICAM-1主要分布于肾小球内皮细胞和系膜细胞的胞浆中.VEGF、ICAM-1水平与蛋白尿和肾小球肥大呈正相关关系.结论DM大鼠肾小球VEGF和ICAM-1的升高可能参与了DN的疾病发展过程,估计是糖尿病肾病发生机理之一.
作者：林辉；黄颂敏；沙朝晖；唐万欣；柳飞 刊期： 2003年第03期
目的研究二十碳五烯酸(EPA)是否协同视黄酸(RA)影响HL-60细胞的凋亡及相应分子机制.方法流式细胞仪(FCM)检测细胞周期相分布以测定细胞增殖和凋亡功能;Western blot法分析bcl-2和caspase-3表达.结果与单独应用相比,EPA和RA联合应用可增强HL-60细胞的调亡效应,以及下调节bcl-2和增强caspase-3基因表达.结论EPA和RA联合应用对HL-60细胞凋亡的增强效应,可能与它们增强caspase-3和降低bcl-2基因表达相关.
作者：罗红；糜漫天；张乾勇 刊期： 2003年第03期
目的制备具有功能活性的重组人TNF家族的B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to the TNF fa-mily,BAFF)胞外区112～285氨基酸残基段(rhBAFF112-285),为BAFF的深入研究奠定基础.方法提取人HL-60细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人BAFF胞外区112～285氨基酸残基(BAFF112-285)的cDNA,行序列测定后,构建于原核表达载体pQE-80L并转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达rhBAFF112-285,Ni2+-NTA层析纯化,进而经3H-TdR掺入实验检测其免疫学活性.结果RT-PCR扩增得到了 525bp的DNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF112-285的cDNA序列一致,该胞外区片段在大肠杆菌中获得了高效表达,表达水平达细菌总蛋白的45.7%,经纯化后纯度可达98.4%,活性检测证实其能明显刺激外周血淋巴细胞活化.结论利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF112-285,所获纯化产物具有生物学活性,所获结果为进一步研究创造了条件.
作者：何凤田；郑英如；高会广；李蓉芬；郑汉其；吉青；江渝；陈敏；钟小林 刊期： 2003年第03期
目的探讨CTLA-4对T细胞无能的诱导作用.方法通过使用超抗原SEA作为一种无能诱导剂,建立体外无能模型,检测了无能T细胞在受到SEA的再次刺激时其膜分子CD28和CTLA-4的表达.结果与活化T细胞相比,无能T细胞在免疫应答的后期阶段表面表达高水平的CTLA-4分子,而CD28的表达则只较活化组T细胞稍高一些.结论CTLA-4表面表达水平的升高很可能与T细胞无能状态的诱导有关.
作者：许桂莲；朱锡华；杨劲；黄云辉 刊期： 2003年第03期
作者： 刊期： 2003年第03期
免疫学杂志
主管:第三军医大学
主办：第三军医大学,中国免疫学会
